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蒙药材蓝玉簪龙胆的化学成分研究

中国现代应用药学 2024年第1期41卷 27-32页

作者：宝钢图诺木拉朝格巴达拉夫苏达毕力格何陈林敖敦格日乐其日格尔拉喜那木吉拉内蒙古民族大学蒙医药学院国家药品监督管理局中药(蒙药)质量控制重点实验室内蒙古通辽028000 蒙医药研发工程教育部重点实验室内蒙古通辽028000

目的研究蒙药材蓝玉簪龙胆的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备型HPLC等色谱手段进行分离纯化,并通过波谱数据和理化常数鉴定化合物结构。结果从蓝玉簪龙胆花中分离得到10个化合物,化合物分别鉴定为2... 详细信息

目的研究蒙药材蓝玉簪龙胆的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备型HPLC等色谱手段进行分离纯化,并通过波谱数据和理化常数鉴定化合物结构。结果从蓝玉簪龙胆花中分离得到10个化合物,化合物分别鉴定为2,3-二羟基苯甲醇β-吡喃葡萄糖苷(1)、龙胆苦苷(2)、 2’-(O,m-Dihydroxybenzoyl)sweroside(3)、异荭草素(4)、异荭草素-3’-甲基醚(5)、异牡荆苷(6)、异荭草素-4’-O-吡喃葡萄糖苷(7)、异肥皂草苷(8)、熊果酸(9)、β-谷甾醇(10)。结论化合物1为新的苄醇糖苷类化合物,化合物10为首次从该植物中分离得到。

关键词：蒙药材蓝玉簪龙胆哈日-珠勒根-其木格化学成分

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扩散吸附作用下CO2非混相驱微观渗流特征模拟

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岩性油气藏 2024年第6期36卷 181-188页

作者：崔传智李静吴忠维中国石油大学(华东)石油工程学院长江大学石油工程学院

利用数值模拟方法建立CO2非混相驱数值模型，使用水平集法模拟扩散吸附作用下CO2非混相驱和近混相驱的微观渗流规律，并对CO2在孔隙中的微观渗流特征及扩散吸附特征进行研究，选取注入速度、扩散系数、吸附反应速率常数等参数研究近混... 详细信息

利用数值模拟方法建立CO2非混相驱数值模型，使用水平集法模拟扩散吸附作用下CO2非混相驱和近混相驱的微观渗流规律，并对CO2在孔隙中的微观渗流特征及扩散吸附特征进行研究，选取注入速度、扩散系数、吸附反应速率常数等参数研究近混相驱微观渗流特征的影响因素。研究结果表明：（1）相场法CO2驱数值模拟采出程度为51.29%，水平集法CO2驱数值模拟采出程度为53.60%，因此水平集法更适用于CO2非混相驱的渗流过程模拟。（2）非混相驱条件下，CO2优先向大孔隙扩散，采收率为87.7%，出口气体体积分数为71.60%,CO2最大表面吸附浓度为3.16×10-4mol/m2；近混相驱条件下，CO2更易向小孔隙扩散，采收率为91.1%，出口含气率为97.01%,CO2最大表面吸附浓度为5.81×10-4mol/m2。（3）近混相驱微观渗流特征受注入速度、扩散系数、吸附反应速率常数等因素影响。注入速度增大，出口含气率和采收率均提高；扩散系数和吸附反应速率常数增大，会使采收率提高，出口含气率下降。

关键词： CO2非混相驱微观渗流特征注入速度扩散系数吸附反应速率常数采收率数值模拟

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串联磁致伸缩生物传感器的制备和食品中大肠杆菌的检测

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农业工程学报 2024年第15期40卷 280-286页

作者：王凡张克维朱保顺山西科技学院材料科学与工程学院晋城048000 太原科技大学材料科学与工程学院太原030024

磁致伸缩生物传感器的制造成本、检测灵敏度、检测效率是影响传感器广泛应用的重要因素。为研究串联磁致伸缩生物传感器对食品中大肠杆菌的检测性能,该研究研制了一种新型串联磁致伸缩生物传感器,该传感器的换能器采用铁基非晶软磁合金... 详细信息

