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固脾消积饮对肝星状细胞共培养条件下HepG2细胞氨基酸代谢和能量代谢的影响

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中国中医药信息杂志 2023年第4期30卷 94-99页

作者：柳卓田雪飞谭小宁郜文辉翦慧颖李可心周琳张振曾普华湖南省中医药研究院湖南长沙412000 湖南中医药大学湖南长沙412006 湖南省中医药研究院附属医院湖南长沙412000

目的观察固脾消积饮对人肝星状细胞LX-2共培养条件下肝癌细胞HepG2氨基酸代谢和能量代谢的影响。方法建立HepG2细胞和LX-2细胞共培养体系,与单独培养的HepG2细胞同时设置对照组、空白血清组、中药血清组(固脾消积饮含药血清)和阳性药... 详细信息

目的观察固脾消积饮对人肝星状细胞LX-2共培养条件下肝癌细胞HepG2氨基酸代谢和能量代谢的影响。方法建立HepG2细胞和LX-2细胞共培养体系,与单独培养的HepG2细胞同时设置对照组、空白血清组、中药血清组(固脾消积饮含药血清)和阳性药组(顺铂)。干预24 h后,CCK8法检测细胞增殖活力,DAPI染色观察细胞状态,ELISA检测细胞上清液三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、丙酮酸和葡萄糖含量,试剂盒检测细胞丙二醛(MDA)含量和糖酵解速率,高效液相色谱法检测细胞上清液氨基酸含量,Western blot检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α表达。结果与同一培养体系对照组比较,10%、20%中药血清组及阳性药组单独培养和共培养HepG2细胞增殖活力降低,上清液TG、TC、葡萄糖含量减少,丙酮酸含量增加,细胞糖酵解速率降低,MDA含量增加,17种氨基酸含量减少(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,10%中药血清能升高单独培养和共培养HepG2细胞p-AMPKα/AMPKα比值。结论固脾消积饮能调节肝星状细胞共培养条件下HepG2细胞氨基酸代谢和能量代谢,其机制与激活p-AMPKα通路有关。

关键词：固脾消积饮 HepG2 LX-2 氨基酸代谢能量代谢

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腹泻高热大鼠模型的实验研究

湖南中医杂志 2019年第1期35卷 124-126页

作者：尹丽张序晴田雪飞李赛王志琪刘文锋周志华段幸湖南中医药大学湖南长沙410208

目的:探索运用中医"下法"结合腹腔注射大肠杆菌内毒素(lipopolysaccharides,LPS)复制腹泻高热大鼠模型的可行性。方法:以SD雄性成年大鼠为研究对象,分为灌胃0、1、3、5、7d组,采用序贯给药法,分别灌胃给予大黄芒硝水煎液0、1、3、5、7d... 详细信息

目的:探索运用中医"下法"结合腹腔注射大肠杆菌内毒素(lipopolysaccharides,LPS)复制腹泻高热大鼠模型的可行性。方法:以SD雄性成年大鼠为研究对象,分为灌胃0、1、3、5、7d组,采用序贯给药法,分别灌胃给予大黄芒硝水煎液0、1、3、5、7d,于末次灌胃后经腹腔注射给予LPS。观察并记录造模大鼠粪便硬度与体温变化情况,考察灌胃大黄芒硝所致的腹泻及天数对经LPS诱导大鼠体温的影响。结果:大鼠灌胃大黄芒硝水煎液后,整体状态变差,粪便硬度下降,粪便含水量增加。仅灌胃大黄芒硝对大鼠体温无明显影响。大鼠腹腔注射LPS后体温均明显升高。其中灌胃大黄芒硝5d的大鼠注射LPS后体温升高所需时间短,且峰值最高。结论:大鼠经灌胃大黄芒硝水煎液后再腹腔注射LPS可成功建立高热模型,大黄芒硝水煎液的灌胃天数对大鼠的发热潜伏期、发热持续时间和体温峰值均有影响。

