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MOPCS: next-generation nucleic acid molecular biosensor

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National Science Review 2022年第9期9卷 139-141页

作者： Quan Liu Shang Chen Li Wang Zhaojun Duan Fuquan Xie Guojun Zhao yunde hou Dixian Luo Laboratory Medicine Center Huazhong University of Science and Technology Union Shenzhen Hospital(Nanshan Hospital) Guangdong Key Laboratory for Biomedical Measurements and Ultrasound Imaging School of Biomedical Engineering Shenzhen University Health Science Center National Institute for Viral Disease Control and Prevention China Center for Disease Control and Prevention Department of Laboratory Medicine Shenzhen Children's Hospital The Sixth Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University Qingyuan City People's Hospital

Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) has had a huge impact on the world, causing millions of deaths and a serious blow to the global economy. SARS-CoV-2 can aack most body tissues with devastating consequences [1].e current global SARS-CoV-2 outbreak has exposed our shortcomings in the prevention and control of infectious diseases,

关键词：

Genomic organization of EDSV strain AA-2

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Chinese Science Bulletin 1998年第7期43卷 594-597页

作者： Liyu Zeng Qi Jin Jinggang Zhang Maoxiang Li Hong Li Lei Zhu Zhen Yin yunde hou Chinese Acad Prevent Med Inst Virol State Key Lab Mol Virol & Genet Engn Beijing 100052 Peoples R China Inst Mil Vet Med Changchun 130062 Peoples R China

The genomic organization of egg drop syndrome virus strain AA-2 isolated in China is reported here. The genome was found to be 32 838 bp in length, approximately 2 kb shorter than those of the human subgenus C adenoviruses. Analysis of open reading frames indicated that the genes for major viral structural proteins (55 K, Penton base, pⅦ, pⅩ, pⅥ, Hexon, 100 K, pⅧ and Fiber), as well as EP, DNA polymerase and ⅣaⅡ are present in the expected locations in the genome. EDSV possesses no identifiable E3 and E4 regions and most proteins encoded by E3 and E4 regions of other adenoviruses genome were not presented in EDSV.

关键词： EDS-76 genomic organization sequence analysis.

A novel method for purification of recombinant adeno-associated virus vectors on a large scale

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Chinese Science Bulletin 2001年第6期46卷 485-489页

作者： WU Xiaobing DONG Xiaoyan WU Zhijian CAO Hui NIU Dongbin QU Jianguo WANG Hong hou yunde State Key Laboratory for Molecular Virology and Genetic Engineering Beijing 100052China Laboratory of Morphology Institute of VirologyChinese Academy of Preventive MedicineBeijing 100052China

A novel method for recombinant adeno-associ-ated virus (rAAV) purification on large scale is described. The method involves three steps, including chloroform treatment, PEG/NaCl precipitation and chloroform extraction. The whole procedure can be performed in four hours. Using this purification method, we can reproducibly obtain, from 4 × 109 of proviral cells cultured in roller bottles, purified rAAV-GFP stocks with titers of around 5×1013 particles/mL and purity greater than 95%. The infectious titers of the vector stocks were up to 2×1012 TU/mL, thus particle-to-infectivity rate was about 25. Under an electronic microscope, most rAAV particles appeared full and a few were in intermediate form. Empty particles were rarely seen. The purified rAAV-GFP stocks have been successfully used in in vitro and in vivo transfection experiments. Therefore, this new method offers a simple, rapid and cost-effective way for large-scale rAAV purification.

关键词： recombinant adeno-associated virus chloroform purifi- cation.

