检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

犬瘟热病毒截短P蛋白的表达及纯化

畜牧与兽医 2019年第10期51卷 81-86页

作者：李爽易立程悦宁曹智刚林鹏程世鹏中国农业科学院特产研究所

为获得犬瘟热病毒(CDV)野毒株截短磷蛋白(aa232~507),以Asia 1型CDV-PS为基础,经PCR扩增得到P(aa232~507)基因,插入原核表达载体pEASY^R-Blunt E1中,构建重组原核表达载体pEASY^R-Blunt E1-CDV-P;将重组质粒转化到BL21感受态细胞中进行原核表达并对诱导条件进行优化;超声破碎最佳条件下的诱导产物经离心后对重组蛋白进行可溶性分析,随后用镍柱对重组截短P蛋白进行纯化并用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果显示:重组P蛋白大小约37 kDa,在IPTG终浓度0.1 mmol/L,诱导时间为8 h时,表达量最高;重组P蛋白以包涵体形式存在,经SDS-PAGE和Western blot鉴定,成功纯化出重组截短P蛋白;重组P蛋白具有良好的免疫反应性。本研究成功制备出CDV-PS截短P蛋白,为进一步P蛋白抗原表位的研究和CDV抗体诊断方法的研发奠定基础。

关键词：犬瘟热病毒重组P蛋白原核表达蛋白纯化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

北极狐能量代谢的研究进展

特产研究 2023年第2期45卷 149-153页

作者：刘倩钟伟罗国良程悦宁中国农业科学院特产研究所吉林长春130112

本文综述了北极狐消化生理特性,针对其不同生物学时期生长发育规律和代谢能需要量进行归纳总结,同时对影响其能量代谢的主要因素进行分析,旨在为我国北极狐的精细化饲养与饲料配方的精准配制提供理论参考依据。

关键词：北极狐能量调节代谢调控

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水貂沙门氏菌的分离鉴定及药物敏感性分析

中国畜牧兽医 2019年第2期46卷 635-641页

作者：孙娜陈强程悦宁杨勇王改丽刘泽余张淑琴程世鹏中国农业科学院特产研究所农业部经济动物疫病重点实验室长春130112 长春大学园林学院长春130022 吉林大学长春130062

为指导临床合理用药并为治疗患病水貂提供依据,本试验对山东省某水貂养殖场送检的7只疑似患有沙门氏菌病的病死水貂的肝脏和脾脏样品进行细菌分离鉴定及药物敏感性分析,通过分离纯化方法从样品中分离菌株,并采用革兰氏染色、生化鉴定和... 详细信息

为指导临床合理用药并为治疗患病水貂提供依据,本试验对山东省某水貂养殖场送检的7只疑似患有沙门氏菌病的病死水貂的肝脏和脾脏样品进行细菌分离鉴定及药物敏感性分析,通过分离纯化方法从样品中分离菌株,并采用革兰氏染色、生化鉴定和PCR方法对分离菌株进行鉴定。运用K-B药敏法检测菌株对临床常用药物的敏感性,并通过PCR方法检测菌株耐药基因及Ⅰ类整合子的携带情况。结果显示,本试验分离得到的7株菌均为革兰氏阴性、短小的杆菌;生化反应检测显示,分离菌株葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、MR试验、枸橼酸盐、硫化氢试验均表现为阳性,初步鉴定分离菌株为沙门氏菌;PCR产物测序结果进一步表明7株分离菌均为沙门氏菌;药敏试验结果显示,7株沙门氏菌对头孢曲松、左氧氟沙星、氟苯尼考和多黏菌素较敏感,对氨基糖苷类药物、四环素和氨苄西林表现为耐药;耐药基因检测结果显示,7株沙门氏菌共检测出8种耐药基因blaTEM-1、blaCTX-M-1G、aadA1、aac(3′)-Ⅳ、aac(3′)-Ⅱc、aph(4′)-Ⅰa、aph(3′)-Ⅶ和oqxAB,以及基因盒为aadA1、arr-3-aacA4和blaPSE-1的Ⅰ类整合子。综上可知,本试验在送检的7只患病水貂的肝脏和脾脏样品中分离到7株沙门氏菌,分离菌株均为耐药菌株,且主要表现为多重耐药现象;耐药基因呈多样性,且存在位于质粒上的耐药基因扩大了耐药基因的传播范围,增加了细菌的耐药性,为临床用药治疗带来困难。

