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Long-term in vivo single-cell lineage tracing of deep structures using three-photon activation

Light(Science & Applications) 2016年第1期5卷 730-736页

作者： Isil Tekeli Isabelle Aujard xavier trepat Ludovic Jullien Angel Raya Dobryna Zalvidea Center of Regenerative Medicine in Barcelona(CMRB) Barcelona Biomedical Research ParkDr Aiguader 8808003 BarcelonaSpain Control of Stem Cell Potency Group Institute for Bioengineering of Catalonia(IBEC)Barcelona Science ParkBaldiri Reixac 15-2108028 BarcelonaSpain École Normale Supérieure-PSL Research University Department of Chemistry24 rue LhomondF-75005 ParisFrance Sorbonne Universités UPMC Univ Paris 06PASTEURF-75005 ParisFrance CNRS UMR 8640 PASTEURF-75005 ParisFrance Integrative Cell and Tissue Dynamics Group Institute of Bioengineering of Catalonia(IBEC)08028 BarcelonaSpain InstitucióCatalana de Recerca i Estudis Avançats(ICREA) 08010 BarcelonaSpain Center for Networked Biomedical Research on Bioengineering Biomaterials and Nanomedicine(CIBER-BBN)28029 MadridSpain

Genetic labeling techniques allow for noninvasive lineage tracing of cells in ***-photon inducible activators provide spatial resolution for superficial cells,but labeling cells located deep within tissues is precluded by scattering of the far-red illumination required for two-photon ***-photon illumination has been shown to overcome the limitations of two-photon microscopy for in vivo imaging of deep structures,but whether it can be used for photoactivation remains to be *** we show,both theoretically and experimentally,that three-photon illumination overcomes scattering problems by combining longer wavelength excitation with high uncaging three-photon cross-section *** prospectively labeled heart muscle cells in zebrafish embryos and found permanent labeling in their progeny in adult animals with negligible tissue *** technique allows for a noninvasive genetic manipulation in vivo with spatial,temporal and cell-type specificity,and may have wide applicability in experimental biology.

关键词： multi-photon microscopy photoactivation three-photon microscopy zebrafish

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