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山羊支原体山羊肺炎亚种在2种培养基上的生长特性比较

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中国兽医学报 2021年第5期41卷 911-914,919页

作者：张晓亮马水燕郝华芳陈胜利颜新敏马丽娜刘永生储岳峰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046

为筛选出山羊传染性胸膜肺炎疫苗制备中抗原产量高且成本低的培养基,本试验将山羊支原体山羊肺炎亚种M1801株和M1601株接种于含20%马血清的改良Thiaucourt’s肉汤(MTB)和新研制的含5%马血清的培养基(HF3),在120 h内监测其pH值、颜色变... 详细信息

为筛选出山羊传染性胸膜肺炎疫苗制备中抗原产量高且成本低的培养基,本试验将山羊支原体山羊肺炎亚种M1801株和M1601株接种于含20%马血清的改良Thiaucourt’s肉汤(MTB)和新研制的含5%马血清的培养基(HF3),在120 h内监测其pH值、颜色变化单位(color change units, CCU)和菌体蛋白浓度的变化,绘制相应曲线。结果表明,山羊支原体山羊肺炎亚种用HF3培养时pH值下降更慢,2个菌株在HF3培养基中的CCU计数均高于MTB培养基,且高滴度维持时间更长,菌体的蛋白浓度也略高于MTB培养基。结果提示山羊支原体山羊肺炎亚种在HF3培养基中产量更高,较MTB具有更好的效果,且血清浓度低,成本更低廉,为山羊传染性胸膜肺炎灭活疫苗的大批量生产奠定了基础。

关键词：山羊支原体山羊肺炎亚种培养基筛选低血清培养基颜色变化单位蛋白浓度

牛支原体TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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畜牧与兽医 2019年第8期51卷 105-109页

作者：翟肖辉王方国郝华芳颜新敏陈胜利 Hussam Askar Mohamad 朱建勋储岳峰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046 甘肃煤田地质局一三三队甘肃白银730913

以牛支原体p80基因为靶基因,设计特异性引物与探针,优化反应体系,建立了牛支原体TaqMan探针实时荧光定量PCR(TaqMan real-time PCR)检测方法,并对该方法进行了特异性、敏感性、重复性评估以及临床样本检测。结果显示,特异性试验中,牛支... 详细信息

以牛支原体p80基因为靶基因,设计特异性引物与探针,优化反应体系,建立了牛支原体TaqMan探针实时荧光定量PCR(TaqMan real-time PCR)检测方法,并对该方法进行了特异性、敏感性、重复性评估以及临床样本检测。结果显示,特异性试验中,牛支原体2个菌株Cq值均小于18,其余13个非牛支原体菌株Cq值均大于36;敏感性试验中,最低可检3.89拷贝/μL靶DNA,是普通PCR的10~4倍(普通PCR 3.89×10~4拷贝/μL);重复性试验中,组内、组间重复的变异系数均小于1%;44份牛的临床样品利用TaqMan real time PCR检出6份阳性(阳性率为13.64%),分离培养鉴定检出7份阳性,普通PCR检测全部阴性。本研究建立了一种敏感、特异、稳定的牛支原体TaqMan real time PCR检测方法,可用于牛支原体的快速诊断和核酸定量检测。

关键词：牛支原体 p80基因 TaqMan探针实时荧光定量PCR 特异性敏感性

胡椒碱合成相关BAHD酰基转移酶基因的克隆与分析

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分子植物育种 2023年第2期21卷 437-453页

作者：程俊后思宇李靖岑怡苏岳峰伍宝朵范睿郝朝运杨建峰丁元昊胡丽松海南大学热带作物学院海口570228 中国热带农业科学院香料饮料研究所农业农村部香辛饮料作物遗传资源利用重点实验室海南省Sim Soonliang院士工作站万宁571533

胡椒碱是胡椒中重要的功能物质和品质指标之一。本研究以中国胡椒的主栽品种‘热引1号’为材料,基于胡椒基因组数据和转录组数据,筛选参与胡椒碱合成相关BAHD酰基转移酶,对候选的酰基转移酶基因进行克隆、分析和诱导表达。结果表明从胡... 详细信息

胡椒碱是胡椒中重要的功能物质和品质指标之一。本研究以中国胡椒的主栽品种‘热引1号’为材料,基于胡椒基因组数据和转录组数据,筛选参与胡椒碱合成相关BAHD酰基转移酶,对候选的酰基转移酶基因进行克隆、分析和诱导表达。结果表明从胡椒基因组中鉴定出BAHD酰基转移酶基因78个。基于多序列比对及motif分析,胡椒BAHD酰基转移酶成员分为7类,特征结构域主要为HXXXD、DFGWG、YFGN。表达模式分析筛选出在胡椒果实中特异表达的BAHD基因7个,并成功克隆到全长序列。其中,Pn1.3303、Pn1.3375编码的氨基酸包含完整且未发生突变的特征结构域,在胡椒种子中特异表达,表达模式与胡椒碱合成紧密相关。将2个目的基因分别构建到原核表达载体pGEX-4T-1上,最终成功诱导表达出N末端与GST标签融合的目的蛋白。本研究为胡椒碱生物合成相关BAHD酰基转移酶的鉴定提供了基因资源。

