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生殖与避孕 1983年第1期 33-36页

作者：吴明章谢文英顾红斌江鱼王益鑫吴裕伦上海第二医学院上海第二医学院附属第三人民医院

本文对25例男性不育症患者的睾丸活检组织进行了超微结构观察。结果表明不育症患者睾丸曲细精管界膜有显著变化,主要为界膜增厚、界膜纤维化、基膜样物质沉积、肌样细胞变性及肥大细胞增多。间质中可见结缔组织增生或小血管内皮细胞肿... 详细信息

本文对25例男性不育症患者的睾丸活检组织进行了超微结构观察。结果表明不育症患者睾丸曲细精管界膜有显著变化,主要为界膜增厚、界膜纤维化、基膜样物质沉积、肌样细胞变性及肥大细胞增多。间质中可见结缔组织增生或小血管内皮细胞肿胀。支持细胞有空泡变性,支持细胞综合症患者的支持细胞呈未成熟型,支持细胞间未形成复合连接,而在其它病例,则有血睾屏障存在。

关键词： Male Infertility Testis Ultrastructure limiting Membrane Mast Cells Sertoli Cells

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努比亚山羊LMCD1基因生物信息学分析、真核表达载体的构建及表达

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中国畜牧兽医 2022年第6期49卷 2033-2042页

作者：邹剑伟邹菊红申玉建韦一张叁保连子童徐建建宋颖黄艳娜韦英明蒋钦杨郑自华广西大学动物科学技术学院南宁530004 广西大学农牧产业发展研究院南宁530004

【目的】扩增努比亚山羊lim结构域基因1(lim domain gene 1,LMCD1)并进行生物信息学分析,构建真核表达载体并检测LMCD1基因的表达情况,为研究努比亚山羊LMCD1基因功能及探究LMCD1基因在山羊骨骼肌肉发育中的作用提供依据。【方法】从努... 详细信息

【目的】扩增努比亚山羊lim结构域基因1(lim domain gene 1,LMCD1)并进行生物信息学分析,构建真核表达载体并检测LMCD1基因的表达情况,为研究努比亚山羊LMCD1基因功能及探究LMCD1基因在山羊骨骼肌肉发育中的作用提供依据。【方法】从努比亚山羊背最长肌组织中提取总RNA,应用RT-PCR方法扩增LMCD1基因CDS区序列,并进行生物信息学分析;将LMCD1基因以同源重组的方式连接pEGFP-N1载体,经酶切、测序鉴定后重组阳性质粒命名为pEGFP-N1-LMCD1;将pEGFP-N1-LMCD1重组质粒转染至山羊骨骼肌卫星细胞,通过实时荧光定量PCR检测努比亚山羊LMCD1基因的表达情况。【结果】努比亚山羊LMCD1基因CDS区序列全长1092 bp,编码363个氨基酸。LMCD1蛋白分子式为C_(1775)H_(2818)N_(508)O_(533)S_(29),分子质量为40.73 ku。努比亚山羊LMCD1基因CDS区序列与山羊相似性最高(99.8%),与斑马鱼相似性最低(55.4%),与其他物种的相似性在87.0%~98.8%之间。LMCD1蛋白无信号肽,不存在跨膜结构域,为亲水性蛋白。通过构建努比亚山羊pEGFP-N1-LMCD1真核表达载体并转染至骨骼肌卫星细胞,过表达LMCD1基因,产生绿色荧光信号。【结论】试验成功扩增LMCD1基因CDS区序列,构建了pEGFP-N1-LMCD1真核表达载体,并分析了生物学功能,为后续开展LMCD1基因在山羊骨骼肌肉发育中的机制研究提供了理论基础。

关键词：努比亚山羊 LMCD1基因生物信息学分析真核表达载体表达

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葫芦茶抗IgE介导Ⅰ型过敏有效部位的研究

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中南药学 2011年第1期9卷 35-38页

作者：周旭东史丽颖于大永师海波苗艳波唐玲冯宝民王永奇大连大学药物研究所辽宁大连116622 吉林省中医药科学院长春130041

目的以大鼠I型过敏反应模型探索葫芦茶抗过敏反应有效部位。方法葫芦茶用50%丙酮提取、乙酸乙酯萃取和D101大孔树脂富集分别得到丙酮提取物(1号)、乙酸乙酯萃取物(2号)、水溶物(3号)、水不溶物(4号)和大孔树脂富集物(5号)。采用卵白蛋白... 详细信息

目的以大鼠I型过敏反应模型探索葫芦茶抗过敏反应有效部位。方法葫芦茶用50%丙酮提取、乙酸乙酯萃取和D101大孔树脂富集分别得到丙酮提取物(1号)、乙酸乙酯萃取物(2号)、水溶物(3号)、水不溶物(4号)和大孔树脂富集物(5号)。采用卵白蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]的混合液致敏和诱发制备的大鼠I型过敏反应模型,随机分组,1、2、3、4、5号组各设100、400 ***-12个剂量组,孟鲁司特钠(menglus-itena)组、正常对照组和模型组;采用ELISA法测定血清IgE、LT和His含量;采用细胞计数法,测定大鼠全血和肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)数量;通过病理学检查,检测肺组织炎症面积。结果 1、2、3号均可明显降低血清IgE、LT和His的含量,强弱顺序为1>2>3;1号可明显减少全血及BALF中EOS数量,其余作用不明显;1、2号可减少肺组织炎症面积,强弱顺序为1>2。结论 1、2、3号灌胃给药对大鼠过敏均有明显的拮抗作用,综合各项指标,活性强弱顺序为1>2>3。

关键词：葫芦茶有效部位 IgE介导I型过敏反应炎症

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RBPJ与KyoT_2真核表达载体的构建与鉴定

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现代肿瘤医学 2007年第12期15卷 1704-1707页

作者：尹郸丹梁英民韩骅侯丽宏王耀春胡兴斌张萍康志杰时宏伟第四军医大学唐都医院血液内科陕西西安710038 第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室陕西西安710032 第四军医大学电镜中心陕西西安710032

目的:构建含有myc-RBPJ(R218H)(recombination binding protein-J)、myc-KyoT2融合基因片段的质粒,并在真核细胞中表达、鉴定。方法:由本科室保存质粒酶切分别得到RBPJ(R218H)和myc-KyoT2基因片段,将RBPJ(R218H)基因插入载体PCMV-myc中,获得融合基因myc-RBP-J(R218H),将myc-RBPJ(R218H)和myc-KyoT2插入真核表达载体pIRES2-EGFP,构建真核表达载体myc-RBPJ(R218H)-IRES2-EGFP、myc-KyoT2-IRES2-EGFP。以其瞬时转染HEK293细胞,应用免疫印迹与流式细胞术检测融合蛋白与绿色荧光蛋白的表达。结果:正确获得myc-RBPJ(R218H)融合基因,DNA序列分析表明所构建的含myc-RBPJ(R218H)、myc-KyoT2融合基因的质粒与设计相同,myc-RBPJ(R218H)、myc-KyoT2融合蛋白与绿色荧光蛋白均正确表达。结论:成功构建了含有myc-RBPJ(R218H)、myc-KyoT2融合基因的真核表达载体,并在真核细胞中正确表达,为进一步研究慢性粒细胞白血病与Notch信号转导通路之间的关系奠定了基础。

关键词：慢性粒细胞白血病 Notch RBPJ lim蛋白/KyoT2 GFP/绿色荧光蛋白融合蛋白真核表达

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