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Dahuang Zhechong Pill Alleviates Liver Fibrosis Progression by Regulating p38 MAPK/NF-κB/TGF-β1 Pathway

Chinese Journal of Integrative Medicine 2024年第12期30卷 1113-1120页

作者： HE Xiao-yan XIONG Xiao-jiao liu Mei-jun LIANG Jing-tao liu fu-you XIAO Jing-yi WU Li-juan School of Public Health Chengdu University of Traditional Chinese MedicineChengdu 610036China Department of Neurology Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese MedicineChengdu 610072China

Objective:To explore the effect and mechanism of Dahuang Zhechong Pill(DHZCP)on liver ***:Liver fibrosis cell model was induced by transforming growth factor-β(TGF-β)in hepatic stellate cells(HSC-T6).DHZCP medicated serum(DMS)was prepared in ***-T6 cells were divided into the control(15%normal blank serum culture),TGF-β(15%normal blank serum+5 ng/mL TGF-β),DHZCP(15%DMS+5 ng/mL TGF-β),DHZCP+PDTC[15%DMS+4 mmol/L ammonium pyrrolidine dithiocarbamate(PDTC)+5 ng/mL TGF-β],and PDTC groups(4 mmol/L PDTC+5 ng/mL TGF-β).Cell activity was detected by cell counting kit 8 and levels of tumor necrosis factor-α(TNF-α),interleukin(IL)-1β,IL-6,aspartate aminotransferase(AST)and alanine aminotransferase(ALT)in the cell supernatant were determined by enzymelinked immunosorbnent *** blot was used to measure the expressions of p38 mitogen-activated protein kinase/nuclear factor kappa B/transforming growth factor-β1(p38 MAPK/NF-κB/TGF-β1)pathway related proteins,and the localization and expressions of these proteins were observed by immunofluorescence ***:DHZCP improved the viability of cells damaged by TGF-βand reduced inflammatory cytokines and ALT and AST levels in the supernatant of HSC-T6 cells induced with TGF-β(P<0.05 or P<0.01).Compared with the TGF-βgroup,NF-κB p65 levels in the DHZCP group were decreased(P<0.05).p38 MAPK and NF-κB p65 levels in the DHZCP+PDTC were also reduced(P

关键词： liver fibrosis Dahuang Zhechong Pill inflammation p38 mitogen-activated protein kinase/nuclear factorkappaB/transforminggrowthfactor-β1pathway Chinesemedicine

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Inhibiting effect of short hairpin RNA on expression of transforming growth factor-β1 in human peritoneal mesothelial cells induced by peritoneal dialysis solution

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Chinese Medical Journal 2005年第18期118卷 1552-1556页

作者： liu fu-you LING Guang-hui liu Hong PENG you-ming liu Ying-hong DUAN Shao-bin Department of Nephrology Second Xiangya Hospital Central SouthUniversity Changsha 410011 China

The peritoneum response to peritoneal dialysis can lead to fibrosis. The transforming growth factor-β1 （TGF-β1） plays an important role in regulating tissue repair and remodeling after injury. Excessive synthesis and deposition of matrix proteins by peritoneal mesothelial cells can lead to structural and functional changes in the peritoneal membrane, jeopardizing the long-term efficacy of peritoneal dialysis （PD）. Prolonged exposure to high glucose concentrations in PD fluid has been implicated as a major stimulus to matrix accumulation, through the induction of transforming growth factor-β1 （TGF-β1）.

关键词： human peritoneal mesothelial cells·peritoneal dialysis solution·transforming growth factor-β1 RNA interference

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Gene delivery in peritoneal dialysis related peritoneal fibrosis research

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Chinese Medical Journal 2012年第12期125卷 2219-2224页

作者： LI Xie-jia SUN Lin XIAO Li liu fu-you Department of Nephropathy Second Xiangya HospitalCentral South UniversityChangshaHunan 410011China