磁致伸缩生物传感器的制造成本、检测灵敏度、检测效率是影响传感器广泛应用的重要因素。为研究串联磁致伸缩生物传感器对食品中大肠杆菌的检测性能,该研究研制了一种新型串联磁致伸缩生物传感器,该传感器的换能器采用铁基非晶软磁合金,功能涂层采用环保亲水材料聚乙烯醇。将不同尺寸的单一传感器作为对照组,利用阻抗分析仪检测传感器的谐振参数。选取尺寸为4.8 mm×0.8 mm与7.2 mm×1.2 mm的传感器进行串联,将无抗体加载的传感器作为参考传感器,检测浓度为10~10^(8)CFU/mL大肠杆菌悬浮液。利用扫描电子显微镜观察传感器表面吸附致病菌情况。探索串联磁致伸缩传感器检测大肠杆菌食品溶液时谐振频率漂移量与浸泡时间的关系。研究发现:该串联磁致伸缩生物传感器相较于单一传感器具有更好的响应强度。通过对不同浓度大肠杆菌悬浮液的检测,得到该串联抗体传感器与大肠杆菌发生特异性结合,检测限为10^(2)CFU/mL。利用扫描电子显微镜观察传感器表面,证实谐振频率偏移量均由吸附大肠杆菌引起。利用阻抗分析仪检测串联传感器在大肠杆菌食品溶液中浸泡不同时间后的谐振频率漂移量,得到传感器实现稳定检测时间为20 min。表明此新型串联磁致伸缩生物传感器具有较高的灵敏度、稳定性、检测效率且制造简单,成本较低,使用方便。该研究可为生物传感器在食品安全检测方面的广泛应用提供有力参考。

关键词：食品安全生物传感器病菌磁致伸缩大肠杆菌

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基于深度学习的高中生物学大概念教学策略研究与实践 ——以“细胞的能量供应和利用”单元为例

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基于深度学习的高中生物学大概念教学策略研究与实践 ——以“细...

作者：武瑶格黄冈师范学院

学位级别：硕士

《基础教育课程教学改革深化行动方案》指出要深化科学教育改革,并将“科学素养提升行动”作为2023年至2027年基础教育课程教学深化改革的重点任务之一,强调应加强科学类学科教学,以激发学生的想象力、探求欲,发展学生的科学素养。这与... 详细信息

《基础教育课程教学改革深化行动方案》指出要深化科学教育改革,并将“科学素养提升行动”作为2023年至2027年基础教育课程教学深化改革的重点任务之一,强调应加强科学类学科教学,以激发学生的想象力、探求欲,发展学生的科学素养。这与以核心素养为导向的深度学习理念及内容追求“少而精”原则的大概念教学理念不谋而合。因此,本研究以湖北省m中学的高中学生为研究对象,采用文献研究法、问卷调查法、访谈法和教育实验法等研究方法,构建了促进学生深度学习的生物学大概念教学策略,并展开教学设计与实践。主要结果如下:一、调查湖北省m中学高一年级学生的生物学深度学习水平发现,该校学生的深度学习水平较弱,具体表现为学习的持久性差,容易产生畏难心理,批判创造和协作沟通能力还有待提高。通过访谈深度学习现状和大概念教学现状,发现受教学课时有限、自身研究不够深入和评价体系不够系统等因素影响,大概念教学在实际课堂中应用较少。二、以深度学习和大概念教学的内涵与本质要求为理论基础,以解决调查与访谈结果中发现的问题为导向,构建了基于深度学习的高中生物学大概念教学策略。该策略将教学过程分为教学准备、教学实施和教学评价3个阶段,设置了分析——设计——观察——组织——迁移——反思6个教学环节,各环节的主要教学任务分别是:梳理大概念体系,建构学习目标;创设学习情景,提炼核心问题;聚焦挑战性任务,促进经验转化;进行深度加工,推动大概念体系构建;鼓励迁移创造,解决核心问题;进行多元化评价设计,注重过程性评价。三、随机选择生物学深度学习水平和期中考试成绩均无显著差异的两个班级作为对照班和实验班。实验班以构建的生物学大概念教学策略为指导进行教学,对照班进行常规教学。采用单元检测、概念图绘制和学生访谈等方式进行教学评价。单元检测后测结果表明,实验班学生的平均分为65.1分,高于对照班的61.1分,且成绩差异达显著水平;概念图绘制结果表明,实验班学生较为重视概念间的联系,能对知识进行较为精细的加工;通过学生访谈发现,实验班学生更加重视科学史学习,喜欢团队协作,关注学科知识与现实生活的联系。综上所述,该教学策略可有效提高学生的知识理解、建构、整合和应用能力,提升其学习兴趣和课堂参与度,并提升深度学习能力和生物学学科核心素养。

