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Activation of DNA Damage Signaling Components by Diagnostic Computed Tomograph. (CT) Scans Detected in Patient Samples Using an Electroch.miluminescence-Based Assay Platform

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Advances in Bioscience and Biotech.ology 2017年第7期8卷 228-247页

作者： Yich.ng h.eih.Ulrike Begley Lauren endres James Keith.Antonietta F. h.nsen Laurence Kaminsky Brian McCandless Th.mas J. Begley Colleges of Nanoscale Science and Engineering State University of New York Polytechnic Institute Albany NY USA College of Arts and Sciences Stratton Veterans Administration Medical Center State University of New York Polytechnic Institute Albany NY USA

Tech.ologies th.t measure activation of components of th. DNA damage response (DDR) h.ve applications in exposure assessment and personalized medicine. Th. DDR and associated DNA repair path.ays encompass h.ndreds of proteins, making detailed measurement of activation tech.ically ch.llenging and laborious. Th. purpose of our study was to develop protein-specific assays for certain DDR components on a h.gh.th.ough.ut electroch.miluminescence (ECL)-based platform. We developed five working assay pairs for ataxia telangiectasia mutated (ATM), ch.ckpoint kinase 2 (Ch.2), ph.sph.rylated-ATM S1981, ph.sph.rylated-Ch.2 T68 and ph.sph.rylated-tumor protein p53 (p53) S15. We validated th. ECL results against traditional immunoblot and γ-h.AX foci measures in cell and cancer models. In an effort to test th. ECL-based tech.ology in a clinical setting, we utilized periph.ral blood mononuclear cells (PBMCs) from patients undergoing computed tomograph. (CT) scans. CT scans represent both.a valuable medical imaging diagnostic and a controlled environmental exposure to ionizing radiation for research.studies, as th.y deliver ~2 to 31 millisieverts (mSv) and are known to activate DDR components. In th.s study, we sh.w th.t ECL-based tech.ology can measure th. basal and damage-induced levels of DDR components in patient PBMC samples. Using a blinded study design and patient match.d pre- and post CT scan samples, we sh.w th.t ECL-derived data can consistently (94% of th. time, 15/16 patients) identify PBMCs th.t h.ve been exposed to low dose ionizing radiation associated with.CT scans. Ultimately, th. results of our pilot clinical study support th. idea th.t ECL-based tech.ology is applicable for use in clinical and population coh.rts th.t study components of th. DDR.

关键词： DNA Damage Response Ionizing Radiation Diagnostic CT-Scan Clinical Samples ATM Ch.2 p53

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促酰化蛋白受体C5L2在前脂肪细胞分化过程和脂肪酸负荷下的表达研究

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中华医学杂志 2007年第36期87卷 2571-2574页

作者：温宇王宏伟吴静卢慧玲夏治 katherine Cianflone 华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科武汉430030 加拿大拉瓦大学医学研究中心

目的观察3T3-L1前脂细胞分化和游离脂肪酸(FFA)对3T3-L1(前)脂肪细胞 C5L2基因和蛋白表达的影响。方法采用逆转录(RT)-PCR 和流式细胞仪检测不同分化时段和 FFA 处理后(前)脂肪细胞 C5L2 mRNA 和蛋白表达。结果 3T3-L1脂肪细胞 C5L2 mR... 详细信息

