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Developing an efficient and visible prime editing system to restore tobacco 8-hydroxy-copalyl diphosphate gene for labdane diterpene Z-abienol biosynthesis

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Science China(life Sciences) 2023年第12期66卷 2910-2921页

作者： Jianduo Zhang Lu Zhang Chengwei Zhang Yongxing Yang Huayin liu Lu li Shengxue Zhang xianggan li Xinxiang liu Ya liu Jin Wang Guangyu Yang Qingyou Xia Weiguang Wang Jinxiao Yang Yunnan Key Laboratory of Tobacco Yunnan Academy of Tobacco ScienceKunming 650231China Beijing Key Laboratory of Maize DNA Fingerprinting and Molecular Breeding Beijing Academy of Agriculture&Forestry SciencesBeijing 100089China Key Laboratory of Natural Products Synthetic Biology of Ethnic Medicinal Endophytes State Ethnic Affairs CommissionYunnan Minzu UniversityKunming 650031China Cropedit Biotechnology Co.Ltd. Beijing 102206China Biological Science Research Center Southwest UniversityChongqing 400716China

Prime editing(PE)is a versatile CRISPR-Cas based precise genome-editing platform widely used to introduce a range of possible base conversions in various ***,no PE systems have been shown to induce heritable mutations in tobacco,nor in any other *** this study,we generated an efficient PE system in tobacco that not only introduced heritable mutations,but also enabled anthocyanin-based reporter selection of transgene-free T_(1) *** system was used to confer Zabienol biosynthesis in the allotetraploid tobacco cultivar HHDJY by restoring a G>T conversion in the NtCPS2 *** levels of Z-abienol were detected in the leaves of homozygous T_(1) plants at two weeks after *** study describes an advance in PE systems and expands genome-editing toolbox in tobacco,even in dicots,for use in basic research and molecular *** restoring biosynthesis of Z-abienol in tobacco might provide an efficient way to obtain Z-abienol in plants.

关键词： prime editing Z-abienol biosynthesis visible marker CRISPR Cas9 tobacco

CRISPR/Cas9基因组定点编辑中脱靶现象的研究进展

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植物学报 2018年第4期53卷 528-541页

作者：王影李相敢邱丽娟中国农业科学院作物科学研究所北京100081 先正达生物科技(中国)有限公司北京102206

近年来,CRISPR定点编辑技术发展迅猛,在动物、植物和微生物中均得到广泛应用。其中,备受关注的脱靶现象也是研究的热点,迄今已取得了重要进展。该文介绍了脱靶现象的产生原理及体内和体外检测脱靶现象的方法,评价了通过改进sg RNA设计... 详细信息

近年来,CRISPR定点编辑技术发展迅猛,在动物、植物和微生物中均得到广泛应用。其中,备受关注的脱靶现象也是研究的热点,迄今已取得了重要进展。该文介绍了脱靶现象的产生原理及体内和体外检测脱靶现象的方法,评价了通过改进sg RNA设计和优化CRISPR系统等来降低脱靶率的方法。在植物基因组定点编辑过程中,应适时检测脱靶现象,提高脱靶检测的精确度和准确度。

关键词： CRISPR/Cas9 定点编辑脱靶

Maize Transformation Improvement Enabled Development of Transgenic Products

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Maize Transformation Improvement Enabled Development of Tran...

全国“植物生物技术及其产业化”研讨会

作者： xianggan li (Syngenta Biotechnology Inc.,North Carolina,USA,3054 Cornwallis Road,Research Triangle Park,NC 27709)

＜正＞Transgenic maize acreage has increased significantly in the last *** a global agribusiness company,Syngenta is actively developing new biotechnology products as well as new herbieides, insecticides,and *** traits under development for maize include those for insect resistance,disease resistance,drought and herbicide tolerance,higher yield,and enzymes for

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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模糊聚类法对温带山地灌草丛的分类

南京大学学报(自然科学版) 1988年第2期 330-339页

作者：李相敢南京大学生物系

本文应用聚类方法对溫带山地灌草丛群落进行定量分析,过程如下:(1)计算群落的相关矩阵R;(2)求模糊等价矩阵B~*;(3)用不同水平截距APH将群落逐步聚类;当APH=0.425时,将溫带山地灌草丛群落划分成10个群丛。它们是细柄草+黄背草群丛,野青茅... 详细信息

