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A versatile method for enumeration and characterization of circulating tumour cells from patients with breast cancer

引用

Journal of Cancer Metastasis and Treatment 2017年第1期3卷 23-33页

作者： Ujjwala M.Warawdekar Vani Parmar Aruna Prabhu Abhay Kulkarni meenal chaudhari Rajendra A.Badwe CRI Lab Advanced Centre for Treatment Research and Education in Cancer(ACTREC)Tata Memorial CentreNavi Mumbai 410208India Department of Surgery Breast UnitTata Memorial HospitalTata Memorial CentreParelMumbai 400012India Homi Bhabha National Institute Anushakti NagarMumbai 400085India.

Aim:To establish a standardized protocol for the isolation and enumeration of circulating tumor cells(CTCs)from peripheral blood of patients with metastatic breast ***:The protocol used tumor cells spiked in a lymphoid cell line with detection by flow cytometry and quantitative reverse transcription polymerase chain reaction(QRT-PCR).Cells of the human mammary cancer subtypes were spiked into Jurkat cells,which served as the lymphocyte designate in numbers from 10 to 500 per 105 Jurkat *** mixed population was probed for CD45,EpCAM,and pancytokeratin acquired from flow cytometry and characterized by ***-PCR was done for CK-19,MUC-1,EpCAM,and *** was attained with blood samples from 22 patients with metastatic breast cancer and 20 healthy ***:Flow cytometry could detect 1 breast cancer cell per 100,000 Jurkat cells,with similar detection levels in the breast cancer *** from patients with breast cancer showed a range of CTCs from 1-85 per 10 mL of *** of expression for EpCAM,CK-19,Muc-1,and Her2neu confirmed the presence of CTCs in 76%of ***:Density gradient and immunomagnetic enrichment accomplished isolation of CTCs and quantitation was achieved using flow *** QRT-PCR and imaging further validated these findings,rendering a robust methodology.

关键词： Circulating tumor cells cytokeratin-19 flow cytometry circulating tumor cell enumeration quantitative reverse transcription polymerase chain reaction EpCAM

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