关键词：深度学习大概念教学高中生物学教学策略

表达传染性喉气管炎病毒gD蛋白的新城疫病毒La Sota嵌合株的构建及免疫效力评价

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表达传染性喉气管炎病毒gD蛋白的新城疫病毒La Sota嵌合株的构建...

作者：田静格河南农业大学

学位级别：硕士

传染性喉气管炎（Infectious laryngotracheitis,ILT）是由传染性喉气管炎病毒（Infectious laryngotracheitis vrius,ILTV）引起的一种严重危害家禽养殖业健康发展的呼吸道传染病。目前对于ILT的防控,在做好生物安全措施的同时,主要依... 详细信息

传染性喉气管炎（Infectious laryngotracheitis,ILT）是由传染性喉气管炎病毒（Infectious laryngotracheitis vrius,ILTV）引起的一种严重危害家禽养殖业健康发展的呼吸道传染病。目前对于ILT的防控,在做好生物安全措施的同时,主要依赖对易感鸡接种弱毒活疫苗。但弱毒活疫苗存在接种副反应大、疫苗株之间或疫苗株与野毒株之间发生基因重组导致不断出现新的毒株,以及疫苗株接种后的毒力返强等问题,养禽业迫切需要新型安全高效的ILT疫苗。ILTV的糖蛋白D（gD）是主要的保护性抗原之一,能够刺激机体产生较强的保护性免疫。新城疫（Newcastle disease,ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）引起的一种急性、高度接触性传染病,严重危害家禽养殖业的健康发展。目前我国鸡群中流行的NDV毒株主要是基因Ⅶ型,而针对基因Ⅶ型NDV的商品化疫苗是全病毒灭活疫苗,虽然可以诱导较高的血清抗体水平,但是不能够诱导有效的黏膜免疫;而基于基因II型NDV La Sota株弱毒活疫苗不能针对基因Ⅶ型NDV的感染提供良好保护。研发防控基因Ⅶ型NDV的弱毒活疫苗具有迫切的现实需求。ILT和ND作为两种重要的禽呼吸道传染病在临床上常呈现混合感染,造成更为严重的后果。因此研发同时防控ILTV和基因Ⅶ型NDV感染的新型安全高效疫苗将为有效防控这两种传染病提供技术支持。本研究利用NDV反向遗传技术平台,在利用基因Ⅶ型NDV的HN基因和蛋白酶裂解位点氨基酸突变的F基因替换La Sota疫苗株的HN和F基因的基础上,在P和m基因之间插入ILTV的gD基因,成功构建表达ILTV gD蛋白的重组嵌合型病毒rLa Sota-ⅦF/HN-gD,研究该重组病毒的部分生物学特性,并对其作为二联弱毒活疫苗的免疫效力进行评价。