Objective To summarize the development of gene delivery vectors in peritoneal fibrosis research and discuss the feasibility and superiority of lentiviral vectors. Data sources The data in this article were collected from PubMed database with relevant English articles published from 1995 to 2011. Study selection Articles regarding the gene therapy in peritoneal fibrosis research using non-viral vectors, adenoviral vectors, retroviral vectors, and lentiviral vectors were selected. Data were mainly extracted from 60 articles, which are listed in the reference section of this review. Results Non-viral vector-mediated gene delivery （including naked DNA for ex vivo, oligonucleotides, ultrasound- contrast agent mediated naked gene delivery, etc.） and viral vector-mediated gene delivery （including adenovirus, helper-dependant adenovirus, and retrovirus vectors） have been successfully applied both in the mechanistic investigation and the potential prevention and treatment of peritoneal fibrosis. Conclusions Peritoneal fibrosis is a major complication of peritoneal dialysis （PD）. Recently, the wide use of the gene delivery technique made it possible to access and further research peritoneal fibrosis. The use of lentiviral vector is expected to be widely used in PD research in the future due to its advantages in gene delivery.

关键词： peritoneal dialysis peritoneal fibrosis gene delivery non-viral vector viral vector

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Inhibition effect of small interfering RNA of connective tissue growth factor on the expression of vascular endothelial growth factor and connective tissue growth factor in cultured human peritoneal mesothelial cells

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Chinese Medical Journal 2007年第3期120卷 231-236页

作者： liu fu-you XIAO Li PENG you-ming DUAN Shao-bin liu Hong liu Ying-hong LING Gui-hui YUAN Fang CHEN Jun-xiang fu Xiao ZHU Jian-lian Division of Nephrology Second Affiliated Xiangya Hospital Central South University Changsha 410002 China

Background The peritoneum response to peritoneal dialysis can lead to fibrosis. The transforming growth factor β1 （TGF-β1 ） plays a key role in regulating tissue repair and remodelling after injury. Connective tissue growth factor （CTGF）, a downstream mediator of TGF-β1 inducing fibrosis, has been implicated in peritoneal fibrosis. Vascular endothelial growth factor （VEGF） plays a key role in angiogenesis that can hasten peritoneal fibrosis. In this study, we investigated the effect of small interfering RNA （siRNA） of CTGF by pRETRO-SUPER （PRS） retrovirus vector on the expression of CTGF and VEGF in human peritoneal mesothelial cells. Methods Retrovirus producing CTGF siRNA were constructed from the inverted oligonucleotides and transferred into packaging cell line PT67 with lipofectamine, and the virus supernatant was used to infect human peritoneal mesothelial cell （HPMC）. The cells were divided into seven groups： low glucose DMEM, low glucose DMEM ＋ TGF-β1 5 ng/ml, low glucose DMEM ＋ TGF-β1 5 ng/ml ＋ PRS-CTGF-siRNA1-4 and low glucose DMEM ＋ TGF-β1 5 ng/ml ＋ PRS. The expression of CTGF and VEGF were measured by semiquantitative RT-PCR and Western blot. Results Low levels of CTGF and VEGF were detected in confluent HPMCs. Following stimulation with TGF-β1 , the levels of CTGF and VEGF were significantly upregulated （P〈0.01）. Introduction of PRS-CTGF-siRNA1-4 resulted in the significant reduction of CTGF mRNA and protein, and VEGF mRNA （P〈0.01）, especially in groups PRS-CTGF-siRNA, and PRS-CTGF-siRNA4. The introduction of PRS void vector did not have these effects （P〉0.05）. Conclusions The expression of CTGF siRNA mediated by PRS retrovirus vector can effectively reduce the level of CTGF and VEGF induced by TGF-β1 in cultured HPMCs. This study may provide potential therapeutic strategies to prevent the peritoneal fibrosis.

关键词： peritonealfibrosis connective tissue growth factor vascular endothelial growth factor,RNA, small interfering

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Atmospheric Deposition-Carried Pb, Zn, and Cd from a Zinc Smelter and Their Effect on Soil Microorganisms

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Pedosphere 2009年第4期19卷 422-433页

作者： YANG Yuan-Gen2, JIN Zhi-Sheng, BI Xiang-Yang, LI Fei-Li, SUN Li, liu Jie and fu Zhi-you Institute of Geochemistry, Chinese Academy of Sciences, Guiyang 550002 (China) Institute of Geochemistry Chinese Academy of Sciences Guiyang 550002 (China)

