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Agricultural Sciences in China 2009年第9期8卷 1143-1147页

作者： zhanG Tao HUANG Hui-ling zhanG Shuang LU Ping HU Ge suo zhan-wei JIANG Dai-xun MU Xiang Beijing Key Laboratory of Traditional Chinese Veterinary Medicine Beijing University of Agriculture Beijing 102206 P.R.China College of Animal Science and Technology Hebei Agricultural University Baoding 071001 P.R.China Institute of Zoology Chinese Academy of Sciences Beijing 100101 P.R.China Beijing Key Laboratory of New Technology in Agricultural Application Beijing University of Agriculture Beijing 102206 P.R.China

To explore the relationship between the heat-clearing and detoxicating functions and the bacteriostatic actions of berberine hydrochloride （Ber. H）, chlorogenic acid （Chlo. A）, and baicalin （Bai）, their concentrations in rabbit body fluid were compared with their minimal inhibitory concentrations （MICs）. Their concentrations in rabbit blood and tissue fluid were determined by reversed-phase high performance liquid chromatography, and their MICs to Escherichia coli were determined by tube dilution method. The results showed that the peak concentrations of Ber. H, Chlo. A, and Bai in rabbit blood were 3.2, 5.03, and 7.63 μg mL^-1, and in rabbit tissue fluid were 0.12, 0.11, and 0.12 μg mL^-1, respectively. Their MICs to E. coli were, respectively, 1.0×10^3, 3.75 × 10^3, and 6.75 ×10^3μg mL^-1, which were far higher than the concentrations in rabbit body fluids. This study indicates that Ber. H, Chlo. A, and Bai have weak bacteriostatic actions and do not reach their effective inhibitory concentrations in rabbit body fluids, and their heat-clearing and detoxicating functions are independent on the bacteriostatic actions.

关键词： berberine chlorogenic acid baicalin plasma concentration tissue fluid concentrations MIC

刀豆蛋白A诱导大鼠小肠黏膜微血管内皮细胞分泌IFN-γ的研究

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解剖学报 2007年第4期38卷 486-488页

作者：尹龙胡格索占伟段慧琴张涛穆祥北京农学院动物科学和技术系北京102206 中国农业大学动物医学院北京100094

目的探讨刀豆蛋白A(ConA)能否诱导肠黏膜微血管内皮细胞分泌IFN-γ。方法采用双抗夹心ELISA法检测细胞培养上清液中的IFN-γ的含量。结果ConA能极显著地激活大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌IFN-γ,5.0mg/L ConA的激活作用有时间依赖性,但1... 详细信息

目的探讨刀豆蛋白A(ConA)能否诱导肠黏膜微血管内皮细胞分泌IFN-γ。方法采用双抗夹心ELISA法检测细胞培养上清液中的IFN-γ的含量。结果ConA能极显著地激活大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌IFN-γ,5.0mg/L ConA的激活作用有时间依赖性,但10.0mg/L ConA激活作用未表明有时间依赖性;5.0mg/L ConA组和10.0mg/L ConA组间无显著性差异。结论ConA能激活大鼠小肠黏膜微血管内皮细胞分泌IFN-γ。

关键词： γ-干扰素刀豆蛋白A 肠粘膜微血管内皮细胞 ELISA法大鼠

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在Ⅰ型代谢型谷氨酸受体诱发痛觉超敏中的作用

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中国药理学通报 2017年第2期33卷 171-174页

作者：薛曼杨云惠索占伟杨娴胡晓东兰州大学药学院分子药理研究所甘肃兰州730000

目的探讨Ⅰ型代谢型谷氨酸受体(mGluRs)的痛觉调制作用与蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2(Src homology-2 domain-containing phosphatase-2)的关系。方法以免疫共沉淀法,研究小鼠脊髓背角SHP-2与Ⅰ型mGluRs之间的相互作用;通过测定缩足阈值,观察... 详细信息