论文包括以下两方面的内容:一、表达ILTV gD基因的NDV La Sota嵌合株的构建与鉴定为了构建表达ILTV糖蛋白D（gD）的重组NDV La Sota嵌合株,本研究将ILTV强毒株gD胞外域基因与NDV F信号肽、跨膜域和胞质尾区基因进行融合,并插入到含有基因Ⅶ型NDV F和HN基因的NDV La Sota嵌合株感染性c DNA克隆pLa Sota-ⅦF/HN的P和m基因之间,将获得的重组感染性克隆pLa Sota-ⅦF/HN-gD与辅助质粒pCIneo-NP-P-L共转染BHk-21细胞,拯救出表达gD蛋白的重组NDV La Sota嵌合株rLa Sota-ⅦF/HN-gD。将重组病毒在9日龄SPF鸡胚中连续传至10代,提取重组病毒RNA,反转录成c DNA为模板,以ILTV gD基因插入位点两侧的鉴定引物进行PCR;用第10代重组病毒感染BHk-21细胞,以抗ILTV gD蛋白多克隆抗体作为一抗进行间接免疫荧光鉴定;分别用鸡红细胞吸附后的重组病毒鸡胚尿囊液上清和纯化的重组NDV病毒粒子进行Western blot鉴定,并对重组病毒对鸡胚的致病性和在鸡胚中的复制动态等特性进行了初步研究。PCR结果显示ILTV gD基因能够在重组病毒中稳定存在,间接免疫荧光实验和Western blot结果显示重组病毒能够正确表达ILTV的gD蛋白,而且gD蛋白嵌合表达在重组病毒颗粒上。鸡胚致病性实验和在鸡胚中的复制动态实验结果显示重组病毒保持了La Sota疫苗株的低致病性和良好的复制特性,rLa Sota-ⅦF/HN-gD的鸡胚平均死亡时间（mDT）为168 h,1日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI）为0.20,鸡胚半数感染量(EID50)峰值可达10-8.66/100μL。本研究所制备的重组病毒rLa Sota-ⅦF/HN-gD为研制同时防控基因Ⅶ型新城疫和鸡传染性喉气管炎的二联活疫苗奠定了基础。二、rLa Sota-ⅦF/HN-gD免疫原性和免疫效力评价为了评价基于rLa Sota-ⅦF/HN-gD的二联弱毒活疫苗的免疫原性和免疫效力,本研究用10～7EID50/只免疫剂量的rLa Sota-ⅦF/HN-gD对4周龄SPF鸡进行点眼/滴鼻免疫,免疫后每周翅下静脉采血分离血清,利用血凝抑制试验（HI）检测抗基因Ⅶ型NDV的抗体水平,利用间接ELISA检测免疫后血清中抗ILTV gD蛋白的抗体水平,以及抗基因Ⅶ型NDV和ILTV的黏膜IgA抗体水平。实验结果显示,rLa Sota-ⅦF/HN-gD弱毒活疫苗可以诱导机体产生抗NDV和ILTV的特异性抗体,疫苗的安全性良好。在免疫后第4周,用ILTV HNXY株(2×10～4EID50/只)和基因Ⅶ型NDV YN1106株(10～5ELD50/只)进行攻毒保护实验。攻毒后逐日观察各组鸡的临床表现,利用实时荧

