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孕前砷暴露对F1代新生鼠睾丸发育和vasa基因表达的影响

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遵义医学院学报 2016年第3期39卷 241-245页

作者：何志全李三华陆祥高迎冬陈伟遵义医学院组织胚胎学教研室贵州遵义563099 遵义医学院医学与生物学研究中心贵州遵义563099

目的本实验主要探讨孕前砷暴露对F1代新生鼠睾丸发育和vasa基因表达的影响。方法将24只雌性SD大鼠随机分为3组(n=8),通过灌胃方式建立砷染毒模型后,"一代一窝"繁殖试验技术获得后代。统计新生鼠的数量并称重,镜下观察睾丸组织结构并测... 详细信息

目的本实验主要探讨孕前砷暴露对F1代新生鼠睾丸发育和vasa基因表达的影响。方法将24只雌性SD大鼠随机分为3组(n=8),通过灌胃方式建立砷染毒模型后,"一代一窝"繁殖试验技术获得后代。统计新生鼠的数量并称重,镜下观察睾丸组织结构并测量生精索直径及索间面积,实时荧光定量PCR和免疫组织化学法检测新生鼠睾丸组织vasa mRNA和vasa蛋白表达。结果与对照组(0.9%Na Cl)比较,高剂量组(1.5 mg/kg/d As_2O_3)新生鼠的出生数、活胎率和新生鼠平均体重都在显著降低,有统计学差异(P<0.05);与对照组比较,中剂量组(0.75 mg/kg/d As_2O_3)生精索直径变窄和索间面积变宽,有统计学差异(P<0.05),高剂量组生精索直径变窄和索间面积变宽程度加剧,差异极显著(P<0.01);与对照组比较,中剂量组、高剂量组的vasa mRNA和vasa蛋白表达量显著下降(P<0.01);与中剂量组比较,高剂量组vasa mRNA表达量明显下降(P<0.05),vasa蛋白表达量显著下降(P<0.01)。结论随孕前染砷剂量的增加,F1代新生鼠生精索直径变窄,索间面积增大,vasa mRNA和vasa蛋白表达量降低。因此,孕前砷暴露对新生鼠睾丸发育产生一定抑制作用。

关键词：砷暴露新生鼠 SD大鼠睾丸发育 vasa基因

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石蜡切片在不同保存条件下抗原稳定性分析

中国组织化学与细胞化学杂志 2022年第5期31卷 502-507页

作者：米贯勋杨潇燕邢雅南牛银银李三华齐华河南省肿瘤病理诊断试剂工程技术研究中心郑州450001

目的采用不同的保存条件处理石蜡组织切片,检测组织切片内抗原在不同保存条件下的稳定性,从而找到合适的石蜡组织切片保存条件。方法分别将Alk、CA125、CD10、Cox2、ER、p16、p63、Her2、Pax5、PD-L1等10个抗原阳性表达的组织蜡块连续... 详细信息

目的采用不同的保存条件处理石蜡组织切片,检测组织切片内抗原在不同保存条件下的稳定性,从而找到合适的石蜡组织切片保存条件。方法分别将Alk、CA125、CD10、Cox2、ER、p16、p63、Her2、Pax5、PD-L1等10个抗原阳性表达的组织蜡块连续切片后,65℃烤片2 h,作为无蜡封组;蜡封组将空白石蜡切片捞取在石蜡切片组织的表面,以达到蜡封、隔绝空气的目的。将无蜡封组和蜡封组石蜡切片在室温、2~8℃和-20℃保存,并在0 h、1月、2月、3月、4月、5月、6月、7月时,使用相同批号的免疫组织化学试剂进行染色,分析不同保存条件下抗原的稳定性。另外,无蜡封组和蜡封组在37℃条件下进行2周的老化试验,以观察高温老化条件下组织切片内抗原的稳定性。结果蜡封组染色效果均差于无蜡封组。石蜡切片在保存7月时,Alk、ER、Pax5抗原项目染色明显减弱,Her2抗原阳性组织切片室温保存4月时染色已为阴性,其它抗原项目抗原虽有丢失,但免疫组织化学染色结果差异不显著。结论-20℃条件下,组织切片保存抗原稳定性最好,2~8℃条件下保存效果次之,室温保存效果最差;细胞核抗原稳定性最差;无蜡封处理的石蜡切片抗原保存效果好于蜡封处理。低温保存是储存石蜡组织切片的良好条件,但蜡封处理后的石蜡切片免疫组织化学染色弱于无蜡封组。

关键词：石蜡组织切片保存条件抗原稳定性

基于继电保护测量仪的快速接线转换装置的研究

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电工技术 2024年第8期 162-164页

作者：施雨杉许凯章三华李翔张济韬国网江苏省电力有限公司响水县供电分公司江苏盐城224600

目前通过测试仪测试继电保护装置的过程中,需要接插多根电流和电压实验线缆,接线过程中存在接错线的风险,可能会影响继电保护测试实验的进行及检测结果,严重时还可能导致接线处出现打火等现象,危及人身安全。通过设计保护装置自动测试... 详细信息