重视重组人干扰素α1b的创新研究和儿科临床应用

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中华实用儿科临床杂志 2018年第18期33卷 1361-1365页

作者：侯云德张国成中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206 中国武警后勤学院医学院儿童医院天津300163

重组人干扰素α1b（IFNα1b）作为中国第一个基因工程Ⅰ类新药，具有独特的生物学意义及临床价值。特别是在儿科领域，IFNα1b用于小儿病毒性肺炎、病毒性肝炎、毛细支气管炎、疱疹性咽峡炎、手足口病和某些肿瘤的治疗，均显示了确切的... 详细信息

重组人干扰素α1b（IFNα1b）作为中国第一个基因工程Ⅰ类新药，具有独特的生物学意义及临床价值。特别是在儿科领域，IFNα1b用于小儿病毒性肺炎、病毒性肝炎、毛细支气管炎、疱疹性咽峡炎、手足口病和某些肿瘤的治疗，均显示了确切的疗效和良好的安全性，近期在病毒相关的喘息性疾病、流感等重大传染病防治领域展现了更大的应用前景，为促进我国儿童健康发挥了重要作用。现就IFNα1b的基因和分子特点、新型递送方式及儿童应用的前沿研究成果进行阐述和讨论。

关键词：干扰素α1b 儿童病毒雾化吸入喘息流感

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21世纪的医学病毒学研究趋向

医学研究通讯 2002年第10期31卷 2-5页

作者：侯云德病毒基因工程国家重点实验室

目前,分子病毒学是病毒学的主流分支学科,分子病毒学向两个方向发展,一是着重在理论方面,采用现代分子生物学技术阐明病毒及病毒感染的本质;另一方面是着重在应用,也就是病毒基因工程.两者相互依存,相互促进,其主要内容和重要性可以概... 详细信息

目前,分子病毒学是病毒学的主流分支学科,分子病毒学向两个方向发展,一是着重在理论方面,采用现代分子生物学技术阐明病毒及病毒感染的本质;另一方面是着重在应用,也就是病毒基因工程.两者相互依存,相互促进,其主要内容和重要性可以概括如下:

关键词： 21世纪医学病毒学病毒基因工程病毒蛋白质工程抗病毒多肽物质

基因工程产品的N末端均一性及其中残留的痕量杂质蛋白的分析

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生物工程学报 1991年第2期7卷 108-113页

作者：金冬雁张智清周圆侯云德中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

利用Edman降解法,辅之以邻苯二甲醛阻断等技术,在蛋白/多肽测序仪-PTH氨基酸分析仪上微量自动测定了在大肠杆菌系统获得高效表达的重组人γ干扰素、α 2干扰素和白细胞介素-2等多种基因工程产品的N末端氨基酸序列。根据氨基酸色谱分析... 详细信息

利用Edman降解法,辅之以邻苯二甲醛阻断等技术,在蛋白/多肽测序仪-PTH氨基酸分析仪上微量自动测定了在大肠杆菌系统获得高效表达的重组人γ干扰素、α 2干扰素和白细胞介素-2等多种基因工程产品的N末端氨基酸序列。根据氨基酸色谱分析的原始资料,对上述蛋白质样品的N末端均一性进行了细致分析。在此基础上,借助序列库检索比较等计算机方法检定了这些样品中可能残留的痕量杂质蛋白,并对分析痕量残留蛋白的一般方法进行了讨论。分析结果表明重组人γ干扰素N末端均一;而α 2干扰素和白细胞介素-2的N末端不均一,其中主要含大致等量的N末端带有蛋氨酸与不带蛋氨酸的两种分子,仅在个别送检样品中发现痕量N末端丢失一个氨基酸的分子。通过在序列库中检索所测出的一段八肽疑似序列,推断在一批送检样品中含有痕量的卵清溶菌酶,经进一步纯化样品并测序后得以证实。本文结果为进一步优化和确定有关产品的生产流程并建立产品质量控制的标准提供了重要依据。

关键词：基因工程产品 N端均一性杂质蛋白

在大肠杆菌中提高人α1b型基因工程干扰素的表达

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生物工程学报 1996年第S1期12卷 67-71页

作者：薛水星吴淑华韩峰魏佳侯云德中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

将人α１ｂ型干扰素（ＩＦＮα１ｂ）基因插入带有原核增强子样序列的新型载体ｐＢＶ３２２，使干扰素在大肠杆菌中的表达水平明显高于原表达载体，达到１６×１０８ｕ／Ｌ培养液。重组质粒的特点是：含增强子序列Ｘ，ｔｒｐ启动子... 详细信息

