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Mass spectrometry imaging and single-cell transcriptional profiling reveal the tissue-specific regulation of bioactive ingredient biosynthesis in Taxus leaves

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Plant Communications 2023年第5期4卷 29-45页

作者： xiaori zhan Tian Qiu Hongshan zhang Kailin Hou Xueshuang Liang Cheng Chen Zhijing Wang Qicong Wu Xiaojia Wang Xiao-lin Li Mingshuang Wang Shangguo Feng Houqing Zeng Chunna Yu Huizhong Wang Chenjia Shen College of Life and Environmental Sciences Hangzhou Normal UniversityHangzhou 311121China Zhejiang Provincial Key Laboratory for Genetic Improvement and Quality Control of Medicinal Plants Hangzhou Normal UniversityHangzhou 311121China Kharkiv Institute Hangzhou Normal UniversityHangzhou 311121China College of Pharmacy Hangzhou Normal UniversityHangzhou 311121China State Key Laboratory Breeding Base of Dao-di Herbs National Resource Center for Chinese Materia MedicaChina Academy of Chinese Medical SciencesBeijing 100700China

Taxus leaves provide the raw industrial materials for taxol,a natural antineoplastic drug widely used in the treatment of various ***,the precise distribution,biosynthesis,and transcriptional regulation of taxoids and other active components in Taxus leaves remain ***-assisted laser desorption/ionization–mass spectrometry imaging analysis was used to visualize various secondary metabolites in leaf sections of Taxus mairei,confirming the tissue-specific accumulation of different active ***-cell sequencing was used to produce expression profiles of 8846 cells,with a median of 2352 genes per *** on a series of cluster-specific markers,cells were grouped into 15 clusters,suggesting a high degree of cell heterogeneity in *** *** data were used to create the first Taxus leaf metabolic single-cell atlas and to reveal spatial and temporal expression patterns of several secondary metabolic *** to the cell-type annotation,most taxol biosynthesis genes are expressed mainly in leaf mesophyll cells;phenolic acid and flavonoid biosynthesis genes are highly expressed in leaf epidermal cells(including the stomatal complex and guard cells);and terpenoid and steroid biosynthesis genes are expressed specifically in leaf mesophyll cells.A number of novel and cell-specific transcription factors involved in secondary metabolite biosynthesis were identified,including MYB17,WRKY12,WRKY31,ERF13,GT_2,and *** research establishes the transcriptional landscape of major cell types in *** leaves at a single-cell resolution and provides valuable resources for studying the basic principles of cell-type-specific regulation of secondary metabolism.

关键词： scRNA-seq taxol biosynthesis Taxus mairei secondary metabolism transcription regulation

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小建中汤及其拆方对芍药苷提取率的影响研究

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世界科学技术-中医药现代化 2013年第6期15卷 1338-1342页

作者：王瑞展晓日刘厚世山西中医学院中药学院太原030024 杭州师范大学生物医药与健康中心杭州310012 中国中医科学院中药研究所北京100700

目的:研究小建中汤及其拆方对芍药苷含量的影响。方法:采用Diamonsil RP-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长230 nm。结果:小建中汤拆方前后芍药苷的含量有明显变化,其中去甘草组、去桂枝组... 详细信息

目的:研究小建中汤及其拆方对芍药苷含量的影响。方法:采用Diamonsil RP-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长230 nm。结果:小建中汤拆方前后芍药苷的含量有明显变化,其中去甘草组、去桂枝组、去饴糖组与全方组比较均有显著性差异(P0.05)。结论:甘草和桂枝有助于白芍中芍药苷的溶出;大枣、生姜对白芍中芍药苷的溶出影响不大;饴糖可能会以小团块形式包裹芍药苷,使实验中芍药苷的萃取效率降低。

关键词：小建中汤拆方芍药苷含量测定高效液相色谱法

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中药复方对非肥胖型多囊卵巢综合征患者性激素的影响

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中华中医药学刊 2015年第2期33卷 404-406页

作者：孙忻丁彩飞展晓日杨欣侯丽辉浙江省中西医结合医院浙江杭州310003 杭州师范大学浙江杭州310036 黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150040

