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中华实验眼科杂志 2016年第4期34卷 317-323页

作者：徐文芹尹婕王雨生第四军医大学西京医院眼科全军眼科研究所西安710032

背景研究发现，Toll样受体（TLRs）在视网膜新生血管的形成中发挥重要作用，但其作用机制尚不清楚。目的探讨TLR4对小鼠氧诱导视网膜病变（OIR）中新生血管生成的作用及其机制。方法将18只7日龄新生C57BL／6J小鼠以随机数字表法按小鼠... 详细信息

背景研究发现，Toll样受体（TLRs）在视网膜新生血管的形成中发挥重要作用，但其作用机制尚不清楚。目的探讨TLR4对小鼠氧诱导视网膜病变（OIR）中新生血管生成的作用及其机制。方法将18只7日龄新生C57BL／6J小鼠以随机数字表法按小鼠窝别分为常氧组、OIR组及0IR＋脂多糖（LPS）-EB组，常氧组小鼠在正常氧环境中饲养，OIR组及OIR＋LPS—EB组小鼠于生后第7天（P7）与母鼠置于体积分数（75±2）％高氧氧箱中饲养5d以诱导OIR模型，于P12在正常氧环境中饲养，OIR＋LPS-EB组P12小鼠腹腔内注射LPS-EB，剂量为1mg／kg，OIR组同法注射PBS。各组摘取P17小鼠眼球于质量分数4％多聚甲醛中固定并行视网膜铺片和Lectin染色，计算视网膜无血管区和新生血管区面积占全视网膜的百分比。各组制备P17小鼠眼后节组织冰冻切片并行免疫荧光检测，计数小鼠5mm视网膜全长活化小胶质细胞数目；采用CDllb和TLR4免疫荧光双标记法检测各组小鼠视网膜小胶质细胞中CDllb、TLR4的表达及其分泌血管内皮生长因子（VEGF）、白细胞介素1p（IL-1β）和肿瘤坏死因子-a（TNF-a）的水平。结果常氧组P17小鼠视网膜血管分布和形态正常，OIR组和OIR＋LPS—EB组P17小鼠视网膜中央均出现无血管区和新生血管簇，OIR＋LPS-EB组小鼠视网膜无血管区面积比为（18．47±1．32）％，新生血管面积比为（3．29±0．85）％，分别大于OIR组的（15．78±1．44）％和（1．77±0．19）％，差异均有统计学意义（t=3．36，P=0．01；t=4．22，P=0．00）。免疫荧光结果显示，常氧组P17小鼠视网膜中活化小胶质细胞数量极少，OIR组和OIR＋LPS—EB组P17小鼠视网膜中活化小胶质细胞荧光强度增强，活化小胶质细胞数量增加，其中OIR＋LPS-EB组小鼠视网膜中小胶质细胞数明显多于OIR组，差异有统计学意义[（95．50±4．77）／5mm与（74．83±4．17）／5mm，t=8．00，P〈0．01]。常氧组小鼠视网膜中TLR4阳性小胶质细胞数量极少，OIR组和OIR＋LPS—EB组小鼠视网膜中TLR4荧光增强，TLR4阳性小胶质细胞数量明显增加，OIR＋LPS—EB组小鼠视网膜中TLR4阳性小胶质细胞数目明显多于OIR组，差异有统计学意义[（49．50±6．38）／5mm与（28．17±6．24）／5mm，t=5．86，P〈0．01）]。常氧组P17小鼠视网膜中CDllb和VEGF／IL-1β／TNF-a共表达的小胶质细胞数量分别为（1．17±0．75）／5mm、0和0，而OIR＋LPS—EB组小鼠视网膜中共表达CDllb和VEGF／IL·1β／TNF—d的小胶质细胞数量多于OIR组，差异有统计学意义[（44．50±8．78）／5mm与（28．50±5．61）／5mm，F=44．07，P〈0．01；（24．10±6．49）／5mm与（16．00±3．46）／5nlm，F=11．31，P〈0．01；（33．83±14．82）／5mm与（23．00±2．83）／5mm，t=19．92，P〈0．01]。结论TLR4可促进OIR小鼠视网膜新生血管的生成，其作用机制可能与TLR4激活视网膜小胶质细胞中相关的下游信号通路，促进血管生长因子及炎性因子的释放有关。

关键词： Toll样受体4 视网膜新生血管血管生成缺血/病理神经胶质细胞/代谢动物模型近交系C57BL小鼠炎性介质/代谢信号转导

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大模数矩形花键冷挤压成形质量分析

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兵器材料科学与工程 2015年第4期38卷 73-75页

作者：孙英达徐文琴浙江工业职业技术学院浙江绍兴312000

针对大模数矩形花键冷挤压成形质量差的问题,对其进行成形工艺和缺陷分析,并采用有限元数值模拟的方法,探寻坯料直径、坯料初始倒角和凹模入模角对花键成形质量产生的影响。分析结果显示:坯料直径增加,成形质量显著提高;坯料初始倒角增... 详细信息

针对大模数矩形花键冷挤压成形质量差的问题,对其进行成形工艺和缺陷分析,并采用有限元数值模拟的方法,探寻坯料直径、坯料初始倒角和凹模入模角对花键成形质量产生的影响。分析结果显示:坯料直径增加,成形质量显著提高;坯料初始倒角增加,成形质量降低;入模角增加,成形质量有所提高,但容易造成入模口处出现堆积的缺陷。工艺实验表明,采用优化工艺参数组合成功地解决了大模数矩形花键冷挤压成形齿顶塌角区大的问题。

