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5nm金纳米颗粒对大鼠皮质神经元的作用及机制初探

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南京医科大学学报（自然科学版） 2016年第7期36卷 811-816页

作者：吴玉芸刘正霞郭志睿刘莹鲁翔南京医科大学第二附属医院老年医学科江苏南京210011

目的 :探讨直径5 nm的小尺寸金纳米颗粒(gold nanoparticles,GNPs)对大鼠皮质神经元细胞的作用及相关机制。方法:使用硼氢化钠还原法制备GNPs,用透射电镜(TEM)及紫外-可见光光谱(UV-Vis)进行鉴定。用5%牛血清白蛋白(BSA)对GNPs进行包裹... 详细信息

目的 :探讨直径5 nm的小尺寸金纳米颗粒(gold nanoparticles,GNPs)对大鼠皮质神经元细胞的作用及相关机制。方法:使用硼氢化钠还原法制备GNPs,用透射电镜(TEM)及紫外-可见光光谱(UV-Vis)进行鉴定。用5%牛血清白蛋白(BSA)对GNPs进行包裹提纯后制备成不同浓度(600、1 200、2 400μg/L)的GNPs培养液。采用免疫荧光染色鉴定原代培养的大鼠皮质神经元纯度。体外培养原代大鼠皮质神经元72 h后,以正常培养的神经元为对照组,以不同浓度GNPs溶液孵育48 h后的神经元作为实验组。采用TEM观察GNPs在细胞内的分布;采用CCK-8试剂盒检测细胞活力;采用TUNEL法检测细胞凋亡;采用丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测氧化应激水平。结果:TEM及UV-Vis显示硼氢化钠还原法制备的GNPs呈尺寸均一的球形,在溶液中均匀分散。原代培养的大鼠皮质神经元纯度为(82.0±2.3)%。GNPs主要以聚合体形式分布于胞浆、溶酶体、囊泡中。随着GNPs浓度的增高,细胞活性逐渐降低,尤其1 200和2 400μg/L处理组细胞活力较对照组显著降低(P<0.05)。TUNEL染色结果显示,随着GNPs浓度的增高,凋亡细胞数逐渐增加,1 200和2 400μg/L处理组细胞凋亡明显,具有显著性差异(P<0.05)。随着GNPs浓度的增高,细胞内MDA含量逐渐增加,SOD含量逐渐减少,1 200和2 400μg/L处理组与对照组相比MDA含量显著升高,SOD含量显著降低(P<0.05)。结论:5 nm GNPs能降低大鼠皮质神经元的细胞活力,促进其凋亡,其机制可能与氧化应激损伤相关。

关键词：金纳米颗粒大鼠皮质神经元细胞凋亡氧化应激

慢病毒介导RNA干扰沉默Fas基因在脐带间充质干细胞中的表达

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南方医科大学学报 2014年第10期34卷 1475-1480页

作者：王露翟玮玮杨向荣王芳李见张强李玉云蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心安徽蚌埠233030 徐州市第四人民医院检验科江苏徐州221009 蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233030 蚌埠医学院临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233030

目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,构建Fas基因的siRNA慢病毒表达载体,建立Fas基因稳定干扰的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)株,为下一步使用低表达Fas基因的UC-MSCs治疗再生障碍性贫血奠定实验基础。方法以人Fas基因mRNA序列作为干扰靶点... 详细信息

目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,构建Fas基因的siRNA慢病毒表达载体,建立Fas基因稳定干扰的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)株,为下一步使用低表达Fas基因的UC-MSCs治疗再生障碍性贫血奠定实验基础。方法以人Fas基因mRNA序列作为干扰靶点,设计4组靶向Fas的shRNA序列,合成寡核苷酸,与经过BamHI、EcoRI双酶切后的LV3载体连接获得重组慢病毒,通过感染293T细胞对慢病毒进行包装和滴度测定。体外培养人UC-MSCs,使用包装好的慢病毒感染UCMSCs,应用Real time-PCR和Western blotting检测感染后细胞中Fas mRNA及蛋白的表达情况。结果经酶切以及基因测序鉴定证明慢病毒载体构建成功,病毒悬液滴度为3×108TU/ml。Real time-PCR和Western blotting结果显示干扰组细胞的Fas表达水平较对照组显著降低。结论慢病毒介导的SiRNA能有效沉默UC-MSCs中Fas基因的表达。

关键词：慢病毒 siRNA Fas 脐带间充质干细胞

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t检验方法在评价水库地震中的应用

华南地震 2012年第4期32卷 10-19页

作者：钟羽云周昕卢显张帆浙江省地震局浙江杭州310013 中国地震台网中心北京10045

引入t检验方法对中国1975年以后的30例水库地震震例进行了定量评价。评价中首先分别统计水库蓄水前、后水库区水域线20 km范围内的地震年频度作为统计检验的2个样本,然后通过F检验和t检验方法对2个样本的标准差和均值是否存在显著差异... 详细信息

