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类凝血酶效价测定方法的研究

中国生化药物杂志 1997年第3期18卷 134-136页

作者：郝苏丽沈佳孙磊中国药品生物制品检定所北京100050

对蛇毒中提取的类凝血酶进行了分析，并建立了类凝血酶效价测定法，此法灵敏度高，重视性好，操作简便，适用于蛇毒有效成分的分析及厂方质量的跟踪检测。

关键词：类凝血酶效价测定法蛇毒

沙门氏菌的一新菌型——自贡沙门氏菌16:1,w:1,5

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微生物学报 1979年第3期 227-229页

作者： Hygienic and Anti-epidemic Station, Zigong City, Sichuan (Zigong) National institute for the control of Pharmaceutical and biological products, Ministry of Health(beijing) 四川省自贡市卫生防疫站卫生部药品生物制品检定所

从四川省自贡市某医院污水中检出一株沙门氏菌。血清学试验证明,其抗原式为16:1, w:1,5,其生化反应按Kauffmann关于沙门氏菌属分类,其特性与亚属Ⅰ较接近,因此建议将该菌暂定名为自贡沙门氏菌。

关键词：沙门氏菌抗原菲丁 w 自贡市自贡菌型

乙型脑炎减毒活疫苗病毒SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种后的生物学和分子生物学特性

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中国生物制品学杂志 2007年第6期20卷 419-421页

作者：刘志文俞永新张海林王志伟贾丽丽章域震董关木张云中国药品生物制品检定所疫苗一室北京100050 云南省地方病防治所大理671000

目的研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性。方法将乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK2... 详细信息

目的研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性。方法将乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK21细胞中培养,得到SA14-14-2M1C1病毒液。应用空斑形成单位法测定病毒滴度,再进行小鼠脑内毒力测定和乳鼠脑内回传后毒力返祖试验。提取病毒RNA,RT-PCR扩增E基因片段,测序后与SA14-14-2原株的E基因序列进行比较分析。结果SA14-14-2M1C1病毒液滴度达1.4×107PFU/ml,小鼠脑内毒力测定结果无小鼠发病死亡,乳鼠脑内传代对小鼠的脑内致病力很低,毒力为1.9LgLD50/0.03ml,小于《中国药典》规定的3.0LgLD50,且皮下注射未见小鼠发病死亡。扩增出的E基因片段序列与原株相比较,只有E区1340位一个核苷酸的变化A→G,导致E447位1个氨基酸的改变D(Asp)→G(Gly),此差异位点不是SA14-14-2株发生基因变异的8个位点之一。结论SA14-14-2疫苗株病毒经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后,其生物学(弱毒)特性和基因特征(E区8个氨基酸突变)未发生改变,进一步证实了该病毒的稳定性。

关键词：流行性乙型脑炎 SA14-14-2株三带喙库蚊生物学特性分子生物学特性

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人胎盘泌乳素免疫测定用国家标准品的研制

同位素 2003年第4期16卷 180-185页

作者：沈洪征黄颖焦岩徐立根中国药品生物制品检定所，北京100050

人胎盘泌乳素原料经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析在相对分子量为21000～22000处有两条显色相近的主带，在5000～80000处有数条微弱杂质色带，蛋白定量分析为1．06g／L，用放射免疫分析方法标定其免疫活性为2．187g／L，其剂量-反应曲线与人... 详细信息

人胎盘泌乳素原料经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析在相对分子量为21000～22000处有两条显色相近的主带，在5000～80000处有数条微弱杂质色带，蛋白定量分析为1．06g／L，用放射免疫分析方法标定其免疫活性为2．187g／L，其剂量-反应曲线与人胎盘泌乳素国际参考品(编号73／545)平行，表明该原料适于制作标准品。用含0．2％(w／V)人血清白蛋白、1％甘露醇的磷酸盐缓冲液(0．01mol／L，pH7．4)配制的30mg／L人胎盘泌乳素溶液按每安瓿0．5mL分装，经冷冻干燥制备成标准品。以人胎盘泌乳素国际参考品为对照品，用放射免疫分析法对其免疫活性进行标定，均值为14．19μg／支，95％可信限为13．50～14．88μg／支。分别以国际标准品和本标准品为对照品测定同一套人胎盘泌乳素质控血清，证明对不同剂量水平的质控血清测定均值非常接近，统计学分析上无显著差异，P>0．05。

关键词：人胎盘泌乳素聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 HPL 放射免疫分析 RIA 氨基酸

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PET放射性药物的质量保证和质量控制

同位素 2001年第3期14卷 241-245页

作者：党淑琴夏振民中国原子能科学研究院同位素研究所北京102413 中国药品生物制品检定所北京100050

随着我国高能正电子断层显像技术应用的迅速开展 ,研制和开发符合标准的正电子药物应用于临床已是当务之急。由于正电子放射性药物寿命短 ,迫使人们必须建立质量控制的新概念。质量控制是强调法规控制下研制和生产过程的质量保证。

