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sirNA沉默smpd1对抗小鼠卵及3t3细胞凋亡的研究

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SiRNA沉默smpd1对抗小鼠卵及3T3细胞凋亡的研究

第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会

作者：马芸张仁礼周灿权高军欧建平闻安民陈系古邓新燕中山大学实验动物中心广东省人民医院生殖中心中山大学附属第一医院生殖中心

目的:卵巢中生殖细胞对于化疗药物特别敏感,儿童和育龄妇女肿瘤患者常出现卵巢早衰并丧失生育能力.卵母细胞和颗粒凋亡的信号途径是通过活化酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase), 水解鞘磷脂产生神经酰胺(ceramide),作为第二信使启动... 详细信息

目的:卵巢中生殖细胞对于化疗药物特别敏感,儿童和育龄妇女肿瘤患者常出现卵巢早衰并丧失生育能力.卵母细胞和颗粒凋亡的信号途径是通过活化酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase), 水解鞘磷脂产生神经酰胺(ceramide),作为第二信使启动细胞凋亡.小鼠的 smpd1基因与人高度同源,为探讨用 sirNA 沉默酸性鞘磷脂酶基因(smPd1)是否可以在体外保护卵细胞免受化疗药物的损害,本实验观察 sirNA 沉默小鼠成纤维细胞和 gV 期卵子 smpd1基因后对化疗药物诱导凋亡的反应.方法:设计合成6条靶向 smpd1基因的 sirNA,用脂质体 lipofectamine2000转染小鼠胚胎成纤维细胞株 NIH3t3,用荧光定量 rt-Pcr 法和 western blot 法筛选出高效 sirNA 序列并确定最低有效浓度。NIH3t3细胞转染有效 sirNA 和对照无效 sirNA 后培养液中加入丝裂霉素诱导凋亡,Annexin V-EgFP/PI 双染流式细胞仪检测细胞凋亡率.4～5周龄性成熟前期雌性 NIH 小鼠腹腔注射 Pmsg5IU,48h 后卵巢收集 gV 期卵,0.2mmIBmX 抑制 gVBd,显微注射5p120u m sirNA、阴性对照 rNA 或溶解 sirNA 的缓冲液,培养24h 用荧光定量 rt-Pcr 和 western blot 分别检测 smpd1 mrNA 水平和蛋白水平的基因沉默情况。培养液中加入丝裂霉素诱导 gV 卵凋亡,Annexin V-EgFP/PI 双染观测注射后各组凋亡情况。结果:用荧光定量 rt-Pcr 方法筛选自行设计和定购的6条 sirNA, 发现设计的3号普通19nt sirNA 和 stealth sirNA2号和3号均对3t3细胞内源性表达的 smPd1基因有明显抑制作用,均超过65%(转染效率约为80%),0.5nm 浓度24h 即有明显沉默的作用,蛋白沉默的时间介于48h 之后.细胞转染 sirNA 后丝裂霉素的诱导凋亡作用明显减轻,空白对照组凋亡率为31%,而 sirNA 3号凋亡率为8.6%,stealth sirNA 2号为7%,差异有显著性意义(pgV 期卵注射后24h 使 smpd1 mrNA 下降90%,与未注射和注射阴性对照及缓冲液的卵子相比,注射 sirNA 的卵子对化疗药物诱导的凋亡有明显的抵抗作用。结论:本研究设计筛选出了靶向 smpd1 基因的 sirNA,并验证 smpd1 sirNA 在小鼠胚胎成纤维细胞系和 gV 期卵子中具有一定对抗化疗药物诱导凋亡的作用,为卵巢保护提供靶点及治疗途径。

关键词： sirNA 凋亡酸性鞘磷脂酶

椎弓根螺钉入点定位及双侧入点间距的应用测量

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中国临床解剖学杂志 2001年第4期19卷 308-310页

作者：李志军刘万林温树正高斌礼王瑞张拓赛内蒙古医学院解剖学教研室第二附属医院脊柱外科第一附属医院ct室内蒙古呼和浩特市010059

目的 :提供椎弓根螺钉入点定位法及双入点间距的解剖学资料。方法 :观测螺钉入点并测量双入点间距。结果 :①螺钉入点 :分 4组 ,第 1组 ,c2 为横突下缘水平线与中外 1/4垂线交点处 ;第 2组c3 ～L1,除c5外均在横突中上水平线与关节突中... 详细信息