目的观察3T3-L1前脂细胞分化和游离脂肪酸(FFA)对3T3-L1(前)脂肪细胞 C5L2基因和蛋白表达的影响。方法采用逆转录(RT)-PCR 和流式细胞仪检测不同分化时段和 FFA 处理后(前)脂肪细胞 C5L2 mRNA 和蛋白表达。结果 3T3-L1脂肪细胞 C5L2 mRNA 表达呈分化依赖性增加,而 C5L2蛋白表达水平在分化早期显著增强,诱导分化6h.C5L2蛋白表达增加了21%(61%±18% vs 51%±15%,Ph.达高峰,增加了38%(70%±12%vs 51%±15%,P<0.01);分化3d 基本恢复至0d 水平。在3T3-L1成熟脂肪细胞,0.5 mmol/L 和1.0 mmol/L 油酸分别抑制46%(0.58±0.21 vs 1.08±0.46,P70.05)和84%(0.18±0.04 vs 1.08±0.46,P<0.05)C5L2 mRNA 表达,而0.125 mmol/L 油酸即能显著下调36%(35%±8% vs 54%±7%,P<0.01)C5L2蛋白表达。低浓度棕榈酸均能明显抑制 C5L2 mRNA 和蛋白的表达,1.0mmol/L 时 C5L2 mRNA和蛋白表达分别减少了41%(0.57±0.28 vs 0.97±0.41,p<0.05)和55%(24%±13% vs 54%±7%,P<0.01)。油酸和棕榈酸对前脂肪细胞 C5L2表达差异无统计学意义。结论促酰化蛋白/C5L2途径参与了脂肪细胞分化的调控过程。C5L2 mRNA 和蛋白表达的下调可能参与了油酸和棕榈酸诱导的成熟脂肪细胞胰岛素抵抗的发生。

关键词：脂细胞脂肪酸类促酰化蛋白

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诱导SW872前脂肪细胞分化的最优方法探讨

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基础医学与临床 2006年第3期26卷 315-318页

作者：卢慧玲王宏伟 katherine Cianflone 温宇华中科技大学同济医学院同济医院儿科心血管研究室湖北武汉430030 加拿大麦吉尔大学医学中心皇家维多利亚医院心血管脂代谢研究室

目的探讨诱导SW872脂肪细胞分化的最优方法。方法根据不同的分化诱导刺激分为6组:①对照组:无分化刺激,仅有DMEM/F12培养基;②胰岛素组:含2 mg/L Insulin;③1-甲基3-异丁基黄嘌呤组:含0.5 mmol/L IBMX;④促酰化蛋白组:含50 mg/L ASP;⑤... 详细信息

目的探讨诱导SW872脂肪细胞分化的最优方法。方法根据不同的分化诱导刺激分为6组:①对照组:无分化刺激,仅有DMEM/F12培养基;②胰岛素组:含2 mg/L Insulin;③1-甲基3-异丁基黄嘌呤组:含0.5 mmol/L IBMX;④促酰化蛋白组:含50 mg/L ASP;⑤激素鸡尾酒(胰岛素+1-甲基3-异丁基黄嘌呤+地塞米松组:含2 mg/L insulin+0.5 mmol/L IBMX+1.0μmol/L DEX;⑥油酸(oleic acid)组:含0.2 mg/L oleic acid。通过形态学观察、油红染色、测定细胞甘油三酯总量的方法。结果多组分化刺激中,油酸组刺激可在24 h.诱导SW872细胞分化,而且分化均匀,分化率高,分化后形成的脂肪细胞形态典型;而且油酸组促进SW872细胞分化过程中细胞内甘油三酯的积累。结论油酸是诱导SW872细胞分化的最佳方法,该方法的建立和统一,为进一步利用SW872细胞进行脂代谢、脂肪细胞功能的研究奠定了基础。

关键词：脂肪细胞分化油酸

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Macroph.ge-specific inh.bition of th. h.stone demeth.lase JMJD3 decreases STING and path.logic inflammation in diabetic wound repair

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Cellular & Molecular Immunology 2022年第11期19卷 1251-1262页

作者： Ch.istoph.r O.Audu William J.Melvin Amrita D.Josh. Sonya J.Wolf Jadie Y.Moon Frank M.Davis Emily C.Barrett Kevin D.Mangum h.ngping Deng Xianying Xing Rach.l Wasikowski Lam C.Tsoi Sriganesh.B.Sh.rma Tyler M.Bauer James Sh.diow Matth.w A.Corriere Andrea TObi Steven LKunkel Benjamin Levi Beth.ny BMoore Joh.nn EGudjonsson Andrew MSmith.katherine A.Gallagh.r Department of Surgery Section of Vascular SurgeryUniversity of MichiganAnn ArborMIUSA Department of Microbiology and Immunology University of MichiganAnn ArborMIUSA Department of Medicinal Ch.mistry University of MichiganAnn ArborMIUSA Department of Surgery Section of General SurgeryUniversity of MichiganAnn ArborMIUSA Department of Bioengineering University of IllinoisUrbana-ChampaignChampaignILUSA Department of Dermatology University of MichiganAnn ArborMIUSA Department of Path.logy University of MichiganAnn ArborMIUSA Department of Surgery University of Texas Southwestern Medical CenterDallasTXUSA