关键词：腹泻发热模型 SD大鼠大黄芒硝水煎液实验研究

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经方“黄连”角药配伍特点及其临床运用初探

陕西中医 2021年第11期42卷 1631-1634页

作者：王勇力黄振吴若霞吴泳蓉朱文豪宁迪敏田雪飞湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208

目的:分析、总结经方中黄连“角药”的配伍特点与临床应用,并深入剖析以黄连为角药的类方鉴别,为现代临床用药谴方提供理论依据。方法:谨遵经旨,对经方中黄连“角药”的配伍特点与临床应用进行详尽梳理,并从独立成方之“角药”、作为方... 详细信息

目的:分析、总结经方中黄连“角药”的配伍特点与临床应用,并深入剖析以黄连为角药的类方鉴别,为现代临床用药谴方提供理论依据。方法:谨遵经旨,对经方中黄连“角药”的配伍特点与临床应用进行详尽梳理,并从独立成方之“角药”、作为方剂主要部分之“角药”以及类方鉴别三方面进行论述。结果:经方中独立成方之黄连“角药”两对、作为方剂主要部分之“角药”7对,黄连的角药配伍,寒热并用,表里同调,虚实相兼,使得其可用于下利、呕吐、肠鸣、烦躁、心下痞等多个方证。结论:经方中蕴含着丰富的黄连“角药”配伍知识,理解掌握经方中黄连“角药”的配伍特点与临床应用及其类方的准确运用,可扩大主治,减少药味,精准治疗。

关键词：黄连角药经方配伍特点寒热并用伤寒论

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白芥子豁痰治肿瘤的应用规律探析

湖南中医药大学学报 2019年第8期39卷 957-959页

作者：邓哲胡玉星田雪飞湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208

基于白芥子畅达三焦化皮里膜外之痰,探讨白芥子"豁痰"功效在肿瘤疾病中的应用规律。皮里膜外为三焦组成部分,白芥子辛温利气豁痰,可畅通三焦水道,消结散滞。内服治疗肿瘤可温通豁痰消结节,畅达三焦化胸水,寓补于消安五脏;外敷可透皮散... 详细信息

基于白芥子畅达三焦化皮里膜外之痰,探讨白芥子"豁痰"功效在肿瘤疾病中的应用规律。皮里膜外为三焦组成部分,白芥子辛温利气豁痰,可畅通三焦水道,消结散滞。内服治疗肿瘤可温通豁痰消结节,畅达三焦化胸水,寓补于消安五脏;外敷可透皮散肿毒。参透其理,可更深入掌握白芥子"豁痰"治肿瘤的应用规律。

关键词：白芥子豁痰肿瘤

基于网络药理学及分子对接探讨雷公藤治疗肝癌的作用机制

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云南中医学院学报 2021年第1期44卷 68-75,102页

作者：朱文豪周青童东昌张振郭垠梅宁迪敏黄振郑飘田雪飞湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007

目的运用网络药理学方法及分子对接技术对雷公藤治疗肝癌的主要活性成分及其潜在作用机制进行探讨。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选雷公藤主要活性成分及其预测靶点;在DrugBank、GeneCards、OMIM、TTD数据库中筛... 详细信息

目的运用网络药理学方法及分子对接技术对雷公藤治疗肝癌的主要活性成分及其潜在作用机制进行探讨。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选雷公藤主要活性成分及其预测靶点;在DrugBank、GeneCards、OMIM、TTD数据库中筛选肝癌相关靶点;通过R语言软件映射得到雷公藤治疗肝癌靶点,并绘制韦恩图;在STRING网站构建治疗靶点PPI网络图;应用Cytoscape软件构建"雷公藤-活性成分-靶点-肝癌"互作网络图;通过R语言软件对治疗靶点进行GO功能分析和KEGG通路富集分析;应用PubChem、RCSB PDB数据库,AutoDock、PyMOL软件对药物潜在活性成分与关键靶点进行分子对接。结果共筛选出活性成分51个和潜在治疗靶点120个,靶点主要涉及酰胺结合、肽结合、DNA结合转录因子结合等生物学过程,并主要富集于卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、乙型肝炎、流体剪切应力和动脉粥样硬化等信号通路中。分子对接验证显示对接得分大于-5kcal/mol占100%,即所有靶点与成分的结合活性较好。结论通过网络药理学方法及分子对接技术证实了雷公藤多成分、多靶点、多途径的作用特点,预测了雷公藤治疗肝癌的潜在作用机制,为后续进一步开发和应用提供理论依据。