关键词：胡椒胡椒碱 BAHD酰基转移酶

EGF+61基因多态性与肝硬化的相关性研究

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胃肠病学和肝病学杂志 2010年第1期19卷 28-30页

作者：陈越峰戚鹏王皓陈岳明孙小娟刘艳高春芳第二军医大学附属东方肝胆外科医院实验诊断科上海200438 第二军医大学附属长征医院实验诊断科浙江省杭州市第一人民医院实验诊断科

目的探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)G61A位点(EGF+61)多态性与肝硬化发生、发展的关系。方法运用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测中国人群中147例肝硬化患者和227例正常对照者中EGF+61位点的... 详细信息

目的探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)G61A位点(EGF+61)多态性与肝硬化发生、发展的关系。方法运用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测中国人群中147例肝硬化患者和227例正常对照者中EGF+61位点的基因型,分析其基因型及等位基因的分布频率。结果EGF+61位点AA基因型及A等位基因在正常对照者中的分布频率均高于肝硬化患者(7.0%vs6.1%,30.4%vs27.2%),但其差异均无统计学意义(P>0.05)。EGF+61位点AA基因型及A等位基因在不同的Child-Pugh分级的肝硬化中的分布频率及规律不一,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在中国人群中,EGF+61位点的基因多态性与肝硬化的发生和发展无密切相关性。

关键词：表皮生长因子多态性单核苷酸肝硬化

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青海地区牦牛牛支原体核酸检测分析

中国兽医学报 2022年第9期42卷 1851-1855,1868页

作者：王方国陈胜利颜新敏郝华芳兰仕梅李章程马丽娜储岳峰曹随忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046 四川农业大学动物医学院四川成都611130

为了解青海地区牦牛牛支原体分子流行情况,本试验采用荧光定量PCR(qPCR)方法对2018-2019年采集青海地区的636份牦牛鼻拭子进行牛支原体核酸检测,并对不同地区、年份、年龄、性别、饲养模式的牦牛牛支原体核酸检测结果进行统计分析。结... 详细信息

为了解青海地区牦牛牛支原体分子流行情况,本试验采用荧光定量PCR(qPCR)方法对2018-2019年采集青海地区的636份牦牛鼻拭子进行牛支原体核酸检测,并对不同地区、年份、年龄、性别、饲养模式的牦牛牛支原体核酸检测结果进行统计分析。结果显示,牛支原体的总检出率为21.86%(139/636),牛支原体在青海不同地区(海北州、海南州、西宁市、海西州)牦牛群存在不同程度的流行(0%~44%);2018年11月检出率为18.02%,2019年6月检出率26.37%;雌性检出率(27.84%)高于雄性检出率(18.41%),差异性显著(P<0.05);0~2岁的检出率最高,为22.26%,其次为3~6岁,检出率为19.50%,6~12岁检出率最低,为18.03%,差异性显著(P<0.05);放牧养殖模式下检出率最高(34.00%),其次是集约化养殖模式(22.81%),放牧+圈养养殖模式下检出率最低(17.47%),差异显著(P<0.05)。青海不同地区牦牛牛支原体存在不同程度的流行,不同年龄、性别、饲养模式存在统计学差异。本研究为明确青海地区牦牛牛支原体流行情况,为制定合理的防制措施提供了参考数据。

关键词：青海牦牛牛支原体核酸检测

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我国健康医疗大数据资源目录体系建设研究

中国卫生信息管理杂志 2017年第3期14卷 387-391页

作者：孟群胡建平董方杰杨龙频张黎黎邢昊李岳峰国家卫生计生委统计信息中心北京市100044

健康医疗大数据是国家重要的基础性战略资源,国家政策明确提出要建立全国健康医疗数据资源目录体系,规范和推动健康医疗大数据融合共享、开放应用。本文总结了我国健康医疗大数据资源目录体系建设目标,详细描述了健康医疗大数据资源目... 详细信息

健康医疗大数据是国家重要的基础性战略资源,国家政策明确提出要建立全国健康医疗数据资源目录体系,规范和推动健康医疗大数据融合共享、开放应用。本文总结了我国健康医疗大数据资源目录体系建设目标,详细描述了健康医疗大数据资源目录体系建设内容涵盖的元数据、资源分类、目录编码和管理系统等关键技术以及行政制度和标准规范等管理需求。

关键词：健康医疗大数据资源目录元数据标准

牛支原体脂蛋白LppB的多克隆抗体制备及对天然蛋白识别分析

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畜牧与兽医 2023年第6期55卷 108-113页

作者：黄志成白宇彤陈胜利李章程兰仕梅李延召刘爽郝华芳刘冠慧储岳峰河北工程大学生命科学与食品工程学院河北邯郸056000 中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院/家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046

