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Expression of Recombinant Protein Bovine Prion pCIp264 in COS-7 Cells and Its Detection

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Journal of Life Sciences 2010年第5期4卷 30-36页

作者： Yaozhong Ding Yongsbeng Liu Wenqian Liu Yanping Ma Meng Wang shenghai yang Jie Zhang State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology Key Laboratory of Veterinary Public Health of Ministry of Agriculture Key Laboratory of Animal Virology of Ministry of Agriculture Lanzhou Veterinary Research Institute Chinese Academy of Agricultural Sciences. Lanzhou 730046. China

Bovine spongiform encephalopathy （BSE） is thought to be caused by prions initially derived from sheep scrapie, and epidemiological studies suggest that new viriant form of CJD manifest in Great Britain may be caused by BSE prions. PrP^Sc is thought to pathogenic factor of transmissible spongiform encephalopathy （TSE）, which invariably involve a post-translational modification process of PrPc encoded by the host euchromosome PrP gene during the period it converted into the pathogenic form （PrP^Sc）, PrP is nomal cellular protein which has been found in both neuronal and nonneuronal tissues. Since the crucial infectious event in protein-transmitted diseases is an induced misfolding of prion proteins （PrP^c） catalyzed by already misfolded PrP^Sc, it is of high importance that such collisions are enhanced by two-dimensional diffusion in cell membranes is of high importance compared to three-dimensional diffusion in solution. The level of PrP mRNA in brain is higher than other tissue, but purification of PrPc from rodent has been difficult. To understand the formation of PrP^Sc, it seemed useful to develop a system for produced a large quantities of PrPc since there is no nature source of PrP^c. The pCI-neo mammalian expression vector contains the neomycin phosphtransferase gene which serves as a marker for the selection of stable transfected cells with G418. COS-7 cells constitutively express simian viruse 40 （SV40） T-antigen and support replication of expression plasmids containing the SV40 origin of replication, amplifying the introduced expression cassettes, now become important routine of expression a large number of heterologous gene products. In this paper, the authors used pCI-neo vector to construct a recombnant pCIp264 （cotains mPrP, N-signalpeptide and C-GPI anchor） plasmid to express it in the COS-7 cells and meanwhile detect the expression fusion using IN-ELISA, IN-IFA and western blot, and obtain some approximative nature PrPc.

关键词： Bovine prion protein (boprp) COS-7 cells indirect immunofluorescence assay (IFA)

乙醇钽化学气相沉积制备Ta_2O_5薄膜研究进展

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稀有金属材料与工程 2007年第12期36卷 2075-2079页

作者：杨声海刘银元邱冠周唐谟堂中南大学湖南长沙410083

Ta2O5薄膜层具有较高的介电常数、折射率以及和ULSI加工过程中的相容性,因而将在硅芯片栅层材料、动态随机存储器、减反膜、气敏传感器、太阳能光伏电池面板介电层等方面得到应用。对以Ta(OC2H5)5为原料,通过常规金属有机化合物气相沉... 详细信息

Ta2O5薄膜层具有较高的介电常数、折射率以及和ULSI加工过程中的相容性,因而将在硅芯片栅层材料、动态随机存储器、减反膜、气敏传感器、太阳能光伏电池面板介电层等方面得到应用。对以Ta(OC2H5)5为原料,通过常规金属有机化合物气相沉积、光致化学气相沉积、等离子增强化学气相沉积、原子层化学气相沉积和脉冲化学气相沉积法制备Ta2O5薄膜进行了评述,并对这些方法存在的问题进行了分析。

关键词：乙醇钽氧化钽薄膜化学气相沉积

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阳极电位对锆在异丙醇中溶解行为的影响

中南大学学报（自然科学版） 2017年第9期48卷 2257-2263页

作者：杨喜云黄海强杨声海中南大学冶金与环境学院湖南长沙410083

采用循环伏安法(CV)、计时电流法、交流阻抗法(EIS)、扫描电镜(SEM)和X线光电子能谱(XPS)研究不同电位下锆在异丙醇溶液中阳极溶解行为。研究结果表明:当阳极电位为0~1.10 V时,锆表面存在氧化膜导致钝化,不发生活性溶解;交流阻抗复数平... 详细信息

