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CVB3对不同营养状态的HeLa细胞mTOR信号通路调控的影响

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中南大学学报（医学版） 2013年第1期38卷 20-25页

作者：成亮陈淳媛杨作成朱咏贵黄利华闾宏伟中南大学湘雅三医院儿科长沙410013 中南大学湘雅三医院医学实验中心长沙410013

目的:探讨不同营养状况对柯萨奇病毒B3(CVB3)感染HeLa细胞后mTOR信号通路调控的影响。方法:HeLa细胞的培养方法:非饥饿法用常规含10%胎牛血清细胞培养液换液培养24 h后次日再用CVB3干预;饥饿法用不含胎牛血清的培养基换液培养24 h后次... 详细信息

目的:探讨不同营养状况对柯萨奇病毒B3(CVB3)感染HeLa细胞后mTOR信号通路调控的影响。方法:HeLa细胞的培养方法:非饥饿法用常规含10%胎牛血清细胞培养液换液培养24 h后次日再用CVB3干预;饥饿法用不含胎牛血清的培养基换液培养24 h后次日再干预。将HeLa细胞分为非饥饿法病毒组与对照组、饥饿法病毒组与对照组4组,采用RT-PCR检测不同时间点HeLa细胞CVB3外壳蛋白、mTOR和p70s6K mRNA表达。结果:非饥饿法:病毒组mTOR,p70s6K mRNA表达与对照组比较仅在12,24 h,差异有统计学意义(Ps6K mRNA差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:CVB3使HeLa细胞mTOR-p70s6K信号通路表达下调,饥饿法mTOR表达高于非饥饿法。

关键词：柯萨奇病毒B3 HeLa细胞营养剥夺 mTOR

GPCR跨膜螺旋的结构拓扑建模及其预测方法

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计算机学报 2013年第10期36卷 2168-2178页

作者：吴宏杰吕强权丽君陈荣陈沙沙李海鸥钱培德苏州大学计算机科学与技术学院江苏苏州215006 苏州大学江苏省计算机信息处理技术重点实验室江苏苏州215006 苏州科技学院电子与信息工程学院江苏苏州215009

7个α跨膜螺旋组成的螺旋束是G蛋白偶联受体的最主要拓扑特征,其三维结构的预测精度直接影响完整受体的三维结构预测、配体对接及功能分析的准确性.近期许多研究小组提出了各种方法,同时也遇到了一个共同的问题:采样时难以在7个跨膜螺... 详细信息

7个α跨膜螺旋组成的螺旋束是G蛋白偶联受体的最主要拓扑特征,其三维结构的预测精度直接影响完整受体的三维结构预测、配体对接及功能分析的准确性.近期许多研究小组提出了各种方法,同时也遇到了一个共同的问题:采样时难以在7个跨膜螺旋结构的保守性与局部多样性之间获得平衡,其实质是未将两者统一到一个系统模型中.文中针对跨膜螺旋的空间结构特点,建立了兼顾保守性与多样性的结构拓扑模型,并利用该模型形成了4阶段的结构优化方法,试图获得采样广度与深度的平衡.同时,引入基于结构拓扑的能量项与约束,起到了优化评判标准和剪裁采样空间的作用,有效地预测了跨膜螺旋的三维结构.使用文中方法展开了3组验证实验,用8个已解构的目标分别与GPCRDOCK2010的参赛结果、知名结构预测工具swiss和MODELLER进行了比较.与swiss的比较中,文中方法有5个目标获得了更优的三维螺旋结构;与单模板、多模板的MODELLER的比较中,文中方法分别在6个目标与7个目标上取得了优势.

关键词：跨膜螺旋 G蛋白偶联受体结构拓扑约束

环磷酰胺激活小鼠肝微粒体谷胱甘肽s-转移酶Ⅰ的机制研究

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中国药理学通报 2013年第10期29卷 1387-1390页

作者：郑英邹晓华付再林方慧陈素红吕圭源浙江中医药大学浙江杭州310053 解放军第117医院浙江杭州310013 温州医学院药学院浙江温州325035

目的探讨环磷酰胺(CP)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽s-转移酶Ⅰ(mGsT-Ⅰ)活性的影响及其可能的机制。方法用苯巴比妥75 mg·kg-1诱导小鼠CYP2B后,ip CP,测定9 h内mGsT-Ⅰ酶活性,观察二巯基丁二醇(DTT)对酶激活的逆转作用和巯基烷化剂N-... 详细信息