目前通过测试仪测试继电保护装置的过程中,需要接插多根电流和电压实验线缆,接线过程中存在接错线的风险,可能会影响继电保护测试实验的进行及检测结果,严重时还可能导致接线处出现打火等现象,危及人身安全。通过设计保护装置自动测试台和电流电压回路接触可靠性检测回路,研制出一种快速接线转换装置。该装置可改善以往因人工接线出现的安全问题,且该装置可检测电流电压回路接触的可靠性,进一步提升测试的安全性。

关键词：快速接线转换装置继电保护测试电流电压回路

5-氮杂-2'-脱氧胞苷对人子宫内膜样癌JEC细胞中P57 kip2蛋白表达及细胞形态影响的研究

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遵义医科大学学报 2020年第5期43卷 557-564页

作者：周俊王凤月李三华钟栎赵朔刘俊江张春英周正平遵义医科大学病理学教研室贵州遵义563099 遵义医科大学电镜室贵州遵义563099 遵义医科大学医学与生物学研究中心贵州遵义563099

目的通过5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)干扰人子宫内膜样癌(Endometrial carcinoma,EC)JEC细胞(中分化)前后,检测p57 kip2基因启动子区甲基化状态及其蛋白表达情况、细胞生长和形态改变,探讨p57 kip2对子宫内... 详细信息

目的通过5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)干扰人子宫内膜样癌(Endometrial carcinoma,EC)JEC细胞(中分化)前后,检测p57 kip2基因启动子区甲基化状态及其蛋白表达情况、细胞生长和形态改变,探讨p57 kip2对子宫内膜癌增殖、分化的影响。方法Ⅰ.Sanger测序方法检测JEC细胞中p57 kip2基因变异情况。Ⅱ.含不同浓度5-Aza-CdR(对照组、5、7.5、10、12.5、15μmol/L)的培养基干扰JEC细胞24 h,亚硫酸氢盐测序(Bisulfite sequencing PCR,BSP)法检测各组p57 kip2基因启动子区甲基化率分别为88.8%、88.1%、83.8%、85.8%、76.2%、83.1%,选择甲基化率下降明显的12.5μmol/L和15μmol/L两个浓度体外培养JEC细胞作为实验组。(1)培养24、48、72 h,四甲基亚唑蓝(MTT)法检测细胞生长情况;(2)培养24、72 h,Western blot法检测P57 kip2蛋白表达情况;(3)培养72 h,光镜、电镜观察细胞形态结构变化。结果Ⅰ.Sanger测序结果:JEC细胞中未检测出p57 kip2基因外显子突变。Ⅱ.p57 kip2基因启动子区甲基化水平:JEC细胞中p57 kip2基因启动子区呈高甲基化状态,经5-Aza-CdR干扰24 h后,12.5μmol/L组(76.2%)、15μmol/L组(83.1%)的总体甲基化率较对照组(88.8%)下降明显。(1)MTT结果:和对照组比较,12.5μmol/L组在24、48 h细胞生长被明显抑制(P0.05);随着作用时间的延长,P57 kip2蛋白在两实验组中表达的上调趋势被削弱,以12.5μmol/L组更明显(P<0.05)。(3)形态改变:和对照组比较,两实验组细胞密度略微有减少,细胞表面微绒毛均更加丰富,细胞内可见较多分泌泡和自噬现象。结论在JEC细胞中,p57 kip2基因外显子无突变,5-Aza-CdR能下调p57 kip2基因启动子区的总体甲基化率,从而上调P57 kip2蛋白表达,使细胞生长受抑制,其中12.5μmol/L组的生长抑制作用比15μmol/L组更明显,可能还促进JEC细胞往更好的分化方向转变;随着时间的延长,没有持续追加5-Aza-CdR,p57 kip2启动子区逐渐恢复甲基化,导致P57 kip2蛋白表达上调的趋势再次被减弱。

关键词：子宫内膜样癌 5-氮杂-2'-脱氧胞苷 JEC细胞甲基化 p57 kip2

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大型仪器共享平台内涵式发展路径研究

实验室科学 2024年第2期27卷 203-209页

作者：方三华刘丽杨丹杨文娟黄莹莹李艳伟刘双双浙江大学医学院公共技术平台浙江杭州310058

大型仪器共享平台(以下简称:平台)是高校重要的科研支撑体系,探索平台内涵式发展路径,实现平台高质量和高水平发展,对于支撑和推动高校“双一流”建设具有重要意义。以浙江大学医学院大型仪器共享平台发展为例,阐述平台外延式发展中出... 详细信息

