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作者： mazu Sabirath shanti 华南农业大学

学位级别：硕士

对蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶、酶菌联合降解羽毛三种方式进行比较,结果酶菌联合降解羽毛的效果更突出。深入研究蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶添加顺序、菌培养时间以及酶添加时间对羽毛降解率的影响,结果采用菌+酶的方式能降解... 详细信息

对蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶、酶菌联合降解羽毛三种方式进行比较,结果酶菌联合降解羽毛的效果更突出。深入研究蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶添加顺序、菌培养时间以及酶添加时间对羽毛降解率的影响,结果采用菌+酶的方式能降解更多的羽毛;同时数据表明菌液在培养14h时产酶达到高峰,加入菌液后的24h再添加角质蛋白酶能保持其较高的活力。以pH值、羽毛添加量、酶添加量、菌液添加量、培养天数为试验因素,设计L(4)正交试验,结果表明在pH 9.0、羽毛添加量3.0%、酶添加量2000 U/g、菌液添加量1.5%、培养时间为96 h条件下,发酵结果最优,此时氨基酸含量为223.26 mg/L,降解率为81.76%。pH 9.0、羽毛添加量3.0%、酶添加量3000 U/g、菌液添加量3.0%、培养时间为4 d为各自的因素的均值最值,以此为条件进行验证试验,结果表明,此时氨基酸含量为273.57 mg/L,降解率为85.41%。以最优发酵条件制备发酵液,取部分发酵液进行5000 r/min离心10 min,得到发酵上清液、发酵沉淀物;对其真空冷冻干燥,得到发酵液干物质、上清液干物质、沉淀物干物质,其蛋白质含量分别为87.35%、41.43%、92.36%。蜡样芽孢杆菌YSQ08联合角蛋白酶降解鸡羽毛后得到的发酵上清液干物质饲养黑水虻效果优于猪粪、发酵沉淀干物质以及发酵液干物质。其饲养黑水虻到一半预蛹时的平均增重为0.2399g,料重比为2.6341、转化率为38.19%、存活率为90.79%。

关键词：蜡样芽孢杆菌YSQ08 角质蛋白酶羽毛发酵黑水虻

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蜡样芽胞杆菌YSQ08碱性蛋白酶aprA基因在毕赤酵母中的表达

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现代食品科技 2016年第12期32卷 105-112页

作者：黄东彦 shanti mazu 朱辉朱剑锋胡文锋华南农业大学食品学院广东广州510642 生物源生物技术(深圳)股份有限公司广东深圳518055

从蛇消化道内容物分离出的一株产角蛋白酶菌株为蜡样芽孢杆菌YSQ08。通过分析Bacillus cereus ATCC 14579的基因组和蛋白酶家族,对比分析蜡样芽孢杆菌YSQ08纯化角蛋白酶的酶活特性,确定碱性蛋白酶aprA基因(1194 bp)为目标角蛋白酶。为... 详细信息

从蛇消化道内容物分离出的一株产角蛋白酶菌株为蜡样芽孢杆菌YSQ08。通过分析Bacillus cereus ATCC 14579的基因组和蛋白酶家族,对比分析蜡样芽孢杆菌YSQ08纯化角蛋白酶的酶活特性,确定碱性蛋白酶aprA基因(1194 bp)为目标角蛋白酶。为深入研究角蛋白酶的潜在能力,对蜡样芽孢杆菌YSQ08碱性蛋白酶aprA基因在毕赤酵母X33上进行克隆、表达和优化重组。结果其10倍浓缩的角蛋白酶酶活达到122.60 U/mL。经优化后的aprA基因在表面展示重组酵母中得到高效表达,并且具有较高的角蛋白酶活性,酶活最高可达到295.78 U/g干细胞重。酶学性质分析结果表明,表面展示表达的重组aprA蛋白酶性质与天然型相比具有更高的热稳定性,最适反应温度为55℃,最适pH为8.0。Fe^(2+)可显著提高重组蛋白的酶活性,最高可达329.08%。表面展示表达的重组角蛋白酶可作为全细胞固定化催化剂,具有更好的热稳定性并能降低酶的纯化回收成本。

关键词：角蛋白酶 aprA 蜡样芽胞杆菌表面展示毕赤酵母

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酶菌联用降解羽毛工艺优化及降解产物对黑水虻幼虫生长性能的影响

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饲料工业 2017年第22期38卷 41-46页

作者： mazu Sabirath shanti 林俊宏朱剑锋朱辉李楚君庞旭董璐胡文锋华南农业大学广东广州510642 汕头职业技术学院广东汕头515078 生物源生物技术(深圳)股份有限公司广东深圳518118 广州无两生物科技有限公司广东广州510642

试验采用角蛋白酶和蜡样芽孢杆菌联用处理鸡羽毛,以羽毛降解率为指标,研究了不同pH值、酶添加量、细菌接种量、羽毛添加量和发酵时间对羽毛降解率的影响,优化了降解羽毛的工艺条件。之后分别使用三种降解产物和猪粪作为饲料,研究了羽毛... 详细信息

试验采用角蛋白酶和蜡样芽孢杆菌联用处理鸡羽毛,以羽毛降解率为指标,研究了不同pH值、酶添加量、细菌接种量、羽毛添加量和发酵时间对羽毛降解率的影响,优化了降解羽毛的工艺条件。之后分别使用三种降解产物和猪粪作为饲料,研究了羽毛降解产物对黑水虻幼虫生长性能的影响,包括平均增重、料重比和存活率等。结果表明,适宜的酶菌联用降解羽毛工艺条件为:pH值9.0、酶添加量2 000 U/g、蜡样芽孢杆菌接种量3.0%(v/v)、羽毛添加量2.5%,发酵5 d。使用发酵上清液干物质作为饲料养殖黑水虻幼虫,能有效提高黑水虻幼虫平均增重、优化料重比、提高存活率。

关键词：角蛋白酶蜡样芽孢杆菌羽毛黑水虻幼虫

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蜡样芽孢杆菌YSQ08与角质蛋白酶联合降解羽毛的研究

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饲料广角 2016年第19期 46-49页

作者：朱辉 mazu shanti 朱剑锋胡文锋华南农业大学食品学院生物源生物技术(深圳)有限公司

对蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶、酶菌联合降解羽毛3种方式进行比较,结果表明酶菌联合降解羽毛的效果更突出.深入研究蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶添加顺序、菌培养时间以及酶添加时间对羽毛降解率的影响,结果显示采用菌+酶的方式... 详细信息

对蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶、酶菌联合降解羽毛3种方式进行比较,结果表明酶菌联合降解羽毛的效果更突出.深入研究蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶添加顺序、菌培养时间以及酶添加时间对羽毛降解率的影响,结果显示采用菌+酶的方式能降解更多的羽毛,同时数据表明菌液在培养14h时产酶达到高峰,加入菌液后的24h再添加角质蛋白酶能保持其较高的活力.以pH值、羽毛添加量、酶添加量、菌液添加量、培养天数为试验因素,设计L16(45)正交试验,结果表明在pH9.0、羽毛添加量3.0%、酶添加量2000U/g、菌液添加量1.5%、培养时间为96h条件下,发酵结果最优,此时氨基酸含量为223.26mg/L,降解率为81.76%.菌+酶降解羽毛的方式为工业化处理羽毛废弃物提供新的思路.

关键词：羽毛联合降解添加时间 YSQ08 蜡样芽孢杆菌蜡样芽胞杆菌角蛋白酶降解率角质

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