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Experimental study of a novel anti-Aβ single chain antibody for Alzheimer’s disease APP/PS1 transgenic mice

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低氧预处理人牙髓干细胞移植对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑白质损伤的影响

中国神经科学学会第十二届全国学术会议

作者： Jun Zhang Meng-Ming Hu Tian-Li Jun-Ting yang yue Cao Zhao-Jun wang Jin-shun Qi Department of Physiology Shanxi Medical University

Objective To observe the effects of a novel anti-amyloid beta protein（Ab） single chain antibody（sc Fv17） on the spatial learning and memory, hippocampal synaptic plasticity, and AD-like pathological charecteristics in the brain of APP/PS1 double transgenic AD model mice. Methods 12 month old APP/PS1 double transgenic mice and wild type mice were used in the present study. Anti-Ab（18）（16）-（18）（20） monoclonal antibody Sc Fv17 was produced by genetic engineering technology, and intranasally admistered to each group of mice for 12 weeks. y maze test and morris water maze tests were performed to study the ability of sort term working memory and long term spatial memory. Thereafter animals were randomly selected for electrophysiological recording and immunochemistry experiment. In field potential recording, hippocampal later phase long term potentiation（L-LTP） in CA1 region was induced by high-frequency stimulation（HFS）. In brain slice immunochemistry, Aβ plaques and inflammatory response in the hippocampus were examined. Results Sc Fv17 dose-dependently recognized and bound to Aβ31-35 and Aβ1-42 fragments in in vitro Elisa experiments, with similar EC50 values. Chronic application of Sc Fv17 improved the working memory and spatial learning and memory of 15-month-old APP/PS1 double transgenic mice, partially reversed the L-LTP depression in the hippocampal CA1 region and significantly reduced the Aβ plaques and inflammatory response presented in the cortex and hippocampus of APP/PS1 mice. Conclusions The novel sc Fv17 antibody effectively alleviates the detrimental insults in APP/PS1 double transgenic mice, providing further experimental evidence for the Aβ active center and therapeutic strategy for AD immunotherapy.

关键词： Anti-Aβ31-35 single chain antibody APP/PS1 transgenic mice Alzheimer’s disease Spatial learning and memory Amyloid-β protein Long term potentiation

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中国现代医学杂志 2023年第12期33卷 24-32页

作者：武沐洋王晓莉高淑君张浩肖培伦王凡涛潍坊医学院口腔医学院山东潍坊261053 潍坊医学院医学影像学院山东潍坊261053 潍坊医学院基础医学院山东潍坊261053 潍坊医学院附属医院口腔科山东潍坊261053

目的探讨低氧预处理人牙髓干细胞移植(H-hDPSCs)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑白质损伤及内源性神经干细胞的影响。方法将健康7 d龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分为假手术组、HIBD组、常氧培养hDPSC移植组(N-hDPSCs组)及低氧预处... 详细信息

目的探讨低氧预处理人牙髓干细胞移植(H-hDPSCs)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑白质损伤及内源性神经干细胞的影响。方法将健康7 d龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分为假手术组、HIBD组、常氧培养hDPSC移植组(N-hDPSCs组)及低氧预处理hDPSC移植组(H-hDPSCs组),每组11只。采用经典的Rice-Vannucci法复制HIBD模型。模型复制后7 d采用增殖细胞核抗原(PCNA)/巢蛋白(Nestin)免疫荧光双标法检测大鼠侧脑室室管膜下区内源性神经干细胞(NSCs)的增殖;模型复制后3周,滑竿实验、y迷宫实验及模型复制后4周morris水迷宫实验检测大鼠的运动及空间记忆能力;行为学实验后采用神经元特异性核蛋白(NeuN)免疫荧光法检测大鼠脑组织皮层和海马CA1区神经元的表达;采用髓鞘碱性蛋白(MBP)及神经纤维丝蛋白重链(NF200)免疫荧光双标法检测纹状体及胼胝体区髓鞘及神经纤维的表达。结果HIBD组模型复制后7 d的侧脑室室管膜下区增殖NSCs数较假手术组少(P<0.05),N-hDPSCs组、H-hDPSCs组较HIBD组多,但较假手术组少(P<0.05),N-hDPSCs组较H-hDPSCs组少(P<0.05)。N-hDPSCs组、H-hDPSCs组模型复制后3周爬杆时间较假手术组长(P<0.05),但较HIBD组短(P<0.05),H-hDPSCs组较N-hDPSCs组短(P<0.05)。HIBD组新异臂停留时间较假手术组短(P<0.05),N-hDPSCs组、H-hDPSCs组较HIBD组长(P<0.05),但较假手术组短(P<0.05),而N-hDPSCs组较H-hDPSCs组短(P<0.05)。各组大鼠第1天、第2天、第3天、第4天逃避潜伏期比较,经重复测量设计的方差分析,结果:(1)不同时间点逃避潜伏期有差异(F=662.825,P=0.000);(2)各组逃避潜伏期有差异(F=109.286,P=0.000),N-hDPSCs组、H-hDPSCs组大鼠较假手术组长(P<0.05),但均较HIBD组短(P<0.05),H-hDPSCs组较N-hDPSCs组短(P<0.05);(3)各组逃避潜伏期变化趋势有差异(F=20.543,P=0.000)。N-hDPSCs组、H-hDPSCs组大鼠在第5天的空间探索实验中穿台次数较假手术组少(P<0.05),但较HIBD组多(P<0.05),H-hDPSCs组较N-hDPSCs组多(P<0.05)。N-hDPSCs组、H-hDPSCs组大鼠在目标象逗留时间百分比较假手术组小(P<0.05),但较HIBD组多(P<0.05),H-hDPSCs组较N-hDPSCs组多(P<0.05)。NhDPSCs组、H-hDPSCs组NeuN阳性细胞数较HIBD组多(P<0.05),但较假手术组少(P<0.05),N-hDPSCs组较H-hDPSCs组少(P<0.05)。N-hDPSCs组、H-hDPSCs组纹状体、胼胝体区MBP、NF200蛋白平均荧光强度高于HIBD组(P<0.05),但低于假手术组(P<0.05),H-hDPSCs组高于N-hDPSCs组(P<0.05)。结论HhDPSCs与N-hDPSCs移植可有效改善HIBD新生大鼠远期行为学,并促进HIBD新生大鼠内源性NSCs的增殖,减轻脑白质损伤进而促进HIBD神经修复,且H-hDPSCs移植的疗效优于N-hDPSCs。

