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时效工艺对铸轧辊铍铜合金力学性能和显微组织影响

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特种铸造及有色合金 2021年第12期41卷 1514-1517页

作者：周延军陈伟李立鸿孔令宝宋克兴刘海涛国秀花河南科技大学材料科学与工程学院河南洛阳471023 汕头华兴(饶平)铜业有限公司汕头华兴冶金设备股份有限公司

对制备的Cu-0.33Be合金进行固溶(960℃×60 min)和不同时效工艺热处理,对比研究了锻态和时效过程中Cu-0.33Be合金的硬度、抗拉强度和拉伸断口形貌的变化。结果表明,时效处理可以显著改善Cu-0.33Be合金的硬度和抗拉强度,460℃时效60 min... 详细信息

对制备的Cu-0.33Be合金进行固溶(960℃×60 min)和不同时效工艺热处理,对比研究了锻态和时效过程中Cu-0.33Be合金的硬度、抗拉强度和拉伸断口形貌的变化。结果表明,时效处理可以显著改善Cu-0.33Be合金的硬度和抗拉强度,460℃时效60 min后,抗拉强度达到峰值661.6 MPa,此时硬度(HB)为207;时效60 min时晶粒最小,时效时间进一步延长,晶粒长大;微观断口形貌在锻态时为韧性断裂,随着时效时间延长,韧性断裂逐渐向脆性断裂转变,峰时效后为典型的脆性颗粒间断裂。

关键词： Cu-0.33Be合金时效硬度抗拉强度断口形貌

持续感染口蹄疫病毒VP1蛋白对细胞转录组的影响

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江西农业大学学报 2022年第2期44卷 411-421页

作者：杨黎刘萍韦美华柯雄锋刘丽清宋静静方莹唐欢孔令保辛秀江西农业大学病原微生物研究所江西南昌330045 江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045 南昌市动物病毒与基因工程重点实验室江西南昌330045

【目的】通过转录组测序(RNA-Seq)方法分析持续感染口蹄疫病毒结构蛋白VP1诱导的PK-15细胞基因表达谱的变化,探索VP1蛋白对宿主细胞信号通路的影响。为后续开展VP1影响FMDV持续感染相关机制研究提供基础数据和理论支持。【方法】PK-15... 详细信息

【目的】通过转录组测序(RNA-Seq)方法分析持续感染口蹄疫病毒结构蛋白VP1诱导的PK-15细胞基因表达谱的变化,探索VP1蛋白对宿主细胞信号通路的影响。为后续开展VP1影响FMDV持续感染相关机制研究提供基础数据和理论支持。【方法】PK-15细胞分别转染pCAGGS-HA(对照载体)、pCAGGS-HA-Pi-VP1质粒,转染36 h后,Western blot检测VP1蛋白表达,同时提取两组细胞总RNA进行转录组测序(每组3个重复,2组6个样本)。将测序所得的序列进行过滤比对,获得差异表达基因后,对差异表达基因进行了生物信息学分析。采用qRT-PCR验证关键差异表达基因的表达。【结果】RNA-Seq共鉴定出3376个差异表达基因(DEGs)|log2(Fold Change)|>0和padj<0.05,其中上调基因1744个,下调基因1632个。许多参与免疫反应和炎症的效应基因差异表达。GO和KEGG富集分析显示,差异基因GO条目绝大部分与核糖体有关,而KEGG富集中涉及了与天然免疫相关的信号通路,如TNF信号通路、Toll受体信号通路。【结论】pCAGGS-HA-Pi-VP1转染PK-15细胞之后,改变了细胞的表达谱,获得的DEGs及其功能注释信息有助于理解其对宿主细胞的影响,为后续开展VP1影响FMDV持续感染相关机制研究提供基础数据和理论支持。

关键词：转录组基因表达谱 FMDV 持续感染 VP1 差异表达基因

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拉拔变形和热处理对铜银合金组织性能的影响

特种铸造及有色合金 2020年第10期40卷 1160-1163页

作者：孔令宝周延军宋克兴封存利康军伟曹军李周牛立业郭慧稳河南科技大学材料科学与工程学院河南洛阳471023 有色金属新材料与先进加工技术省部共建协同创新中心河南森格材料科技有限公司河南理工大学中南大学材料科学与工程学院中铝洛阳铜加工有限公司