关键词：肝癌雷公藤网络药理学分子对接作用机制

基于UPLC-Q-TOF-MS分析下瘀血汤活性成分及其抗肝癌作用机制网络药理学研究

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中国中医药信息杂志 2022年第8期29卷 9-17页

作者：邓哲欧阳昭广龙红萍唐玲朱文豪孟繁颖周思倩怀家轩田雪飞湖南中医药大学中西医结合学院湖南中医药大学方证转化湖南省重点实验室湖南长沙410208 广州医科大学附属口腔医院广东广州510182 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208

目的探究下瘀血汤的活性成分及其抗肝癌的作用机制。方法应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)分析鉴定下瘀血汤的活性成分,借助TCMSP、PubChem、SwissTargetPrediction、UniProt数据库收集活性成分对应靶点。通过Gen... 详细信息

目的探究下瘀血汤的活性成分及其抗肝癌的作用机制。方法应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)分析鉴定下瘀血汤的活性成分,借助TCMSP、PubChem、SwissTargetPrediction、UniProt数据库收集活性成分对应靶点。通过GeneCards、OMIM数据库筛选原发性肝癌的相关靶点,采用Cytoscape3.8.2构建成分-靶点-疾病网络。借助STRING数据库构建蛋白相互作用网络,运用Metascape数据库对靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。利用分子对接验证下瘀血汤主要活性成分与核心靶点的相互作用。采用CCK8法检测下瘀血汤含药血清对肝癌细胞HepG2和Huh-7增殖的影响,并通过RT-qPCR验证其对关键靶点的作用。结果鉴定下瘀血汤活性成分49个,其中山柰酚、儿茶素、苦杏仁苷、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚葡萄糖苷等是其抗肝癌潜在活性成分。预测得到其抗肝癌潜在靶点112个,关键靶点涉及CASP3、ESR1、PPARG、MYC等。GO功能及KEGG通路富集分析结果显示,下瘀血汤抗肝癌作用机制主要与PI3KAkt信号通路、炎症反应、激素水平调节、cGMP-PKG信号通路调控的抗血管生成、紧密连接调控的肠屏障、肿瘤细胞的缺氧、应激、激酶结合等途径相关。分子对接结果显示,下瘀血汤中大黄酚葡萄糖苷和儿茶素二聚体等活性成分与核心靶点具有较好的亲和能力。细胞实验证实,下瘀血汤含药血清浓度为20%时可有效抑制肝癌细胞增殖,并可降低核心靶点CASP3、ESR1、PPARG、MYC表达。结论下瘀血汤中多种成分具有抗肝癌活性,通过CASP3、ESR1、PPARG、MYC等多靶点及多途径发挥抗肝癌作用。

关键词：下瘀血汤活性成分肝癌网络药理学分子对接

虎杖-乳香的有效组分配伍对慢性非细菌性前列腺炎NOD小鼠的药效学评价研究

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湖南中医药大学学报 2019年第11期39卷 1310-1314页

作者：高瑞松刘慧英田雪飞滕永杰贺勇凯王帅熊伟林群芳周青湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学研究生院湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208

目的探讨大黄素、虎杖苷、乳香挥发油配伍对非肥胖性糖尿(non-obese diabetic,NOD)小鼠慢性非细菌性前列腺炎发挥治疗作用的最佳配比。方法正常雄性NOD小鼠220只,按照L8(27)正交表随机分为8组,另设立阳性对照组、模型组、空白对照组,共1... 详细信息

