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Ratiometric fluorescence immunoassay of SARS-CoV-2 nucleocapsid protein via Si-FITC nanoprobe-based inner filter effect

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Nano Research 2023年第4期16卷 5383-5390页

作者： Guobin Mao Yang Yang Shijie Cao silu ye Yifang Li Wei Zhao Hongwei An Yingxia Liu Junbiao Dai Yingxin Ma CAS Key Laboratory of Quantitative Engineering Biology Guangdong Provincial Key Laboratory of Synthetic Genomics and Shenzhen Key Laboratory of Synthetic GenomicsShenzhen Institute of Synthetic BiologyShenzhen Institutes of Advanced TechnologyChinese Academy of SciencesShenzhen 518055China Guangxi University of Chinese Medicine Nanning 530001China Shenzhen Key Laboratory of Pathogen and Immunity National Clinical Research Center for infectious diseaseState Key Discipline of Infectious DiseaseShenzhen Third People’s HospitalSecond Hospital Affiliated to Southern University of Science and TechnologyShenzhen 518112China

The global pandemic caused by severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2)virus has necessitated rapid,easy-to-use,and accurate diagnostic methods to monitor the virus infection.Herein,a ratiometric fluorescence enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)was developed using Si-fluorescein isothiocyanate nanoparticles(FITC NPs)for detecting SARSCoV-2 nucleocapsid(N)protein.Si-FITC NPs were prepared by a one-pot hydrothermal method using 3-aminopropyl triethoxysilane(APTES)-FITC as the Si source.This method did not need post-modification and avoided the reduction in quantum yield and stability.The p-nitrophenyl(pNP)produced by the alkaline phosphatase(ALP)-mediated hydrolysis of pnitrophenyl phosphate(pNPP)could quench Si fluorescence in Si-FITC NPs via the inner filter effect.In ELISA,an immunocomplex was formed by the recognition of capture antibody/N protein/reporter antibody.ALP-linked secondary antibody bound to the reporter antibody and induced pNPP hydrolysis to specifically quench Si fluorescence in Si-FITC NPs.The change in fluorescence intensity ratio could be used for detecting N protein,with a wide linearity range(0.01-10.0 and 50-300 ng/mL)and low detection limit(0.002 ng/mL).The concentration of spiked SARS-CoV-2 N protein could be determined accurately in human serum.Moreover,this proposed method can accurately distinguish coronavirus disease 2019(COVID-19)and non-COVID-19 patient samples.Therefore,this simple,sensitive,and accurate method can be applied for the early diagnosis of SARS-CoV-2 virus infection.

关键词： Si-fluorescein isothiocyanate(FITC)nanoparticles ratiometric fluorescent probe severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2) inner filter effect enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)

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Ratiometric fluorescent Si-FITC nanoprobe for immunoassay of SARS-CoV-2 nucleocapsid protein

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Nano Research 2023年第2期16卷 2859-2865页

作者： Guobin Mao silu ye Wen Yin Yang Yang Xinghu Ji Jin He Yingxia Liu Junbiao Dai Zhike He Yingxin Ma CAS Key Laboratory of Quantitative Engineering Biology Guangdong Provincial Key Laboratory of Synthetic Genomics and Shenzhen Key Laboratory of Synthetic GenomicsShenzhen Institute of Synthetic BiologyShenzhen Institutes of Advanced TechnologyChinese Academy of SciencesShenzhen 518055China State Key Laboratory of Agricultural Microbiology College of Life Science and TechnologyHuazhong Agricultural UniversityWuhan 430070China Shenzhen Key Laboratory of Pathogen and Immunity National Clinical Research Center for Infectious DiseaseState Key Discipline of Infectious DiseaseShenzhen Third People's HospitalSecond Hospital Affiliated to Southern University of Science and TechnologyShenzhen 518112China College of Chemistry and Molecular Sciences Wuhan UniversityWuhan 430072China