以热型水平连铸制备的铜银合金为研究对象,对比研究了拉拔变形+热处理的3种组合工艺对合金电导率、力学性能,以及显微组织的影响。结果表明,在固溶和时效热处理之间施加85.9%的拉拔变形量,合金可在试验范围内获得优异的综合性能,电导率... 详细信息

以热型水平连铸制备的铜银合金为研究对象,对比研究了拉拔变形+热处理的3种组合工艺对合金电导率、力学性能,以及显微组织的影响。结果表明,在固溶和时效热处理之间施加85.9%的拉拔变形量,合金可在试验范围内获得优异的综合性能,电导率为51.91MS/m、显微硬度(HV_(0.1))为169.7、抗拉强度为541.6MPa,伸长率为15.5%。通过在固溶和时效之间施加拉拔变形,合金晶粒得到细化,且沿特定方向排布。同时,拉伸断口形貌以分布均匀的韧窝为主,且断口处较为平整。

关键词：铜银合金拉拔变形热处理电导率微观组织

新冠病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立

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生物灾害科学 2022年第4期45卷 415-422页

作者：刘树荣陶飞飞熊园翔温林郭韫丽孔令保江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045 江西农业大学南昌市动物病毒与基因工程重点实验室江西南昌330045

【目的】为了实现对新冠病毒一步法检测。【方法】采用RT-LAMP技术,利用具有反转录酶活性的Bst3.0 DNA聚合酶,以新冠病毒N蛋白基因为模板设计LAMP引物,成功建立了以新冠N蛋白基因为靶基因的RT-LAMP检测方法。同时对反应条件中的温度、... 详细信息

【目的】为了实现对新冠病毒一步法检测。【方法】采用RT-LAMP技术,利用具有反转录酶活性的Bst3.0 DNA聚合酶,以新冠病毒N蛋白基因为模板设计LAMP引物,成功建立了以新冠N蛋白基因为靶基因的RT-LAMP检测方法。同时对反应条件中的温度、镁离子浓度、NTP浓度、甜菜碱浓度以及酶浓度进行优化。通过加入钙黄绿素和氯化锰显色剂对反应结果进行判定,用ASFV p54质粒和JEV NS1质粒与稀释后模板做对照。【结果】温度为66℃,镁离子浓度为6mmol/L,甜菜碱浓度为1 mol/L,NTP为1.4 mmol/L,酶浓度为160 U/L为最优反应条件。【结论】证明了Bst3.0 DNA聚合酶对新冠N蛋白基因检测是成功的,该方法具有良好的特异性以及灵敏度。

关键词：新型冠状病毒环介导等温扩增技术可视化

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基于热流固耦合的单井增强地热系统数值模拟

哈尔滨工程大学学报 2024年第6期45卷 1066-1075页

作者：郭志鹏卜宪标赵源李华山王令宝中国科学技术大学工程科学学院安徽合肥230026 中国科学院广州能源研究所广东广州510640 中国电建集团华东勘测设计研究院有限公司浙江杭州311122

为提高深井换热器的取热效率,借鉴干热岩的开发思路,本文提出了一种单井增强地热系统。对单井套管底部岩体进行小范围压裂改造,将单井套管由封闭式系统改为开式系统来提高单井系统的取热性能。建立了热-流-固耦合的三维非稳态数值模型,... 详细信息

为提高深井换热器的取热效率,借鉴干热岩的开发思路,本文提出了一种单井增强地热系统。对单井套管底部岩体进行小范围压裂改造,将单井套管由封闭式系统改为开式系统来提高单井系统的取热性能。建立了热-流-固耦合的三维非稳态数值模型,研究了单井增强地热系统的系统性能表现和各关键参数的影响。结果表明:与传统深井换热器相比,单井增强地热系统的取热性能有较大提升,相同注入工况下,生产温度和取热功率分别提高了62.21℃和2 612.99 kW;从地热工程周期和优化角度出发,单井增强地热系统流量控制在10 kg/s较为适宜,过小的单井增强地热系统流量导致取热效率较低,过大使得系统运行寿命较短;增大井筒封隔间距、减小内管导热系数是提高系统取热性能的有效方法。本文研究可为单井增强地热系统的理论分析和实际应用提供参考。