目的:观察补肾调肝中药复方对非肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)患者性激素的影响。方法:采用前瞻性单盲随机对照设计,选择肾虚肝郁型非肥胖型PCOS(BMI<25)患者60例,随机分为治疗组30例,采用毓麟珠和柴胡舒肝散治疗3个月,每日1剂,早晚分服;... 详细信息

目的:观察补肾调肝中药复方对非肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)患者性激素的影响。方法:采用前瞻性单盲随机对照设计,选择肾虚肝郁型非肥胖型PCOS(BMI<25)患者60例,随机分为治疗组30例,采用毓麟珠和柴胡舒肝散治疗3个月,每日1剂,早晚分服;对照组30例,选用二甲双胍片(格华止):1000 mg,每日2次,早晚随餐口服。对治疗前后性激素水平、月经周期,排卵率,妊娠率进行对比观察。结果:1.治疗3月后,两组患者LH/FSH较前水平均有降低,以治疗组降低明显,P<0.05;2.治疗3月后,治疗组LH较前有明显降低,P<0.05;对照组LH较前有降低,但无统计学差异;3.治疗3月后,两组月经周期、排卵率及妊娠率均有改善,治疗组疗效优于对照组,P<0.05。结论:补肾调肝中药复方以及二甲双胍片均能改善非肥胖型多囊卵巢综合征患者月经周期,提高排卵率及妊娠率,可能是通过降低LH及LH/FSH起作用。

关键词：非肥胖型多囊卵巢综合征肾虚肝郁毓麟珠柴胡舒肝散

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芍药苷在白芍单煎剂和桂枝汤中含量变化的研究

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山西中医学院学报 2011年第3期12卷 23-25页

作者：王瑞展晓日王皎曾昭武山西中医学院中药系山西太原030024 杭州师范大学生物医药与健康中心浙江杭州310012

目的:比较芍药苷含量在白芍单煎剂和桂枝汤中的变化,探讨桂枝汤配伍的合理性。方法:采用薄层扫描法测定白芍药材及桂枝汤中芍药苷的含量,展开剂为三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶氨试液(8∶1∶4∶1),检测波长575 nm,参比波长700 nm。结果:... 详细信息

目的:比较芍药苷含量在白芍单煎剂和桂枝汤中的变化,探讨桂枝汤配伍的合理性。方法:采用薄层扫描法测定白芍药材及桂枝汤中芍药苷的含量,展开剂为三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶氨试液(8∶1∶4∶1),检测波长575 nm,参比波长700 nm。结果:芍药苷在1.93μg^19.3μg范围内线性良好(r=0.999 8),白芍单煎液和复方煎液的方法回收率分别为95.7%和96.3%,单煎液中芍药苷的含量明显低于复方煎液(P<0.01)。结论:白芍在桂枝汤中配伍可以增加有效成分芍药苷的煎出量。

关键词：桂枝汤白芍芍药苷含量测定薄层扫描法

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乳块消片生产过程中醇提液快速质量评价方法研究

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世界科学技术-中医药现代化 2008年第5期10卷 130-133页

作者：展晓日史新元乔延江周海燕北京中医药大学中药信息工程研究中心北京100102 北京中医药大学药厂北京100029

目的:利用近红外光谱法建立乳块消片生产过程醇提液中总氮的快速定量方法。方法:利用传统的凯氏定氮法测定醇提液中总氮的含量。同时获取其近红外光谱,以模型评价性能参数为指标,优选最佳建模波段和光谱预处理方法,建立总氮含量与NIR光... 详细信息

目的:利用近红外光谱法建立乳块消片生产过程醇提液中总氮的快速定量方法。方法:利用传统的凯氏定氮法测定醇提液中总氮的含量。同时获取其近红外光谱,以模型评价性能参数为指标,优选最佳建模波段和光谱预处理方法,建立总氮含量与NIR光谱数据间的校正模型,对待测样品进行总氮含量预测,实现乳块消生产过程醇提液的快速质量评价。结果:采用PLS方法建立的校正模型,醇提液中总氮含量在0.13～1.94mg·mL^(-1)范围内,相关系数为0.9707,校正误差均方根(RMSEC)为0.109,预测误差均方根(RMSEP)为0.108。结论:采用信息技术对近红外光谱数据进行处理建立模型,可用于中药制剂生产过程快速质量评价。