关键词： ILTV gD基因基因Ⅶ型NDV 嵌合型重组NDV 弱毒活疫苗

基于网络药理学探究坤泰胶囊调控AGE-RAGE信号通路治疗PCOS模型大鼠的作用机制

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基于网络药理学探究坤泰胶囊调控AGE-RAGE信号通路治疗PCOS模型大...

作者：黄进格甘肃中医药大学

学位级别：硕士

目的:本研究运用网络药理学技术预测和筛选坤泰胶囊（kuntai Capsules,kTC）治疗多囊卵巢综合征（Polycystic ovary syndrome,PCOS）的作用靶点和效应机制;进一步通过建立PCOS动物模型,探讨并验证kTC基于AGE-RAGE信号通路治疗PCOS模型... 详细信息

目的:本研究运用网络药理学技术预测和筛选坤泰胶囊（kuntai Capsules,kTC）治疗多囊卵巢综合征（Polycystic ovary syndrome,PCOS）的作用靶点和效应机制;进一步通过建立PCOS动物模型,探讨并验证kTC基于AGE-RAGE信号通路治疗PCOS模型大鼠的作用机制,以期为临床治疗PCOS提供一定的理论依据。方法:1、网络药理学分析:利用中草药系统药理学平台（Chinese herbal Systems pharmacology platform,TCmSP）和BATmAN-TCm数据库筛选出kTC的有效成分及作用靶点,然后用uniprot数据库对相应靶点基因进行Symbol的转换,Gene Cards、NCBI、Dis Ge NET等数据库筛选疾病靶标,STRING构建PPI蛋白互作网络,通过Network Analyzer工具进行拓扑分析寻找关键靶点,根据mCODE分析进行核心基因的筛选,Cytoscape 3.8.0构建药物-化合物-靶点网络,利用R语言软件进行GO与kEGG富集分析。2、实验研究:选取21日龄SPF级SD大鼠,除对照组外,其余大鼠均采用颈背部皮肤注射脱氢表雄酮（Dehydroepiandrosterone,DHEA）联合高脂饮食（High-fat diet,HFD）的方式进行诱导,建立PCOS大鼠模型,造模28 d。造模成功后,将kTC溶于等量生理盐水分别予以低(0.315 g·kg-1·d-1)、中(0.63 g·kg-1·d-1)、高(1.26 g·kg-1·d-1)剂量进行大鼠灌胃,为kTC低、中、高剂量组,对照组和模型组均给予等量生理盐水,持续灌胃15 d。给药结束后,血糖仪测定空腹血糖（Fasting blood glucose,FBG）;酶联免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定血清空腹胰岛素（Fasting insulin,FINS）、黄体生成素（Luteinizing hormone,LH）、睾酮（Testosterone,T）、卵泡刺激素（Follicle stimulating hormone,FSH）,计算LH/FSH比值和稳态模型胰岛素抵抗指数（Homeostasis model assessment of insulin resistance,HOmA-IR）;苏木素-伊红(（hematoxylin-eosin,HE）染色观察卵巢组织病理形态;蛋白免疫印迹法（Western blot）和免疫荧光法检测Ⅲ型胶原α1链（COL3A1）、凋亡因子Bcl-2关联X的蛋白（Bcl-2associated X,Bax）和B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time PCR,RT-PCR）检测卵巢组织中COL3A1、Bax、Bcl-2 m RNA表达水平。结果:1、网络药理学分析获得kTC有效成分共83种,有效作用靶点共376个;获得PCOS靶点共2010个,kTC治疗PCOS的核心靶点共130个。kTC治疗PCOS的主要核心靶点有AkT1、Bax、Bcl-2、CASP3、COL3A1、FOS、JUN、IL-6等,kTC治疗PCOS主要通过调控AGE-RAGE信号通路、动脉粥样硬化、IL-17信号通路、内分泌抵抗、TNF信号通路、细胞衰老、化学致癌-受体激活、人巨细胞病毒感染、p53信号通路等多个方面的信号通路等途径实现。2、动物实验验证2.1大鼠体质量增长率、血清性激素及糖代谢结果显示:与对照组相比,模型组大鼠体质量增长率、FBG、FINS、LH、T、LH/FSH、HOmA-IR水平均升高（PkTC低、中、高剂量组大鼠体质量增长率水平均降低（PmA-IR水平均下降（PkTC中、高剂量组FSH水平升高（PkTC低、中、高剂量组大鼠逐渐出现稳定的动情周期。2.3 HE染色结果显示:与对照组相比,PCOS模型大鼠卵巢内无成熟卵泡形成,卵泡呈囊性扩张,黄体数量显著降低,颗粒细胞排列疏松且层数减少。与模型组相比,中药kTC三组卵巢表面较光滑,卵巢组织可见卵母细胞及成熟卵泡,颗粒细胞层厚度增加。2.4 Western Blot和免疫荧光染色法结果显示:与对

关键词：多囊卵巢综合征坤泰胶囊网络药理学 AGE-RAGE信号通路治疗

黑灵芝多糖抗卵清蛋白OVA致敏性的研究及其工业化产品设计

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黑灵芝多糖抗卵清蛋白OVA致敏性的研究及其工业化产品设计

作者：余鸿格南昌大学

学位级别：硕士

由特异性IgE介导的食物过敏(FA)是一种Th2型免疫反应疾病,在全世界范围内影响着众多儿童与成人。鸡蛋作为FAO/WHO列入的八大类过敏原之一,其主要过敏原蛋白为卵清蛋白(OVA),目前预防鸡蛋过敏(EA)的主流方法是严格规避过敏原和脱敏疗法,... 详细信息