本文应用聚类方法对溫带山地灌草丛群落进行定量分析,过程如下:(1)计算群落的相关矩阵R;(2)求模糊等价矩阵B~*;(3)用不同水平截距APH将群落逐步聚类;当APH=0.425时,将溫带山地灌草丛群落划分成10个群丛。它们是细柄草+黄背草群丛,野青茅+白颖苔草群丛,黄背草+获群丛;黄背草+绿毛鹅观草群丛;黄背草+白羊草群丛;白羊草+隐子草群丛;白羊草+大穗结缕草群丛;白羊草+南牡蒿群丛;白羊草+百里香群丛;白羊草+长芒草群丛。同时详细分析了灌草丛性质、成因、演替及利用问题。

关键词：灌草丛黄背草白羊草

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植物MSH1基因研究进展

分子植物育种 2016年第9期14卷 2365-2370页

作者：刘春霞耿立召李相敢先正达生物科技(中国)有限公司北京102206

本综述归纳了近几年来植物中Mut S HOMOLOG1(MSH1)基因的研究进展。根据文献的报道,结合NCBI和Gramene数据库的信息,本综述获得了48个来自于不同植物的完整的MSH1蛋白序列,并对它们进行了系统进化树分析。本综述概述了MSH1基因引发人们... 详细信息

本综述归纳了近几年来植物中Mut S HOMOLOG1(MSH1)基因的研究进展。根据文献的报道,结合NCBI和Gramene数据库的信息,本综述获得了48个来自于不同植物的完整的MSH1蛋白序列,并对它们进行了系统进化树分析。本综述概述了MSH1基因引发人们研究兴趣的三种原因:(1)MSH1是一个在植物中高度保守的核基因,易于克隆和比对,是用来做系统进化树分析的优良候选基因;(2)MHS1基因被干扰之后,能够引起线粒体基因组的改变,进而导致细胞质雄性不育的发生,因此该基因可用于细胞质雄性不育系的创制;(3)MSH1基因被抑制后可以引起DNA甲基化的重新编码,增加表观遗传变异,进而导致表观生长发育优势。这不仅为杂种优势分子机理研究提供了新的方法,而且为遗传育种提供了新的思路。

关键词： MSH1 系统进化树分析细胞质雄性不育杂种优势

甘露糖筛选体系及在转基因玉米商业化中的应用

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生物技术通报 2014年第9期30卷 13-21页

作者：刘戬丰王艳丽李相敢先正达生物科技(中国)有限公司北京102206

甘露糖在己糖激酶的作用下形成6-磷酸甘露糖,进一步在磷酸甘露糖异构酶(Phosphomannose isomerase,PMI)的催化下转化成植物可利用的6-磷酸果糖,从而使转化细胞在甘露糖作为主要碳源的培养基上正常生长,而非转化细胞生长受到抑制。这一... 详细信息

甘露糖在己糖激酶的作用下形成6-磷酸甘露糖,进一步在磷酸甘露糖异构酶(Phosphomannose isomerase,PMI)的催化下转化成植物可利用的6-磷酸果糖,从而使转化细胞在甘露糖作为主要碳源的培养基上正常生长,而非转化细胞生长受到抑制。这一筛选体系被认为是一种正向筛选(Positive selection),已被成功地应用于重要的粮食作物和经济作物中。甘露糖筛选的植株可以通过多种方法检测,其中氯酚红检测法和试纸条检测法简单方便,适用于初步筛选。甘露糖筛选体系安全高效,已被应用于玉米商业化产品中。综述了甘露糖(mannose)筛选体系的原理、筛选特点、植株的鉴定、筛选方法的优缺点以及在商业化中的应用,列举了利用甘露糖筛选的玉米单性状转化系用于抗鳞翅目和抗鞘翅目昆虫及抗高温淀粉酶的范例及其在育种叠加中的应用。这种育种叠加使得甘露糖筛选的性状与其他性状重叠而得到更广谱的具有抗除草剂抗虫性状的商业化产品。

关键词：磷酸甘露糖异构酶筛选标记安全性分析转基因植物检测甘露糖

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昆虫抗药性检测方法研究进展

生物技术进展 2017年第4期7卷 272-278,J0001页

作者：马玉婷魏娟李相敢先正达生物科技(中国)有限公司北京102206

随着杀虫剂被长期、广泛地使用,昆虫对杀虫剂产生了不同程度的抗性,昆虫抗药品种及抗药剂量也相应地逐年增加,这使得昆虫抗药性的监测逐渐成为人们关注的焦点,昆虫抗药性的检测方法也因此不断改进。介绍了检测昆虫抗药性的两类常见方法... 详细信息