目的探讨大黄素、虎杖苷、乳香挥发油配伍对非肥胖性糖尿(non-obese diabetic,NOD)小鼠慢性非细菌性前列腺炎发挥治疗作用的最佳配比。方法正常雄性NOD小鼠220只,按照L8(27)正交表随机分为8组,另设立阳性对照组、模型组、空白对照组,共11组,每组20只。按组别给予相应干预,酶联免疫吸附法(enzyme-labeled immunosorbent assay,ELISA)检测NOD小鼠前列腺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)含量的变化,并结合苏木素-伊红(haematoxylin-eosin,HE)染色法评价前列腺组织病理改变程度,明确大黄素、虎杖苷、乳香挥发油的最佳配比与量效关系。结果正交实验极差结果显示各因素影响强弱依次为虎杖苷>大黄素>乳香挥发油,方差分析结果发现虎杖苷、大黄素、乳香挥发油对疗效的影响具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。大黄素、虎杖苷、乳香挥发油的最佳配比为大黄素0.1 g/kg、虎杖苷0.4 g/kg、乳香挥发油0.4 g/kg。结论大黄素、虎杖苷、乳香挥发油的最优比例配伍具有减轻慢性非细菌性前列腺炎动物模型炎症的疗效,乳香挥发油与虎杖苷之间具有协同作用。

关键词：大黄素虎杖苷乳香挥发油前列腺炎

中西医结合学术型研究生开设医学基本实验技能训练课程的探索与实践

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中医教育 2019年第5期38卷 55-58页

作者：张韫玉黄姗姗刘慧萍王宏宝李玲张国民田雪飞何清湖湖南中医药大学

中西医结合研究生培养作为医学研究生培养的重要组成部分,在医学教育研究领域占有重要地位。我校基于中西医结合研究生人才培养要求和课程体系特点,针对中西医结合学术型研究生开设医学基本实验技能训练课程。从课程内容设置、课程模式... 详细信息

中西医结合研究生培养作为医学研究生培养的重要组成部分,在医学教育研究领域占有重要地位。我校基于中西医结合研究生人才培养要求和课程体系特点,针对中西医结合学术型研究生开设医学基本实验技能训练课程。从课程内容设置、课程模式到考核方法、课程实践效果及课程评价进行了全新探索实践,以期提高研究生科研基本理论素养与科研能力,加强科研道德教育,探索出合理的中西医结合学术型研究生培养模式,切实提高中西医结合人才培养质量。

关键词：中西医结合研究生培养医学基本实验技能课程科研素养

河北省小麦生产体系中化肥投入的氮排放和碳足迹分析

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河南科学 2024年第6期42卷 789-796页

作者：范燕赵雪飞么田吴志会陈胜萍刘晓光唐山市农业科学研究院河北唐山063001

分析河北省小麦生产的变化特征,并利用生命周期评价法(LCA)对化肥投入所产生氮排放和碳足迹进行定量分析,以期助力农业减排,为小麦产业绿色发展提供决策依据.结果表明:2003—2021年河北省小麦总产量逐年递增,播种面积基本稳定在2.3×10^... 详细信息

分析河北省小麦生产的变化特征,并利用生命周期评价法(LCA)对化肥投入所产生氮排放和碳足迹进行定量分析,以期助力农业减排,为小麦产业绿色发展提供决策依据.结果表明:2003—2021年河北省小麦总产量逐年递增,播种面积基本稳定在2.3×10^(6)hm^(2)左右,单产增产显著;2010年之前播种面积增加对总产的贡献大,2011年后单产提升对总产贡献大;18年间小麦生产中纯氮肥和复混肥施用最多,分别占总量的39.4%和58.4%;氮肥偏生产力在19.3~26.4 kg/kg之间,呈上升走向;对环境产生的活性氮排放主要以NH3挥发为主,占总量的63.5%;2004—2021年化肥投入对环境所产生的总碳排放量下降34.5%,单位面积化肥投入所产生的碳排放下降28.2%;化肥生产碳排放>化肥施用碳排放;对化肥投入碳足迹影响的主要因素是纯氮肥用量.

关键词：小麦化肥投入氮排放碳足迹