由特异性IgE介导的食物过敏(FA)是一种Th2型免疫反应疾病,在全世界范围内影响着众多儿童与成人。鸡蛋作为FAO/WHO列入的八大类过敏原之一,其主要过敏原蛋白为卵清蛋白(OVA),目前预防鸡蛋过敏(EA)的主流方法是严格规避过敏原和脱敏疗法,但脱敏疗法显效慢、疗程长。因此,寻求新的有效防治措施愈发迫切。最近,利用天然活性物质,例如多糖、多酚和维生素等膳食干预食物过敏的研究已取得成效,其中来源于灵芝的多糖不仅易于提取、安全无毒,还在免疫调节、肠道调节和相关信号通路上都与食物过敏息息相关。因此,可能具有抗OVA致敏性的巨大潜力。本研究聚焦于黑灵芝子实体多糖,通过动物学实验探究其对OVA过敏的调节作用及机制,并进行黑灵芝多糖相关的工业化产品设计,旨在为改善鸡蛋过敏提供新方案。主要研究方法、结果及结论如下:1.以江西本土特色黑灵芝为原材料,对其子实体中的多糖进行热水回流提取,并通过单因素实验和正交试验确定最佳提取工艺条件,最后对单糖组成和平均分子量进行检测。结果表明,该黑灵芝粗多糖在提取参数为:料液比1∶35、提取温度90℃、提取时间3 h、乙醇溶液体积分数95%时,提取效果最佳,得率约为3.7 mg/g。通过极差和方差分析可知,乙醇溶液体积分数的影响最大,提取温度的影响最小,各水平间具有显著差异。此外,其单糖组成主要是葡萄糖,并伴有不同浓度的半乳糖、甘露糖、鼠李糖、岩藻糖、木糖、阿拉伯糖和少量的糖醛酸、糖胺。该多糖的重均分子量(mw)为5.603×10～4 Da,数均分子量(mn)为1.959×10～4 Da,多分散系数(PD)为2.86,主要分子量分布范围在1×10～4-5×10～4Da。总之,该黑灵芝多糖的各项指标与现有报道符合,制备的产物可以满足后续动物实验需求,为工业化产品设计提供了依据。2.以BALB/c小鼠为实验对象,通过注射2次含铝佐剂(Alum)的OVA溶液使小鼠致敏,之后再灌胃6次OVA溶液进行激发,以此诱导小鼠食物过敏,并在期间使用低、高剂量的黑灵芝多糖粗提物(LG、HG)膳食干预小鼠。基于体内、外各项过敏指标评估黑灵芝多糖对OVA过敏小鼠的调节作用。结果表明,黑灵芝多糖可显著改善OVA过敏导致的体温下降和严重腹泻;改善空肠组织病理损伤;降低小鼠血清中OVA特异性免疫球蛋白(Ig E、Ig G、Ig G1、Ig G2a)和肥大细胞蛋白酶-1(m mCPT-1)水平;逆转脾脏中Th1型细胞因子(IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4、IL-5、IL-13)以及IL-10水平,免疫器官(脾和mLN)中细胞分群的变化趋势也与其一致。此外,在两种剂量中,高剂量黑灵芝多糖表现出更为优秀的调节作用,它们可能是通过保护肠道屏障功能完整性,调节Th1/Th2免疫反应平衡等发挥抗过敏效果。3.采用16S rRNA测序技术对小鼠的肠道菌群进行高通量测序,分析黑灵芝多糖干预对OVA过敏小鼠肠道菌群的影响。结果表明,高剂量的黑灵芝多糖对于恢复OVA过敏导致的肠道菌群紊乱具有显著效果,在门水平上主要表现为逆转厚壁菌门/拟杆菌门的相对丰度比值,改善疣微菌门的相对丰度;在属水平上主要表现为逆转阿克曼菌属、丹毒丝菌属等的相对丰度,改善粪杆菌属和乳杆菌属的相对丰度。总之,这些肠道菌群的变化可在抗OVA过敏中发挥有利作用。4.提取小鼠空肠组织中总RNA,运用转录组测序技术(RNA-seq)分析黑灵芝多糖干预对OVA过敏小鼠基因表达的影响,揭示其中的分子机制。结果表明高剂量黑灵芝多糖可显著上调OVA过敏后的Reg3g、Abcb1a、Slc5a8和Cr2基因,显著下调Acta2、Fkbp5、Angptl4和Vip基因。通过差异基因的富集分析发现,它们的功能主要与生物的质量调控、离子传输、生物质膜以及物质跨膜转运活性等有关,涉及的通路主要包括神经活性配体-受体相互作用信号通路、PPAR信号通路、TRP通道的炎症介质调节和产生Ig A的肠道免疫网络等。5.按照保健品及咖啡类饮料生产等相关要求,以黑灵芝和阿拉比卡咖啡豆为主要原料进行工业化产品设计。确定了黑灵芝多糖速溶咖啡的生产工艺、主要设备选型、物料衡算等,并进行了经济技术分析,同时绘制了厂区平面图、车间平面图和工艺流程图,最终完成年产3吨黑灵芝多糖速溶咖啡的工厂设计。综上,本研究已利用黑灵芝子实体制备得到了符合要求的多糖成分。动物学实验证明该黑灵芝多糖具有出色的抗OVA过敏作用,微生物及转录组学的探索同样支持这一结果。并基于此,对黑灵芝多糖速溶咖啡进行了完善的工业化产品设计。总之,本研究为改善鸡蛋过敏提供了新方案,也为相关产品研发提供了新思路。

