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茶树Ⅱ型核糖体失活蛋白基因CsRIP1和CsRIP2的克隆与表达分析

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林业科学 2015年第2期51卷 147-153页

作者：袁红雨马宁杨会敏庞秋芬谢素霞程琳信阳师范学院生命科学学院信阳464000 红河学院生物科学与技术学院蒙自661100

【目的】克隆茶树Ⅱ型核糖体失活蛋白基因CsRIP1和CsRIP2,探讨CsRIPs基因的组织表达特异性以及假眼小绿叶蝉和机械伤害处理对其表达的影响。【方法】Cs-Ev2(Gen Bank登录号:GH618807)为一受假眼小绿叶蝉取食诱导的茶树Ⅱ型核糖体失活蛋... 详细信息

【目的】克隆茶树Ⅱ型核糖体失活蛋白基因CsRIP1和CsRIP2,探讨CsRIPs基因的组织表达特异性以及假眼小绿叶蝉和机械伤害处理对其表达的影响。【方法】Cs-Ev2(Gen Bank登录号:GH618807)为一受假眼小绿叶蝉取食诱导的茶树Ⅱ型核糖体失活蛋白基因的c DNA片段,利用RACE技术克隆该基因的全长c DNA,命名为CsRIP1(Gen Bank登录号:FJ648831)。利用RT-PCR技术从茶树子叶中分离出一个新的Ⅱ型核糖体失活蛋白基因的c DNA序列,命名为CsRIP2(Gen Bank登录号:GU951535)。利用PCR技术克隆CsRIPs的基因组序列。设计基因特异性引物,利用Real-time qRT-PCR技术检测CsRIPs的组织表达特异性,以及在叶片中假眼小绿叶蝉和机械伤害处理对其表达的影响。【结果】CsRIP1和CsRIP2的序列一致性为98%,都含有一个1 713 bp的开放阅读框,编码570个氨基酸残基,但是它们具有不同的3'非翻译区。CsRIP1和CsRIP2由信号肽序列、1个RIP结构域、链接肽和2个RBL结构域组成。CsRIPs与其他Ⅱ型RIPs具有较高的序列一致性,Ⅱ型RIPs保守的氨基酸残基,包括构成A链N-糖苷酶活性位点的氨基酸残基、B链中形成寡糖链结合位点的氨基酸残基、形成链间和链内二硫键的半胱氨酸残基以及RBL结构域中的Qx W基序,均出现在CsRIPs相应的位置上。系统进化树分析结果显示,同一物种的Ⅱ型RIPs首先聚类合并,2个CsRIP与樟的Ⅱ型RIPs聚为一支。比较CsRIPs的c DNA序列和基因组序列,发现它们的基因组序列不含内含子。CsRIPs基因的表达具有组织特异性,CsRIP1在叶片中的表达水平最高,在子叶中的表达水平最低,而CsRIP2在子叶中的表达水平最高,在叶片中的表达水平最低。在叶片中,CsRIP1和CsRIP2的表达均受假眼小绿叶蝉取食的强烈诱导,并且其表达水平随着取食时间的增加而逐渐增加,取食48 h后,它们的表达水平大约分别是对照的120和100倍。在叶片中,CsRIPs基因的表达也受机械伤害处理的诱导,CsRIP1的转录水平在处理后6 h达到最大值,CsRIP2在处理后6 h表达水平显著升高,12 h达到最大值。【结论】克隆茶树的2个Ⅱ型核糖体失活蛋白基因,它们可能参与茶树的防卫反应,且已发生亚功能化。进一步分析这2个基因的启动子,可以加深对CsRIPs基因转录调控以及RIPs的生物学功能的理解。

关键词：茶树假眼小绿叶蝉 Ⅱ型核糖体失活蛋白 CsRIP1 CsRIP2

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茶树CsCBF1基因克隆和转录活性分析

西北植物学报 2013年第9期33卷 1717-1723页

作者：袁红雨朱小佩曾威杨会敏孙楠谢素霞程琳信阳师范学院生命科学学院河南信阳464000 红河学院生命科学与技术学院云南蒙自661100

采用RACE技术克隆了一个受冷诱导的茶树CBF基因全长cDNA,命名为CsCBF1(GenBank登录号为EU563238)。CsCBF1cDNA全长序列为1 211bp,开放阅读框编码259个氨基酸。氨基酸序列分析表明,CsCBF1具有CBF家族典型的保守结构域,与其他植物的CBF具... 详细信息