关键词：水貂沙门氏菌药物敏感性耐药基因

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水貂肺炎克雷伯菌的分离鉴定及耐药性分析

中国畜牧兽医 2022年第2期49卷 700-708页

作者：陈强程悦宁冯秋菊郭利张淑琴谭斌易立赵权程世鹏孙娜中国农业科学院特产研究所农业农村部经济动物疫病重点实验室长春130112 吉林农业大学长春130118 四川省凉山彝族自治州农业农村局农产品质量安全检测中心西昌615000

【目的】肺炎克雷伯菌是人畜共患的条件致病菌,是引起水貂肺炎的常见病原菌之一。试验主要对吉林省某水貂养殖场送检的6只患有肺炎的病死水貂进行细菌分离鉴定及耐药性分析,为指导临床合理用药提供依据。【方法】通过分离纯化方法从样... 详细信息

【目的】肺炎克雷伯菌是人畜共患的条件致病菌,是引起水貂肺炎的常见病原菌之一。试验主要对吉林省某水貂养殖场送检的6只患有肺炎的病死水貂进行细菌分离鉴定及耐药性分析,为指导临床合理用药提供依据。【方法】通过分离纯化方法从样品中分离菌株并进行PCR鉴定,应用多位点序列分型技术(MLST)进行菌株ST分型。通过感染小鼠了解菌株的致病性,PCR检测血清型及毒力基因的携带情况;运用琼脂稀释法检测分离菌株对18种药物的敏感性,并通过PCR检测分离菌株耐药基因的携带情况。【结果】分离得到的6株菌株经PCR鉴定为肺炎克雷伯菌;MLST分析结果表明6株菌株分别有6种ST型,分别为:ST2594、ST1782、ST2844、ST2330、ST86和ST661。致病性分析结果显示,6株菌株均可引起小鼠死亡,共检测出6种毒力基因,未检测到毒力较强的血清型。药敏试验结果显示,6株肺炎克雷伯菌对头孢他啶、头孢曲松、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星较敏感,对链霉素、庆大霉素、卡那霉素、青霉素、氨苄西林、环丙沙星、恩诺沙星、左氧氟沙星、多西环素和氟苯尼考较耐药。耐药基因检测结果显示,6株菌株共检测出bla_(SHV)、bla_(TEM-1)、bla_(CTX-M-1G)、aadA1、aac(3’)-Ⅳ、aac(3’)-Ⅱc、aph(4’)-Ⅰa、aph(3’)-Ⅶ、aph(3’)-Ⅳ、aph(2’)-Ⅰb、rmtB、qnrB、qnrD、qnrS、qepA、oqxAB、floR和mcr-118种耐药基因。【结论】分离到的6株肺炎克雷伯菌株为不同的种系进化,并具有较强的致病性和耐药性,为临床用药治疗带来困难。

关键词：水貂肺炎克雷伯菌药物敏感性耐药基因

牛病毒性腹泻病毒和牛冠状病毒双重纳米RT-PCR检测方法的建立及应用

同方期刊数据库

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧与兽医 2022年第3期54卷 101-105页

作者：魏宇王海璐孙飞雁郭利程悦宁王全凯吉林农业大学中药材学院吉林长春130112 中国农业科学院特产研究所吉林长春130112

本文建立了一种同时检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛冠状病毒(BCoV)2种病原的双重纳米RT-PCR方法。采用BVDV 5′-UTR基因序列(GenBank登录号:AB040132.1)和BCoV的N基因保守序列(GenBank登录号:KX982264.1)设计出一对BVDV特异性引物和一... 详细信息