目的探讨环磷酰胺(CP)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽s-转移酶Ⅰ(mGsT-Ⅰ)活性的影响及其可能的机制。方法用苯巴比妥75 mg·kg-1诱导小鼠CYP2B后,ip CP,测定9 h内mGsT-Ⅰ酶活性,观察二巯基丁二醇(DTT)对酶激活的逆转作用和巯基烷化剂N-乙基马来酰亚胺(NEM)对酶再激活效应,用sDs-PAGE和负染凝胶法评价CP对mGsT-Ⅰ蛋白表达的影响。结果 CP引起小鼠微粒体中mGsT-Ⅰ活性增加;NEM在mGsT-Ⅰ半胱氨酸-49-巯基(cys-49-sH)上的活化效应减弱,而CP引起的mGsT-Ⅰ激活效应不被二硫键还原剂DTT逆转。激活的mGsT-Ⅰ电泳图谱未见蛋白分子量变迁及蛋白表达增加。结论大剂量CP致mGsT-Ⅰ激活效应机制主要是酶分子cys-49-sH上单个巯基的修饰作用。

关键词：环磷酰胺微粒体谷胱甘肽s-转移酶Ⅰ 二巯基丁二醇 N-乙基马来酰亚胺半胱氨酸-49-巯基机制

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肾透明细胞癌中氧化应激蛋白的表达

细胞与分子免疫学杂志 2012年第8期28卷 851-855页

作者：田美娟李雨遥罗长琴吕美玲杨谨西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤内科陕西西安710061

目的:探讨人肾透明细胞癌细胞株RLC-310与人正常肾近曲小管上皮细胞株HK-2,肾癌及其癌旁组织中氧化应激蛋白表达的差异。方法:体外培养RLC-310和HK-2,采用PF-2D蛋白分级分离系统分离细胞总蛋白,选取差异蛋白组分进行毛细管LC-EsI-Ms/Ms... 详细信息

目的:探讨人肾透明细胞癌细胞株RLC-310与人正常肾近曲小管上皮细胞株HK-2,肾癌及其癌旁组织中氧化应激蛋白表达的差异。方法:体外培养RLC-310和HK-2,采用PF-2D蛋白分级分离系统分离细胞总蛋白,选取差异蛋白组分进行毛细管LC-EsI-Ms/Ms分析,结合蛋白质数据库检索对差异蛋白进行鉴定,并对代表性氧化应激差异蛋白采用免疫组织化学方法进行验证。结果:两个细胞株经串联质谱分析共鉴定出12个氧化应激差异表达蛋白,分别是peroxiredox-in-1(PRX-1)、peroxiredoxin-6(PRX-6)、superoxide dismutase[Cu-Zn]sOD1、glutathione peroxidase 1、catalase、glutathionesynthetase、glutathione s-transferase Pi(GsTPi)、thioredoxin、热休克蛋白10(heat shock protein,HsP10)、HsP 60、HsP 70和HsP 90。其中PRX-6、HsP 60、GsTPi三种代表性差异蛋白在人肾透明细胞癌细胞株RLC-310和人正常肾近曲小管上皮细胞株HK-2中均有表达,前者的表达水平较后者显著升高(P<0.05),这三种蛋白在肾癌组织中表达也较癌旁组织显著升高(P<0.05)。结论:人肾透明细胞癌中存在抗氧化应激蛋白的差异表达,这些氧化应激蛋白的异常表达在阻止肾癌细胞氧化损伤中起一定作用。

关键词：氧化应激蛋白透明细胞癌肾癌

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厌氧-好氧生物反应器填埋工艺特性研究

环境科学 2007年第4期28卷 891-896页

作者：陈朱蕾周传斌刘婷江娟曹丽吕志中李希堃黎小保华中科技大学环境科学与工程学院武汉430074 中国科学院生态环境研究中心北京100085

基于生物反应器填埋技术，研究1种填埋场地循环操作的厌氧-好氧生物反应器填埋工艺，设计了该工艺模拟装置并研究了其运行工艺特性．厌氧阶段主要通过渗滤液回灌控制反应器工艺条件，主要试验结果为，pH值，R1在6周后可上升至6．7～7．8... 详细信息

