检索结果-南通市图书馆

Stability improvement of human collagenα1(I)chain using insulin as a fusion partner

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

Chinese Journal of Chemical Engineering 2018年第12期26卷 2607-2614页

作者： Yu Mi Yuan Gao Daidi Fan Zhiguang Duan Rongzhan Fu Lihua Liang wenjiao xue Shanshan Wang Shaanxi R&D Center of Biomaterials and Fermentation Engineering School of Chemical Engineering Northwest UniversityXi'an 710069China Shaanxi Institute of Microbiology Xi'an 710043China School of Biological Science and Engineering Shaanxi University of Technology Hanzhong 723001China

To enhance the stability of recombinant human collagen α1(I) chains(rhCOL1 A1) in production and purification stages, a gene fragment fusing COL1 A1 and insulin protein coding domains was synthesized and inserted into the pPIC9 K expression vector. The fusion peptide-expressing Pichia pastoris strain was created by *** optimization of shake flask cultures, the ultimate intracellular expression level of the insulin-collagen α1(I) chain fusion protein(INS-COL1 A1) reached about 300 mg·L^(-1), and no obvious protein degradation was found in the fermentation and purification processes. The His-tagged recombinant fusion protein was detected by western blotting and was effectively purified using Ni^(2+)-chelating chromatography. A prominent improvement in the stability of INS-COL1 A1 was observed compared to rhCOL1 A1 in vitro, and the rhCOL1 A1 released from the fusion protein was studied by LC–MS/MS and in bioassays. The results showed that the purified rhCOL1 A1 was consistent with the native protein in amino acid composition and had a similar biological compatibility. To our knowledge, this is the first study to demonstrate the use of insulin as a fusion protein to improve the stability of easily degradable proteins.

关键词： Fusion expression Human collagen α1(I) chain Insulin Protein stability Pichia pastoris

白酒酿造副产物黄水中产酯酵母菌株分离鉴定及产酯条件优化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

现代农业科技 2024年第12期 154-159,166页

作者：申旻陈雅楠刘瑶刘晨朱晨辉薛文娇陕西省太白酒业有限责任公司陕西宝鸡722300 陕西省微生物研究所陕西西安710043 西北大学陕西西安710069

利用三丁酸甘油酯法,从太白酒酿造副产物黄水中分离筛选出产酯能力相对较高的酵母菌株,并对最高酶活菌株进行16S rDNA鉴定,结果确定其为异威克汉逊酵母(Wickerhamomyces anomalus)。根据单因素试验结果,结合Box-Behnken Design-响应面... 详细信息

利用三丁酸甘油酯法,从太白酒酿造副产物黄水中分离筛选出产酯能力相对较高的酵母菌株,并对最高酶活菌株进行16S rDNA鉴定,结果确定其为异威克汉逊酵母(Wickerhamomyces anomalus)。根据单因素试验结果,结合Box-Behnken Design-响应面试验优化该菌株的培养条件。结果表明,当初始乙醇体积分数为3%、发酵pH值为5.5、发酵时间为48 h、发酵温度为34℃时,该菌株能继续生长,且酯化能力明显增强,总酯含量从4.1330 g/L提高至9.9100 g/L,其中代表性组分乙酸乙酯的相对含量从41.7200 mg/100 mL提高到302.1200 mg/100 mL。

关键词：白酒黄水产酯酵母分离鉴定酯化能力条件优化

维普期刊数据库博看期刊

聚乳酸-羟基乙酸共聚物载肝细胞生长因子纳米粒的构建及生物学活性评价

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2018年第2期38卷 217-223页

作者：冼文娇王雪儿张琳南方医科大学基础医学院组织胚胎学教研室广东广州510515

目的探究制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒的优化条件,构建肝细胞生长因子(HGF)纳米粒,评价其包封率、载药量、回收率、释放度和生物学活性。方法采用复乳溶剂挥发法制备牛血清白蛋白(BSA)PLGA纳米粒,通过正交试验设计,以粒径较小... 详细信息