本文建立了一种同时检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛冠状病毒(BCoV)2种病原的双重纳米RT-PCR方法。采用BVDV 5′-UTR基因序列(GenBank登录号:AB040132.1)和BCoV的N基因保守序列(GenBank登录号:KX982264.1)设计出一对BVDV特异性引物和一对BCoV的特异性引物,结果表明此方法对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)和牛轮状病毒(BRV)均无交叉反应,特异性良好。同时,应用此方法检测33份腹泻牛的临床样品和25份腹泻鹿的临床样品,结果得出BVDV、BCoV和2种病原混合感染的牛样品阳性率分别为15.15%、36.36%和6.06%。鹿样品感染BVDV、BCoV和2种病原混合感染的阳性率分别为28%、8%和8%。此外,敏感性试验结果为常规RT-PCR敏感性的10倍,最低检出限为1 fg。研究表明,本文建立的该方法快速、灵敏、简捷,具有较强的特异性、敏感性,可适用于大批量临床样品检测,为反刍动物相关病毒性腹泻的诊断和防控提供一定技术支撑。

关键词：牛病毒腹泻病毒牛冠状病毒双重纳米RT-PCR

水貂出血性肺炎大肠杆菌毒力基因测定和H基因分型

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国动物传染病学报 2022年第1期30卷 141-149页

作者：张海威程悦宁王晓旭周玉成乔连江周曼莉程世鹏杨艳玲中国农业科学院特产研究所农业农村部经济动物疫病重点实验室长春130112

为了分离鉴定引起水貂出血性肺炎的大肠杆菌,并对其致病性、血清型和毒力基因进行鉴定。本研究主要通过细菌分离鉴定试验对具有典型肺炎症状的死亡水貂的病原体进行分离,利用16S rRNA对进行细菌鉴定,并通过PCR方法对分离细菌的血清型和... 详细信息

为了分离鉴定引起水貂出血性肺炎的大肠杆菌,并对其致病性、血清型和毒力基因进行鉴定。本研究主要通过细菌分离鉴定试验对具有典型肺炎症状的死亡水貂的病原体进行分离,利用16S rRNA对进行细菌鉴定,并通过PCR方法对分离细菌的血清型和毒力基因进行检测,分析分离菌对动物的致病性。结果显示:28例水貂肺炎病例中分离出8株大肠杆菌,分离率为26.6%;H血清型分析显示:8株大肠杆菌的H基因型分别为H5、H11、H16、H25,其中H11为主要基因型,比率为50%(4/8);共有4种大肠杆菌的主要毒力基因,分别是iutA、papC、irp2、fyuA,其中H11血清型菌株含有iutA、irp2和fyuA 3种主要毒力基因。通过本研究我们明确了引起水貂肺炎的大肠杆菌主要血清型为H11,主要的毒力基因为iutA、papC、irp2和fyuA。

关键词：水貂出血性肺炎大肠杆菌 H基因分型毒力基因检测

维普期刊数据库博看期刊

水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)血清学效力检验及与靶动物免疫保护相关性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黑龙江畜牧兽医 2020年第20期 128-131页

作者：冯二凯易立施鹏飞尹茉莉罗国良王振军陈立志程世鹏郭利程悦宁中国农业科学院特产研究所长春130112 吉林医药学院抗体工程科技协同创新中心吉林吉林132013 吉林特研生物技术有限责任公司长春130122

为了评估新研制的水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)在临床应用中的免疫效果,试验分别将3批疫苗接种水貂,测定其免疫效力、免疫产生期及持续期,以及对CDV-LNM株(强毒)攻击的保护效果;并将其与同类疫苗进行比较,评价疫苗的... 详细信息

为了评估新研制的水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)在临床应用中的免疫效果,试验分别将3批疫苗接种水貂,测定其免疫效力、免疫产生期及持续期,以及对CDV-LNM株(强毒)攻击的保护效果;并将其与同类疫苗进行比较,评价疫苗的优劣。结果表明:试验水貂接种疫苗后7 d产生中和抗体,第14天即可产生免疫保护,第21天抗体水平达到峰值(中和抗体效价在1∶102以上),并可持续180 d。试验水貂血清中和抗体效价与疫苗免疫保护呈正相关性,并且试验疫苗与同类疫苗无明显差异。说明新工艺制备的疫苗质量安全可靠。