旨在克隆牛支原体脂蛋白LppB基因,并进行原核表达与纯化,制备其多克隆抗体,研究其对天然蛋白的识别能力。以牛支原体PG45、ZYJ5及GT01株基因组DNA作为模板,PCR扩增LppB基因,测序并比对分析;将合成的pET-30a-LppB质粒转化大肠杆菌BL21(D... 详细信息

旨在克隆牛支原体脂蛋白LppB基因,并进行原核表达与纯化,制备其多克隆抗体,研究其对天然蛋白的识别能力。以牛支原体PG45、ZYJ5及GT01株基因组DNA作为模板,PCR扩增LppB基因,测序并比对分析;将合成的pET-30a-LppB质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达产物用Ni-NTA纯化,Western blot方法验证纯化重组蛋白,测定其反应原性;将纯化蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,并测定其ELISA效价,Western blot测定多克隆抗体对牛支原体LppB的识别。结果显示:PCR扩增的LppB基因全长约1860 bp,与预期大小相符;LppB主要为可溶性表达,大小约为74 kDa,经Ni柱纯化后获得纯化蛋白,LppB蛋白具有良好的反应原性;制备出小鼠抗LppB多克隆抗体,ELISA效价为1∶25600,能够识别天然LppB蛋白。本研究成功制备出牛支原体重组LppB蛋白及其多克隆抗体,为LppB功能研究奠定基础。

关键词：牛支原体脂蛋白 LppB 原核表达多克隆抗体

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高盐矿井水回用反渗透阻垢剂的阻垢性能试验

净水技术 2022年第5期41卷 97-101页

作者：洪宇王曰锋暴彦慧闫浩尹新旺孙海兵孙永军金瓷科技实业发展有限公司宁夏银川750000 南京工业大学城市建设学院江苏南京211816

为解决宁夏某煤矿矿井水双膜法深度处理工艺中反渗透系统浓水侧结垢严重、进口阻垢剂成本高昂、运营成本倍增等问题,研制出适用于高硬度、高碱度、高矿化度矿井污水的反渗透阻垢剂JC-660,采用静态试验、动态模拟试验、现场应用测试JC-66... 详细信息

为解决宁夏某煤矿矿井水双膜法深度处理工艺中反渗透系统浓水侧结垢严重、进口阻垢剂成本高昂、运营成本倍增等问题,研制出适用于高硬度、高碱度、高矿化度矿井污水的反渗透阻垢剂JC-660,采用静态试验、动态模拟试验、现场应用测试JC-660的阻垢性能。结果表明,反渗透阻垢剂JC-660性能优异,可实现98.44%的高阻垢率,高于国外某进口品牌阻垢剂的11倍浓缩液(98.31%)和8倍浓缩液(98.33%)的阻垢率。且该阻垢剂在一定程度上缩小了企业经营成本,提高了企业生产运行稳定性。

关键词：矿井水反渗透 RO阻垢剂静态试验阻垢率

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红雾水葛根茎化学成分研究

中国民族民间医药 2023年第4期32卷 22-26页

作者：胡粉青赵家福马丽娟吴昊盘龙脉马跃新邵曰凤德宏职业学院云南芒市678400 德宏州食品药品检验所云南芒市678400 昆明市食品药品检验所云南昆明650032

目的:研究红雾水葛根茎的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱法等,从雾水葛属植物红雾水葛根茎的无水乙醇提取物中的乙酸乙酯萃取物中,分离化学成分,并应用核磁共振等技术鉴定化合物的结构。结果:从红雾水葛根茎中分离得到11个化学成分,分... 详细信息

目的:研究红雾水葛根茎的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱法等,从雾水葛属植物红雾水葛根茎的无水乙醇提取物中的乙酸乙酯萃取物中,分离化学成分,并应用核磁共振等技术鉴定化合物的结构。结果:从红雾水葛根茎中分离得到11个化学成分,分别鉴定为:木栓酮(Friedelan-3-one)(1)、(24R)-24-豆甾-4,22-二烯-3-酮((24R)-24-ethylcholesta-4,22-dien-3-one)(2)、豆甾醇(stigmasterol)(3)、表木栓醇(epifriedelanol)(4)、海棠果醛(canophyllal)(5)、(24R)-24-豆甾-4-烯-3-酮(3-oxo-4-en-sitoserone)(6)、7-羟基香豆素(7-Hydroxycoumarin)(7)、槲皮素(quercetin)(8)、十七烷酸-1-甘油酯(2, 3-dihydroxypropyl heptadecoate)(9)和γ-菠甾醇(γ-Spinasterol)(10)、β-谷甾醇(β-stigmasterol)(11)。结论:其中化合物(1)~(11)为首次从该植物中分离得到。化合物(2)、(5)、(6)、(7)、(8)、(9)为首次从该属植物中得到。

关键词：红雾水葛根茎分离鉴定研究

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