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Combinatorial nanodot stripe assay to systematically study cell haptotaxis

Microsystems & Nanoengineering 2020年第1期6卷 37-48页

作者： mcolisi dlamini Timothy EKennedy David Juncker Biomedical Engineering Department McGill University3775 University StreetMontrealQC H3A 2B4Canada McGill Genome Centre 740 Dr.Penfield AvenueMontrealQC H3A 0G1Canada McGill Program in Neuroengineering MontrealQCCanada Department of Neurology and Neurosurgery McGill University3801 University StreetMontréalQC H3A 2B4Canada

Haptotaxis is critical to cell guidance and development and has been studied in vitro using either gradients or stripe assays that present a binary choice between full and zero coverage of a protein ***,stripes offer only a choice between extremes,while for gradients,cell receptor saturation,migration history,and directional persistence confound the interpretation of cellular ***,we introduce nanodot stripe assays(NSAs)formed by adjacent stripes of nanodot arrays with different surface ***-one pairwise combinations were designed using 0,1,3,10,30,44 and 100%stripes and were patterned with 200×200,400×400 or 800×800 nm 2 *** studied the migration choices of C2C12 myoblasts that express neogenin on NSAs(and three-step gradients)of *** reference surface between the nanodots was backfilled with a mixture of polyethylene glycol and poly-D-lysine to minimize nonspecific cell ***,cell response was independent of nanodot *** to a 0%stripe,cells increasingly chose the high-density stripe with up to~90%of cells on stripes with 10%coverage and *** preference for higher *** netrin-1 coverage was observed only for coverage ratios>2.3,with cell preference plateauing at~80%for ratios≥*** combinatorial NSA enables quantitative studies of cell haptotaxis over the full range of surface coverages and ratios and provides a means to elucidate haptotactic mechanisms.

关键词： filled coverage dot

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