关键词：低氧预处理人牙髓干细胞缺氧缺血性脑损伤脑白质损伤新生大鼠

DA5, A Novel GLP-1/GIP Dual Agonist, Improves Cognitive Behavior and Synaptic Plasticity in APP/PS1 Transgenic Mice

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DA5, A Novel GLP-1/GIP Dual Agonist, Improves Cognitive Beha...

探讨癌胚抗原(CEA)密度作为结直肠癌肺转移经皮消融治疗预后指标的预测意义

中国神经科学学会第十二届全国学术会议

作者： yue CAO Meng-Ming HU Ting wang Fang ZHAO yu BAI Jun ZHANG Mei-Na WU Jin-Shun QI Department of Neurobiology Shanxi Medical University

Objective Alzheimer’s disease（AD） is a progressive neurodegenerative disorder which is still irreversible up to now. The typical symptom of AD is memory loss, as well as other mental disorders. Recent evidences indicate that type 2 diabetes mellitus（T2 DM） is an important risk factor of AD;some efforts aimed at the treatment of T2 DM have been used as a novel therapeutic strategy for AD. In the present study, we reported for the first time the neuroprotective effects of Dual-Agonist-5（DA5）, a novel long-lasting GLP-1/GIP dual agonist developed to treat T2 DM, in APP/PS1 transgenic AD mice, and investigated its electrophysiological mechanisms. Method The nine-month-old APP/PS1 mice and wild-type（WT） mice were divided into the following four groups: WT+Saline, WT+DA5, APP/PS1+Saline, APP/PS1+DA5. APP/PS1 and WT mice were injected（i.p.） with DA5（10 nmol/kg） or the same volume saline（0.9%） once a day for 30 days prior to behavioral tests. The body weight, blood glucose of mice were measured before drug injection and every 7 days after injection until the end of all experiments. Results We found that DA5 administration improved short-term and long-term spatial learning and memory of 9-month-old AD mice in y-maze and morris water maze tests. The detrimental synaptic plasticity, i. e. in vivo hippocampal late-phase long-term potentiation（L-LTP）, in APP/PS1 transgenic mice was also partially reversed by the treatment with DA5. Conclusion The present study provides a new evidence for the neuroprotection of anti-diabetic drugs, suggesting that DA5, as a novel potential candidate agent, may be beneficial for the treatment of AD, especially those with T2 DM or hyperglycemia.