目的 :提供椎弓根螺钉入点定位法及双入点间距的解剖学资料。方法 :观测螺钉入点并测量双入点间距。结果 :①螺钉入点 :分 4组 ,第 1组 ,c2 为横突下缘水平线与中外 1/4垂线交点处 ;第 2组c3 ～L1,除c5外均在横突中上水平线与关节突中垂线及中外 1/4垂线限定的四边形内。第 3组L2 ～L4 在横突中水平线与外缘垂线交点处 ;第 4组L5在横突中水平线与乳突外缘垂线交点处 ,距关节突外缘垂线 (4.8± 0 .7)mm。②双入点间距 :L5最大 ,c5次之而t5～t7最小。结论 :c3 ～L3 入点多集中在横突中上水平线与关节突中外垂线限定的四边形内 ,其中c3 ～c4 、c6～L1均在横突中上水平线与关节突中垂线及中外 1/4垂线限定的四边形内 ;双入点间距变化有明显的规律性。

关键词：椎弓根螺钉入点双入点间距

解剖m型超声心动图评价介入栓塞法猪急性心肌梗死模型

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解剖M型超声心动图评价介入栓塞法猪急性心肌梗死模型

第十届全国超声心动图学术会议

作者：张军辉李媛曹礼庭顾鹏刘兴华董国礼张小明川北医学院附属医院超声科川北医学院附属医院放射科

目的应用解剖m型超声心动图(AmE)对猪急性心肌梗死(AmI)左心室结构、局部及整体功能进行评价。方法采用经冠状动脉丝线堵塞法制作小型猪AmI动物模型,于术前、术后1 d检测并计算左心室16节段室壁收缩末期厚度(ts)、舒张末期厚度(td)、室... 详细信息

目的应用解剖m型超声心动图(AmE)对猪急性心肌梗死(AmI)左心室结构、局部及整体功能进行评价。方法采用经冠状动脉丝线堵塞法制作小型猪AmI动物模型,于术前、术后1 d检测并计算左心室16节段室壁收缩末期厚度(ts)、舒张末期厚度(td)、室壁收缩期增厚率(△t%)及运动幅度(Am),左室收缩与舒张末期内径(LVEds,LVEdd)、射血分数(EF)和短轴缩短率(Fs)。根据健康小型猪Am的95%可信区间下限值(6 mm)判定室壁运动异常节段(心肌缺血/梗死节段),并将AmE确定的心肌梗死节段与组织病理学结果进行对照。结果与术前相对应的节段相比,术后心肌梗死节段ts、td、△t%及Am测值下降(Pts、td、△t%及Am测值下降(Pds增大,EF、Fs降低(均PmE对心肌缺血/梗死节段判定的敏感性为80.00%,特异性为91.36%,准确性为89.58%。结论 AmE能对猪AmI后结构、局部及整体心功能进行定量分析。

关键词：解剖m型超声介入,栓塞心肌梗死心室功能,左猪

慢性乙型肝炎感染病人中的cd8lowmtgFβ+t细胞群可能导致其免疫反应低下

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慢性乙型肝炎感染病人中的CD8lowmTGFβ+T细胞群可能导致其免疫反...

第八届全国免疫学学术大会

作者：欧阳礼辰李晓毅杨道峰翁秀芳梁智辉吴雄文华中科技大学同济医学院免疫学系华中科技大学同济医学院附属同济医院

在我们的前期研究中,我们已证实可溶性HLA二聚体可以诱导出一群有同种特异性抑制功能的cd8+t细胞亚群,将其命名为cd8lowm tgFβ+t细胞。有其它证据表明在一些持续抗原刺激的生理病理情况下可检测到cd8low t细胞,而HBV是容易建立慢性持... 详细信息

在我们的前期研究中,我们已证实可溶性HLA二聚体可以诱导出一群有同种特异性抑制功能的cd8+t细胞亚群,将其命名为cd8lowm tgFβ+t细胞。有其它证据表明在一些持续抗原刺激的生理病理情况下可检测到cd8low t细胞,而HBV是容易建立慢性持续感染的重要病毒之一,因此我们的目的是检测慢性乙肝病人中cd8low t细胞的频率,表型和功能。我们的另一个目的是探讨cd8low t细胞是否参与HBV特异性的免疫反应低下。我们收集慢性乙肝病人和健康人的血清并分离其外周血单个核细胞,利用流式细胞术检测外周血中cd8low t细胞的频率,表型,同时用IFN-γELIsPOt检测HBV特异性的免疫应答。正如预期那样,我们观察到相比正常人而言,慢性乙肝病人中cd8low t细胞的频率增多。而且,相比感染时间短的病人,感染时间长的病人中cd8low t细胞的频率更高。然而,我们并未发现cd8low t细胞的频率与血清HBVdNA浓度和肝功能有关。我们检测了cd8low t细胞的表型并发现慢性乙肝病人中的cd8low t细胞相比正常人表达更高水平的m tgFβ和IL-4。重要的是,我们发现cd8lowm tgFβ+t.细胞的频率与HBV特异性的免疫反应存在负相关,提示了cd8lowm tgFβ+t细胞的抑制作用。最后,我们发现慢性乙肝病人血清中显著增多的可溶性HLAI类分子可能与其免疫低下有关,导致慢性持续性感染。总而言之,我们的结论是cd8lowm tgFβ+t细胞可能在调节HBV特异性的免疫应答中发挥作用,而且我们的研究可能会拓宽我们对乙肝病毒感染慢性化因素的理解。

