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Nuclear Factor kappa B p65 Expression in Mouse Cochlea

Journal of Otology 2007年第1期2卷 30-35页

作者： jochen schacht Kresge Hearing research Institute University of Michigan Ann Arbor MI USA

Nuclear factor kappa B(NF-κB) is one of the best-characterized transcription factors playing important roles in many cellular responses to a large variety of stimuli,including inflammatory cytokines, phorbol esters, growth factors, and bacterial and viral products. The aim of this study is to demonstrate NF-κB expression in the mouse cochlea and its enhancement in response to lipopolysaccharides(LPS) and kanamycin(KA) treatment. Methods KA treatment consisted of subcutaneous KA injections at 700 mg/kg twice a day with an eight-hour interval between the two injections for 3 or 7 days. For animals in the LPS treatment group, a single dose of 0.3 mg LPS dissolved in 0.2 ml sterile saline were injected into both bullae through the tympanic membrane and kept there for 3 hours. Animals in the control group received subcutaneous saline injection for 7 days. Following immmunohistochemichal processing with rabbit polyclonal anti-NF-κB p65 antibodies, cryosections of the cochlea were examined for expression of NF-κB p65 in various structures in the cochlea. Results NF-κB p65 expression, identified by presence of brown reaction products characteristic of DAB immunohistochemistry, was visible in the spiral ligament, spiral prominence, tectorial membrane(TM), spiral ganglion and nerve fibers. Relatively weak NF-κB p65 expression was also visualized in the organ of Corti. Within the organ of Corti, the inner hair cells(IHC), outer hair cells(OHC), inner pillar cells(IP), outer pillar cells (OP), Deiter’s cells(DC), and Boettcher’s cells exhibited stronger staining than the inner sulcus cells, Hensen’s cells(HC) and Claudius’cells. No NF-κB p65 expression was seen in the nucleus of the IHC and OHC. NF-κB p65 expression was increased in animals exposed to LPS or KA, demonstrating significant differences in the staining between control animals and LPS/KA-treated animals. NF-κB p65 expression was not significantly different between LPS treated and KA treated animals or between 3 and

关键词： transcription factors nuclear factor kappa B p65(NF-κB p65) mouse cochlea immunohistochemisty lipopolysaccharide(LPS)

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Transient energy depletion trigger small GTPase pathways and hair cell death in noise-induced hearing loss

Transient energy depletion trigger small GTPase pathways and...

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中华医学会第十次全国耳鼻咽喉-头颈外科学术会议

作者：姜鸿彦 jochen schacht 许庚中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院中山大学耳鼻咽喉科学研究所

耳蜗细胞骨架的完整是维持耳蜗功能的重要环节,特别是激动蛋白(actin)的有序装配对耳蜗细胞功能具有重要的影响。F-actin 是耳蜗毛细胞的关键骨架蛋白,一旦发生紊乱或中断, 将影响细胞间的支持和连接,导致通透性增加,最终会致细胞死亡,...

耳蜗细胞骨架的完整是维持耳蜗功能的重要环节,特别是激动蛋白(actin)的有序装配对耳蜗细胞功能具有重要的影响。F-actin 是耳蜗毛细胞的关键骨架蛋白,一旦发生紊乱或中断, 将影响细胞间的支持和连接,导致通透性增加,最终会致细胞死亡,产生永久性的听力障碍。小 GTPases 是调节细胞骨架蛋白平衡的重要信号途径,可能参与了耳毒性药物损伤过程,然而噪声性聋的发生是否于其有关,目前还不清楚。本研究采用 CBA/J 小鼠噪声暴露动物模型及 HEI-OC1 细胞系,研究噪声暴露后耳蜗能量代谢、RhoA/Rac1的活化以及 F-actin 变化,探讨噪声性聋的发生机理。结果显示,噪音暴露(2-20 kHz,106 dB)2h,可以导致 CBA/J 小鼠40dB 左右的永久性阈移。ATP 分析显示,噪声暴露以后耳蜗能量代谢障碍,特别是暴露后1h,耳蜗 ATP 水平明显降低,至5h 略有恢复。F-actin 标记显示毛细胞纤毛排列紊乱,部分出现融合,暴露后3h 部分外毛细胞结构缺失,胞核表现为凋亡及坏死样改变。RhoA 活性增加,而 Rac1活性降低,其时间规律与 ATP 变化水平类似。离体试验证实 ATP 耗竭可以提高 HEI-OC1细胞 Rac1-GTP 水平,导致 F- actin 重排及线粒体蛋白 EndoG 核转位,促进细胞死亡,重新提供能量可以部分逆转 HEI-OC1细胞的改变。结论噪声暴露可以引起耳蜗能量代谢障碍及小 GTPases 信号途径活性的改变,进而干扰毛细胞细胞骨架结构,诱导凋亡或坏死样细胞死亡,最终导致永久性的听力损失。能量代谢障碍有可能是噪声性聋发生的始动因素。