Macroph.ge plasticity is critical for normal tissue repair following *** path.logic states such.as diabetes,macroph.ge plasticity is impaired,and macroph.ges remain in a persistent proinflammatory state;h.wever,th. reasons for th.s are ***,using single-cell RNA sequencing of h.man diabetic wounds,we identified increased JMJD3 in diabetic wound macroph.ges,resulting in increased inflammatory gene ***,we report th.t in wound h.aling,JMJD3 directs early macroph.ge-mediated inflammation via JAK1,3/STAT3 ***,in th. diabetic state,we found th.t IL-6,a cytokine increased in diabetic wound tissue at later time points post-injury,regulates JMJD3 expression in diabetic wound macroph.ges via th. JAK1,3/STAT3 path.ay and th.t th.s late increase in JMJD3 induces NFκB-mediated inflammatory gene transcription in wound macroph.ges via an h.K27me3 ***,RNA sequencing of wound macroph.ges isolated from mice with.JMJD3-deficient myeloid cells(Jmjd3f/fLyz2Cre+)identified th.t th. STING gene(Tmem173)is regulated by JMJD3 in wound *** limits inflammatory cytokine production by wound macroph.ges during ***,in diabetic mice,its role ch.nges to limit wound repair and enh.nce *** finding is important since STING is associated with.ch.onic inflammation,and we found STING to be elevated in h.man and murine diabetic wound macroph.ges at late time ***,we demonstrate th.t macroph.ge-specific,nanoparticle inh.bition of JMJD3 in diabetic wounds significantly improves diabetic wound repair by decreasing inflammatory cytokines and *** togeth.r,th.s work h.gh.igh.s th. central role of JMJD3 in tissue repair and identifies cell-specific targeting as a viable th.rapeutic strategy for nonh.aling diabetic wounds.

关键词： wound h.aling epigenetics diabetes JMJD3 STING

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Comparative transcriptomics of Central Asian Vitis vinifera accessions reveals distinct defense strategies against powdery mildew

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h.rticulture Research 2015年第1期2卷 143-153页

作者： katherine C h.Amrine Barbara Blanco-Ulate Summaira Riaz Dániel Pap Laura Jones Rosa Figueroa-Balderas M Andrew Walker Dario Cantu Department of Viticulture and Enology University of CaliforniaDavisDavis95616CAUSA Department of Genetics and Plant Breeding Corvinus University of BudapestVillányiút 29-341118BudapestHungary

Grape powdery mildew(PM),caused by th. biotroph.c ascomycete Erysiph. necator,is a devastating fungal disease th.t affects most Vitis vinifera *** h.ve previously identified a panel of *** accessions from Central Asia with.partial resistance to PM th.t possess a Ren1-like local *** th.s study,we sh.w th.t in addition to th. typical Ren1-associated late post-penetration resistance,th.se accessions display a range of different levels of disease development suggesting th.t alternative alleles or additional genes contribute to determining th. outcome of th. interaction with.th. *** identify potential Ren1-dependent transcriptional responses and functions associated with.th. different levels of resistance,we sequenced and analyzed th. transcriptomes of th.se Central Asian accessions at two time points of PM *** were compared to identify constitutive differences and PM-inducible responses th.t may underlie th.ir disease resistant *** to *** in all resistant accessions were ch.racterized by an early up-regulation of 13 genes,most encoding putative defense functions,and a late down-regulation of 32 genes,enrich.d in transcriptional regulators and protein *** Ren1-dependent responses included a h.tspot of co-regulated genes on ch.omosome *** also identified 81 genes wh.se expression levels and dynamics correlated with.th. ph.notypic differences between th. most resistant accessions‘Karadzh.ndah.l’,DVIT3351.27,and O34-16 and th. oth.r *** study provides a first exploration of th. functions associated with.varying levels of partial resistance to PM in *** accessions th.t can be exploited as sources of genetic resistance in grape breeding programs.