关键词： cd8low t细胞慢性持续性感染可溶性HLAI类分子

高密度闪烁体Nd∶gdtaO_(4)和Nd∶LutaO_(4)发光跃迁强度计算

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人工晶体学报 2022年第9期51卷 1785-1793页

作者：张庆礼孙贵花罗建乔何異陈迎迎高进云窦仁勤刘文鹏王小飞丁守军张德明孙彧中国科学院合肥物质科学研究院安徽光学精密机械研究所光子器件与材料安徽省重点实验室合肥230031 先进激光技术安徽省实验室合肥230037 中国科学技术大学合肥230026 安徽工业大学数理科学与工程学院马鞍山243032

gdtaO_(4)和LutaO_(4)是具有快发光衰减的新型重闪烁体。采用全谱拟合方法拟合了808 nm激光二极管(Ld)激发的m相Nd∶gdtaO_(4)和m′相Nd∶LutaO_(4)的光致发光谱,给出了它们的跃迁强度参数A k t,p。在808 nm激光激发下,gdtaO_(4)中Nd ^(... 详细信息

gdtaO_(4)和LutaO_(4)是具有快发光衰减的新型重闪烁体。采用全谱拟合方法拟合了808 nm激光二极管(Ld)激发的m相Nd∶gdtaO_(4)和m′相Nd∶LutaO_(4)的光致发光谱,给出了它们的跃迁强度参数A k t,p。在808 nm激光激发下,gdtaO_(4)中Nd ^(3+)离子^(4)F _(3/2)能级的上下两个晶场子能级的粒子布居数比例接近1,而在Nd∶LutaO_(4)中则为1.30、1.41,表明在808 nm激光激发下,Nd ^(3+)的^(4)F_(3/2)两个晶场子能级间的无辐射弛豫速率与激发速率相近。通过给出的跃迁强度参数A_(kt,p)计算了Judd-Ofelt跃迁强度参数Ω_(t),计算了Nd ^(3+)在gdtaO_(4)、LutaO_(4)中的^(2)P_(3/2)跃迁几率,表明gdtaO_(4)和LutaO_(4)中Nd ^(3+)的数百纳秒发光跃迁是由高的无辐射跃迁几率导致的快发光衰减。

关键词：稀土钽酸盐重闪烁体跃迁强度发光无辐射跃迁布居数

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100t格构式起重机门架有限元校核分析

建筑机械 2022年第5期42卷 90-92页

作者：丰树礼姬宏赟任海涛高明利张士杰河南省矿山起重机有限公司河南新乡453000

本文以100t-30m格构式起重机为研究对象,采用通用型有限元软件建立起重机门架结构的有限元模型,对其典型工况进行强度和刚度校核,为桁架门式起重机的设计制作提供理论依据,对其它龙门机型的设计也具有一定的指导意义。

关键词：格构式起重机有限元模型强度刚度

贝那普利对原发性高血压患者左室影响的临床观察

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海峡药学 2009年第6期21卷 106-108页

作者：潘建生方汉云庄国礼李齐明李碎朋浙江省乐清市第二人民医院乐清325608

目的观察贝那普利对原发性高血压患者左室的影响。方法60例原发性高血压患者,心超排除左室肥厚,测定血压、胸导联最大Qrs电压(Vmax)及左室重量指数(LVmI),随机分为贝那普利治疗组(B组)、吲达帕胺治疗组(Ⅰ组)及治疗性生活方式改变组(t... 详细信息