目的探讨Ⅰ型代谢型谷氨酸受体(mGluRs)的痛觉调制作用与蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2(Src homology-2 domain-containing phosphatase-2)的关系。方法以免疫共沉淀法,研究小鼠脊髓背角SHP-2与Ⅰ型mGluRs之间的相互作用;通过测定缩足阈值,观察SHP-2抑制剂NSC-87877或SHP-2的无活性突变体SHP-2(C459S)对Ⅰ型mGluRs激动剂DHPG(50 nmol)诱发的痛觉超敏的影响。结果抗m GluR5的特异性抗体,能够从脊髓背角中免疫共沉淀SHP-2,而抗mGluR1的特异性抗体则无法沉淀出SHP-2;以NSC-87877(6 nmol)或SHP-2(C459S)抑制SHP-2的活性,可有效缓解DHPG诱发的痛觉超敏。结论 SHP-2与mGluR5存在分子间的相互结合,SHP-2的激活可能参与Ⅰ型mGluRs的痛觉调制过程。

关键词： mGluR1/5 SHP-2 磷酸酶脊髓背角 DHPG NSC-87877

绿原酸通过抑制AMPA受体的突触表达缓解慢性炎性疼痛

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中国药理学通报 2021年第9期37卷 1251-1256页

作者：李银霞高敏白雪刘燕妮张亦涵索占伟兰州大学药学院分子药理研究所甘肃兰州730000

目的研究绿原酸(chorogenic acid,CGA)对完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)所诱发的慢性疼痛症状的影响,并通过检测CGA对炎性小鼠脊髓背角AMPA受体突触表达的影响,探讨其作用机制。方法小鼠后足底皮下注射CFA,以诱导机械... 详细信息

目的研究绿原酸(chorogenic acid,CGA)对完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)所诱发的慢性疼痛症状的影响,并通过检测CGA对炎性小鼠脊髓背角AMPA受体突触表达的影响,探讨其作用机制。方法小鼠后足底皮下注射CFA,以诱导机械性痛觉超敏和热痛觉过敏;鞘内给予CGA,实时测定机械性缩足阈值(PWT)及热刺激潜伏期(PWL)的变化;分离脊髓背角,应用免疫印迹法检测AMPA受体亚基GluA1、GluA2的突触表达和磷酸化水平。结果鞘内注射CGA可剂量依赖性地提高疼痛小鼠的PWT和PWL;高剂量(200 ng)CGA对正常小鼠基础痛阈、运动机能并未产生明显影响;中剂量(100 ng)CGA可有效逆转CFA所诱发的GluA1亚基的突触表达亢进,并明显降低炎性小鼠GluA1-Ser845的磷酸化水平,但未影响GluA1-Ser831的磷酸化。结论CGA可通过特异性逆转脊髓背角GluA1-Ser845的过磷酸化、降低GluA1的突触表达而产生镇痛效应。

关键词：绿原酸 AMPA受体 GluA1亚基磷酸化炎性疼痛脊髓背角

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产单核细胞李斯特菌溶血素的纯化

中国预防兽医学报 2008年第8期30卷 605-607页

作者：陈希徐亮胡格索占伟许剑琴穆祥中国农业大学动物医学院北京100094 北京农学院动物科学技术系北京102206

本文旨在探讨产单核细胞李斯特菌溶血素(LLO)的纯化方法。将产单核细胞李斯特菌(LM)接种于BHI液体培养基中培养,得到含LLO的培养液上清(LLO1),再经70%饱和硫酸铵沉淀、透析,得到溶血素粗提物(LLO2),LLO2经凝胶过滤层析,聚乙二醇浓缩,得... 详细信息

本文旨在探讨产单核细胞李斯特菌溶血素(LLO)的纯化方法。将产单核细胞李斯特菌(LM)接种于BHI液体培养基中培养,得到含LLO的培养液上清(LLO1),再经70%饱和硫酸铵沉淀、透析,得到溶血素粗提物(LLO2),LLO2经凝胶过滤层析,聚乙二醇浓缩,得到活性峰收集液(LLO3)。通过以上三步的纯化,溶血素的比活提高160倍,纯化蛋白在SDS-PAGE中呈现一条带,达电泳级纯度。

关键词：产单核细胞李斯特菌溶血素纯化

金丝桃苷对SLT-Ⅱe诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌PGI2、TXA2及PAF的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2007年第4期35卷 6-10页

作者：周宏超范光丽穆祥胡格索占伟西北农林科技大学动物科技学院北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室北京昌平102206 北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室