大型仪器共享平台(以下简称:平台)是高校重要的科研支撑体系,探索平台内涵式发展路径,实现平台高质量和高水平发展,对于支撑和推动高校“双一流”建设具有重要意义。以浙江大学医学院大型仪器共享平台发展为例,阐述平台外延式发展中出现的问题、平台内涵式发展的路径及成效。通过创新组织管理构架、建立先进的实验仪器管理系统、创新大型仪器设备论证和采购制度、提升研究生大型仪器操作技能和加强实验技术队伍建设等内涵式发展内容与途径,解决了外延式发展中出现的问题,大幅提高平台运行效率,提升了平台服务能力和水平,在开放共享服务、大型仪器高效使用、研究生培养、仪器新功能和新技术开发等方面都取得优异的成绩,为科学研究、研究生培养和社会服务提供了良好的技术支撑。

关键词：大型仪器共享平台内涵式发展平台效率服务水平人才培养

基于报告抽查的质量监督方式对提升检测机构报告水平的应用探讨

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工程质量 2024年第S1期42卷 26-28页

作者：罗三华陈健刘然张杉张一鸣李文婷建研院检测中心有限公司北京100013

检验检测报告作为检验检测活动的最终产品,其质量直接反映了检验检测机构的技术能力和管理水平。在检验检测机构内部建立适当的报告抽查制度,有助于检验检测机构更加科学、合理地对检验检测过程进行质量控制,及时识别报告质量风险。本... 详细信息

检验检测报告作为检验检测活动的最终产品,其质量直接反映了检验检测机构的技术能力和管理水平。在检验检测机构内部建立适当的报告抽查制度,有助于检验检测机构更加科学、合理地对检验检测过程进行质量控制,及时识别报告质量风险。本文概括介绍了报告监督抽查中发现的不符合项并对其产生的原因进行简要分析,基于不符合产生的原因提出机构应采取的改进措施和今后监督的重点方向,以期通过报告抽查能够规范检测人员从业行为,提高检验检测报告质量水平。

关键词：报告抽查检验检测建筑工程质量提升

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高等院校天然药物化学实验室安全管理策略

广东化工 2018年第18期45卷 202-202,207页

作者：孟令杰李三华刘云遵义医学院医学与生物学研究中心贵州遵义563000 遵义医学院贵州省普通高等学校特色药物肿瘤防治重点实验室贵州遵义563000

随着高校实验室的建设和发展高速增长,实验室安全显得尤为重要。本文针对高校天然药物化学实验室的特点,从完善实验室安全管理制度、加强入室工作人员的安全教育以及注重实验环节的安全规范三个方面进行了初步的探讨。

关键词：天然药物化学实验室安全管理制度安全教育安全规范

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非小细胞肺癌ALK基因重排检测

国际肿瘤学杂志 2016年第5期43卷 340-342页

作者：赵小磊李三华刘玲玲梁永波牛银银翟晋豫徐玉茵邱金奎齐华河南省食品药品审评查验中心郑州450001 郑州市病理诊断技术工程研究中心河南赛诺特生物技术有限公司研发中心河南省医疗器械检验所

目的通过荧光原位杂交（FISH）方法检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者间变性淋巴瘤激酶（ALK）基因重排。方法根据ALK断裂重排方式及特点，设计并制备红／绿双色荧光探针。以人外周血培养细胞为检测对象评价ALK融合基因检测探针的敏感性和... 详细信息

目的通过荧光原位杂交（FISH）方法检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者间变性淋巴瘤激酶（ALK）基因重排。方法根据ALK断裂重排方式及特点，设计并制备红／绿双色荧光探针。以人外周血培养细胞为检测对象评价ALK融合基因检测探针的敏感性和特异性，以NSCLC石蜡组织样本为对象进行ALK基因重排检测以评价探针的性能。结果本研究制备的荧光探针在EB病毒（EBV）转化的人淋巴细胞检测中的特异性和敏感性均可达到100％。在对2例NSCLC患者石蜡包埋组织样本检测中，检测阴性、阳性各1例，检测结果与免疫组织化学检测结果一致。结论本研究中制备的双色荧光探针可用于NSCLCALK基因重排的检测。

关键词：癌非小细胞肺原位杂交荧光 ALK基因重排

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优化内部管理提升检测机构管理水平

工程质量 2024年第S1期42卷 14-15,19页

作者：罗三华李文婷陈健刘然张杉张一鸣建研院检测中心有限公司北京100013

建筑工程质量检测是建筑工程建设过程中不可缺少的环节,为保证工程质量发挥着重要作用,而建筑工程质量检测机构管理水平的高低直接决定着整个工程质量安全。本文以检测机构常规管理模式为研究对象,分析了此管理模式下的质量管理情况,指... 详细信息

建筑工程质量检测是建筑工程建设过程中不可缺少的环节,为保证工程质量发挥着重要作用,而建筑工程质量检测机构管理水平的高低直接决定着整个工程质量安全。本文以检测机构常规管理模式为研究对象,分析了此管理模式下的质量管理情况,指出质量管理过程中发现的问题,探讨了质量管理模式发展的优化路径,以期通过此优化提高其技术能力和管理水平,促进机构健康发展。

关键词：检测机构质量管理管理模式优化路径