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Streamlining the preparation of “endotoxin-free” ClearColi cell extract with autoinduction media for cell-free protein synthesis of the therapeutic protein crisantaspase

引用

Synthetic and Systems Biotechnology 2019年第4期4卷 220-224页

作者： J.Porter Hunt Emily Long Zhao Mehran Soltani madison frei J.Andrew D.Nelson Bradley C.Bundy Department of Chemical Engineering Brigham Young UniversityProvoUTUSA Department of Chemical Engineering Brigham Young University330N Engineering BuildingProvoUT84602USA

An“endotoxin-free”***-based cell-free protein synthesis system has been reported to produce therapeutic proteins rapidly and ***,preparation of the most complex CFPS reagent–the cell extract–remains time-consuming and labor-intensive because of the relatively slow growth kinetics of the endotoxin-free ClearColiTMBL21(DE3)*** we report a streamlined procedure for preparing *** cell extract from ClearColi™using auto-induction *** this work,the term auto-induction describes cell culture media which eliminates the need for manual induction of protein *** Clearcoli™cells in autoinduction media significantly reduces the hands-on time required during extract preparation,and the resulting“endotoxinfree”cell extract maintained the same cell-free protein synthesis capability as extract produced with traditional induction as demonstrated by the high-yield expression of crisantaspase,an FDA approved leukemia *** is anticipated that this work will lower the barrier for researchers to enter the field and use this technology as the method to produce endotoxin-free ***-based extract for CFPS.

关键词： Auto-induction Autoinduction Cell-free protein synthesis CFPS Endotoxin-free Crisantaspase Clearcoli

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