关键词： breeding mildew cultivar

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心血管药物对3T3-L1脂肪细胞促酰化蛋白分泌的影响

心血管药物对3T3-L1脂肪细胞促酰化蛋白分泌的影响

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第11届全国脂质与脂蛋白学术会议

作者：高颖 katherine Cianflone Danny Gauvreau Wei Cui 马依彤新疆医科大学第一附属医院心脏中心 Centre de Rech.rch. Institut Universitaire de Cardiologie et de Pneumologie de Quebec(CRIUCPQ) Laval UniversityQuébecQuébecCanada

目的:首次建立使用3T3-L1脂肪细胞评价药物影响促酰化蛋白(acylationstimulating protein,ASP)分泌的细胞模型和测定ASP分泌的ELISA方法,使用此方法研究用于治疗心血管疾病的药物对ASP的影响及机制,以及与补体C3、非酯化脂肪酸(non este... 详细信息

目的:首次建立使用3T3-L1脂肪细胞评价药物影响促酰化蛋白(acylationstimulating protein,ASP)分泌的细胞模型和测定ASP分泌的ELISA方法,使用此方法研究用于治疗心血管疾病的药物对ASP的影响及机制,以及与补体C3、非酯化脂肪酸(non esterified fatty acid,NEFA)释放、甘油三酯总量(triglyceridemass,TG mass)、脂肪酸摄入(fatty acid uptake,FA uptake)量的关系。方法:以3T3-L1前脂肪细胞为实验对象,诱导细胞分化,分别加入乳糜微粒、洛伐他丁、阿替洛尔、普萘洛尔作用48h.

关键词：心血管药物 3T3-L1脂肪细胞促酰化蛋白分泌表达细胞模型

来源： cnki会议评论

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孕酮对脂肪细胞促酰化蛋白受体和下游信号蛋白表达的作用

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中华医学杂志 2008年第2期88卷 114-118页

作者：温宇王宏伟胡秀芬 katherine Cianflone 魏俊夏治李瑞珍华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科武汉430030 Centre de Rech.rch. h.spital Laval Universite Laval Quebec Canada

目的观察孕酮对3T3-L1（前）脂肪细胞促酰化蛋白（ASP）受体C5L2 mRNA和细胞表面C5L2蛋白表达的影响，以及孕酮对ASP下游信号蛋白的作用。方法体外培养3T3-L1细胞，诱导细胞分化，不同浓度孕酮作用于3T3-L1（前）脂肪细胞，孵育过夜后... 详细信息

目的观察孕酮对3T3-L1（前）脂肪细胞促酰化蛋白（ASP）受体C5L2 mRNA和细胞表面C5L2蛋白表达的影响，以及孕酮对ASP下游信号蛋白的作用。方法体外培养3T3-L1细胞，诱导细胞分化，不同浓度孕酮作用于3T3-L1（前）脂肪细胞，孵育过夜后收获细胞，分别采用RT-PCR和流式细胞仪检测ASP受体mRNA和蛋白表达情况；采用Western印迹法检测基础状态和ASP激发后Gαq／11，GB，p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达。结果孕酮最大抑制成熟脂肪细胞14％C5L2 mRNA（P〉0．05）和蛋白表达22％（36％±15％vs46％±12％，P〈0．01），高浓度孕酮（1×10^-6mol／L）能显著性抑制前脂肪细胞66％C5L2 mRNA（0．17±0．11vs0．50±0．18，P〈0．01）和29％C5L2蛋白表达（36％±16％vs51％±20％，P〈0．05）。高浓度孕酮在一定程度上抑制ASP激发后成熟脂肪细胞Gαq／11，Gβ，p-PKCα和p-PKCζ的表达，各蛋白表达分别减少了41％（0．71±0．21vs1．20±0．24，P〈0．05），63％（0．55±0．32vs1．48±0．40，P〈0．05），49％（0．53±0．20vs1．04±0．19，P〈0．01）和32％（0．36±0．10vs0．53±0．20，P〉0．05）。在前脂肪细胞，高浓度孕酮显著性抑制ASP刺激的59％Gαq／11（0．42±0．18vs1．04±0．28，P〈0．01），43％Gβ（0．77±0．09vs1．35±0．27．P〈0．05），51％p—PKCα（0．44±0．15vs0．90±0．25，P〈0．05）和30％P-PKC（（0．27±0．08vs0．39±0．12，P〈0．05）蛋白表达。结论孕酮诱导ASP抵抗的发生，ASP抵抗参与了高浓度孕酮引起的脂肪细胞胰岛素抵抗状态的病理生理过程。