基于生物反应器填埋技术，研究1种填埋场地循环操作的厌氧-好氧生物反应器填埋工艺，设计了该工艺模拟装置并研究了其运行工艺特性．厌氧阶段主要通过渗滤液回灌控制反应器工艺条件，主要试验结果为，pH值，R1在6周后可上升至6．7～7．8，R2在17周内一直低于6．8；渗滤液COD浓度，R1在13周时下降至10617mg／L，R2在5周后上升至60000mg／L后长期趋于稳定；填埋气累计产量，R1在8周达到44％，R2几乎不产气．衡量稳定化可以分别采用渗滤液pH、COD浓度及BOD5／COD的减少率、填埋气的累计产率等指标来判断，并据此转换为好氧填埋运行．好氧阶段主要是通过强制通风来减少恶臭和水分，主要试验结果为，通风19d氨气浓度降为1．16mg／m^3，通风23d后恶臭浓度降为19；通风14d后含水率降为26％．完成此阶段的工艺指标值可依据矿化垃圾开采的最终用途确定．对主要试验数据进行了数值模拟．厌氧-好氧填埋过程的微生物演替经RIsA分析，有4个优势菌群，一些兼性菌群在厌氧-好氧阶段起着重要的承前启后作用．

关键词：生活垃圾生物反应器填埋厌氧-好氧

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近红外荧光量子点对颊癌可视化活体

中华口腔医学杂志 2011年第3期46卷 134-138页

作者：杨凯曹雨庵李志刚吕晓强赵成杨佳重庆医科大学附属第一医院口腔颌面外科重庆400016

目的观察用最大发射波长为800 nm近红外荧光量子点（quantum dots,QD800）标记的昆明小鼠鳞状细胞癌u14细胞在体内颊部的可视化成像情况,为癌症的早期诊断、可视化观察和个体化治疗提供依据.方法用具有穿膜作用肽段连接的QD800通过内... 详细信息

目的观察用最大发射波长为800 nm近红外荧光量子点（quantum dots,QD800）标记的昆明小鼠鳞状细胞癌u14细胞在体内颊部的可视化成像情况,为癌症的早期诊断、可视化观察和个体化治疗提供依据.方法用具有穿膜作用肽段连接的QD800通过内吞标记u14细胞（u14-QD800）,将含有不同细胞数的u14-QD800分别注射于裸鼠和昆明小鼠颊部黏膜下,在不同时间行活体成像,观察用QD800标记对u14细胞非侵入体内检测的敏感性和动态成像情况.结果活体成像对裸鼠和昆明小鼠颊部可视化检测到的最少u 14-QD800细胞数分别为1×104和1×105个.1×104、1×105和1×106个u14-QD800细胞在裸鼠颊部能可视化成像持续的时间分别为3、7和16 d,1×105和1×106个u14-QD800细胞在昆明小鼠颊部能可视化成像持续的时间分别为3和10 d.结论由于近红外荧光量子点对组织具有强的穿透力,在癌症的早期诊断、可视化观察和个体化治疗方面具有较大的发展前景.

关键词：癌,鳞状细胞量子点早期诊断

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附加黏滞阻尼器减震结构实用设计方法研究

振动与冲击 2012年第21期31卷 80-88页

作者：翁大根张超吕西林彭林海徐斌丁孙玮周红卫同济大学土木工程防灾减灾国家重点实验室上海200092 上海材料所上海200092

黏滞阻尼器近年来在结构减震控制中得到广泛应用,但面向黏滞阻尼减震结构的设计方法仍有待补充和完善。基于此,探讨和提出了一种针对附加黏滞阻尼器减震结构的实用设计方法,主要内容包括分析了黏滞阻尼减震的基本原理和力学模型,从主体... 详细信息

黏滞阻尼器近年来在结构减震控制中得到广泛应用,但面向黏滞阻尼减震结构的设计方法仍有待补充和完善。基于此,探讨和提出了一种针对附加黏滞阻尼器减震结构的实用设计方法,主要内容包括分析了黏滞阻尼减震的基本原理和力学模型,从主体结构与附加消能部件分开设计的思路着手给出了具体的设计流程和内容框架,列出了消能部件方案设计及性能参数配置的计算公式。最后,结合一个工程实例,引入日本JssI Manual中黏滞阻尼减震结构设计方法进行了对比分析和论证,结果表明该实用减震设计方法对于结构各楼层地震响应控制得比较均匀,如此有助于改善结构薄弱层状况,而通过减震结构的强度、变形验算也表明该实用方法能很好地契合现有抗震设计规范,可应用于黏滞阻尼减震结构设计中,以满足不同地震风险下的减震控制目标和需求。