引入t检验方法对中国1975年以后的30例水库地震震例进行了定量评价。评价中首先分别统计水库蓄水前、后水库区水域线20 km范围内的地震年频度作为统计检验的2个样本,然后通过F检验和t检验方法对2个样本的标准差和均值是否存在显著差异进行检验,根据标准差和均值检验结果判定水库蓄水是否诱发了地震活动。结果显示:①如果水库蓄水前后库区地震年频度标准差和平均值均发生了显著变化,则水库蓄水诱发了地震。②如果水库蓄水前后库区地震年频度标准差无明显变化,但地震年频度平均值变化显著,则水库蓄水可能诱发了地震。③如果水库蓄水前后库区地震年频度标准差和平均值均无明显变化,则水库蓄水没有诱发地震。

关键词： t检验水库地震显著性差异

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我国体育舞蹈选手运动损伤的现状分析

当代体育科技 2021年第31期11卷 34-37页

作者：肖雨韵鲁春霞湖南师范大学湖南长沙410000

体育舞蹈在中国不断快速发展,竞争也逐渐激烈。体育舞蹈选手都希望通过自身的刻苦训练在各项大赛中取得满意而优异的成绩,但在此过程中大部分体育舞蹈选手和教师会忽视运动损伤带来的负面效果和损伤概念及处理手段的重要性,增加了损伤... 详细信息

体育舞蹈在中国不断快速发展,竞争也逐渐激烈。体育舞蹈选手都希望通过自身的刻苦训练在各项大赛中取得满意而优异的成绩,但在此过程中大部分体育舞蹈选手和教师会忽视运动损伤带来的负面效果和损伤概念及处理手段的重要性,增加了损伤发生的几率,影响选手的训练效果与比赛成绩。该文采用文献资料法对我国体育舞蹈选手运动损伤的现状、预防与康复进行分析,进而为选手提供更好的条件与环境。

关键词：体育舞蹈运动损伤现状分析

基于网络药理学、分子对接和动物实验探析清热化浊方对2型糖尿病的影响及作用机制

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南开大学学报（自然科学版） 2024年第5期57卷 18-23,31页

作者：樊毓运卢伟炽王任魏军平临沂市人民医院山东临沂276000 中国中医科学院广安门医院北京100053 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广东省中医临床研究院广东广州510405

为明确清热化浊方对2型糖尿病的影响和物质基础,借助网络药理学联合分子对接技术以及动物实验验证分析.发现清热化浊方治疗2型糖尿病潜在有效成分有97个,关键化合物为槲皮素,木犀草素,汉黄芩素等.候选靶点188个,关键靶点分别为TP53,AKT1... 详细信息

为明确清热化浊方对2型糖尿病的影响和物质基础,借助网络药理学联合分子对接技术以及动物实验验证分析.发现清热化浊方治疗2型糖尿病潜在有效成分有97个,关键化合物为槲皮素,木犀草素,汉黄芩素等.候选靶点188个,关键靶点分别为TP53,AKT1,HSP90AA1等.GO富集分析显示涉及的生物功能有药物应答,氧化应激的反应,活性氧细胞代谢等.KEGG通路富集显示有脂类和动脉粥样硬化信号通路,磷脂酰肌醇信号通路等.分子对接显示有32对稳定的化合物和受体蛋白结合体.动物实验显示清热化浊方可降低DM大鼠的空腹血糖,空腹胰岛素,胰岛素抵抗指数和糖化血红蛋白,且DM大鼠肝组织中p-PI3K/PI3K,p-AKT/AKT蛋白表达显著上调(P<0.05).清热化浊方可能通过激活PI3K-AKT信号通路,改善胰岛素抵抗,从而治疗2型糖尿病,且具有作用成分多、靶点广和信号通路多样的特点.

关键词：清热化浊方网络药理学糖尿病

土壤中可编码乌头酸异构酶的芽胞杆菌菌株筛选及鉴定

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微生物学报 2019年第7期59卷 1373-1382页

作者：郑操蔡鹭张中强王立华戴余军都萃颖湖北工程学院生命科学技术学院湖北省植物功能成分利用工程技术研究中心湖北孝感432000 湖北工程学院特色果蔬质量安全控制湖北省重点实验室湖北孝感432000

【目的】以芽胞杆菌(Bacillus)为筛选对象,分离土壤中可编码乌头酸异构酶(aconitate isomerase,AI)的革兰氏阳性(Gram positive,G+)菌株,以丰富对AI分布的科学认识,为其生物学功能研究奠定理论与材料基础。【方法】采用土样高温预处理... 详细信息