关键词： PET 放射性药物正电子发射计算机断层显像质量控制药物研制管理规范药品生产管理规范质量保证

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钩端螺旋体疫苗的接种反应和血清学效果观察

微生物学杂志 2004年第5期24卷 26-28页

作者：秦进才高吉元蒲丛中国药品生物制品检定所北京100050

为统一中国钩体疫苗的菌数 (浓度 ) ,保障人群预防接种的安全与有效 ,用上海、武汉和成都生物制品研究所生产钩体疫苗 ,观察了 4种不同菌数、4种不同接种剂量 8个不同组别对 2 0 37人的免疫效果。所有接种者全身反应轻微 ,中强反应不超... 详细信息

为统一中国钩体疫苗的菌数 (浓度 ) ,保障人群预防接种的安全与有效 ,用上海、武汉和成都生物制品研究所生产钩体疫苗 ,观察了 4种不同菌数、4种不同接种剂量 8个不同组别对 2 0 37人的免疫效果。所有接种者全身反应轻微 ,中强反应不超过 3%。局部反应各所间有差别 ,上海所最轻 (9.6 8% ) ,武汉所居中(17.93% ) ,成都所最重 (38.78% )。血清阳转率和GMT水平 1个月达高峰 ,3个月似有下降。随着钩体疫苗接种总量的增大 ,人群抗体的阳转率和GMT水平有所提高 ,尤其是赖型抗原。 3个所疫苗的抗体阳转率和GMT有明显差别 ,以成都所为最高。根据实验结果 ,建议 :① 5价 (含 5价 )以下钩体疫苗 ,每型菌数不低于1.5亿 /mL ;② 6价 (含 6价 )以上 ,每型含菌数不应低于 1亿 /mL ,但疫苗的总菌数不超过 12 .5亿 /mL ;③全程接种 2次 ,首次 0 .5mL ,再次 1mL ,间隔 5～ 7d。该建议已被 1990版《中国生物制品规程》(钩体疫苗制检规程 )所采纳 ,并一直沿用至今。

关键词：钩端螺旋体疫苗接种剂量

Experimental Researches on Carcinogenesis or Tumorigenicity of MDCK Canine Kidney Cell(CKC) Lines and Analysis of Their Chromosome Karyotypes

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Agricultural Sciences in china 2002年第7期1卷 816-827页

作者： ZHANG De-li, LI Liu-jin, XIA Geng-tian, HE Xu-yu, GAO Bu-xian, BAI Xiao-hong, HUANG Gao-sheng, LIU Shang-gao, YAN Long-fei and FANG Fu-de( Department of Immunology, School of Basic Medical Sciences , Peking University Health Science Center , beijing 100083 , P. R . china beijing institute of Preventive Medicine , beijing 100071 , P. R . china Department of Toxicology at Center for Research & Development of Animal Healthcare products , Fourth Military Medical University , Xian 710032 , P. R . china Department of Pathology at School of Pre-clinical Education , Section of Pathology at Xi-Jing Hospital, institute for Cancer Research at china Cancer Research Foundation , Fourth Military Medical University, Xian 710032 , P. R . china Key Open Laboratory of Preventive Veterinary Medicine of State Ministry of Agriculture, College of Animal Medical Sciences & State Key Laboratory of Agricultural Biotechnology , College of biological Sciences , china Agricultural University , beijing 100094 , P.R.china State Key Laboratory of Medical Molecular Biology, School of Basic Medical Sciences at the Peking Union Medical Colloge /institute of Basic Medical Sciences at the Chinese Academy of Medical Sciences , beijing 100005 , P. R . china) Department of Immunology School of Basic Medical Sciences Peking University Health Science Center Beijing 100083 P. R.China beijing institute of Preventive Medicine Beijing 100071P.R.China Department of Pathology at School of Pre-clinical Education Department of Toxicology at Center for Research Development of Animal Healthcare products Fourth Military Medical University Xian 710032 P. R . China beijing institute of Preventive Medicine Beijing 100071P.R.China Department of Pathology at School of Pre-clinical Education Section of Pathology at Xi-Jing Hospital Institute for Cancer Research at China Cancer Research Foundation Fourth Military Medical University Xian 710032 P. R . China Key Open Laboratory of Preventive Veterinary Medicine of State Ministry of Agriculture College of Animal Medical Sciences State Key Laboratory of Agricultural Biotechnology College of Biological Sciences China Agricultural University Beijing 100094 P State Key Laboratory of Medical Molecular Biology School of Basic Medical Sciences at the Peking Union Medical Colloge/Institute of Basic Medical Sciences at the Chinese Academy of Medical Sciences Beijing 100005 P.R. China