目的探究制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒的优化条件,构建肝细胞生长因子(HGF)纳米粒,评价其包封率、载药量、回收率、释放度和生物学活性。方法采用复乳溶剂挥发法制备牛血清白蛋白(BSA)PLGA纳米粒,通过正交试验设计,以粒径较小,包封率、载药量和回收率较高为考察指标,优化纳米粒的制备条件;选取优化条件制备HGF纳米粒,分别采用BCA试剂盒和HGF-ELISA试剂盒检测BSA纳米粒和HGF纳米粒的包封率、载药量和释放度,通过CCK8增殖实验评价HGF纳米粒的生物活性。结果优化条件下制备的HGF纳米粒大小均匀,粒径234.4±4.8 nm,包封率(77.75±3.04)%,回收率(49.33±9.34)%,体外释放度曲线表现为先突释,后缓释;HGF纳米粒可以促进角质形成细胞的增殖。结论复乳溶剂挥发法-优化条件下制备的HGF纳米粒具有较高包封率,良好的缓释效果和生物学活性。

关键词：聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒正交试验肝细胞生长因子缓释

自体富血小板血浆对游离皮瓣修复兔软组织缺损的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华烧伤杂志 2019年第9期35卷 683-689页

作者：李洋郑健生王彪薛文娇解放军联勤保障部队第九〇九医院(厦门大学附属东南医院)烧伤整形科漳州363000

目的探讨自体富血小板血浆(PRP)对游离皮瓣修复兔软组织缺损的影响。方法取30只6个月龄、雌雄不拘新西兰大白兔,心脏采血后Aghaloo法制备PRP,于每只兔耳制作5 cm×3 cm的游离皮瓣模型。采用随机数字表法选择每只兔一侧兔耳作为PRP组,另... 详细信息

目的探讨自体富血小板血浆(PRP)对游离皮瓣修复兔软组织缺损的影响。方法取30只6个月龄、雌雄不拘新西兰大白兔,心脏采血后Aghaloo法制备PRP,于每只兔耳制作5 cm×3 cm的游离皮瓣模型。采用随机数字表法选择每只兔一侧兔耳作为PRP组,另一侧兔耳作为生理盐水组。PRP组兔耳皮瓣基底均匀涂抹1.0 mL自体PRP,生理盐水组涂抹等量生理盐水,皮瓣原位回植。分别于术后2、3、5、7、14 d,每组取6只兔,观察并记录兔耳皮瓣成活情况;取皮瓣组织,行苏木精-伊红染色观察皮瓣基底组织形态;采用免疫荧光法检测皮瓣基底组织的CD31和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。另取1只同等实验条件下不制备皮瓣的6个月龄雄性新西兰大白兔,分别采集全血和制备PRP,行血小板计数及采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法检测血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子β(TGF-β)含量。对数据行析因设计方差分析、配对样本t检验及Bonferroni校正。结果(1)术后2 d,PRP组兔创面皮瓣颜色彤红,与基底组织贴合良好;生理盐水组兔创面皮瓣颜色暗红,与基底组织贴合不良。术后3 d,PRP组兔创面皮瓣颜色红润,与基底组织贴合紧密;生理盐水组兔创面皮瓣散在斑状暗红,与基底组织贴合一般。术后5 d,PRP组兔创面皮瓣淡红,与基底组织贴合紧密,皮瓣已成活;生理盐水组兔创面皮瓣与基底组织贴合紧密,皮瓣颜色红润。术后7 d,PRP组兔创面皮瓣表面覆盖中量兔毛,皮瓣颜色与周围皮肤颜色接近;生理盐水组兔创面皮瓣与基底贴合一般,表面仅有少量绒毛覆盖。术后14 d,PRP组兔创面愈合良好,生理盐水组仍有小创面尚未愈合。(2)术后2 d,2组兔创面皮瓣均有炎性细胞浸润。术后3 d,PRP组兔创面皮瓣可见新生微血管,间质出血少;生理盐水组兔创面皮瓣新生微血管少。术后5 d,生理盐水组兔创面皮瓣中量炎性细胞浸润,新生微血管数量少;PRP组兔创面皮瓣可见大量Fb,少量炎性细胞浸润,明显可见周围散布新生微血管。术后7 d,生理盐水组兔创面皮瓣新生微血管数量较PRP组少。术后14 d,PRP组兔创面皮瓣新生微血管分化逐渐成熟,周围大量Fb分布;生理盐水组兔创面皮瓣部分新生微血管分化成熟,愈合过程较PRP组迟缓。(3)术后2、3、5、7、14 d,PRP组兔创面皮瓣基底组织的CD31和α-SMA表达量均明显多于生理盐水组(t=10.133、5.444、9.450、6.986、8.394,14.896、10.328、9.295、13.902、10.814,P<0.01)。(4)活化后的兔PRP中血小板计数为(2 863±962)×10^9/L,明显高于全血中的(393±49)×10^9/L(t=7.690,P<0.05)。(5)活化后的兔PRP中VEGF、TGF-β含量分别为(564.3±3.2)、(1 143±251)pg/mL,明显高于全血中的(99.7±0.4)、(274±95)pg/mL(t=287.390、9.648,P<0.05或P<0.01)。结论兔PRP中含有大量的VEGF与TGF-β,可以有效促进游离皮瓣组织微血管新生,加快游离皮瓣成活。