Dust emissions from smelters, as a major contributor to heavy metal contamination in soils, could severely influence soil quality. Downwind surface soils within 1.5 km of a zinc smelter, which was active for 10 years but ceased in 2000, in Magu Town, Cuizhou Province, China were selected to examine Pb, Zn, and Cd concentrations and their fractionation along a distance gradient from a zinc smelter, and to study the possible effects of Pb, Zn, and Cd accumulation on soil microorganisms by comparing with a reference soil located at a downwind distance of 10 km from the zinc smelter. Soils within 1.5 km of the zinc smelter accumulated high levels of heavy metals Zn （508 mg kg^-1）, Pb （95.6 mg kg^-1）, and Cd （5.98 mg kg^-1） with low ratios of Zn/Cd （59.1-115） and Pb/Cd （12.4-23.4）. Composite pollution indices （CPIs） of surface soils （2.52-15.2） were 3 to 13 times higher than the reference soils. In metal accumulated soils, exchangeable plus carbonate-bound fractions accounted for more than 10% of the total Zn, Pb, and Cd. The saturation degree of metals （SDM） in soils within 1.5 km of the smelter （averaging 1.25） was six times higher than that of the reference soils （0.209）. A smaller soil microbial biomass was found more frequently in metal accumulated soils （85.1-438 μg C g^-1） than in reference soils （497 μg C g^-1）, and a negative correlation （P 〈 0.01） of soil microbial biomass carbon to organic carbon ratio （Cmic/Corg） with SDM was observed. Microbial consumption of carbon sources was more rapid in contaminated soils than in reference soils, and a shift in the substrate utilization pattern was apparent and was negatively correlated with SDM （R = -0.773, P 〈 0.01）. Consequently, dust deposited Pb, Zn, and Cd in soils from zinc smelting were readily mobilized, and were detrimental to soil quality mainly in respect of microbial biomass .

关键词： composite pollution index heavy metals microbial biomass saturation degree of metals sequential extrac- tion

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蛋白尿致肾小管间质纤维化的机制及防治

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中华肾脏病杂志 2006年第5期22卷 258-260页

作者：刘伏友中南大学湘雅二医院肾内科中南大学肾病研究所长沙410011

肾间质纤维化是各种不同病因的慢性肾脏病进展到终末期肾病（ESRD）的共同病变过程。动物实验和临床试验表明，各种肾脏疾病进行性肾功能恶化主要取决于肾间质损伤的严重程度。蛋白尿是肾小球疾病的共同临床表现，长期蛋白尿不仅引起肾... 详细信息

肾间质纤维化是各种不同病因的慢性肾脏病进展到终末期肾病（ESRD）的共同病变过程。动物实验和临床试验表明，各种肾脏疾病进行性肾功能恶化主要取决于肾间质损伤的严重程度。蛋白尿是肾小球疾病的共同临床表现，长期蛋白尿不仅引起肾小球硬化，而且可以直接导致肾小管间质损伤，后者与肾小球疾病进展的关系更为密切。我们的研究发现，在血压、肾功能均正常且其他各项临床指标相近的条件下，显著蛋白尿IgA肾病患者的肾小球及肾小管间质损害程度更为严重，蛋白尿可作为独立的致病因子，直接造成IgA肾病患者肾小管间质损害。因此，研究肾间质纤维化的分子机制，探索有效的防治措施，对延缓ESRD的进程意义重大。本文重点阐述蛋白尿致肾小管间质损伤的机制及防治现况。

关键词：肾小管间质纤维化蛋白尿终末期肾病(ESRD) 防治肾小管间质损伤 IgA肾病患者肾间质纤维化肾小球疾病肾小管间质损害肾功能恶化

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Gpnmb在小鼠M1和M2型骨髓源性巨噬细胞中表达的差异

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第7期33卷 488-494页

作者：周乐天刘伏友中南大学湘雅二医院肾内科长沙410011

目的了解小鼠M1和M2型骨髓源性巨噬细胞（BMMφs）中非转移性黑色素瘤糖蛋白b（Gpnmb）表达的差异。方法原代培养小鼠BMMφs，免疫荧光染色F4／80和流式细胞仪检测CD11b鉴定巨噬细胞；用IFN-γ和LPS诱导BMMφs向M1型分化，用IL-4诱导向M... 详细信息