【目的】以芽胞杆菌(Bacillus)为筛选对象,分离土壤中可编码乌头酸异构酶(aconitate isomerase,AI)的革兰氏阳性(Gram positive,G+)菌株,以丰富对AI分布的科学认识,为其生物学功能研究奠定理论与材料基础。【方法】采用土样高温预处理法、含反式乌头酸(trans-aconitic acid,TAA)唯一碳源的ACO固体平板培养法,结合16S rDNA基因序列同源性分析,筛选能够编码AI的芽胞杆菌目的菌株。【结果】共分离得到22株能够利用TAA碳源的细菌菌株,成功鉴定了其中的16株,分别为巨大芽胞杆菌(Bacillus megaterium) 2株,阿氏芽胞杆菌(Bacillus aryabhattai) 7株,短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus) 1株,未鉴定到种的芽胞杆菌(Bacillus sp.) 6株;且它们所含AI编码基因与已知AI基因在序列上存在差异。【结论】首次证明可编码AI的芽胞杆菌细菌种类具有多样性,暗示G+细菌广泛编码AI的可能性,更新了AI几乎只在G–细菌中分布的观点,为后续深入挖掘AI基因及其生物学功能研究提供更多可用微生物资源。

关键词：乌头酸异构酶芽胞杆菌分离鉴定乌头酸顺反异构体

网络化认知行为疗法在青少年慢性疲劳综合征中应用的研究进展

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护理研究 2024年第22期38卷 4072-4075页

作者：茹玉云董海燕叶梦园陆诗燕湖州师范学院浙江313000

对慢性疲劳综合征、网络化认知行为疗法的概念、网络化认知行为疗法的优势及在青少年慢性疲劳综合征病人中的应用效果进行综述,以期为网络化认知行为疗法在我国青少年慢性疲劳综合征病人中的相关研究提供参考。

关键词：网络化认知行为疗法(ICBT) 慢性疲劳综合征(CFS) 青少年护理综述

论陆游乡居诗与宋代戏剧——以浙东运河、鉴湖流域为中心

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绍兴文理学院学报 2020年第11期40卷 75-83页

作者：赵豫云洛阳师范学院文学院大运河研究院河南洛阳471934

宋代浙东运河包括鉴湖部分是交通繁忙的水运航道。建炎南渡后,绍兴成为南宋京畿之地,浙东运河更成为可以直接出海的海上丝绸之路、国家级航道。乡居期间的陆游活动范围广布于浙东运河与鉴湖流域,其乡居诗中有大量的、长时间跨度的关于... 详细信息

宋代浙东运河包括鉴湖部分是交通繁忙的水运航道。建炎南渡后,绍兴成为南宋京畿之地,浙东运河更成为可以直接出海的海上丝绸之路、国家级航道。乡居期间的陆游活动范围广布于浙东运河与鉴湖流域,其乡居诗中有大量的、长时间跨度的关于浙东运河和鉴湖沿线草市镇、乡村文娱演出的系统、生动的记录、描摹,如与戏剧有血缘关系的民间歌舞、民俗演出,商业性质的、有组织的堂会歌舞演出和民间说唱,以及较专业和商业化的戏剧、戏曲演出等。这些诗作不仅充满了市井气息和农村风味,具有较高的艺术成就,且有独特的戏剧、戏曲史料价值。

关键词：陆游乡居诗戏剧浙东运河鉴湖草市镇

三七总皂苷抑制K562细胞mTOR信号通路活性的实验研究

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第三军医大学学报 2015年第12期37卷 1237-1242页

作者：翟玮玮李玉云杨向荣于北凯王露李见蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院临床检验基础教研室安徽蚌埠233030

目的探讨三七总皂苷（Panax notoginseng saponins,PNS）对体外培养K562细胞m TOR信号通路相关分子表达及活性的影响。方法不同浓度的PNS（50~800μg/m L）干预体外培养K562细胞24~72 h后,MTT比色法检测PNS对K562细胞增殖的抑制作用;AO... 详细信息

目的探讨三七总皂苷（Panax notoginseng saponins,PNS）对体外培养K562细胞m TOR信号通路相关分子表达及活性的影响。方法不同浓度的PNS（50~800μg/m L）干预体外培养K562细胞24~72 h后,MTT比色法检测PNS对K562细胞增殖的抑制作用;AO/EB双荧光染色法观察细胞死亡及凋亡状况;RT-PCR检测m TOR、p70S6K、4E-BP1 mRNA表达变化;Western blot检测m TOR、p70S6K、4E-BP1及p-m TOR、p-p70S6K、p-4E-BP1蛋白表达量的变化。结果与对照组相比,浓度为100~800μg/m L的PNS能够抑制K562细胞增殖（P〈0.05）,促进K562细胞凋亡及死亡（P〈0.05）,PNS对K562细胞72 h的IC50为（229.07±2.36）μg/m L;100、200、400μg/m L PNS作用于K562细胞72 h后m TOR蛋白表达量及mRNA表达量降低（P〈0.05）,且磷酸化蛋白p-m TOR（Ser2448）、p-p70S6K（Thr229/389）及p-4E-BP1（Thr37/46）表达水平也随着药物浓度的增加而降低（P〈0.05）。结论 PNS能够抑制K562细胞m TOR信号通路的活性,这可能是PNS抑制K562细胞增殖的机制之一。

关键词：三七总皂苷 K562细胞 m TOR信号通路