关键词：富血小板血浆外科皮瓣伤口愈合微血管密度

关中地区地下热泉普鲁兰酶产生菌的分离及其酶学性质

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品与生物技术学报 2014年第12期33卷 1312-1318页

作者：常帆薛文娇马赛箭安超陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心陕西西安710043

从关中地区的西安市区、临潼区、长安区,以及杨凌周边地区,分别采集地下热泉泉水水样,采用培养法分别得到105株普鲁兰酶产生菌,对其中21株进行16S r DNA基因片段序列分析。比对表明,克雷伯菌属(Klebsiella)和芽孢杆菌属(Bacillus)在热... 详细信息

从关中地区的西安市区、临潼区、长安区,以及杨凌周边地区,分别采集地下热泉泉水水样,采用培养法分别得到105株普鲁兰酶产生菌,对其中21株进行16S r DNA基因片段序列分析。比对表明,克雷伯菌属(Klebsiella)和芽孢杆菌属(Bacillus)在热泉生态系统中处于优势地位。根据统计结果,所分离的菌株在种间和种内均有显著的酶活力差异。其中GP-1最适温度为50℃,最适p H 4.0,在50℃时有良好的稳定性,保温30 min仍有92%剩余酶活。

关键词：热泉可培养菌普鲁兰酶筛选多样性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基于高通量测序的出芽短梗霉转录组学研究

基因组学与应用生物学 2016年第4期35卷 931-941页

作者：马赛箭安超薛文娇上官亦卿陕西省微生物研究所西安710043

为获得出芽短梗霉合成普鲁兰多糖的转录组信息,揭示出芽短梗霉生长发育过程中转录组的整体表达特征,本研究采用Illumina Hi Seq 2500平台对出芽短梗霉swp 35进行高通量测序,结合生物信息学方法开展基因表达谱研究和功能基因预测。通过... 详细信息

为获得出芽短梗霉合成普鲁兰多糖的转录组信息,揭示出芽短梗霉生长发育过程中转录组的整体表达特征,本研究采用Illumina Hi Seq 2500平台对出芽短梗霉swp 35进行高通量测序,结合生物信息学方法开展基因表达谱研究和功能基因预测。通过测序、组装共得到29 919条Transcript和20 312条UniGene。所有UniGene与NCBI的非冗余蛋白质数据库(Nr)进行相似搜索(E值<10^(-5)),结果一共有13 465个UniGene与数据库中的已知基因同源。此外,还对Uni Gene进行了GO、COG和KEGG的功能注释、分类及通路分析,获得一批与普鲁兰多糖合成相关的基因。通过高通量测序,获得了丰富的出芽短梗霉合成普鲁兰多糖的转录组数据,为深入研究出芽短梗霉合成普鲁兰多糖的代谢调控提供了有价值的数据。

关键词：高通量测序出芽短梗霉转录组基因注释

基于高通量测序的野生竹根七根际及内生细菌群落结构特征分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基因组学与应用生物学 2021年第5期40卷 2076-2082页

