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诱变酒酒球菌中抗酸候选基因ATPase和FtsH的表达差异分析及功能验证

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中国食品学报 2021年第1期21卷 215-224页

作者：文向圆原雨欣余东亮刘树文西北农林科技大学葡萄酒学院陕西杨凌712100 秦皇岛金士国际葡萄酒有限公司河北昌黎066600 陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心陕西杨凌712100 陕西省合阳葡萄试验示范站陕西渭南715300

为研究胁迫条件下具有不同表达趋势的抗酸候选基因ATPase和FtsH是否可以提高菌株的抗酸性,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定诱变酒酒球菌抗酸菌株b1和酸敏菌株b2中ATPase和FtsH在pH 4.8(最适条件)和pH 3.0(胁迫条件)ATB培养基中的相对... 详细信息

为研究胁迫条件下具有不同表达趋势的抗酸候选基因ATPase和FtsH是否可以提高菌株的抗酸性,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定诱变酒酒球菌抗酸菌株b1和酸敏菌株b2中ATPase和FtsH在pH 4.8(最适条件)和pH 3.0(胁迫条件)ATB培养基中的相对表达量,分析其表达趋势;从b1中克隆ATPase和FtsH,分别命名为ATPase1和FtsH1,从b2中克隆ATPase和FtsH,分别命名为ATPase2和FtsH2,分析序列差异;将ATPase1,ATPase2,FtsH1和FtsH2分别在植物乳杆菌XJ25中做功能验证,构成重组植物乳杆菌a1,a2,f1和f2。以含空载体的植物乳杆菌con为对照,于pH 3.2的MRS培养基中测定重组植物乳杆菌的生长能力。定量结果表明ATPase在菌株b1和b2中表达量均显著上调;FtsH在b1中不变,在b2中显著上调。ATPase1和ATPase2在功能结构域内有3处非同义突变,FtsH1和FtsH2在跨膜结构域内有1处非同义突变。功能验证结果表明:a1和a2的生长能力均强于con,且a1和a2生长能力无差异;f1生长能力强于con,f2生长能力与con无差异。由此可知ATPase1,ATPase2和FtsH1均可以提高菌株抗酸性。

关键词：抗酸生物信息学分析实时荧光定量PCR

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产β-糖苷酶菌株的筛选及酶活的研究

中国酿造 2009年第6期28卷 68-71页

作者：李庆华刘树文西北农林科技大学葡萄酒学院陕西杨凌712100 陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心陕西杨凌712100

利用对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷为底物筛选酿酒酵母菌,得到1株高产糖苷酶的酿酒酵母菌。以该菌株作为实验菌株,研究该菌株的酶活特性,对酿酒酵母菌酶活性测定条件进行研究。通过单因子试验,确立了该菌株发酵对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷酶... 详细信息

利用对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷为底物筛选酿酒酵母菌,得到1株高产糖苷酶的酿酒酵母菌。以该菌株作为实验菌株,研究该菌株的酶活特性,对酿酒酵母菌酶活性测定条件进行研究。通过单因子试验,确立了该菌株发酵对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷酶的最适培养条件:pH4.0,温度为40℃,发酵时间为6h。高浓度的葡萄糖、果糖对酶活没有抑制作用,酒精度超过14%vol时对产酶有抑制作用。

关键词： β-葡萄糖苷酶优化温度

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自动驾驶的伦理问题研究述评

当代中国价值观研究 2020年第4期5卷 121-128页

作者：刘书文上海师范大学马克思主义学院

自动驾驶汽车作为以人工智能技术为支撑的代表性产物之一,在其现实运用过程中衍生了一系列伦理问题。相关研究的核心主要聚焦于自动驾驶所引发的道德伦理、机器伦理与法律伦理方面。其中不仅涉及后果主义与绝对主义、事故算法与道德算... 详细信息

自动驾驶汽车作为以人工智能技术为支撑的代表性产物之一,在其现实运用过程中衍生了一系列伦理问题。相关研究的核心主要聚焦于自动驾驶所引发的道德伦理、机器伦理与法律伦理方面。其中不仅涉及后果主义与绝对主义、事故算法与道德算法以及伦理和法理的争论,更囊括了主体利益分化、利益归责与边界认定以及法律政策制定等难题。通过探讨道德、机器与法律伦理方面关于现存论争与道德决策、算法设定的诘难以及事故结果的判定等问题,可把握自动驾驶汽车在伦理问题方面的研究现状。

关键词：自动驾驶汽车道德伦理机器伦理法律伦理

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南京地区天牛幼虫分类研究

南京林业大学学报（自然科学版） 2012年第5期36卷 102-108页

作者：张凯嵇保中刘曙雯叶军南京林业大学森林资源与环境学院上海出入境检验检疫局南京市中山陵园管理局

采集鉴定出南京地区天牛科幼虫24种,分属锯天牛亚科、幽天牛亚科、天牛亚科、沟胫天牛亚科。经对比发现,在原来的种类记录基础上新增了5属9种,目前南京地区共有天牛46属67种,其中5种为江苏省分布新记录,分别为光胸断眼天牛(Tetropium ca... 详细信息