随着杀虫剂被长期、广泛地使用,昆虫对杀虫剂产生了不同程度的抗性,昆虫抗药品种及抗药剂量也相应地逐年增加,这使得昆虫抗药性的监测逐渐成为人们关注的焦点,昆虫抗药性的检测方法也因此不断改进。介绍了检测昆虫抗药性的两类常见方法:生物测定法和分子生物学法,其中,生物测定法分为人工饲料混药法、浸叶法、点滴法、喷雾法及喷粉法、药膜法、浸虫法和IRAC No.5法;而分子生物学法又包括PCR限制性内切酶技术、特异性等位基因PCR技术、随机扩增多态性DNA技术、TaqMan实时荧光定量PCR技术、KASP技术和DNA测序技术。研究人员可通过比较昆虫特性、环境因素、实验条件及实验目的的不同,选择合适的检测方法,以快速掌握昆虫的抗性信息,并及时有效的调整昆虫的防治策略。

关键词：昆虫抗药性生物测定分子检测

运用CRISPR/Cas系统对植物基因组进行定点编辑

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分子植物育种 2014年第6期12卷 1059-1066页

作者：宋时奎王影于洋耿立召张春翔李相敢韩天富先正达生物科技(中国)有限公司北京102206 中国农业科学院作物科学研究所北京100081

随着转基因技术的发展,出现了多种对基因组进行定点编辑的新技术。本文介绍了常用的植物基因组定点编辑技术的基本原理,特别对新近发展起来的CRISPR/Cas系统的原理、组成及各元件的作用等进行了综述,比较了CRISPR/Cas系统与ZFN、TALEN... 详细信息

随着转基因技术的发展,出现了多种对基因组进行定点编辑的新技术。本文介绍了常用的植物基因组定点编辑技术的基本原理,特别对新近发展起来的CRISPR/Cas系统的原理、组成及各元件的作用等进行了综述,比较了CRISPR/Cas系统与ZFN、TALEN等常用定点编辑技术的异同。文中列举了利用CRISPR/Cas系统对几种单子叶和双子叶植物进行基因组定点编辑的案例,认为通过CRISPR/Cas系统对植物基因组进行定点编辑是可行的,特别是由于嵌合sg RNA的成功设计,使得应用CRISPR/Cas系统更加简单方便。研究人员正在努力降低CRISPR/Cas系统的毒性和脱靶率,拓宽该技术的应用空间。

关键词：植物基因组 CRISPR Cas9 crRNA sgRNA 定点编辑

N-乙酰半胱氨酸在急性脑梗死治疗中的临床研究

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中国当代医药 2024年第27期31卷 62-66页

作者：冷志根李月华贺建雄陈飞军王湘赣江西省宜春市人民医院神经外科江西宜春336000 宜春职业技术学院基础医学教学部江西宜春336000

目的探究N-乙酰半胱氨酸在急性脑梗死治疗中的临床效果。方法选取2021年7月至2023年12月宜春市人民医院收治的60例急性脑梗死患者作为研究对象。按随机数字表法将其分为对照组(30例)与研究组(30例),对照组采用常规治疗,研究组在常规治... 详细信息

目的探究N-乙酰半胱氨酸在急性脑梗死治疗中的临床效果。方法选取2021年7月至2023年12月宜春市人民医院收治的60例急性脑梗死患者作为研究对象。按随机数字表法将其分为对照组(30例)与研究组(30例),对照组采用常规治疗,研究组在常规治疗基础上联合N-乙酰半胱氨酸治疗。比较两组的临床疗效、炎症指标[白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)]、病灶大小、神经功能[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)]、日常生活能力[日常生活能力评分量表(ADL)],以及不良反应发生率。结果治疗后,研究组的总有效率为96.67%,高于对照组的76.67%,差异有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后的NIHSS评分均低于本组治疗前,且研究组治疗后的NIHSS评分低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论N-乙酰半胱氨酸对治疗急性脑梗死患者效果显著,可以减轻患者炎症反应,改善患者的临床指标、神经功能,提高患者的日常生活能力,但其对脑梗死病灶大小的影响还需要进一步研究。

关键词： N-乙酰半胱氨酸急性脑梗死神经功能临床效果