采用RACE技术克隆了一个受冷诱导的茶树CBF基因全长cDNA,命名为CsCBF1(GenBank登录号为EU563238)。CsCBF1cDNA全长序列为1 211bp,开放阅读框编码259个氨基酸。氨基酸序列分析表明,CsCBF1具有CBF家族典型的保守结构域,与其他植物的CBF具有较高的相似性;与拟南芥、辣椒和橡胶树编码的CBF相似性分别为56%、63%和56%。亚细胞定位结果表明,CsCBF1位于细胞核内。分别将10个CsCBF1缺失突变体与GAL4DNA结合域融合的结果显示,CsCBF1的羧基末端酸性结构域(第137位氨基酸至259位氨基酸)在酵母中具有转录激活活性。实时定量RT-PCR分析表明,CsCBF1基因受低温的快速诱导表达。

关键词：茶树 CBF 表达分析亚细胞定位

白细胞介素-6与脑源性神经营养因子对大鼠神经前体细胞向多巴胺神经元分化的诱导作用

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郑州大学学报（医学版） 2009年第1期44卷 93-95页

作者：赵荷剑柴立辉吴素霞高林贺维亚河南大学附属淮河医院神经内科开封475001 河南大学医学院开封475004

目的:探讨细胞因子在体外诱导胎鼠纹状体神经前体细胞向多巴胺(dopamine,DA)神经元分化的机制,为临床上应用细胞移植替代治疗诸如帕金森病等神经精神性疾病提供理论依据。方法:分离获取胎龄14.5d的SD大鼠纹状体神经前体细胞,白细胞介素-... 详细信息

目的:探讨细胞因子在体外诱导胎鼠纹状体神经前体细胞向多巴胺(dopamine,DA)神经元分化的机制,为临床上应用细胞移植替代治疗诸如帕金森病等神经精神性疾病提供理论依据。方法:分离获取胎龄14.5d的SD大鼠纹状体神经前体细胞,白细胞介素-6(IL-6)(10μg/L)和脑源性神经营养因子(BDNF)(50μmol/L)分别或联合对胎鼠纹状体神经前体细胞进行诱导。诱导2周后观察细胞的形态变化;免疫细胞化学染色检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)和酪氨酸羟化酶(TH)的表达,RT-PCR检测NSE、TH及转录因子Nurr1和Lmx1b mRNA的表达。结果:免疫细胞化学染色结果表明IL-6处理组、BDNF处理组及2者联合处理组均较对照组NSE和TH阳性率高,且IL-6和BDNF联合处理组较单用IL-6或BDNF处理组的细胞阳性率高(P<0.05);RT-PCR结果显示对照组仅有NSE的表达,而IL-6处理组、BDNF处理组及2者联合处理组均有NSE、Nurr1、Lmx1b和TH mRNA的表达。结论:IL-6和BDNF均可在体外诱导胎鼠纹状体神经前体细胞向DA神经元分化,并具有协同作用。

关键词：神经前体细胞多巴胺神经元白细胞介素-6 脑源性神经营养因子大鼠

不同气候情景下华北平原蒸发与径流时空变化分析

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气候变化研究进展 2012年第6期8卷 409-416页

作者：莫兴国孟德娟刘苏峡林忠辉夏军中国科学院地理科学与资源研究所陆地水循环及地表过程重点实验室北京100101 中国科学院大学北京100049

基于中国气象局国家气候中心生成的IPCC第四次评估报告中23种气候模式的情景集成数据,采用Schreiber公式和Thornthwaite方法计算实际蒸发和径流,分析了2001—2060年SRES A1B、A2和B1这3种情景下,华北平原气温、降水、蒸发与径流的时空... 详细信息

基于中国气象局国家气候中心生成的IPCC第四次评估报告中23种气候模式的情景集成数据,采用Schreiber公式和Thornthwaite方法计算实际蒸发和径流,分析了2001—2060年SRES A1B、A2和B1这3种情景下,华北平原气温、降水、蒸发与径流的时空变化。结果表明:未来华北平原气温呈升高趋势,且冬半年升温幅度大于夏半年;降水亦呈增加趋势,而冬半年降水增加幅度小于夏半年;与此相应,华北平原蒸发和年径流呈增加趋势,增幅和空间差异随时间推移而增大,到2041—2060年蒸发将上升7.1%～9.4%,径流将增加8.7%～10.7%。

关键词：预估气温降水蒸发径流 Schreiber公式 Thornthwaite方法

三角梅7个品种的矿质元素的分析研究(英文)

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热带作物学报 2011年第8期32卷 1404-1410页

作者：徐夙侠黄青云林春松许文宝曾碧玉福建省亚热带植物研究所生理与生化重点实验室福建厦门361006

三角梅在食品保健环保方面的价值日渐引起注意。本研究用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)对7个三角梅栽培种盛花期的微量元素和大量元素在花和叶中的分布特点作了调查,以期筛选出适合食用和园林环保不同用途的品种。结果表明有益... 详细信息