采集鉴定出南京地区天牛科幼虫24种,分属锯天牛亚科、幽天牛亚科、天牛亚科、沟胫天牛亚科。经对比发现,在原来的种类记录基础上新增了5属9种,目前南京地区共有天牛46属67种,其中5种为江苏省分布新记录,分别为光胸断眼天牛(Tetropium castaneum(Linnaeus))、浙江脊虎天牛(Xylotrechus savioi Pic)、白带窝天牛(Desisa subfasciata(Pascoe))、构树筒天牛(Oberearufotestasea Pic)、金合欢坡天牛(Pterolophia persimilis Gahan)。此次研究获得了上述24种天牛幼虫的主要鉴定特征图片,并描述了金合欢坡天牛(*** Gahan)、浙江脊虎天牛(***)幼虫的外部形态,其中苜蓿多节天牛(Agapanthia amurensis Kraatz)幼虫属于国内首次描述。

关键词：天牛幼虫外部形态江苏省新记录南京

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华北陆块基底构造格局及早期大陆克拉通化过程

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岩石学报 2000年第1期16卷 1-10页

作者：李江海钱祥麟黄雄南刘树文北京大学地质学系北京100871

依据区域构造分析及同位素年代学数据库 ,华北克拉通变质基底主要可以区划为以下构造单元 :1)鄂尔多斯陆块新太古代被动边缘沉积 ;2 )恒山 -承德太古代末期构造带 ;3)太古代末期五台 -登封岛弧带杂岩及构造缝合带 ;4)鲁西 -冀东 -辽吉... 详细信息

依据区域构造分析及同位素年代学数据库 ,华北克拉通变质基底主要可以区划为以下构造单元 :1)鄂尔多斯陆块新太古代被动边缘沉积 ;2 )恒山 -承德太古代末期构造带 ;3)太古代末期五台 -登封岛弧带杂岩及构造缝合带 ;4)鲁西 -冀东 -辽吉新太古代活动大陆边缘岩浆杂岩带 ;5 )胶辽陆块 ;6 )冀北 -固阳古元古代初造山带及内蒙 -冀东再造麻粒岩相带 ;7)吕梁 -中条古元古代裂谷带 ;8)辽南古元古代裂谷带。华北克拉通早期构造演化历史主要涉及东部陆块西缘的岛弧增生及其与西部陆块的碰撞拼合 ,太古代末期克拉通北缘开始形成增生型陆缘活动带 ,并造成克拉通中部的裂谷作用。东部古郯庐断裂带的活动造成辽南 -鲁北古元古代裂谷带的形成。最后 ,以古元古代末期的拗拉谷系、基性岩墙群为标志的伸展构造体制。

关键词：杂岩表壳岩系板块构造华北陆块基底构造格局

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非包被ELISA可检测寨卡病毒包膜蛋白

南方医科大学学报 2019年第6期39卷 699-704页

作者：柳红妙周炜烽廖晖胡正阳邹敏刘叔文南方医科大学药学院广东省新药筛选重点实验室广州市新发病毒防治药物研究重点实验室

目的建立一种基于寨卡病毒包膜蛋白的非包被ELISA方法,检测被感染的细胞内E蛋白的表达情况,用于抗寨卡病毒药物筛选。方法将寨卡病毒感染的贴壁细胞固定在孔板上,加入抗体与之结合,并确定抗体浓度,建立E蛋白的非包被ELISA方法;用该方法... 详细信息

目的建立一种基于寨卡病毒包膜蛋白的非包被ELISA方法,检测被感染的细胞内E蛋白的表达情况,用于抗寨卡病毒药物筛选。方法将寨卡病毒感染的贴壁细胞固定在孔板上,加入抗体与之结合,并确定抗体浓度,建立E蛋白的非包被ELISA方法;用该方法检测木脂素类化合物C1的抗病毒活性;用实时荧光定量PCR实验(RT-PCR)验证这种非包被ELISA方法的准确性;并排除该方法对登革病毒的交叉反应。结果经过优化,未感染的细胞的背景A450nm降低到0.20左右,采用该方法检测的抗病毒活性结果,与实时荧光定量PCR实验的结果基本一致,且该方法对登革病毒不存在交叉反应。结论建立了一种寨卡病毒E蛋白的非包被ELISA方法,可用于抗寨卡病毒药物筛选。

关键词：寨卡病毒酶联免疫吸附实验包膜蛋白交叉反应抗病毒药物

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中国农村经济发展新旧动能转换测度与评价

统计与决策 2021年第8期37卷 73-76页

作者：刘姝雯杨胜刚阳旸湖南大学金融与统计学院长沙410082 湖南师范大学商学院长沙410081

农村经济发展新旧动能转换是农业供给侧结构性改革的重要标志,是推进农村经济高质量发展与助力乡村振兴战略的重要保障。文章在系统阐释农村经济发展新旧动能转换内涵的基础上,构建了包括需求侧动能、供给侧动能与结构转换动能在内的综... 详细信息