Coronavirus disease 2019(COVID-19)highlights the importance of rapid and reliable diagnostic assays for the management of virus transmission.Here,we developed a one-pot hydrothermal method to prepare Si-FITC nanoparticles(NPs)for the fluorescent immunoassay of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2)nucleocapsid protein(N protein).The synthesis of Si-FITC NPs did not need post-modification,which addressed the issue of quantum yield reduction during the coupling reaction.Si-FITC NPs showed two distinct peaks,Si fluorescence atλem=385 nm and FITC fluorescence atλem=490 nm.In the presence of KMnO_(4),Si fluorescence was decreased and FITC fluorescence was enhanced.Briefly,in the presence of N protein,catalase(CAT)-linked secondary antibody/reporter antibody/N protein/capture antibody immunocomplexes were formed on microplates.Subsequently,hydrogen peroxide(H_(2)O_(2))and Si-FITC NPs/KMnO_(4)were injected into the microplate together.The decomposition of H_(2)O_(2)by CAT resulted in remaining of KMnO_(4),which changed the fluorescence intensity ratio of Si-FITC NPs.The fluorescence intensity ratio correlated significantly with the N protein concentration ranging from 0.02 to 50.00 ng/mL,and the detection limit was 0.003 ng/mL,which was more sensitive than the commercial ELISA kit with a detection limit of 0.057 ng/mL.The N protein concentration can be accurately determined in human serum.Furthermore,the COVID-19 and non-COVID-19 patients were distinguishable by this method.Therefore,the ratiometric fluorescent immunoassay can be used for SARS-CoV-2 infection diagnosis with a high sensitivity and selectivity.

关键词： Si-FITC nanoparticles ratiometric fluorescent probe SARS-CoV-2 ELISA

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不同运动疗法对乳腺癌病人生存质量及负面情绪影响的网状Meta分析

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循证护理 2024年第9期10卷 1537-1544页

作者：郭梦佳熊怡陶思路叶子翔吴冬梅成都中医药大学护理学院四川610075 电子科技大学成都脑科学研究院临床医院

目的:通过网状Meta分析方法评价运动疗法对乳腺癌病人生存质量、焦虑、抑郁的干预效果。方法:检索PubMed、Web of Science、the Cochrane Library、EMbase、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方数据库及维普数据库建库至2023年8月2... 详细信息

目的:通过网状Meta分析方法评价运动疗法对乳腺癌病人生存质量、焦虑、抑郁的干预效果。方法:检索PubMed、Web of Science、the Cochrane Library、EMbase、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方数据库及维普数据库建库至2023年8月2日有关运动疗法对乳腺癌病人影响的随机对照试验。结果:纳入40篇文献,涉及3848例乳腺癌病人,包括瑜伽、有氧运动、太极拳、八段锦、抗阻运动、有氧联合阻力运动、放松训练7种运动方式,合并了生活质量、焦虑和抑郁3个结局指标。网状Meta结果显示,在改善生存质量和抑郁方面,太极拳运动干预效果优于其他运动方式;在改善焦虑方面,放松训练干预效果优于其他运动方式。结论:现有证据显示,太极拳是改善乳腺癌生存质量和抑郁的有效运动,放松训练是减轻病人焦虑的有效运动,未来仍需进一步验证此结论。

关键词：乳腺癌网状Meta分析运动疗法生存质量负性情绪太极拳放松训练循证护理

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基于改进YOLOv8s的密集多人脸检测

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软件 2024年第4期45卷 142-146页

作者：孙涵田野孙春凤哈尔滨师范大学物理与电子工程学院黑龙江哈尔滨150025

针对密集场景中多人脸检测存在的漏检率高、检测精度低的问题,提出一种改进的YOLOv8s人脸检测算法。在YOLOv8的骨干网络添加SimAM注意力机制,提高检测模型对于图像内小目标的特征提取能力。将原激活函数silu替换为FReLU函数,扩大特征点... 详细信息

针对密集场景中多人脸检测存在的漏检率高、检测精度低的问题,提出一种改进的YOLOv8s人脸检测算法。在YOLOv8的骨干网络添加SimAM注意力机制,提高检测模型对于图像内小目标的特征提取能力。将原激活函数silu替换为FReLU函数,扩大特征点提取范围,提高小目标检测准确度。引入新的损失函数Wise-IoUv1,解决部分小目标在截取过程中可能出现的低质量问题,进一步提升检测精度。实验结果表明,改进后的算法在自建密集场景人脸数据集上,准确度提升到99.26%,在回归率持平的基础上计算参数无明显上涨,实测漏检率降低26%,有效提升了人脸检测能力。

关键词：人脸检测 YOLOv8 SimAM 密集场景

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RAB10对胰腺癌细胞生物学功能的影响及临床意义

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安徽医科大学学报 2023年第12期58卷 2038-2044页

作者：匡鹏张钦泉程盛董毅王理承张思璐叶家欣马丹丹李中虎张智勇武汉科技大学医学院武汉430070 中国人民解放军中部战区总医院普通外科武汉430070

目的研究RAS癌基因家族成员RAB10在胰腺癌中的表达情况及其对人胰腺癌细胞系SW1990细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法利用癌症基因数据库GEPIA和TCGA中胰腺癌的数据分析RAB10 mRNA在胰腺癌组织中的表达;Cox回归分析RAB10 mRNA... 详细信息