通过检测金丝桃苷对SLT-Ⅱe诱导的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌前列环素(PGI2)、血栓素(TXA2)及血小板活化因子(PAF)的影响,探索中药复方有效成分金丝桃苷对仔猪水肿病的疗效机制。将培养的肠黏膜微血管内皮细胞分为阴性对照组、阳性... 详细信息

通过检测金丝桃苷对SLT-Ⅱe诱导的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌前列环素(PGI2)、血栓素(TXA2)及血小板活化因子(PAF)的影响,探索中药复方有效成分金丝桃苷对仔猪水肿病的疗效机制。将培养的肠黏膜微血管内皮细胞分为阴性对照组、阳性对照组、不同质量浓度金丝桃苷处理组等6个组,采用ELISA法测定了培养3,6,9和12 h时细胞上清液中PGI2、TXA2及PAF质量浓度的变化。结果表明,不同质量浓度金丝桃苷处理组对SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞过量分泌PG12、PAF无明显的抑制作用;1和5μg／mL质量浓度金丝桃苷处理组对SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞TXA2的分泌具有明显的下调作用。南此可见,金丝桃苷通过抑制SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞TXA2的过量分泌,阻止血小板聚集,避免微血栓形成,以达到治疗疾病的目的;金丝桃苷保护大鼠肠黏膜微血管内皮细胞损伤的模型剂量为1和5μg／mL。

关键词： SLT-Ⅱe 肠黏膜微血管内皮细胞前列环素血栓素A2 血小板活化因子

中药成分小檗碱对小鼠2-细胞胚胎体外培养及移植效果的研究

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中国畜牧杂志 2006年第15期42卷 16-19页

作者：高建明傅文栋陈武穆祥索占伟北京农学院动物科学技术系北京102206

以添加抗菌素的mCZB液为对照组,筛选比较了中药有效成分小檗碱不同浓度对小鼠2-细胞胚胎体外培养效果的影响,并计数所培养的孵化胚胎细胞数目,观察中药有效成分对胚胎细胞数目增殖的作用;通过将体外培养发育的囊胚进行移植,进一步验证... 详细信息

以添加抗菌素的mCZB液为对照组,筛选比较了中药有效成分小檗碱不同浓度对小鼠2-细胞胚胎体外培养效果的影响,并计数所培养的孵化胚胎细胞数目,观察中药有效成分对胚胎细胞数目增殖的作用;通过将体外培养发育的囊胚进行移植,进一步验证其对小鼠胚胎移植效果和产仔发育的影响。结果表明:小檗碱最佳浓度为0.10μg/mL,120h孵化胚胎发育率和孵化胚胎细胞数目(89.9%,83.7±9.10)极显著高于对照组(50.7%,69.5±7.14)(P0.05)。其结果说明,小檗碱对体外胚胎生长发育和细胞增殖有促进作用,对胚胎附植及初生仔鼠无不良影响。

关键词：畜牧学小檗碱 2-细胞胚胎体外培养细胞计数胚胎移植小鼠

小檗碱、白头翁素对肠黏膜微血管内皮细胞E-selectin表达的影响

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黑龙江畜牧兽医 2011年第6期 8-10页

作者：张永东段慧琴胡格索占伟穆祥北京农业职业学院北京102442 北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室北京102206

为了观察内毒素即细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对肠黏膜微血管内皮细胞(RIMECs)表面E-selectin表达的影响及小檗碱和白头翁素对E-selectin表达的调控作用,试验以体外培养的肠黏膜微血管内皮细胞为模型,采用免疫组化SP法检测不同... 详细信息

为了观察内毒素即细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对肠黏膜微血管内皮细胞(RIMECs)表面E-selectin表达的影响及小檗碱和白头翁素对E-selectin表达的调控作用,试验以体外培养的肠黏膜微血管内皮细胞为模型,采用免疫组化SP法检测不同浓度LPS(10μg/mL、5μg/mL、1μg/mL)、10μg/mL小檗碱、10μg/mL白头翁素刺激6 h后及10μg/mL小檗碱、10μg/mL白头翁素分别预孵1 h后加入1μg/mLLPS刺激6 h细胞表面E-selectin的表达情况。结果表明:E-selec-tin在正常RIMECs表面不表达,LPS刺激后E-selectin表达增加,不同浓度LPS对E-selectin表达无显著差异;白头翁素和小檗碱单独作用后内皮细胞E-selectin表达呈弱阳性,小檗碱和白头翁素预孵组E-selectin表达减少,经灰度分析与LPS组比较差异极显著。说明LPS可诱导E-selectin表达显著增加,小檗碱和白头翁素可下调LPS诱导的E-selectin表达增加,提示抑制内皮细胞E-se-lectin表达,从而抑制白细胞的贴壁和黏附是小檗碱和白头翁素抗炎机制之一。