关键词： GLP-1/GIP dual agonist DA5 spatial learning and memory L-LTP APP/PS1 transgenic mice

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国际医学放射学杂志 2017年第2期 229-229页

作者： y.R.Huo D.Glenn W.Liauw M.Power J.Zhao D.L.morris 钟红霞 Hepatobiliary and Surgical Oncology Unit UNSW Department of SurgerySt George Hospital

摘要目的探讨经皮消融治疗的结直肠癌肺转移病人的癌胚抗原(CEA)密度及其他临床病理指标对判断预后的价值。方法 CEA密度计算方法为治疗前血清CEA水平绝对

关键词： CEA 消融治疗结直肠癌肺转移癌胚抗原密度经皮

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麻醉相关认知功能的动物行为学评估

国际麻醉学与复苏杂志 2014年第3期35卷 263-267页

作者：杨美华王超王国林天津医科大学总医院麻醉科天津市麻醉学研究所300052

背景目前，全麻是影响认知功能的重要潜在危险因素之一，多种行为学方法用于麻醉相关认知损伤的基础研究。目的探讨如何正确、合理选择用于评估认知功能的行为学方法的问题。内容就所检测的不同学习记忆类型和与学习记忆关联的脑功能区... 详细信息

背景目前，全麻是影响认知功能的重要潜在危险因素之一，多种行为学方法用于麻醉相关认知损伤的基础研究。目的探讨如何正确、合理选择用于评估认知功能的行为学方法的问题。内容就所检测的不同学习记忆类型和与学习记忆关联的脑功能区两个方面，以恐惧条件化、morris水迷宫、放射状迷宫、y迷宫等几种普遍应用的行为学方法为例来说明麻醉相关认知功能行为学方法的合理选择问题。趋向正确、合理地应用动物行为学方法，为进一步探讨麻醉相关的认知损伤机制及临床上如何避免或减少这种损伤提供理论依据。

关键词：认知行为学方法学习记忆类型脑功能区恐惧条件化迷宫麻醉

经鼻腔长期输送骨髓基质细胞改善大鼠缺血再灌注性脑损伤

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中国组织工程研究 2012年第27期16卷 5072-5075页

作者：王洋沈慧娟朱群娥王飞许卫珍俞千曾宪智嘉兴学院医学院医学院嘉兴学院机电学院机电工程中心嘉兴学院医学院医学实验中心浙江省武警总队医院病理科浙江省嘉兴市314000 嘉兴学院医学院解剖学教研室浙江省嘉兴市314001

背景:经鼻腔黏膜给药是一种可以克服血脑屏障、减少外周不良反应、效能高的脑内给药方式。目的:验证经鼻腔长期输送骨髓基质细胞治疗大鼠缺血再灌注性脑损伤的可行性。方法:贴壁培养法分离大鼠骨髓基质细胞。缺血再灌注脑损伤大鼠随机... 详细信息

背景:经鼻腔黏膜给药是一种可以克服血脑屏障、减少外周不良反应、效能高的脑内给药方式。目的:验证经鼻腔长期输送骨髓基质细胞治疗大鼠缺血再灌注性脑损伤的可行性。方法:贴壁培养法分离大鼠骨髓基质细胞。缺血再灌注脑损伤大鼠随机分成实验组和对照组。实验组经鼻腔滴入骨髓基质细胞,对照组同法给予磷酸盐缓冲液,隔天1次,共4周。每周进行1次行为学评价,最后1次行为学评价后进行脑病理学检测。结果与结论:与对照组比较,从第2周开始神经病学严重程度评分和morris水迷宫实验检测结果表明实验组行为学逐步改善(P<0.05,P<0.01)。与行为学改善相一致,缺血再灌注导致对照组CA1区海马细胞数量减少了66%,而实验组CA1区细胞丢失明显要少,只丢失了25%(P<0.01)。说明了经鼻腔长期输注骨髓基质细胞具有改善大鼠缺血再灌注脑损伤的作用。

关键词：脑损伤骨髓基质细胞鼻腔血脑屏障缺血再灌注干细胞

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神经生长因子对脑缺血大鼠学习与记忆的影响

中华神经外科疾病研究杂志 2012年第4期11卷 339-342页

作者：禄韶英王燕西安交通大学医学院第一附属医院普外科陕西西安710061 第四军医大学唐都医院疼痛生物医学研究所陕西西安710038

目的为了观察神经生长因子(NGF)对脑缺血大鼠学习与记忆的影响和海马内N-甲基-D-天门冬氨酸受体NR2A/B亚zhanghaopeng(NR2A/B)表达的变化。方法本研究将48只成年雄性SD大鼠分为正常组(n=12)、假手术组(n=12)、慢性脑缺血组(n=12)、NGF... 详细信息

目的为了观察神经生长因子(NGF)对脑缺血大鼠学习与记忆的影响和海马内N-甲基-D-天门冬氨酸受体NR2A/B亚zhanghaopeng(NR2A/B)表达的变化。方法本研究将48只成年雄性SD大鼠分为正常组(n=12)、假手术组(n=12)、慢性脑缺血组(n=12)、NGF处理组(n=12)。于造模后开始腹腔注射0.25 ug/100 g NGF,假手术组和慢性脑缺血组腹腔注射等量生理盐水,均1次/d,共21 d。用morris水迷宫和""y"迷宫作业测试其空间学习与记忆成绩,再采用Western blot方法分析海马的NR2A、NR2B的表达。结果①morris水迷宫测试:模型组大鼠寻找平台的潜伏期较假手术组明显延长,NGF处理组大鼠寻找平台的潜伏期较模型组明显缩短;"y"迷宫测试:模型组大鼠学会躲避电击的正确次数较假手术组明显减少,NGF处理组大鼠学会躲避电击的正确次数较模型组明显增多;②模型组NR2A表达水平较假手术组明显降低,而NR2B明显升高;NGF处理组海马内NR2A表达水平较模型组明显上调,而NR2B明显下调。结论神经生长因子可增强学习与记忆,海马内N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体表达变化可能是影响学习与记忆的机制之一。