目的研究RAS癌基因家族成员RAB10在胰腺癌中的表达情况及其对人胰腺癌细胞系SW1990细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法利用癌症基因数据库GEPIA和TCGA中胰腺癌的数据分析RAB10 mRNA在胰腺癌组织中的表达;Cox回归分析RAB10 mRNA表达水平与胰腺癌患者预后关系;靶向RAB10的小干扰RNA(RAB10-siRNA)作为沉默组、构建过表达RAB10质粒(RAB10-OE)作为过表达组;使用Q-PCR检测沉默及过表达效果;Western blot实验检测蛋白表达水平;EdU细胞增殖实验、划痕实验、Transwell实验、流式细胞实验分别分析RAB10对SW1990增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。结果胰腺癌组织中RAB10 mRNA的表达量明显高于正常胰腺组织(P<0.05);EdU细胞增殖实验结果显示,RAB10-OE组的SW1990细胞的增殖率明显高于对照组,RAB10-siRNA组SW1990细胞的增殖率低于对照组(P<0.05);Transwell实验和划痕实验结果显示,RAB10-OE组细胞侵袭率及迁移率均高于对照组,RAB10-siRNA组细胞迁移率及侵袭率均低于对照组(P<0.05);流式细胞实验结果显示,RAB10-OE组细胞凋亡率低于对照组,RAB10-siRNA组细胞凋亡率高于对照组(P<0.05);RAB10高表达组生存时间低于RAB10低表达组(P<0.05);单因素Cox回归分析结果显示,临床分级、T分期、M分期及RAB10 mRNA表达水平与胰腺癌患者预后相关(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,RAB10 mRNA的表达水平为影响胰腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论RAB10在胰腺癌组织中高表达,是胰腺癌患者预后的独立危险因素且能够促进胰腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,并抑制胰腺癌细胞的凋亡。

关键词：胰腺癌 RAB10 增殖凋亡迁移侵袭预后

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硅胶键合杯[4]芳烃固定相的合成和核磁共振表征

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物理化学学报 2000年第1期16卷 65-69页

作者：张岩肖湘竹冯钰锜达世禄裘鉴卿叶朝辉中国科学院武汉物理与数学研究所武汉大学化学系武汉430072

杯芳烃（Ｃａｌｉｘａｒｅｎｅｓ）［１］是由苯酚单体通过亚甲基单元连接起来的一类性质稳定的环状低聚物．由于它的独特结构特点以及由此表现出来的特有性能，使之已成为继冠醚和环糊精之后的第三代超分子［２］．近年来，杯芳烃在色... 详细信息

杯芳烃（Ｃａｌｉｘａｒｅｎｅｓ）［１］是由苯酚单体通过亚甲基单元连接起来的一类性质稳定的环状低聚物．由于它的独特结构特点以及由此表现出来的特有性能，使之已成为继冠醚和环糊精之后的第三代超分子［２］．近年来，杯芳烃在色谱中的应用已经引起人们的关注，有关...

关键词：杯芳烃固定相硅胶键合固定相核磁共振

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刑事技术科研创新工作体系建设探索

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刑事技术 2019年第5期44卷 377-382页

作者：孟庆振刘慧念彭斯璐黄星马新赵兴春叶健公安部物证鉴定中心现场物证溯源技术国家工程实验室

刑事技术科研创新工作是刑事技术不断发展的动力和源泉,为刑事技术工作不断解决新的刑侦实战问题、应对新的风险挑战提供科技支撑。本文剖析了刑事技术科研创新工作的重要意义,指出了刑事技术科研创新工作的指导原则,提出了创新工作体... 详细信息

刑事技术科研创新工作是刑事技术不断发展的动力和源泉,为刑事技术工作不断解决新的刑侦实战问题、应对新的风险挑战提供科技支撑。本文剖析了刑事技术科研创新工作的重要意义,指出了刑事技术科研创新工作的指导原则,提出了创新工作体系的基本架构组成。最后,本文以公安部物证鉴定中心为例,指出了建设刑事技术科研创新工作体系的可能路径以及这一体系在实际工作中的建设和应用成效。

关键词：刑事技术科研创新工作体系协同创新应用示范

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铁皮石斛处方辅助治疗肺结核效果的临床观察

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中国医药科学 2015年第10期5卷 7-9页

作者：何思陆梁烨陆高翔李天资陆春雷右江民族医学院附属医院广西百色533000

目的探讨铁皮石斛处方辅助治疗肺结核患者 IL-10、IL-18、OPN 水平变化与治疗效果。方法将2013年5月～2014年3月确诊为浸润性肺结核的76例患者随机分为治疗组和对照组两组，每组38例，治疗组用铁皮石斛处方加西药抗结核药物治疗；对照... 详细信息