关键词：灵芝多糖卵清蛋白过敏膳食干预抗过敏黑灵芝多糖速溶咖啡

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FSRU多点系泊设备基座疲劳分析

船舶工程 2024年第2期46卷 124-130,137页

作者：刘立维上海中远海运重工有限公司上海201913

以一艘13.7万立方米的浮式储存和再气化装置(FSRU)多点系泊设备基座为例,基于英国劳氏船级社(LR)规范,以系泊分析中各缆绳疲劳载荷作为输入,采用SESAm GENIE软件进行有限元计算得到10 kN疲劳载荷作用下的热点应力范围,通过线性换算得到... 详细信息

以一艘13.7万立方米的浮式储存和再气化装置(FSRU)多点系泊设备基座为例,基于英国劳氏船级社(LR)规范,以系泊分析中各缆绳疲劳载荷作为输入,采用SESAm GENIE软件进行有限元计算得到10 kN疲劳载荷作用下的热点应力范围,通过线性换算得到其他载荷作用下的热点应力范围。基于S-N曲线疲劳损伤公式,并考虑作业海域各海况发生概率,利用miner线性疲劳累积方法得到使用年限内各热点的疲劳累积损伤值。结果表明,各系泊设备基座疲劳寿命满足要求,疲劳累积损伤较大值位于连接首尾横缆的系泊设备基座。该方法对于浮式海洋结构的多点系泊设备基座疲劳寿命计算具有参考意义。

关键词：浮式储存和再气化装置疲劳分析多点系泊热点应力

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新型人参皂苷衍生物CkN对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

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新型人参皂苷衍生物CKN对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

作者：王嘉维重庆理工大学

学位级别：硕士

脑卒中又称为中风,广泛分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中。临床上缺血性脑卒中最为常见,病因多为颈动脉闭塞。缺血发生时,其核心区的神经元和神经胶质细胞因缺糖缺氧迅速死亡,在其核心区周围半暗带神经元受到刺激但尚未死亡,迅速恢复血流... 详细信息