采用循环伏安法(CV)、计时电流法、交流阻抗法(EIS)、扫描电镜(SEM)和X线光电子能谱(XPS)研究不同电位下锆在异丙醇溶液中阳极溶解行为。研究结果表明:当阳极电位为0~1.10 V时,锆表面存在氧化膜导致钝化,不发生活性溶解;交流阻抗复数平面图出现大的容抗弧;自腐蚀电位随时间延长而增大;当阳极电位大于1.10 V,Br^-击穿钝化膜使锆发生活性溶解,锆溶解属于点蚀,交流阻抗复数平面图在高频区出现容抗弧,在中频区出现感抗弧,在低频区出现Warburg阻抗;稳态点蚀电位处于1.10~1.20 V之间,点蚀的成核方式为瞬间三维成核,生长过程为扩散控制;提高阳极电位,点蚀加剧,腐蚀面积加大,腐蚀孔加深,容抗弧直径减小;锆表面钝化膜的主要成分为ZrO_2,在异丙醇溶液中溶解生成Zr(OC_3H_7)_4。

关键词：锆点蚀异丙醇阳极电位

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高纯纳米氧化钽的制备

稀有金属材料与工程 2007年第2期36卷 282-286页

作者：杨声海王亦男何静唐谟堂邱冠周中南大学湖南长沙410083

以自制高纯乙醇钽为原料,通过水解、干燥与煅烧生产粒度约35nm的高纯Ta2O5纳米粉。研究了水解过程中乙醇钽浓度、温度、加料时间对产品粒度的影响以及煅烧温度与时间对Ta2O5晶形的影响。选取水解最佳条件为:乙醇钽浓度1.0mol/L,水解温... 详细信息

以自制高纯乙醇钽为原料,通过水解、干燥与煅烧生产粒度约35nm的高纯Ta2O5纳米粉。研究了水解过程中乙醇钽浓度、温度、加料时间对产品粒度的影响以及煅烧温度与时间对Ta2O5晶形的影响。选取水解最佳条件为:乙醇钽浓度1.0mol/L,水解温度50℃左右,加料时间约15min。加完后,搅拌5min,接着加入氨水溶液调节pH值到8～9,同时升温至80℃～85℃保温30min;煅烧温度800℃,时间2h。得到的Ta2O5产品粒度约35nm,纯度>99.997%。

关键词：乙醇钽水解高纯纳米粉

利用加权基因共表达网络分析牛口蹄疫病毒感染通路变化

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浙江农业学报 2021年第9期33卷 1617-1624页

作者：杨生海刘西兰张勇甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中农威特生物科技股份有限公司甘肃兰州730046

从基因表达综合数据库下载GSE83514数据集,利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选与牛口蹄疫病毒感染的相关模块及枢纽基因,并对整个模块内的基因进行GO功能注释和KEGG通路分析。结果显示,通过构建WGCNA共表达网络,确定与牛口蹄疫病毒... 详细信息

从基因表达综合数据库下载GSE83514数据集,利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选与牛口蹄疫病毒感染的相关模块及枢纽基因,并对整个模块内的基因进行GO功能注释和KEGG通路分析。结果显示,通过构建WGCNA共表达网络,确定与牛口蹄疫病毒感染显著负相关的Darkred模块和显著正相关的Green模块为枢纽模块,它们的枢纽基因分别为MFSD4和RHOH。这两个模块基因共富集到20个生物学过程及14条KEGG信号通路,并且两个模块同时富集到DNA复制通路。本研究为探究牛口蹄疫病毒感染通路变化提供了生物信息学依据,筛选的枢纽基因MFSD4和RHOH有望成为抑制牛口蹄疫病毒感染的治疗靶标。

关键词：牛口蹄疫病毒转录组测序加权基因共表达数据挖掘枢纽基因

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“牺牲”阳极法合成乙醇钽研究

稀有金属材料与工程 2006年第4期35卷 625-628页

作者：杨声海潘泽强李朝晖唐谟堂邱冠周中南大学湖南长沙410083 株洲硬质合金集团公司钽铌事业部湖南株洲412005

研究了“牺牲”阳极法电化学合成乙醇钽过程中,添加剂种类与浓度、电解液温度、阴阳极极距和电流密度的影响。选取最佳合成条件为:四甲基氯化铵0.04mol/L,温度为电解液的沸腾温度,极距约2cm,电流密度220A/m2。电合成的混合液经常压蒸馏... 详细信息