关键词：近红外光谱乳块消偏最小二乘

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镉胁迫对延胡索生理及生物碱积累的影响

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浙江农业科学 2022年第7期63卷 1591-1595页

作者：展晓日吴琦聪黄洁芳沈晨佳王慧中杭州师范大学生命与环境科学学院浙江省药用植物种质改良与质量控制技术重点实验室浙江杭州310036

研究不同浓度镉(0、100、200、300μmol·L^(-1))胁迫对延胡索(Corydalis yanhusuo)生理及活性成分含量的影响。研究表明,在不同浓度镉胁迫下,叶绿素含量受到抑制,而可溶性蛋白和丙二醛(MDA)含量显著上升,说明延胡索是镉胁迫敏感植物。... 详细信息

研究不同浓度镉(0、100、200、300μmol·L^(-1))胁迫对延胡索(Corydalis yanhusuo)生理及活性成分含量的影响。研究表明,在不同浓度镉胁迫下,叶绿素含量受到抑制,而可溶性蛋白和丙二醛(MDA)含量显著上升,说明延胡索是镉胁迫敏感植物。在镉胁迫下,其中3种主要的抗氧化酶指标均表现出显著变化,说明延胡索的次生代谢系统受到镉胁迫的严重破坏。过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性在不同浓度镉胁迫处理下变化较小,说明CAT和SOD活性对镉浓度不敏感。而过氧化物酶(POD)活性在低浓度镉处理下上升较快,但其在高浓度镉胁迫下逐渐下降,说明高浓度镉破坏了POD活性,降低了植株的毒素分解能力。本研究进一步测定了原阿片碱、小蘖碱、延胡索乙素和脱氢紫堇碱等4种重要的延胡索生物碱在镉胁迫处理下的变化,评价重金属镉污染对延胡索品质的影响。结果显示,上述4种生物碱在镉胁迫下的含量均显著下降,说明镉胁迫破坏了延胡索的质量,对其品质造成严重影响。其中,原阿片碱的生物合成对不同程度的镉污染不敏感,而小蘖碱含量受镉胁迫的影响最大。本研究结果说明,重金属镉严重影响延胡索的各项生理指标,降低了药材的品质,在延胡索栽培过程中须避开重金属污染的土地。

关键词：延胡索镉胁迫生物碱抗氧化酶生理指标

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榄香烯乳剂游离药物的分离与UPLC测定包封率

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中药新药与临床药理 2010年第3期21卷 304-307页

作者：曾昭武周广林展晓日刘珺应龙彬王安明谢恬杭州师范大学生物医药与健康研究中心杭州310012

目的榄香烯乳剂游离药物分离方法的比较与超高效液相色谱法(UPLC)测定榄香烯乳剂的包封率。方法采用离心法、凝胶柱色谱法和液面法分离榄香烯乳剂的游离与包封药物,采用超高效液相色谱法检测榄香烯乳剂的包封率。结果榄香烯在3.94～27.5... 详细信息

目的榄香烯乳剂游离药物分离方法的比较与超高效液相色谱法(UPLC)测定榄香烯乳剂的包封率。方法采用离心法、凝胶柱色谱法和液面法分离榄香烯乳剂的游离与包封药物,采用超高效液相色谱法检测榄香烯乳剂的包封率。结果榄香烯在3.94～27.58μg·mL-1浓度范围内线性关系良好。榄香烯注射乳的新配方平均包封率为(96.3±0.8)%、老配方包封率为(98.1±0.8)%,两者比较,P<0.05,统计学上有显著性差异。结论分离榄香烯乳剂的游离与包封药物的方法中液面法较好,超高效液相色谱法可用于检测榄香烯乳剂的包封率,简单、快速且准确。新老配方的榄香烯乳剂的包封率都很好。

关键词：榄香烯乳剂超高效液相色谱法

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苦蘵化学成分及药理作用研究进展

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杭州师范大学学报（自然科学版） 2016年第6期15卷 613-616页