关键词：黏滞阻尼器消能减震设计方法黏滞阻尼减震结构等效阻尼比

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一种简单的岩体地下洞室地震安全评价方法

岩土力学 2009年第7期30卷 1873-1882页

作者：李海波刘博吕涛许文锋杨建宏夏祥周青春中国科学院武汉岩土力学研究所岩土力学与工程国家重点实验室武汉430071 中国地质大学(武汉)工程学院武汉430074 国家电力公司成都勘测设计研究院成都610072

提出了动应力集中因子代表值的概念,以合理反映地震荷载作用下地下洞室围岩的动应力集中程度,并将动应力集中因子代表值,作为洞室地震响应的关键特征来衡量洞室地震响应的大小。应用显示有限差分法,讨论了地震动加速度幅值、洞室埋深、... 详细信息

提出了动应力集中因子代表值的概念,以合理反映地震荷载作用下地下洞室围岩的动应力集中程度,并将动应力集中因子代表值,作为洞室地震响应的关键特征来衡量洞室地震响应的大小。应用显示有限差分法,讨论了地震动加速度幅值、洞室埋深、围岩岩体级别、衬砌混凝土厚度、衬砌混凝土强度等级与动应力集中因子代表值的相关关系。研究表明,动应力集中因子代表值与这5个因素均近似呈线性关系。在此基础上给出了有(无)衬砌支护结构两种情况的地震安全评价公式,提出了岩体地下洞室的地震安全评价方法。应用提出的评价方法,分别对唐山余震地震作用下溪洛渡水电站超大型地下洞室群的地震安全性进行了评价,所得结果与Dowding-Rozen及sharma-Judd的评价方法结果一致。分析还表明,文中提出的岩体地下工程的地震安全评价方法的评价结果是偏于安全的。

关键词：地震安全评价方法溪洛渡水电站:岩体地下洞室:地震反应

落叶松八齿小蠹与长喙壳真菌间的种特异性伴生关系

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生态学报 2015年第2期35卷 313-323页

作者：孟贤静吕全刘学伟焦相杰梁军张星耀国家林业局森林保护学重点实验室、中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所北京100091 内蒙古赤峰市克什克腾旗广兴林场赤峰025350

小蠹虫与长喙壳类真菌(Ophiostomatoid fungi)在自然界中形成稳定的伴生关系,是森林生态系统内一种普遍的生态学现象。已有研究表明欧亚大陆的齿小蠹属(Ips)昆虫与多种长喙壳类真菌形成广泛的伴生关系,其中部分真菌是重要的针叶树病原... 详细信息

小蠹虫与长喙壳类真菌(Ophiostomatoid fungi)在自然界中形成稳定的伴生关系,是森林生态系统内一种普遍的生态学现象。已有研究表明欧亚大陆的齿小蠹属(Ips)昆虫与多种长喙壳类真菌形成广泛的伴生关系,其中部分真菌是重要的针叶树病原菌。随着借助于DNA信息特征的系统发育分析,揭示出形态特征和亲缘关系十分接近的3种齿小蠹属昆虫,云杉八齿小蠹(***),欧洲落叶松八齿小蠹(***)和亚洲落叶松八齿小蠹(***)确定为不同种之后,相应地与之稳定伴生的长喙壳类真菌Ceratocystis polonica也由过去一个种揭示为3个种的复合体,各自与3种小蠹虫稳定伴生,形成密切的种特异性伴生关系。小蠹虫与真菌的种特异性伴生被认为是处于同一森林生态系统内的生物协同进化的结果。通过对我国东北地区落叶松八齿小蠹虫体、坑道标本上伴生真菌菌株的采集、分离和生理学、形态学特征观察,以及基于ITs、β-tubulin、MAT-2 HMG box多位点DNA序列的系统发育分析,首次确定了长喙壳真菌Ceratocystis fujiensis在我国东北地区异域分布的3种落叶松林内普遍存在,与落叶松八齿小蠹形成稳定的伴生关系。作为亚洲落叶松八齿小蠹伴生的主要真菌,也是伴生菌区系中的先锋种和致病力最强的病原菌,***在我国落叶松人工林的广泛分布值得高度重视,将为制定防治病虫复合危害的有效策略和措施提供科学基础。研究结果进一步支持了齿小蠹属昆虫与长喙壳真菌间的种特异性伴生假说。同时,多基因序列特征表明落叶松八齿小蠹与***在亚洲范围内的不同地理种群存在着显著的遗传多样性,预示特异性伴生在不同种群间发生的可能,可以为种特异性伴生假说和小蠹虫-真菌间共生关系的研究提供良好的模式材料。

关键词：亚洲落叶松八齿小蠹 Ceratocystisfujiensis 系统发育落叶松病原菌