关键词：地热能深井换热器增强型地热系统单井多孔介质压裂储层渗透率热流固耦合

猴痘F3L蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备

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中国病原生物学杂志 2023年第11期18卷 1274-1278页

作者：王毅豪刘承锐刘昊霖贾梦乐杨领弟陶飞飞王婷王宇孔令保黎美凤江西农业大学生物科学与工程学院江西农业大学病原微生物研究所江西农业大学南昌市动物病毒与基因工程重点实验室江西南昌330045

目的猴痘病毒(MPXV)是一种能引起人畜共患病的正痘病毒属病毒,在人群和野生动物中具有较高的感染率,对人类公共卫生安全造成重大威胁。当前猴痘病毒的相关研究基础较弱,猴痘诊断试剂匮乏。本研究旨在以猴痘病毒基因F3L为对象表达F3L重... 详细信息

目的猴痘病毒(MPXV)是一种能引起人畜共患病的正痘病毒属病毒,在人群和野生动物中具有较高的感染率,对人类公共卫生安全造成重大威胁。当前猴痘病毒的相关研究基础较弱,猴痘诊断试剂匮乏。本研究旨在以猴痘病毒基因F3L为对象表达F3L重组蛋白并免疫小鼠,制备F3L多克隆抗体,为猴痘诊断试剂的研发奠定基础。方法克隆猴痘病毒基因F3L,构建至原核表达载体pET-28a上,测序无误后将重组质粒pET-28a-MPXV-F3L转化*** BL21感受态细胞,用优化的IPTG诱导表达条件表达MPXV-F3L重组蛋白,表达蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化后采用SDS-PAGE及Western blot进行鉴定。用纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备F3L多克隆抗体血清,采用ELISA检测血清抗体滴度。结果克隆得到的猴痘病毒F3L基因片段长度为471 bp,表达的pET-28a-MPXV-F3L重组蛋白分子质量约为24.6 ku,其最佳表达条件为IPTG浓度0.2 mmol/L、温度42℃、时间12 h。表达蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化后纯度达95.29%,经Western blot鉴定表达蛋白能被相应抗体识别。用该蛋白免疫小鼠,制备获得F3L多克隆抗体ELISA滴度为4.709。结论重组表达的F3L蛋白具有抗原性,免疫小鼠后能刺激产生高滴度的血清抗体,为F3L蛋白功能分析、猴痘病毒的致病机制研究以及诊断试剂和疫苗的开发奠定了基础。

关键词：猴痘病毒 F3L 原核表达纯化免疫

乙型脑炎病毒NS1_(△63)蛋白发酵工艺优化研究

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生物灾害科学 2023年第2期46卷 242-248页

作者：陶飞飞卞佳宁余文捡刘仕国熊海月钟鸣孔令保王婷江西农业大学生物科学与工程学院/南昌市动物病毒与基因工程重点试验室江西南昌330045

【目的】乙型脑炎病毒NS1蛋白能诱导机体产生保护性免疫,具有开发成亚单位疫苗的潜力。为提高重组蛋白NS1_(△63)的原核表达量,研究进行发酵条件优化以开发稳定高产的蛋白生产工艺。【方法】采用单因素与Plackett-Burman试验对培养基成... 详细信息