农村经济发展新旧动能转换是农业供给侧结构性改革的重要标志,是推进农村经济高质量发展与助力乡村振兴战略的重要保障。文章在系统阐释农村经济发展新旧动能转换内涵的基础上,构建了包括需求侧动能、供给侧动能与结构转换动能在内的综合指标体系,对我国2005—2018年农村经济发展新旧动能转换水平进行测算与评价。结果显示,中国农村经济发展新旧动能转换以平稳的速度跨过起步阶段,进入了加速阶段,不同省份在不同动能维度的发展水平上差异较大,区域不平衡较为明显。

关键词：农村经济需求侧动能供给侧动能结构转换功能

Identification of HBsAg-specific antibodies from a mammalian cell displayed full-length human antibody library of healthy immunized donor

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Cellular & Molecular Immunology 2012年第2期9卷 184-190页

作者： Chang-Zheng Li Zhong-Kun Liang Zhen-Rui Chen Hai-Bo Lou Ye Zhou Zhe-Huan Zhang Fei Yu shuwen liu Yuanping Zhou Shuguang Wu Wenling Zheng Wanlong Tan Shibo Jiang Chen Zhou Nanfang Hospital Southern Medical UniversityGuangzhouChina Institute of Genetic Engineering Southern Medical UniversityGuangzhouChina School of Traditional Chinese Medicine Southern Medical UniversityGuangzhouChina School of Pharmaceutical Science Southern Medical UniversityGuangzhouChina MOE/MOH Key Laboratory of Medical Molecular Virology Shanghai Medical CollegeFudan UniversityShanghaiChina Dgen Biotech Limited Company Hong KongChina

Hepatitis B immunoglobulin （HBIG） is important in the management of hepatitis B virus （HBV） infection. Aiming to develop recombinant monoclona# antibodies as an alternative to HBIG, we report the successful identification of HBV surface antigen （HBsAg）-specific antibodies from a full-length human antibody library displayed on mammalian cell surface. Using total RNA of peripheral blood mononuclear cells of a natively immunized donor as template, the antibody repertoire was amplified. Combining four-way ligation and the FIp recombinase-mediated integration （FIp-ln） system, we constructed a mammalian cell-based, fully human, full-length antibody display library in which each cell displayed only one kind of antibody molecule. By screening the cell library using fluorescence-activated cell sorting （FACS）, eight cell clones that displayed HBsAg-specific antibodies on cell surfaces were identified. DNA sequence analysis of the antibody genes revealed three unique antibodies. FACS data indicated that fluorescent strength of expression （FSE）, fluorescent strength of binding （FSB） and relative binding ability （RBA） were all different among them. These results demonstrated that by using our antibody mammalian display and screening platform, we can successfully identify antigen-specific antibodies from an immunized full-length antibody library. Therefore, this platform is very useful for the development of therapeutic antibodies.

关键词： antibody display antibody screening full-length antibody HBsAg-specific antibody mammalian display

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碳酸钙产品分类与命名建议

无机盐工业 2008年第3期40卷 1-3页

作者：胡庆福刘祝增刘树文中国无机盐工业协会专家委员会河北石家庄050018

碳酸钙产品广泛应用于塑料、造纸、涂料、橡胶、日化、医药、食品、饲料等行业。根据加工方法不同可分为重质碳酸钙（GCC）、轻质碳酸钙（PCC）；根据是否改性可分为普通碳酸钙和活性碳酸钙；根据用途不同可分为专用碳酸钙。为了方便行... 详细信息

碳酸钙产品广泛应用于塑料、造纸、涂料、橡胶、日化、医药、食品、饲料等行业。根据加工方法不同可分为重质碳酸钙（GCC）、轻质碳酸钙（PCC）；根据是否改性可分为普通碳酸钙和活性碳酸钙；根据用途不同可分为专用碳酸钙。为了方便行业管理，便于统计，有利于用户选用，建议按产品加工方法及其平均粒径大小分为轻质和重质两大类。轻质碳酸钙分为轻质碳酸钙（〉2．0μm）、超细碳酸钙（0．1～2．0μm）、纳米级碳酸钙（≤0．1μm）等3个级别，每个级别中分为活性与普通产品、各种专用产品等；重质碳酸钙分为重质碳酸钙（〉10μm）、微细重质碳酸钙（2．0～10μm）、超细重质碳酸钙（0．1—2．0μm）等3个级别，每个级别中分为活性与普通产品、各种专用产品等。各类各种碳酸钙产品物理及化学指标分别符合国家、行业或企业标准要求。

关键词：轻质碳酸钙重质碳酸钙分类命名