三角梅在食品保健环保方面的价值日渐引起注意。本研究用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)对7个三角梅栽培种盛花期的微量元素和大量元素在花和叶中的分布特点作了调查,以期筛选出适合食用和园林环保不同用途的品种。结果表明有益健康的元素和重金属元素积累在品种间存在显著差异。叶中重金属含量最高的品种是***‘Thimma’(B.p),其次是***‘S’(B.g‘S’),重金属积累最少的是B.‘Raspberryice’(B.‘R’)的叶.而花中重金属积累最多的品种是***‘Thimma’(B.p),最少的是***‘Alba’(B.g‘A’).而主要有益元素钙、锌和铁含量最高的品种分别是B.g‘M’和B.b‘C’的花中钙含量最高,B.b‘C’和B.‘Z’的花中以及B.p-n的叶中锌含量最高,B.‘Z’的花和B.'R'的叶中铁含量最高。综合考虑,三角梅品种B.'R'的花比较适合用于在食品保健业的开发而品种B.p更适合于种植在高含量铅、镉、砷等重金属污染的环境用于生物环境修复。

关键词：三角梅 ICP—OES 微量元素大量元素

用斜率和曲率湿周法推求河道最小生态需水量的比较

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地理学报 2006年第3期61卷 273-281页

作者：刘苏峡莫兴国夏军刘昌明林忠辉门宝辉吉利娜中国科学院地理科学与资源研究所陆地水循环与地表过程重点实验室北京100101 中国科学院地理科学与资源研究所生态网络观测与模拟重点实验室北京100101

从湿周-流量曲线临界点的两种不同确定准则入手,分析湿周法推求河道内最小生态需水量(minimumecologicalinstreamflowrequirements,简称MEIFR)的不确定性。假设河道呈三角形断面和均匀流,得到湿周法的解析解表达式。表达式显示斜率法(... 详细信息

从湿周-流量曲线临界点的两种不同确定准则入手,分析湿周法推求河道内最小生态需水量(minimumecologicalinstreamflowrequirements,简称MEIFR)的不确定性。假设河道呈三角形断面和均匀流,得到湿周法的解析解表达式。表达式显示斜率法(曲线上斜率为1)和曲率法(曲线上曲率最大)二者所得的MEIFR结果迥异。当斜率法取斜率为0.39时,其相应的流量与曲率法结果一致。MEIFR对斜率临界值非常敏感,斜率法中的斜率临界值难以确定,相比而言,曲率法更可靠。这用近似具有三角形断面的南水北调西线一期工程调水区流域的实际数据得到证实。根据我们在该区实地观测和收集的6条河35个河道断面的水深和水宽资料,用解析解估算出各断面的MEIFR。曲率法所估算的MEIFR结果为多年平均流量的2.5%￣23.7%,大部分数据落在Tennant法的10%￣30%的范围。斜率法为11%￣105.7%,普遍偏大,超过这个范围。虽然采用较小的斜率临界点可使斜率法的估算结果变小,然而到底斜率临界点应取何值存在较大的不确定性。这进一步说明,在无法获得一个确定的斜率临界值的情况下,湿周法估算MEIFR宜采用曲率法确定临界点。本文的结果基于理想情况,更普遍的结论有待于对更多种河道断面的探讨。

关键词：河道内最小生态需水量南水北调西线工程湿周法不确定性解析解

超声波萃取番橄榄挥发油化学成分的GC-MS分析

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热带作物学报 2010年第10期31卷 1840-1845页

作者：林春松徐夙侠章宁黄青云陈菲张文惠福建省亚热带植物研究所福建省亚热带植物生理生化重点公共实验室福建厦门361006

采用超声波法萃取番橄榄不同时期的果实和叶片挥发油,用气相色谱-质谱法对挥发油中各种化学成分进行分析和鉴定。共鉴定出48个化合物,其中37个成分为在该植物中首次报道。其果实挥发油主要成分有:1R-α-蒎烯,22,23-二氢豆甾醇,β-蒎烯,2... 详细信息

采用超声波法萃取番橄榄不同时期的果实和叶片挥发油,用气相色谱-质谱法对挥发油中各种化学成分进行分析和鉴定。共鉴定出48个化合物,其中37个成分为在该植物中首次报道。其果实挥发油主要成分有:1R-α-蒎烯,22,23-二氢豆甾醇,β-蒎烯,2,2'-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚),维生素E;叶片挥发油主要成分有:维生素E,22,23-二氢豆甾醇,1R-α-蒎烯,三十一烷,植醇,β-石竹烯。黄熟的果实中萃取的挥发油的总量明显高于青果,而不同时期的绿叶中萃取的挥发油总量则较为接近。