【目的】乙型脑炎病毒NS1蛋白能诱导机体产生保护性免疫,具有开发成亚单位疫苗的潜力。为提高重组蛋白NS1_(△63)的原核表达量,研究进行发酵条件优化以开发稳定高产的蛋白生产工艺。【方法】采用单因素与Plackett-Burman试验对培养基成分进行优化,同时探究诱导条件对发酵的影响,并在5 L发酵罐中进行初步的工艺放大验证。【结果】最佳的培养基成分为乳糖10 g/L、酵母粉19 g/L、蛋白胨25 g/L、磷酸盐37.5 mmol/L、氯化钾1.25 g/L。最佳发酵条件是诱导温度36℃、诱导时间12 h、0.6 mmol/L IPTG、5%接种量。蛋白产量提高到优化前的3.25倍,5 L发酵罐蛋白产量可达3022.23 mg/L。【结论】研究显著提高了NS1△63蛋白的原核产量,为该蛋白应用于亚单位疫苗和检测试剂盒的相关研究奠定了基础。

关键词：乙型脑炎病毒 NS1_(△63) 大肠杆菌发酵优化 Plackett-Burman试验

猴痘病毒A23R蛋白的表达、纯化及其小鼠抗血清制备

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第7期39卷 642-648页

作者：王毅豪李名志贾梦乐杨领弟熊嘉琪王婷王宇刘树荣郭韫丽孔令保黎美凤江西农业大学:病原微生物研究所南昌市动物病毒与基因工程重点实验室生物科学与工程学院生物技术教研室江西南昌330045

目的大肠杆菌细胞表达和镍柱纯化猴痘病毒(MPXV)A23R蛋白,制备小鼠抗MPXV A23R的高效价抗血清。方法构建重组质粒pET-28a-MPXV-A23R,并转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,优化蛋白表达条件后获得大量蛋白。镍柱纯化重组蛋白A23R并进行Weste... 详细信息

目的大肠杆菌细胞表达和镍柱纯化猴痘病毒(MPXV)A23R蛋白,制备小鼠抗MPXV A23R的高效价抗血清。方法构建重组质粒pET-28a-MPXV-A23R,并转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,优化蛋白表达条件后获得大量蛋白。镍柱纯化重组蛋白A23R并进行Western blot法鉴定。纯化后的A23R蛋白免疫小鼠,制备A23R多克隆抗体,采用ELISA检测抗体免疫滴度。结果在0.6 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)、诱导温度37℃、诱导20 h时,获得的A23R重组蛋白表达量最大,纯化后的蛋白纯度约为96.07%,经Western blot法鉴定为目的蛋白。重组蛋白免疫小鼠,第6周时IgG抗体的效价达到1∶102 400。结论成功获得高表达和高纯度的重组A23R蛋白,并制备了小鼠抗MPXV-A23R的高效价血清。

关键词：猴痘病毒(MPXV) A23R 表达纯化免疫

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不同温度退火后Cu-Ag合金的组织和性能

机械工程材料 2020年第12期44卷 29-32页

作者：孔令宝周延军宋克兴曹军吕长春李科刘庆宾吴保安唐会毅张学宾皇涛河南科技大学材料科学与工程学院洛阳471023 有色金属共性技术河南省协同创新中心洛阳471023 河南理工大学机械与动力工程学院焦作454000 河南优客电子材料有限公司济源454650 重庆材料研究院有限公司国家仪表功能材料工程技术研究中心重庆400700

采用连铸法结合冷拉拔与中间软化处理制备Cu-4Ag和Cu-20Ag合金,研究了合金在不同温度(440,480,520℃)退火后的显微组织、硬度和导电率。结果表明:退火后,富银相在Cu-4Ag和Cu-20Ag合金横截面上分别呈细小的颗粒状和连续的网状结构,在合... 详细信息

采用连铸法结合冷拉拔与中间软化处理制备Cu-4Ag和Cu-20Ag合金,研究了合金在不同温度(440,480,520℃)退火后的显微组织、硬度和导电率。结果表明:退火后,富银相在Cu-4Ag和Cu-20Ag合金横截面上分别呈细小的颗粒状和连续的网状结构,在合金纵截面上均呈纤维状。与Cu-4Ag合金相比,Cu-20Ag合金的富银相较多,硬度较高,导电率较低;随退火温度升高,2种合金的硬度降低,导电率增大,480℃退火后二者的导电率和硬度均最接近;在480℃退火时Cu-20Ag合金的导电率和硬度达到最优匹配。

关键词： Cu-Ag合金退火硬度导电率