目的观察贝那普利对原发性高血压患者左室的影响。方法60例原发性高血压患者,心超排除左室肥厚,测定血压、胸导联最大Qrs电压(Vmax)及左室重量指数(LVmI),随机分为贝那普利治疗组(B组)、吲达帕胺治疗组(Ⅰ组)及治疗性生活方式改变组(t组),分别于3,6月测定血压,胸前导联最高电压,左室重量指数,比较3组有无差异性。结果血压、Vmax、LVmI治疗后B组分别为:132.3±3.5/83.3±2.8mmHg、29.9±1.5mm、81.3±5.7g.m-2,Ⅰ组分别为:133.2±3.2/83.6±2.5mmHg、32.5±3.8mm、91.0±7.4g.m-2,t组为:142.7±3.8/90.5±2.4mmHg、36.5±3.8mm、99.2±7.9g.m-2,B组血压与Ⅰ组无特异性差异(P>0.05),而B组Vmax、LVmI与Ⅰ组、t组均有特异性差异(P<0.01)。结论贝那普利能有效控制血压,且能明显抑制左室肥厚,改善预后。

关键词：贝那普利高血压左室电压左室重量指数

利用胚胎干细胞试验模型评价矮壮素的发育毒性

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癌变．畸变．突变 2015年第4期27卷 260-265,271页

作者：孔丹郝卫东蒋建军尚兰琴魏雪涛时褔礼北京大学公共卫生学院食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室北京100191 北京市海淀区卫生局卫生监督所北京100037

目的:利用胚胎干细胞试验模型评价矮壮素的发育毒性。方法:以dmsO为阴性对照,使用不同剂量(7.8125、15.625、31.25、62.5、125、250、500、1 000μg/m L)的矮壮素染毒小鼠胚胎干细胞d3(Es-d3)和3t3成纤维细胞,观察矮壮素对Es-d3细胞向... 详细信息

目的:利用胚胎干细胞试验模型评价矮壮素的发育毒性。方法:以dmsO为阴性对照,使用不同剂量(7.8125、15.625、31.25、62.5、125、250、500、1 000μg/m L)的矮壮素染毒小鼠胚胎干细胞d3(Es-d3)和3t3成纤维细胞,观察矮壮素对Es-d3细胞向心肌细胞分化的影响,以及对Es-d3和3t3细胞的细胞毒性,在此基础上,根据发育毒性判别公式对矮壮素致畸性进行判定。提取Es-d3分化抑制试验中的拟胚体总rNA,进行real-time Pcr,在基因水平检测矮壮素对Es-d3向各胚层分化的影响。结果:1 000μg/m L矮壮素染毒可明显促进体外培养Es-d3、3t3细胞增殖;250μg/m L的矮壮素作用下,观察到具有心肌细胞收缩的拟胚体数仅占接种拟胚体总数的69.4%;1 000μg/m L矮壮素能够影响Es-d3向心肌细胞分化的基因标志物(Nkx2.5,α-mHc)的表达。结论:无法利用判别公式对矮壮素进行发育毒性评价;矮壮素在不引起3t3、Es-d3细胞毒性的水平下,影响Es-d3向心肌细胞的分化,有产生胚胎毒性的可能。

关键词：矮壮素植物生长调节剂发育毒性胚胎干细胞试验模型

高能聚焦超声“刀”加经尿道气化术——治疗晚期膀胱癌的一种新方法

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高能聚焦超声“刀”加经尿道气化术——治疗晚期膀胱癌的一种新方...

2001'全国肿瘤外科学术会议

作者：王共先熊礼生应学明胡峰习海波邓顺中汪芳宋新新谢淑云江西医学院一附院泌尿外科、沁尿外科研究所江西医学院一附院泌尿外科、沁尿外科研究所江西医学院一附院泌尿外科、沁尿外科研究所江西医学院一附院泌尿外科、沁尿外科研究所江西医学院一附院泌尿外科、沁尿外科研究所江西医学院一附院泌尿外科、沁尿外科研究所江西医学院一附院泌尿外科、沁尿外科研究所江西医学院一附院泌尿外科、沁尿外科研究所江西医学院一附院泌尿外科、沁尿外科研究所

＜正＞阐明高能聚焦超声“刀”加经尿道气化术联合应用治疗晚期膀胱癌的优点、适应症和临床效果。方法:应用高能聚焦超声刀（HIFU）加经尿道气化术（tV-Bt）联合治疗28例晚期膀胱癌,所有患者（平均年龄68．3岁）均经 B 超、ct、骨扫描...

＜正＞阐明高能聚焦超声“刀”加经尿道气化术联合应用治疗晚期膀胱癌的优点、适应症和临床效果。方法:应用高能聚焦超声刀（HIFU）加经尿道气化术（tV-Bt）联合治疗28例晚期膀胱癌,所有患者（平均年龄68．3岁）均经 B 超、ct、骨扫描和膀胱镜+活检等确诊为膀胱癌,病理分级为Ⅱ～Ⅲ级,临床分期为 t3～m1期。先用高能聚焦超声

关键词：