目的了解小鼠M1和M2型骨髓源性巨噬细胞（BMMφs）中非转移性黑色素瘤糖蛋白b（Gpnmb）表达的差异。方法原代培养小鼠BMMφs，免疫荧光染色F4／80和流式细胞仪检测CD11b鉴定巨噬细胞；用IFN-γ和LPS诱导BMMφs向M1型分化，用IL-4诱导向M2型分化。实时荧光定量PCR检测M1型巨噬细胞标志物（TNF-α、iNOS）、M2型巨噬细胞标志物（MMR、Arg-1）和Gpn-mb的mRNA表达；免疫荧光双染色、Western印迹、流式细胞仪检测Gpnmb与MMR的蛋白表达。结果（1）免疫荧光染色结果示BMMφs中F4／80高表达；流式细胞仪检测结果示BMMφs中有（92．7±6．1）％细胞表达CD11b，提示BMMφs培养成功；（2）相对于未分化的M0型BMMφs，TNF-α、iNOSmRNA在M1型BMMφs中高表达（P均〈0．01），而MMR、Arg-1mRNA在M2型BMMφs中高表达（P均〈0．01），提示原代M1、M2型BMMφs分化成功；（3）M2型BMMφs的GpnmbmRNA和蛋白表达均较M0型和M1型BMMφs显著增高（P均〈0．01）；免疫荧光双染色及流式细胞仪结果显示，BMMφs中Gpnmb与MMR共表达，在M2型BMMφs中MMR阳性BMMφs有（83．2±9．7）％表达Gpnmb。结论M2型BMMφs的Gpnmb表达较M1型BMMφs显著增高，提示Gpnmb可能作为鉴别M1、M2型巨噬细胞的标志物，在巨噬细胞的表型分化中起作用。

关键词： Gpnmb 骨髓源性巨噬细胞 M1型巨噬细胞 M2型巨噬细胞 MMR

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吲哚美辛对人腹膜间皮细胞分泌FN和PAI-1的影响

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中南大学学报（医学版） 2005年第5期30卷 590-592,603页

作者：刘新彭佑铭刘伏友魏佳莉清华大学第一附属医院肾内科北京100016 中南大学湘雅二医院肾病研究所长沙410078

目的:探讨吲哚美辛对人腹膜间皮细胞分泌FN和PAI-1的影响。方法:用LPS或2.5%葡萄糖分别与不同浓度的吲哚美辛作用于体外培养的人腹膜间皮细胞,采用酶联免疫吸附法检测上清液中纤维连接蛋白(FN)和纤溶酶原抑制剂-1(PAI-1)的含量。结果:... 详细信息

目的:探讨吲哚美辛对人腹膜间皮细胞分泌FN和PAI-1的影响。方法:用LPS或2.5%葡萄糖分别与不同浓度的吲哚美辛作用于体外培养的人腹膜间皮细胞,采用酶联免疫吸附法检测上清液中纤维连接蛋白(FN)和纤溶酶原抑制剂-1(PAI-1)的含量。结果:腹膜间皮细胞在2.5%葡萄糖或10mg/LLPS刺激下分泌FN及PAI-1明显增加,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01);0.15mg/L及0.75mg/L吲哚美辛可明显抑制2.5%葡萄糖或10mg/LLPS刺激的腹膜间皮细胞24h内分泌FN及PAI-1蛋白水平(P<0.05)。结论:吲哚美辛可抑制人腹膜间皮细胞合成细胞外基质,在腹膜纤维化的防治中有潜在的应用价值。

关键词：吲哚美辛纤维连接蛋白纤溶酶原抑制剂-1 腹膜间皮细胞

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基于热图像的种蛋气室变化监测算法

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光谱学与光谱分析 2021年第2期41卷 572-578页

作者：刘又夫肖德琴王春桃华南农业大学数学与信息学院/广东省农业大数据工程技术研究中心广东广州510642

种蛋气室的大小是监测种蛋孵化过程的重要指标之一。根据种蛋的热力学结构,种蛋在孵化过程中,包裹气室部分蛋壳会与其他部分蛋壳产生温差,从而可通过热红外图像进行观察。针对在种蛋孵化过程中,人工照蛋检测气室效率低的问题,探索设计... 详细信息