作者：安超马赛箭薛文娇刘晨丁浩陕西省微生物研究所西安710043 陕西省科学院秦岭天然产物工程中心西安710043

为系统研究竹根七根际土及内生细菌菌群结构信息,本研究利用Illumina MiSeq平台,采用高通量测序方法对野生竹根七根际土和内生细菌进行序列测定及生物信息学分析。结果表明,从竹根七根际土、根和叶共获得分类单元(OTUs)1148个,其中14个... 详细信息

为系统研究竹根七根际土及内生细菌菌群结构信息,本研究利用Illumina MiSeq平台,采用高通量测序方法对野生竹根七根际土和内生细菌进行序列测定及生物信息学分析。结果表明,从竹根七根际土、根和叶共获得分类单元(OTUs)1148个,其中14个OUT为三者共有,竹根七根际土、根及叶各自特有的OTUs分别为337个、171个和308个,根际土的细菌多样性高于竹根七内生细菌的多样性。根际土细菌主要分布在变形菌门(Proteobacteria,47.5%)和放线菌门(Actinobacteria,20.6%),内生细菌主要分布在变形菌门(Proteobacteria,84.3%)。热度图分析表明,竹根七根际土及内生的细菌在属分类水平呈现显著差异。代谢预测分析显示,竹根七根际土中聚酮类化合物和萜类化合物代谢(Metabolism of Terpenoids and Polyketides)功能的细菌菌群丰度高于植物内生组织的。本研究可为竹根七根际及内生环境菌群功能的阐明和特定微生物的挖掘提供重要参考。

关键词：竹根七内生菌根际微生物多样性高通量测序

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

环青海湖地区可培养放线菌多样性及生物活性

西北农业学报 2015年第11期24卷 133-139页

作者：马赛箭安超常帆甄丽莎薛文娇陕西省微生物研究所微生物代谢产物研究中心西安710043

以资源利用为出发点,研究了环青海湖土壤中可培养放线菌的多样性及生物活性。采用5种放线菌培养基,分离获得纯培养菌株,并通过6种指示菌筛选具有生物活性的放线菌资源。共分离获得151株纯培养菌株,对其中的45株进行16SrRNA基因序列鉴定... 详细信息

以资源利用为出发点,研究了环青海湖土壤中可培养放线菌的多样性及生物活性。采用5种放线菌培养基,分离获得纯培养菌株,并通过6种指示菌筛选具有生物活性的放线菌资源。共分离获得151株纯培养菌株,对其中的45株进行16SrRNA基因序列鉴定,选出具有代表性的19株进行系统发育树分析,结果显示它们分属7个种属,以链霉菌和诺卡氏菌居多,抗菌活性显示多株菌的代谢产物表现显著的抑菌活性,具有进一步研究的价值。

关键词：环青海湖放线菌多样性生物活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

离子交换法纯化重组类人胶原蛋白II的研究

离子交换与吸附 2006年第4期22卷 289-297页

作者：薛文娇范代娣尚龙安侯文洁鱼奇鳞张卫刚西北大学化工学院生物工程系西安交大保赛生物技术股份有限公司长安大学环境科学与工程学院

用阳离子交换树脂CM-52分离纯化类人胶原蛋白II(HumanCollagen-likeBioproteinII,HCBII)。通过实验,分别确定了静态吸附和柱层析吸附的操作条件,即静态吸附:在pH4.0、NaCl0.15mol/L、进料浓度7g/L,处理量17.26ml/g树脂的条件下进行吸附... 详细信息

用阳离子交换树脂CM-52分离纯化类人胶原蛋白II(HumanCollagen-likeBioproteinII,HCBII)。通过实验,分别确定了静态吸附和柱层析吸附的操作条件,即静态吸附:在pH4.0、NaCl0.15mol/L、进料浓度7g/L,处理量17.26ml/g树脂的条件下进行吸附,吸附时间为60min;柱层析:在pH4.0、NaCl0.15mol/L、进料浓度5g/L、流速5ml/min的条件下进行吸附。然后上柱,在pH4.0、NaCl0.30mol/L下进行脱附。实验表明,采用静态吸附的方式吸附HCBII,然后上柱洗脱,HCBII的吸附量可达到48.6mg/g树脂,回收率83.8%,操作时间短,分辨率高,最终纯化的HCBII达电泳纯,分子量为97kD。

关键词： HCBII 离子交换静态吸附柱层析吸附回收率