目的探讨铁皮石斛处方辅助治疗肺结核患者 IL-10、IL-18、OPN 水平变化与治疗效果。方法将2013年5月～2014年3月确诊为浸润性肺结核的76例患者随机分为治疗组和对照组两组，每组38例，治疗组用铁皮石斛处方加西药抗结核药物治疗；对照组单纯用西药抗结核药物治疗，两组疗程均为6个月。比较两组患者治疗前后的血清白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-18（IL-18）和骨桥蛋白（OPN）水平，并与于2014年3月在本院行健康体检的32例健康组比较。结果两组治疗前血清 IL-10、IL-18、OPN 均值高于健康组（P ＜0.05）；提示浸润性肺结核患者细胞因子水平异常增高，治疗后两组患者 IL-10、IL-18、OPN 均有不同程度降低（P ＜0.05），提示细胞因子水平异常与浸润性肺结核患者临床转归相关；治疗组治疗后血清 IL-10、IL-18均值与健康组比较差异无统计学意义（P ＞0.05），OPN 均值高于健康组（P ＜0.05），对照组治疗后血清 IL-10、IL-18、OPN 均高于健康组（P ＜0.05），提示治疗组对患者免疫损伤的改善作用优于单纯用西药治疗组。结论铁皮石斛处方辅助治疗肺结核对改善患者的细胞因子功能紊乱的治疗效果优于单纯用西药治疗。

关键词：铁皮石斛浸润性肺结核骨桥蛋白白细胞介素

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法医DNA实践中的伦理问题

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中国法医学杂志 2019年第3期34卷 272-274,271页

作者：孙敬彭斯璐苑美青李彩霞权养科孙辉李万水赵兴春叶健公安部物证鉴定中心

法医DNA始终在国际法医物证检验领域中占据核心地位,技术应用早已广泛成熟。近年来,诸多学者开始关注法医DNA伦理学方面的研究,目前该研究还处于初步探索阶段。本文是在伦理学已有学术基础上,从DNA数据库建设和亲子鉴定两个方面对法医DN... 详细信息

法医DNA始终在国际法医物证检验领域中占据核心地位,技术应用早已广泛成熟。近年来,诸多学者开始关注法医DNA伦理学方面的研究,目前该研究还处于初步探索阶段。本文是在伦理学已有学术基础上,从DNA数据库建设和亲子鉴定两个方面对法医DNA伦理学思想应用现状进行了初步探讨,并且参考国内外文献资料对伦理学思想在法医DNA实践中的应用原则进行了阐述,目的在于衡量法医DNA工作是否达到伦理方面的要求,其实践意义将在DNA数据库建设和亲子鉴定中起到重要作用。

关键词：法医DNA伦理学 DNA数据库亲子鉴定伦理学思想知情同意

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YOLOv4口罩检测算法的轻量化改进

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计算机工程与应用 2021年第17期57卷 157-168页

作者：叶子勋张红英西南科技大学信息工程学院四川绵阳621010 西南科技大学特殊环境机器人技术四川省重点实验室四川绵阳621010

针对当前YOLOv4目标检测算法网络模型庞大、特征提取不充分且易受光线环境影响的缺点,提出了一种优化了特征提取网络和一般卷积块的轻量化YOLOv4-Lite网络模型。使用改进的MobileNetv3替换原有的主干特征提取网络,减小了网络模型的参数... 详细信息

针对当前YOLOv4目标检测算法网络模型庞大、特征提取不充分且易受光线环境影响的缺点,提出了一种优化了特征提取网络和一般卷积块的轻量化YOLOv4-Lite网络模型。使用改进的MobileNetv3替换原有的主干特征提取网络,减小了网络模型的参数量,提高了检测精度。提出了使用深度可分离卷积块代替原网络中的普通卷积块,使得模型的参数量进一步降低。结合了标签平滑、学习率余弦退火衰减算法,新增了silu激活函数代替Mobile-Netv3浅层网络的ReLU激活函数,优化了模型的收敛效果。优化了Mosaic数据增强方法,提升了模型的鲁棒性。在人脸口罩佩戴任务中与原算法相比,牺牲了1.68%的mAP,但在检测效率(FPS)上提升约180%。

关键词：口罩检测深度学习 YOLOv4 MobileNetv3 深度可分离卷积

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