关键词：神经生长因子慢性脑缺血学习与记忆 NR2A NR2B 海马

氢气对七氟醚麻醉诱发新生大鼠海马神经元凋亡的影响

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中华麻醉学杂志 2015年第6期35卷 687-689页

作者：丁玲敖吉莹汤晓红张麟临李楠王志芬王国林天津医科大学总医院麻醉科天津市麻醉学研究所 300052

目的评价氢气对七氟醚麻醉诱发新生大鼠海马神经元凋亡的影响.方法健康雄性SD大鼠48只,7日龄,体重12～20 g,采用随机数字表法,将其分为3组（n=16）：对照组（C组）、七氟醚麻醉组（S组）和氢气组（H组）.C组吸入30％氧气6h;S组吸入3... 详细信息

目的评价氢气对七氟醚麻醉诱发新生大鼠海马神经元凋亡的影响.方法健康雄性SD大鼠48只,7日龄,体重12～20 g,采用随机数字表法,将其分为3组（n=16）：对照组（C组）、七氟醚麻醉组（S组）和氢气组（H组）.C组吸入30％氧气6h;S组吸入3％七氟醚6h;H组吸入3％七氟醚和2％氢气6h.于出生后7d（吸入氧气、七氟醚或氢气结束后）,每组处死8只大鼠,取海马组织,采用Western blot法测定活化的caspase-3和髓磷脂碱性蛋白的表达水平.于出生后28 d时,取8只大鼠,行y迷宫实验及morris水迷宫实验测定认知功能,记录进入各臂总次数、自发交替次数、逃避潜伏期和原平台所在象限滞留时间.结果与C组比较,S组自发交替百分率降低,逃避潜伏期延长,原平台所在象限滞留时间缩短,海马组织活化的caspase-3表达上调,髓磷脂碱性蛋白表达下调（P＜0.05）;与S组比较,H组自发交替百分率升高,逃避潜伏期缩短,原平台所在象限滞留时间延长,海马组织活化的caspase-3表达下调,髓磷脂碱性蛋白表达上调（P＜0.05）;3组间进入各臂总次数比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论氢气可抑制七氟醚麻醉诱发新生大鼠海马神经元凋亡.

关键词：氢气麻醉药,吸入麻醉婴儿,新生细胞凋亡

七氟醚处理对老龄小鼠基底前脑胆碱能系统和认知功能的影响

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神经解剖学杂志 2016年第6期32卷 757-762页

作者：熊璐徐文庆王子高上海市金山区亭林医院麻醉科上海201505 复旦大学附属金山医院神经内科上海201508

目的:探讨七氟醚对基底前脑胆碱能系统和认知功能的影响。方法:老年C57小鼠吸入七氟醚建立全身麻醉动物模型,利用morris水迷宫检测认知功能,免疫荧光检测Meynert基底核中胆碱能神经元计数,Western Blot检测额叶皮层胆碱乙酰转移酶及高... 详细信息

目的:探讨七氟醚对基底前脑胆碱能系统和认知功能的影响。方法:老年C57小鼠吸入七氟醚建立全身麻醉动物模型,利用morris水迷宫检测认知功能,免疫荧光检测Meynert基底核中胆碱能神经元计数,Western Blot检测额叶皮层胆碱乙酰转移酶及高亲和力胆碱转运体的蛋白水平,ELISA测定额叶皮层胆碱乙酰转移酶的活性。结果:与对照组相比,七氟醚组小鼠平台潜伏期延长,平台穿越次数减少(2.1±0.4 vs 5.6±0.5,Pynert基底核胆碱能神经元计数减少(3748±248 vs 5942±315,P<0.05),额叶皮层胆碱乙酰转移酶及高亲和力胆碱转运体表达下降,伴有胆碱乙酰转移酶活性降低[(31.4±1.1)μmol/(g.h)vs(55.8±1.3)μmol/(g.h),P<0.05]。结论:七氟醚可损害老龄鼠基底前脑胆碱能系统并诱导认知功能损害。

关键词：七氟醚基底前脑胆碱能系统认知功能 morris水迷宫胆碱乙酰转移酶小鼠