关键词：脂细胞孕酮胰岛素抵抗

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脂肪酸诱导脂肪细胞促酰化蛋白抵抗及机制研究

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中国病理生理杂志 2010年第4期26卷 748-754页

作者：温宇 katherine Cianflone 胡秀芬杨姗姗卢慧玲华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科湖北武汉430030 Centre de Rech.rch. h.spitalLaval Université Laval

目的:观察不同浓度单不饱和脂肪酸(油酸)和饱和脂肪酸(棕榈酸)对3T3-L1(前)脂肪细胞葡萄糖转运的影响,探讨高游离脂肪酸(FFA)负荷在促酰化蛋白(ASP)抵抗形成中的意义,及FFA诱导的3T3-L1(前)脂肪细胞ASP抵抗的机制。方法:体外培养3T3-L1... 详细信息

目的:观察不同浓度单不饱和脂肪酸(油酸)和饱和脂肪酸(棕榈酸)对3T3-L1(前)脂肪细胞葡萄糖转运的影响,探讨高游离脂肪酸(FFA)负荷在促酰化蛋白(ASP)抵抗形成中的意义,及FFA诱导的3T3-L1(前)脂肪细胞ASP抵抗的机制。方法:体外培养3T3-L1细胞,诱导细胞分化,用不同浓度FFA作用于3T3-L1(前)脂肪细胞,孵育过夜后收获细胞,采用2-脱氧-[3h.-D-葡萄糖掺入法,观察3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞基础状态和ASP刺激状态的葡萄糖摄取率;采用Western blotting法检测基础状态和ASP刺激的鸟苷酸结合蛋白alph.-q/11(Gαq/11),鸟苷酸结合蛋白beta(Gβ),磷酸化蛋白激酶Calph.(p-PKCα)和磷酸化蛋白激酶Czeta(p-PKCζ)蛋白表达。结果:ASP刺激后,3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞葡萄糖摄取率分别是基础状态的1.98倍(P0.05);棕榈酸组也可观察到类似现象(P<0.05或P<0.01)。在前脂肪细胞,油酸仅抑制ASP刺激的p-PKCα和p-PKCζ(均P<0.05)蛋白表达;而棕榈酸下调上述4种信号蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:油酸或棕榈酸抑制3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞ASP刺激的葡萄糖转运,证明FFA诱导脂肪细胞产生胰岛素抵抗状态下同时存在ASP抵抗。FFA诱导的ASP抵抗的发生机制与其干扰ASP-C5L2信号转导途径有关。ASP抵抗参与了"脂毒性"-胰岛素抵抗/肥胖症的病理生理过程。

关键词：脂细胞胰岛素抵抗促酰化蛋白抵抗脂肪酸类

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汉代墓葬彩绘陶研究

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中国博物馆 2021年第S2期 87-94页

作者：朱莉·h.沃茨乔治娜·雷纳凯瑟琳·埃雷明苏珊·科斯特洛安吉拉·张梅丽莎·莫伊张淇馨(译) 美国哈佛艺术博物馆马萨诸塞州剑桥西安半坡博物馆西安710001 山东大学青岛266237