关键词：水貂犬瘟热疫苗悬浮培养效力试验免疫保护相关性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

狐狸流产奇异变形杆菌的分离鉴定及特征分析

中国畜牧兽医 2019年第11期46卷 3370-3377页

作者：张萍程悦宁张海威乔连江周玉成徐丽候庆丰杨艳玲中国农业科学院特产研究所长春130112 柳河县柳南乡畜牧兽医站柳河135300 舒兰市畜牧总站舒兰132600

为明确引起狐狸流产的主要原因,确定主要病原体并提出有效防控措施,试验收集了河北地区多个流产狐狸的脾脏和卵巢,利用细菌分离培养、形态观察、药敏试验、16S rRNA基因测序和序列分析及同源性比对等方法对引起狐狸流产的病原体进行分... 详细信息

为明确引起狐狸流产的主要原因,确定主要病原体并提出有效防控措施,试验收集了河北地区多个流产狐狸的脾脏和卵巢,利用细菌分离培养、形态观察、药敏试验、16S rRNA基因测序和序列分析及同源性比对等方法对引起狐狸流产的病原体进行分离鉴定,分析其耐药性,筛选有效治疗药物;同时对病原菌的致病力进行检测。结果显示,从流产狐狸病变的脾脏和卵巢中分离到了1株单一的革兰氏阴性菌,命名为FOX-abortion-Hebei。药敏试验结果显示,该菌对头孢哌酮等11类药物敏感,而对妥布霉素等5类抗菌药物中度敏感。动物试验结果显示,该菌株具有较强的致病性,攻毒小鼠和狐狸后均可引起动物死亡。16S rRNA测序和同源性分析结果显示,分离到的革兰氏阴性菌为奇异变形杆菌(Proteus mirabilis,PM),与已公布序列的同源性为93.6%~99.9%;系统进化树结果显示,该菌与埃及分离到的菌株(AUMC B-199)亲缘关系最近。本研究明确了狐狸流产主要是由奇异变形杆菌感染所致,也是首次在流产狐狸中分离到该菌,且能引起严重的繁殖障碍,需在狐狸养殖中加以防控。

关键词：狐狸流产奇异变形杆菌致病力耐药性

水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗对北极狐安全性和免疫效力评价

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

吉林农业大学学报 2023年第3期45卷 372-378页

作者：冯二凯施鹏飞罗国良张淼易立孙娜陈立志程世鹏尹茉莉任飞王振军程悦宁中国农业科学院特产研究所长春130112 吉林特研生物技术有限责任公司长春130122 吉林医药学院抗体工程科技协同创新中心吉林132013

分别以单剂量(3头份)、重复单剂量、超剂量(30头份)将3批中试生产的水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)接种育成期北极狐(2~4月龄),考察疫苗对北极狐的免疫安全性和免疫效力。安全性评价重点观察接种动物的体温、食欲以及生... 详细信息

分别以单剂量(3头份)、重复单剂量、超剂量(30头份)将3批中试生产的水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)接种育成期北极狐(2~4月龄),考察疫苗对北极狐的免疫安全性和免疫效力。安全性评价重点观察接种动物的体温、食欲以及生产性能是否发生改变,注射部位是否出现炎症等;免疫效力重点关注疫苗的免疫应答抗体、免疫产生期和持续期,以及对CDV强毒攻击(LNM株)的保护效果等。结果表明:单剂量、重复单剂量以及超剂量接种动物均没有发生炎症反应,疫苗被完全吸收;动物体温变化也处于正常范围内;疫苗在接种后7 d产生中和抗体,14 d部分动物即可形成免疫保护,21 d抗体水平达到峰值,并可持续约180 d,说明新工艺制备的疫苗对北极狐安全有效。

关键词：犬瘟热活疫苗悬浮培养北极狐安全性免疫效力