将人α１ｂ型干扰素（ＩＦＮα１ｂ）基因插入带有原核增强子样序列的新型载体ｐＢＶ３２２，使干扰素在大肠杆菌中的表达水平明显高于原表达载体，达到１６×１０８ｕ／Ｌ培养液。重组质粒的特点是：含增强子序列Ｘ，ｔｒｐ启动子控制。利用ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅ、ＣＭＳｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析及单克隆抗体亲和层析纯化ＩＦＮα１ｂ，获得了电泳纯产品，其比活性为２×１０７ｕ／ｍｇ，分子量为１９ｋＤａ。此外，用ｐＡＴ１５３代替ｐＢＶ３２２，构建了带有和不带有Ｘ序列的两种表达载体。

关键词：人α1b型干扰素原核增强子样序列蛋白质纯化

饰胶蛋白(Decorin)基因的cDNA克隆与表达

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西安医科大学学报 2000年第6期21卷 512-514页

作者：曹茂开赵文明侯云德西安交通大学生物科学与工程研究所，西安 710049

目的　通过基因克隆技术获得饰胶蛋白基因cDNA克隆并表达。为研究饰胶蛋白的生物学功能及应用打基础。方法　应用PCR技术从T细胞cDNA文库获得饰胶蛋白全长基因cDNA片段 ,并克隆到pUC1 9载体中 ,采用Sanger双脱氧末端终止法测定全部cDNA... 详细信息

目的　通过基因克隆技术获得饰胶蛋白基因cDNA克隆并表达。为研究饰胶蛋白的生物学功能及应用打基础。方法　应用PCR技术从T细胞cDNA文库获得饰胶蛋白全长基因cDNA片段 ,并克隆到pUC1 9载体中 ,采用Sanger双脱氧末端终止法测定全部cDNA序列 ,将测序正确的饰胶蛋白cDNA序列插入pGEX 4T 1表达载体中 ,经BamHI和EcoRI双酶切后 1 2 %凝胶电泳鉴定 ,IPTG诱导表达产物经SDS PAGE分析。结果　克隆的饰胶蛋白cDNA序列与GenBank中AF1 3830 0记载的序列完全一致 ,所表达的融合蛋白质分子量与理论计算值(65 6KD)也一致并为可溶性蛋白。结论　本研究成功地克隆了饰胶蛋白基因和表达了GST

关键词：饰胶蛋白克隆序列分析 cDNA

GM－CSF对人单核细胞HLA－DR抗原表达的影响

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上海免疫学杂志 1994年第4期14卷 193-195页

作者：丁传林姚堃周瑶玺张智清侯云德南京医科大学微生物学教研室中国预防医学科学院病毒研究所

本文采用ＥＬＩＳＡ方法，研究了重组的人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对体外培养的正常人外周血单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的影响。结果表明ＧＭ－ＣＳＦ能提高单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，并且呈剂量依赖... 详细信息

本文采用ＥＬＩＳＡ方法，研究了重组的人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对体外培养的正常人外周血单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的影响。结果表明ＧＭ－ＣＳＦ能提高单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，并且呈剂量依赖关系，最适剂量（５００ｕ／ｍｌ）时能使ＤＲ抗原表达量提高到对照组的２．５倍。ＧＭ－ＣＳＦ对ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的诱导作用并不是通过诱生的ＩＦＮ－γ的作用而实现的，因为有中和活性的ＩＦＮ－γ单抗并不能阻断这种效应。ＧＭ－ＣＳＦ能够增强低剂量ＩＦＮ－γ（５ｕ／ｍｌ）对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导作用，但未观察到对高剂量ＩＦＮ－γ（１００ｕ／ｍｌ）的ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导增强作用。

关键词： GM-CSF 单核细胞人白细胞抗原 DR