研究了“牺牲”阳极法电化学合成乙醇钽过程中,添加剂种类与浓度、电解液温度、阴阳极极距和电流密度的影响。选取最佳合成条件为:四甲基氯化铵0.04mol/L,温度为电解液的沸腾温度,极距约2cm,电流密度220A/m2。电合成的混合液经常压蒸馏和减压蒸馏,得到产品用红外光谱、拉曼光谱和元素分析进行表征,确定了产品为乙醇钽。电合成的电流效率大于95%,产品蒸馏时钽的直收率82.8%。

关键词：电化学合成乙醇钽乙醇红外光谱四甲基氯化铵

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加快油田电网建设适应油田经济发展

江汉石油职工大学学报 2001年第4期14卷 49-51页

作者：杨声海江汉石油管理局水电厂湖北潜江433122

经过近三十年建设，江汉油田电网不断完善，面对新的发展形势，油田电网面临许多新的问题，通过调查研究，提出加快油田电网建设，适应油田经济发展的几点建议，以求油田电网走向良性循环发展．

关键词：电网建设江汉油田经济发展管理体制

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使用P204从甲基磺酸溶液中萃取铟的研究

中南大学学报（自然科学版） 2019年第6期50卷 1320-1325页

作者：何静李杨刚柳涛廖方文陈永明杨声海中南大学冶金与环境学院

以粗铅电解后液的甲基磺酸溶液为原料,使用萃取剂P204从甲基磺酸溶液中萃取铟。考察萃取剂体积分数、水相组成、搅拌时间、温度、相比等因素对铟萃取率的影响,模拟理论级数的逆流萃取。研究结果表明:在萃取剂体积分数为55%,甲基磺酸浓度... 详细信息

以粗铅电解后液的甲基磺酸溶液为原料,使用萃取剂P204从甲基磺酸溶液中萃取铟。考察萃取剂体积分数、水相组成、搅拌时间、温度、相比等因素对铟萃取率的影响,模拟理论级数的逆流萃取。研究结果表明:在萃取剂体积分数为55%,甲基磺酸浓度为0.52~1.04mol/L,水相pH为0.5~2.0,搅拌时间为1.5min,温度为20~30℃,水相和有机相体积比为4:1的最优条件下,铟的平均萃取率达到98%以上;经过2级逆流萃取,铟萃取率达到99%;通过斜率法和红外光谱技术得到萃合物的分子式及萃取反应式,证实P204中的羟基OH参加成键,并与游离的铟离子发生取代反应。

关键词：铟甲基磺酸萃取机理

Na_2CO_3-NaCl二元共晶熔盐的热稳定性

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中南大学学报（自然科学版） 2016年第8期47卷 2563-2568页

作者：叶龙刚唐朝波陈永明杨声海唐谟堂中南大学冶金与环境学院湖南长沙410083

考察Na_2CO_3-NaCl共晶熔盐在熔点温度至1 000℃的热稳定性,从高温下的质量损失,循环使用性能,高温处理后的成分、结构和形貌等方面进行评价。研究结果表明:共晶成分的挥发性介于纯NaCl和纯Na_2CO_3之间,当温度超过800℃后,挥发量急剧增... 详细信息

考察Na_2CO_3-NaCl共晶熔盐在熔点温度至1 000℃的热稳定性,从高温下的质量损失,循环使用性能,高温处理后的成分、结构和形貌等方面进行评价。研究结果表明:共晶成分的挥发性介于纯NaCl和纯Na_2CO_3之间,当温度超过800℃后,挥发量急剧增加,挥发量与时间成线性关系。共晶成分在多次循环过程中保持熔化温度、结晶温度及熔化时间、结晶时间基本不变。XRD研究表明:熔盐的组成在长时间高温处理后保持不变,NaCl和Na_2CO_3的相对含量也不发生变化,同时经高温处理后混合物的结晶性和溶合更好,液相成分更均匀。

关键词：熔盐热稳定性共晶成分热循环