关键词：番橄榄超声波法挥发油气相色谱-质谱

重组人血管内皮抑制素联合多西他赛和顺铂方案新辅助化疗治疗晚期上皮性卵巢癌的临床疗效观察

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中华内分泌外科杂志 2018年第2期12卷 158-162页

作者：李苏霞林蓓蓓陈素秀浙江省温州医科大学附属第一医院全科医学科温州325000

目的探讨重组人血管内皮抑制素（endostatin，ES）联合多西他赛和顺铂方案新辅助化疗治疗晚期上皮性卵巢癌的临床疗效。方法将2012年4月至2014年4月浙江温州医科大学附属第一医院的晚期卵巢癌患者76例用随机数字表法分为观察组和对照组... 详细信息

目的探讨重组人血管内皮抑制素（endostatin，ES）联合多西他赛和顺铂方案新辅助化疗治疗晚期上皮性卵巢癌的临床疗效。方法将2012年4月至2014年4月浙江温州医科大学附属第一医院的晚期卵巢癌患者76例用随机数字表法分为观察组和对照组，术前均行新辅助化疗，对照组采用多西他赛和顺铂（TP）方案，观察组采用ES联合TP方案。比较2组临床疗效、手术及远期生存情况。结果所有研究对象均顺利完成3个周期化疗，观察组白细胞下降程度、食欲减退、发热发生率均高于对照组，2组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；所有研究对象在化疗后CA125、肿瘤负荷和腹腔积液深度均出现明显下降，化疗前后差异均有统计学意义（P〈0．05）；2组在术中腹水量、出血量、手术时间、住院天数比较差异无统计学意义（P〉0．05）。观察组残留病灶大小≤2cm占比为84．2％，明显高于对照组的60．5％，且2者差异有统计学意义（P〈0．05）。对照组和观察组1、3年总生存率分别为84．2％、63．1％和86．8、60．5％；2组总生存率差异无统计学意义（γ2=0．207，P=0．649），对照组和观察组1、3年无疾病进展生存时间分别为89．4％、68．4％和94．7％、76.3％，2组无疾病进展生存率比较差异有统计学意义（γ2=4．042，P=0．040）。结论ES联合TP方案治疗晚期卵巢癌是安全有效的。可提高肿瘤减灭术切净率，提高肿瘤局部控制率。

关键词：晚期卵巢癌重组人血管内皮抑制素新辅助化疗预后

飞秒激光辅助的微创板层角膜移植术治疗完成期圆锥角膜的安全性和有效性

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中华眼科杂志 2023年第4期59卷 288-294页

作者：刘明娜李娜田歌陈彤林越李素霞亓晓琳史伟云高华山东第一医科大学附属眼科研究所、山东第一医科大学附属眼科医院(山东省眼科医院)山东省眼科学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地、山东第一医科大学眼科学院济南250021

目的评估飞秒激光辅助的微创板层角膜移植术(FL-MILK)治疗完成期圆锥角膜的初步安全性和有效性。方法病例系列研究。前瞻性连续纳入2017年8月至2020年4月于山东省眼科医院行FL-MILK的完成期圆锥角膜患者。采用飞秒激光制作受体角膜基质... 详细信息

目的评估飞秒激光辅助的微创板层角膜移植术(FL-MILK)治疗完成期圆锥角膜的初步安全性和有效性。方法病例系列研究。前瞻性连续纳入2017年8月至2020年4月于山东省眼科医院行FL-MILK的完成期圆锥角膜患者。采用飞秒激光制作受体角膜基质囊袋和供体板层角膜。将供体板层角膜折叠植入受体角膜基质囊袋后展开。观察指标包括最佳矫正视力、角膜前表面3 mm平均曲率、角膜中央前后表面高度、中央角膜厚度、角膜形变幅度比值、硬度指数和角膜内皮细胞密度。术后1、12、24个月进行随访。结果共纳入患者33例(35只眼),其中男性26例,女性7例,年龄为(20.34±5.24)岁。33例(35只眼)和25例(27只眼)分别完成术后12和24个月的随访。随访期间所有患者均未出现感染、上皮植入、同种异体角膜移植免疫排斥等并发症。与术前相比,术后患者的角膜中央前表面高度(P0.05)。结论飞秒激光辅助的微创板层角膜移植术治疗完成期圆锥角膜安全有效,该手术将为圆锥角膜提供一种新的安全的治疗方法。

关键词：圆锥角膜角膜移植最小侵入性外科手术激光,飞秒有效性研究(主题)