汉代陶制随葬品作为昂贵的青铜器和漆器等礼器的廉价替代品而产生。陶器在低温下烧制而成,工艺相对简单,略显粗陋,多随葬墓中。陶器外表用多种来源于矿物的颜料,绘制了富有生活气息的图案。尽管彩绘区域色彩鲜艳,但易脱落。这项研究旨... 详细信息

汉代陶制随葬品作为昂贵的青铜器和漆器等礼器的廉价替代品而产生。陶器在低温下烧制而成,工艺相对简单,略显粗陋,多随葬墓中。陶器外表用多种来源于矿物的颜料,绘制了富有生活气息的图案。尽管彩绘区域色彩鲜艳,但易脱落。这项研究旨在了解汉代墓葬中的彩绘陶是如何生产制作的,使用了哪些颜料,以及涂绘时是否使用了胶结剂。由热释光(TL)测年法检测得知,陶器烧制于汉代。紫外成像表明彩绘区域没有使用加固材料。使用可见光诱导红外释光成像证实了许多紫色区域是汉代颜料,进一步支持了测年结果。借助X光照相技术、X射线荧光光谱、扫描电镜-能谱分析、拉曼光谱、红外光谱和热裂解气相色谱-质谱技术手段研究这些器物,证实制作中可能使用了汉紫、汉蓝颜料的猜测。彩绘陶还使用其他颜料,如朱砂、孔雀石、蓝铜矿、骨白、炭黑、赭石、赤铁矿和铅丹。涂绘时较少使用胶结剂,X射线照片还显示了装饰图案的成型工艺。

关键词：汉紫彩绘陶扫描电镜-能谱分析(SEM-EDS) X射线荧光光谱(XRF) X光照相技术拉曼光谱傅里叶变换红外光谱(FTIR)

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肾脏疾病儿童血浆促酰化蛋白水平测定的意义

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实用儿科临床杂志 2008年第5期23卷 337-339页

作者：唐锦辉温宇王宏伟 katherine Cianflone 米杰华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科武汉430030 加拿大拉瓦大学医学研究中心加拿大魁比克市首都儿科研究所流行病学研究室北京100020

目的探讨肾脏疾病儿童血浆促酰化蛋白(ASP)与血浆C3、非酯化脂肪酸(NEFA)及血脂的关系。方法肾脏疾病组48例,健康对照组279例。将48例肾脏疾病儿童分为3组:1.急性链球菌感染后肾小球肾炎(APSGN)组12例;2.狼疮性肾炎(LN)组4例;3.肾病综合... 详细信息

目的探讨肾脏疾病儿童血浆促酰化蛋白(ASP)与血浆C3、非酯化脂肪酸(NEFA)及血脂的关系。方法肾脏疾病组48例,健康对照组279例。将48例肾脏疾病儿童分为3组:1.急性链球菌感染后肾小球肾炎(APSGN)组12例;2.狼疮性肾炎(LN)组4例;3.肾病综合征(NS)组32例。用ELISA方法检测各组血浆ASP水平,酶学比色法测定其NEFA水平,用酶学比浊法检测其血浆C3、血脂等生化指标。数据采用Graph.ad Prism 4.0软件进行统计学分析。结果***组(81.8±24.8)nmol/L、LN组(90.9±28.2)nmol/L和NS组(101.4±39.9)nmol/L血浆ASP水平明显高于健康对照组[(44.3±25.2)nmol/LPa0.05),而高密度脂蛋白胆固醇(h.L-C)显著低于健康对照组(Ph.L-C水平(Ph.L-C(r=0.447P<0.01)、ApoA(r=0.551P<0.001)、ApoB(r=0.365P<0.01)均呈正相关。结论脂源性激素ASP和补体C3参与肾脏疾病患儿血脂代谢的调节。ASP的升高发生在严重血脂紊乱之前。

关键词：促酰化蛋白补体C 肾脏疾病血脂儿童

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