脑卒中又称为中风,广泛分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中。临床上缺血性脑卒中最为常见,病因多为颈动脉闭塞。缺血发生时,其核心区的神经元和神经胶质细胞因缺糖缺氧迅速死亡,在其核心区周围半暗带神经元受到刺激但尚未死亡,迅速恢复血流,该区域神经细胞依旧可以存活。目前为仍采用稳定、高效的溶栓治疗,但大量研究表明,迅速恢复血流仍会对局部脑组织造成损伤即缺血再灌注（Ischemia/reperfusion,I/R）损伤。I/R的病理机制十分复杂,兴奋性氨基酸毒性、细胞内Ca超载、氧化自由基和炎症反应等因素促使细胞死亡。其中神经元死亡会造成大量髓鞘脱落和磷脂破坏,形成大量细胞碎片。小胶质细胞作为脑内的先天免疫细胞,是首要免疫应答者,脑内稳态环境遭受破坏,小胶质细胞受到刺激并迅速响应并被激活,激活的小胶质细胞吞噬死细胞和细胞碎片;但过度激活的小胶质细胞会产生IL-1β、IL-6、NO和TNF-α等炎症因子加剧脑组织损伤。激活态小胶质细胞主要出现在半暗带,由于小胶质细胞的过度激活导致半暗带扩大。因此减少小胶质细胞过度激活是减少缺血再灌注损伤策略。CkN是本课题组在Ck的基础上进行结构修饰的新型LXRα激动剂,病理研究结果已证明CkN在防治动脉粥样硬化上具有减少细胞脂质沉积,抑制炎症反应双重作用,已获得国家、国际发明专利授权。小胶质细胞作为脑内的常驻巨噬细胞,LXRα/ABCA1信号通路可改善小胶质细胞脂质沉积抑制炎症。提示CkN对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。方法:1.建立小鼠大脑动脉闭塞（tmCAO）模型,随机分为三组:Sham组（假手术组）、tmCAO组（缺血再灌注组）和tmCAO+CkN组（CkN治疗组）;缺血2h再灌注,Sham组和tmCAO组连续3 d灌胃0.5%CmC-Na,tmCAO+CkN组连续3 d灌胃CkN。2.通过神经功能评分、TTC染色和HE染色,检测缺血再灌注后CkN对再灌注损伤的保护作用。3.通过免疫荧光染色,考察半暗带小胶质细胞的激活状态和神经元的损伤情况、小胶质细胞的脂质沉积情况、ABCA1在小胶质细胞上的表达。***实验,初步探索CkN对神经保护作用的机制。5.设置CkN浓度梯度,考察CkN对BV2细胞的存活率的影响。6.胆固醇刺激BV2细胞,通过油红O染色、BODIPY荧光染色考察不同浓度CkN对BV2细胞脂质沉积的影响,以及LXR抑制剂对加有10μmol/m L CkN BV2细胞脂质沉积的影响。7.分离纯化原代小胶质细胞,胆固醇刺激后通过免疫荧光染色考察ABCA1、TLR4的表达以及脂质沉积情况。结果:1.神经功能损伤评分和TTC染色表明,与Sham组相比,tmCAO组神经功能损伤评分显著提升,脑组织梗死体积扩大,表明小鼠大脑动脉闭塞造模成功;与tmCAO组相比,CkN显著减少神经功能损伤评分,显著减少脑组织梗死面积。***染色表明,与Sham组相比,tmCAO组大量的神经元变形、坏死;与tmCAO组相比,CkN显著减少神经元坏死数量、减缓其坏死程度。3.免疫荧光染色表明,与Sham组相比,tmCAO组小胶质细胞明显激活,吞噬神经元碎片且靠近应激神经元,细胞内脂质沉积明显,ABCA1表达水平无明显变化;与tmCAO组相比,CkN抑制小胶质细胞激活;小胶质细胞吞噬神经元行为不明显;脂质沉积不明显;ABCA1表达水平升高。***结果表明,与Sham组相比,tmCAO组TLR4、myd88、TRAF6、p-NF-κB和TNF-α蛋白表达水平升高,ABCA1、LXRα、LXRβ和NF-κB表达水平无明显变化;与tmCAO组相比,CkN抑制TLR4/myd88/TRAF6/p-NF-κB信号通路,降低TNF-α蛋白表达;促进ABCA1蛋白表达,对LXRα、LXRβ表达水平无明显影响。5.筛选CkN作用剂量为1μmol/L、3μmol/L和10μmol/L。6.油红O染色和BODIPY荧光染色显示,与对照组相比,BV2细胞模型组脂质沉积明显,BODIOPY荧光强度增强;CkN组随剂量浓度升高梯脂质沉积变少、BODIPY荧光强度减弱,表明CkN剂量依赖性减缓BV2细胞脂质沉积情况;LXRα抑制剂组与10μmol/L CkN组相比,脂质沉积明显增多、BODIPY荧光强度增强。***1、DAPI免疫荧光染色鉴定原代小胶质细胞,纯度在90%以上。高浓度CHO刺激源代小胶质细胞,原代小胶质细胞脂质沉积明显。与对照组和DmSO组相比,模型组的ABCA1表达水平无明显差异,TLR4表达水平升高。与模型组相比,CkN组ABCA1表达水平显著上调、TLR4表达水平下调、脂质沉积不明显。LXRα抑制剂组与CkN最大剂量组相比脂质沉积明显、TLR4表达水平升高、

关键词：脑卒中缺血再灌注损伤半暗带小胶质细胞 CkN