关键词：花键大模数冷挤压,质量分析

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正确认识多焦点人工晶状体植入术后的神经适应

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中华眼科杂志 2021年第1期57卷 6-10页

作者：李朝辉徐文芹叶子解放军总医院第一医学中心眼科北京100853

多焦点人工晶状体(MIOL)可以重建人眼全程视力、恢复双眼立体视觉、提升拟调节力并在一定范围校正角膜规则散光,完美地契合了当代人白内障摘除手术后的视觉需求。然而,MIOL亦有缺点,即使在严格控制适应证的条件下,也会出现对比敏感度下... 详细信息

多焦点人工晶状体(MIOL)可以重建人眼全程视力、恢复双眼立体视觉、提升拟调节力并在一定范围校正角膜规则散光,完美地契合了当代人白内障摘除手术后的视觉需求。然而,MIOL亦有缺点,即使在严格控制适应证的条件下,也会出现对比敏感度下降、夜间眩光和光晕等视觉异常感受,部分视觉异常感受能够自发缓解,在此过程中神经适应发挥着重要的作用。本文将阐述神经适应的概念、机制、中枢定位、神经适应的训练、MIOL植入的术前评估和术后视觉异常的相关处理,主要阐述神经适应在MIOL植入术后的重要作用,为正确认识MIOL植入术后并发症提供一定的理论依据。

关键词：多焦点人工晶状体白内障摘除术视敏度适应,生理学

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肝细胞癌中促癌miRNA调控网络分析与验证

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南方医科大学学报 2022年第1期42卷 45-54页

作者：叶静静徐文琴陈天兵皖南医学院弋矶山医院中心实验室安徽芜湖241001 皖南医学院重大疾病非编码RNA转化研究安徽普通高校重点实验室安徽芜湖241001

目的构建肝细胞癌中生存相关的促癌miRNA与其靶基因的调控网络并对关键miRNA-靶基因进行实验验证。方法利用OncomiR和Oncolnc获取肝癌中生存相关的miRNA,并进行表达分析和生存分析;利用miRNet预测miRNA的靶基因,通过GEPIA2、Ualcan分别... 详细信息

目的构建肝细胞癌中生存相关的促癌miRNA与其靶基因的调控网络并对关键miRNA-靶基因进行实验验证。方法利用OncomiR和Oncolnc获取肝癌中生存相关的miRNA,并进行表达分析和生存分析;利用miRNet预测miRNA的靶基因,通过GEPIA2、Ualcan分别对靶基因进行生存和表达分析,通过Starbase进行miRNA-靶基因共表达分析,利用Cytoscape软件构建miRNA-靶基因网络,通过Enrichr进行靶基因富集分析,利用String数据库进行蛋白互作网络构建。将NC,hsa-miR-1226-3p的mimic或inhibitor,hsa-miR-221-5p的mimic或inhibitor分别转染HepG2细胞,利用CCK8检测转染后细胞活力的变化情况,另取转染后48 h样品利用Q-PCR检测靶基因表达情况;将NC,hsa-miR-221-5p的mimic或inhibitor分别转染HepG2细胞,48 h后用Werstern blot检测靶基因蛋白表达情况;将NC+p-GCDH-WT质粒,NC+p-GCDH-MUT质粒,hsa-miR-221-5p mimic+pGCDH-WT质粒,hsa-miR-221-5p mimic+p-GCDH-MUT质粒分别转染HepG2细胞,48 h后利用多功能酶标仪检测荧光素酶活性;将NC,hsa-miR-221-5p mimic,pEGFP N1-GCDH质粒,hsa-miR-221-5p mimic+pEGFP N1-GCDH质粒分别转染HepG2细胞,利用CCK8检测转染后细胞活力的变化情况,transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果从OncomiR和Oncolnc数据库中分别得到223个(P<0.05)和146个(P<0.05)在肝癌中与生存相关的miRNA,两者交集为131个;结合表达分析和生存分析的结果共鉴定出48个促癌miRNA;miRnet共预测出10 278个靶基因,通过生存和表达分析符合预期的为44个,miRNAmRNA共表达分析后的结果显示27个靶基因符合预期。通过Cytoscape软件构建的miRNA-靶基因网络包含了25个促癌miRNA和27个抑癌基因。富集分析结果显示靶基因集中作用于脂肪酸代谢通路。验证实验显示,转染hsa-miR-1226-3p的mimic和inhibitor,hsa-miR-221-5p的mimic和inhibitor后,其对应的靶基因mRNA或蛋白水平均显著改变(P<0.05);hsa-miR-221-5p mimic和p-GCDH-WT质粒共转可显著降低其荧光素酶的活性(P<0.05);pEGFP N1-GCDH质粒和hsa-miR-221-5p mimic共转可显著恢复其对细胞活力,以及细胞迁移、侵袭能力的影响(P<0.05)。结论通过综合分析鉴定了肝癌中的促癌miRNA并构建了其调控网络;脂肪酸代谢可能是肝细胞癌中促癌miRNA发挥作用的重要的靶标信号通路之一。hsa-miR-221-5p/GCDH轴是肝癌进展的重要分子机制。

关键词：肝癌促癌miRNA 调控网络生信分析

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