种蛋气室的大小是监测种蛋孵化过程的重要指标之一。根据种蛋的热力学结构,种蛋在孵化过程中,包裹气室部分蛋壳会与其他部分蛋壳产生温差,从而可通过热红外图像进行观察。针对在种蛋孵化过程中,人工照蛋检测气室效率低的问题,探索设计了一种基于热图像的种蛋气室变化俯视监测算法。监测种蛋气室热图像的算法主要包括种蛋目标检测,种蛋图像分割和种蛋气室面积计算3个部分,其中种蛋的目标检测采用Faster-RCNN算法实现;种蛋图像分割采用BP神经网络算法实现;种蛋气室面积是在种蛋图像分割的基础上进行计算。使用孵化5天及以上的种蛋作为研究对象,并拍取种蛋的热图像进行试验。试验结果表明:种蛋热图像的目标检测的平均精度(mAP)为99.85%,拥有较好的检测效果。使用BP网络对种蛋进行图像分割。BP神经网络经过调参后,其网络最佳的结构为三层隐藏层,每个隐藏层拥有1000个神经元,最优初始学习率为0.0001,最优最大迭代次数为500。以F1-measure作为分割效果的评价指标,BP神经网络的图像分割总体结果为87.02%,Otsu算法的总体结果为65.25%。其中只有一个蛋的情况下,BP神经网络的分割结果为87.17%,Otsu算法的结果为68.86%。存在其他种蛋的干扰条件下,BP神经网络的分割结果为86.94%,Otsu算法的结果为61.64%,BP神经网络的分割效果优于Otsu分割算法,BP神经网络拥有更强的抗干扰能力。最后提取了孵化5~19 d种蛋的气室变化,通过观察种蛋气室大小曲线来监测种蛋的孵化情况,可看出随着天数的增加,气室有着明显变大的趋势。人工测量法与热红外测量法比较结果说明两者相关性为0.9343,拥有较好的相关性。基于热图像的种蛋气室变化监测算法可在实际生产中实现种蛋的识别与气室大小的快速监测,为实现监测种蛋孵化的自动化提供了技术参考。

关键词：热图像种蛋气室机器视觉深度学习 BP神经网络图像分割

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免疫荧光细胞化学和免疫酶细胞化学染色方法检测IgA肾病患者尿足细胞的效果比较

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吉林大学学报（医学版） 2013年第6期39卷 1242-1246,1316页

作者：姜文玲彭佑铭刘虹夏运成刘伏友中南大学湘雅第二医院肾脏病研究所肾病实验室湖南长沙410011

目的：比较免疫荧光细胞化学和免疫酶细胞化学染色2种方法检测IgA肾病（IgAN）患者尿足细胞的效果，为尿足细胞检测方法的选择提供依据。方法：收集43例确诊为IgAN患者（实验组）和10例正常对照研究对象（对照组）活检前连续3d的晨尿各2... 详细信息

目的：比较免疫荧光细胞化学和免疫酶细胞化学染色2种方法检测IgA肾病（IgAN）患者尿足细胞的效果，为尿足细胞检测方法的选择提供依据。方法：收集43例确诊为IgAN患者（实验组）和10例正常对照研究对象（对照组）活检前连续3d的晨尿各200mL，离心上清制成涂片。IgAN患者按Lee分级分成Lee I～LeeV组。采用抗人足细胞表面标记蛋白Podocalyxin（PCX）单克隆抗体对尿沉渣涂片分别行免疫荧光细胞化学和免疫酶细胞化学染色，荧光显微镜和普通光学显微镜下计数2组研究对象尿足细胞数；采用Spearman相关分析法分析2种方法检测IgAN患者尿足细胞数的相关性。结果：2种方法检测的对照组研究对象尿中未见足细胞，2种方法检测实验组研究对象尿中均可见足细胞；免疫荧光细胞化学法检测足细胞阳性率和检出中位数低于免疫酶细胞化学法，2种方法检测尿足细胞阳性率和中位数比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；2种方法检查患者尿足细胞数呈明显的正相关关系（r=0．842，P〈0．01）。结论：采用免疫酶细胞化学法检测同一份尿标本的效果优于免疫荧光细胞化学法。

关键词：免疫酶细胞化学免疫荧光细胞化学足细胞尿液

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