作者：方雷展晓日俞春娜薛洁王慧中杭州师范大学生命与环境科学学院浙江省药用植物种质改良与质量控制技术重点实验室浙江杭州310036

苦蘵是中国民间药用植物,主要化学成分为甾体类、甾醇类、有机酸类、多糖类、黄酮类化合物等.现代药理研究证明其具有抗癌、免疫调节、抗炎、抗氧化、抗菌等活性.文章就国内外近年来对苦蘵的化学成分、药理作用的研究进展进行综述,为其... 详细信息

苦蘵是中国民间药用植物,主要化学成分为甾体类、甾醇类、有机酸类、多糖类、黄酮类化合物等.现代药理研究证明其具有抗癌、免疫调节、抗炎、抗氧化、抗菌等活性.文章就国内外近年来对苦蘵的化学成分、药理作用的研究进展进行综述,为其进一步的深入研究与开发利用提供参考.

关键词：苦蘵甾体类化合物抗肿瘤

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UPLC-MS/MS法测定苦蘵宿萼中physalin H和physalin D的含量

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杭州师范大学学报（自然科学版） 2021年第4期20卷 360-363,448页

作者：王灵艳戴亚平薛洁俞春娜王慧中展晓日杭州师范大学生命与环境科学学院浙江杭州311121 浙江省药用植物种质改良与质量控制技术重点实验室浙江杭州311121

建立了同时测定苦蘵中2种酸浆苦味素类化合物含量的方法.应用超高效液相色谱(UPLC)与Qtrap质谱(MS)联用同时测定苦蘵中酸浆苦味素H(physalin H)和酸浆苦味素D(physalin D)2个成分的含量.采用Waters Acquity BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7... 详细信息

建立了同时测定苦蘵中2种酸浆苦味素类化合物含量的方法.应用超高效液相色谱(UPLC)与Qtrap质谱(MS)联用同时测定苦蘵中酸浆苦味素H(physalin H)和酸浆苦味素D(physalin D)2个成分的含量.采用Waters Acquity BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以水(0.1%甲酸)-乙腈(0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,柱温35℃,流速0.3 mL·min^(-1),使用ESI+离子源,多反应监测(MRM)模式扫描,对physalin H和physalin D进行定量.结果表明physalin H和physalin D在5~10000 ng·mL^(-1)范围内具有良好的线性关系,相关系数(r)分别为0.9997和0.9995;平均加样回收率(n=5)分别为71.1%和71.0%,RSD值分别为1.36%和1.47%.该方法准确可靠,可用于苦蘵药材中physalin H和physalin D的含量测定,为有效控制苦蘵药材的质量奠定了基础.

关键词：苦蘵酸浆苦味素液质联用含量测定

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网络药理学指导下的中药有效成分发现策略

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世界科学技术-中医药现代化 2014年第1期16卷 27-31页

作者：宋阔魁毕天展晓日李志勇王俊文何巍童元元李彦文中央民族大学中国少数民族传统医学研究院北京 100081 中国中医科学院中药资源中心北京 100700 中国中医科学院中医药信息研究所北京 100700

网络药理学是建立在疾病-基因-药物的多层次网络基础上,用于从整体上预测药物靶点、提高药物发现效率的新兴学科,其研究理念同中药发挥整体疗效的观点十分相似,使得越来越多的医药研究人员开始寻找中药与网络药理学的结合点,并出现了一... 详细信息

网络药理学是建立在疾病-基因-药物的多层次网络基础上,用于从整体上预测药物靶点、提高药物发现效率的新兴学科,其研究理念同中药发挥整体疗效的观点十分相似,使得越来越多的医药研究人员开始寻找中药与网络药理学的结合点,并出现了一系列研究疾病相关基因、预测靶点信息及中药活性成分的方法。本文对网络药理学研究的主要工具与数据库及其应用进行归类总结与介绍,并在此基础上,提出了应用网络药理学进行中药有效成分靶向分离的科学策略,以期提高中药有效成分发现的效率与速率。

关键词：网络药理学中药成分靶向分离新药发现

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