关键词：肠黏膜微血管内皮细胞 E-selectin LPS 小檗碱白头翁素

LPS和LT对体外大鼠肠粘膜微血管内皮细胞的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2006年第8期34卷 31-34页

作者：王新谭建华索占伟刘金玲杜绍范穆祥韦旭斌吉林大学畜牧兽医学院中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130062 北京农学院动物科学系北京昌平102206 莱阳农学院外语系山东青岛266109 沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110161

将大鼠肠粘膜微血管内皮细胞分为空白对照组、BSA对照组、LPS1组、LPS2组、LT 1组和LT 2组6个组,分别用维持培养液,含50μg/mL BSA、1或10μg/mL LPS、10或50μg/mL LT的培养液静置培养12 h,研究不同浓度LPS和LT对体外大鼠肠粘膜微血管... 详细信息

将大鼠肠粘膜微血管内皮细胞分为空白对照组、BSA对照组、LPS1组、LPS2组、LT 1组和LT 2组6个组,分别用维持培养液,含50μg/mL BSA、1或10μg/mL LPS、10或50μg/mL LT的培养液静置培养12 h,研究不同浓度LPS和LT对体外大鼠肠粘膜微血管内皮细胞形态及NO分泌量的影响,并确定LPS和LT致大鼠肠粘膜微血管内皮细胞损伤的模型剂量。结果表明,LPS可使细胞长宽比增大,间隙变宽,而LT可使细胞肿大,排列紊乱;各浓度的LPS和LT均能引起肠粘膜微血管内皮细胞的NO分泌量升高,但1μg/mL LPS与50μg/mL LT的作用更明显;LPS和LT致大鼠肠粘膜微血管内皮细胞损伤的模型剂量分别是1和50μg/mL。

关键词：肠粘膜微血管内皮细胞 LPS LT

SLT-Ⅱe对大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌NO、ET-1、P-选凝素、sICAM-1及TNF-α的影响

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中国兽医科学 2009年第8期39卷 738-742页

作者：周宏超索占伟范光丽刘钟杰穆祥西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室北京102206 中国农业大学动物医学院北京100094

为探索肠黏膜微血管内皮细胞在仔猪水肿病发生机制中的作用,将培养的肠黏膜微血管内皮细胞分为对照组、不同浓度SLT-Ⅱe处理组等5个组,采用ELISA法测定了培养3、6、9和12 h时细胞培养上清液中NO、ET-1、P-选凝素、sICAM-1及TNF-α浓度... 详细信息

为探索肠黏膜微血管内皮细胞在仔猪水肿病发生机制中的作用,将培养的肠黏膜微血管内皮细胞分为对照组、不同浓度SLT-Ⅱe处理组等5个组,采用ELISA法测定了培养3、6、9和12 h时细胞培养上清液中NO、ET-1、P-选凝素、sICAM-1及TNF-α浓度的变化。结果表明,1、10μg/mL SLT-Ⅱe诱导内皮细胞作用12 h时NO的分泌浓度是对照组NO分泌浓度的3倍。1μg/mL SLT-Ⅱe作用12 h时ET-1、P-选凝素、sICAM-1及TNF-α的浓度分别是相应对照组的4.6、2.8、2.8、1.8倍。由此可见,SLT-Ⅱe通过诱导肠黏膜微血管内皮细胞NO、ET-1、P-选凝素、sICAM-1及TNF-α的过量分泌,NO/ET-1比值下降,引起肠道微循环障碍,炎症反应,导致水肿病的发生。SLT-Ⅱe诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞损伤的最佳模型剂量为1μg/mL。

关键词：志贺样毒素Ⅱ型变异体肠黏膜微血管内皮细胞一氧化氮内皮素-1 P-选凝素可溶性细胞间黏附分子-1 肿瘤坏死因子-α