The chromosomal number variations & structural aberrations of the MDCK cell line, primary feline or canine kidney cell(FKC or CKC) and Hela cell line were investigated and their karyotypes of conventional chromosome bands were analyzed. The carcinogenesis or tumorigenicity testing of these cell lines in about 232 nude mice and for colony formation in soft agarose and for haemagglutination under different concentration of plant lectins of these cells were carried out. Under the prerequisite that the incidence of cancer or tumor in negative-control nude mice inoculated subcutaneously with primary feline or canine kidney cell cultures purified in vitro at passage 3 was 0 (0/22) and 0 (0/10), respectively. The incidence of the progressively-growing malignant tumor(MT) in positive-control nude mice inoculated subcutaneously with Hela cell cultures of KB, X, or NM20/X strain was 10/10, 25/25 and 5/51, respectively. The results showed that the incidence of tumor in nude mice with tetraploid YA strain of MDCK cell during 20 - 45 passages, with hy-podiploid JB strain of MDCK cell on passage 25, with di-and hypoploid JC strain of MDCK cell during 2-15 passages or with hypoploid M strain of MDCK cell during 9 - 27 passages was 28/58, 1/5, 4/18 and 0/31, respectively. The chromosomal analysis results showed that the ratio of difference in the rate of modal chromosome number between high(mcs+ n) and lowest (mcs) passages was not more than 5% - 15% and the structure aberrations was generally 0 - 3% . These results proved that the genetic characteristics of chromosomal number of cell lines determines their tumorigenicity, but it is species-specific. MDCK line has tumorigenicity no matter what its chromosome karyotype is, at least it has very low tumorigenicity even when its modal chromosome number is hypoploid. The repeatedly frozen, thawed and split controls of tumorigenicity-positive cell lines(X strain of Hela, M strain of BHK-21, JA strain of Vero, YA strain of MDCK) have much

关键词： Cell line MDCK Hela Feline or canine kidney cell Karyotypes Carcinogenesis or tuniori-genicity

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胰岛素放射免疫分析质控血清的研制

同位素 1998年第1期11卷 24-28页

作者：沈洪征黄颖彭新杰中国药品生物制品检定所

介绍了亲和层析法制备胰岛素零值血清和胰岛素放射免疫分析质控血清研制的过程。胰岛素为免疫原对豚鼠进行免疫获得抗血清，将此抗血清直接偶联到溴化氰活化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ凝胶上，制成亲和层析柱，使正常人血清通过此柱，胰岛... 详细信息

介绍了亲和层析法制备胰岛素零值血清和胰岛素放射免疫分析质控血清研制的过程。胰岛素为免疫原对豚鼠进行免疫获得抗血清，将此抗血清直接偶联到溴化氰活化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ凝胶上，制成亲和层析柱，使正常人血清通过此柱，胰岛素被特异地吸附在柱中而从血清中除掉。用放免方法测定过柱处理后的血清，其中不含胰岛素，经蛋白测定和醋酸纤维素膜电泳检测证明过柱前、后血清蛋白含量和组成未产生明显变化。向此血清中定量加入胰岛素并经标定确定其靶值和允许范围，即制成低、中和高值质控血清。

关键词：胰岛素质控血清亲和层析柱放射免疫分析

检测HCV RNA的PCR试剂质控试行参考品的建立

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中国生物制品学杂志 1994年第3期7卷 133-135页

作者：汪兴太周诚祁自柏李河民中国药品生物制品检定所北京100050

选慢性丙型肝炎病人中HCVRNA含量不等的阳性血清作为阳性标准，采用选自HCV基因5’端非编码区的不同引物来扩增病毒基因，扩增产物与分子量标准进行比较，部分产物用酶切初步分析进行确证。选国家HCV抗体诊断试剂盒临床验证参考品中的... 详细信息

选慢性丙型肝炎病人中HCVRNA含量不等的阳性血清作为阳性标准，采用选自HCV基因5’端非编码区的不同引物来扩增病毒基因，扩增产物与分子量标准进行比较，部分产物用酶切初步分析进行确证。选国家HCV抗体诊断试剂盒临床验证参考品中的阴性样品作为阴性标准，经反复检测显示HCVRNA为阴性。选强阳性血清经5%小牛血清稀释作为灵敏度标准，检测范围为10－5～10－7。应用该参考品对北医肝病研究所的三批HCVRNA诊断试剂盒进行检测，阳性和阴性标准均符合要求，灵敏度为10-5～10-6。

关键词： PCR 丙型肝炎病毒 RNA 试剂盒