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小鼠耳蜗核因子-κB p50免疫组化定位(英文)

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解放军医学杂志 2007年第1期32卷 1-4页

作者：孙建和杨伟炎沙淑花 jochen schacht Institute of Otolaryngology General Hospital of PLA Kresge Hearing research Institute University of Michigan

目的了解核因子-κB(NF-κB)在耳蜗的表达情况。方法小鼠皮下注射卡那霉素(KA),鼓室注射脂多糖(LPS),以注射等量生理盐水作为对照,用多克隆兔抗体NF-κB p50免疫组化染色,观察NF-κB p50在小鼠耳蜗的表达。结果NF-κB p50主要定位在耳... 详细信息

目的了解核因子-κB(NF-κB)在耳蜗的表达情况。方法小鼠皮下注射卡那霉素(KA),鼓室注射脂多糖(LPS),以注射等量生理盐水作为对照,用多克隆兔抗体NF-κB p50免疫组化染色,观察NF-κB p50在小鼠耳蜗的表达。结果NF-κB p50主要定位在耳蜗的螺旋缘、盖膜、血管纹、螺旋韧带、螺旋神经节和神经纤维。整个耳蜗各圈均可观察到免疫反应,而螺旋韧带、盖膜、螺旋突、螺旋神经节和神经纤维均可观察到较强的免疫反应,Corti器的免疫反应比上述结构要弱一些。Corti器的内、外毛细胞,内、外柱细胞,Deiter细胞和Claudious细胞均可观察到NF-κBp50的免疫反应,这些免疫反应在内沟细胞、Hensen细胞和Claudious细胞较弱,而在螺旋神经节可观察到较强的免疫反应,内、外毛细胞核未见免疫反应。结论注射脂多糖和卡那霉素可使NF-κBp50在小鼠耳蜗产生急性反应。

关键词：转录因子 NF-κB p50 耳蜗免疫组织化学脂多糖类

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阿司匹林预防庆大霉素耳毒性的随机对照试验

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中华耳科学杂志 2008年第2期6卷 145-147页

作者：陈阳黄维国查定军邱建华王锦玲沙素华 jochen schacht 第四军医大学西京医院耳鼻咽喉-头颈外科西安710032 Kresge Hearing Research Institute University of MichiganAnnArborMIUSA

目的观察阿司匹林对庆大霉素耳毒性的预防作用。方法设计实施多中心的随机双盲对照试验,预防组在应用庆大霉素的同时口服阿斯匹林2周,对照组口服安慰剂。用药前后检测纯音测听3次,对比听力损伤发生率。结果两组的血清庆大霉素水平相当,... 详细信息

目的观察阿司匹林对庆大霉素耳毒性的预防作用。方法设计实施多中心的随机双盲对照试验,预防组在应用庆大霉素的同时口服阿斯匹林2周,对照组口服安慰剂。用药前后检测纯音测听3次,对比听力损伤发生率。结果两组的血清庆大霉素水平相当,预防组的听力损伤发生率为3%(3/89),明显低于对照组的13%(14/106)(P=0.013)。试验中阿司匹林没有影响到庆大霉素的血清药物水平和时程。结论同时伍用阿司匹林可以有效减轻庆大霉素的耳毒性损伤,氨基甙类抗生素的耳毒性防护研究已从动物实验走向临床。

关键词：氨基甙类抗生素耳毒性抗氧化治疗水杨酸

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核因子-κB p65在小鼠耳蜗中的表达

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听力学及言语疾病杂志 2006年第4期14卷 289-291,303,T0003页

作者：孙建和杨伟炎沙素华 jochen schacht 解放军总医院耳鼻咽喉科研究所耳鼻咽喉头颈外科北京100853 美国密歇根大学Kresge听力研究所

目的探讨核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在耳蜗的表达情况。方法24只小鼠随机平均分为4组,其中2组分别连续3d和7d于皮下注射卡那霉素(kanamycin,KA),一组鼓室注射脂多糖(lipopolysac-charides LPS),另一组皮下注射等量生理... 详细信息

目的探讨核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在耳蜗的表达情况。方法24只小鼠随机平均分为4组,其中2组分别连续3d和7d于皮下注射卡那霉素(kanamycin,KA),一组鼓室注射脂多糖(lipopolysac-charides LPS),另一组皮下注射等量生理盐水7d作为对照,用多克隆兔抗体NF-κB p65免疫组织化学等染色,观察NF-κB p65在小鼠耳蜗的表达。结果NF-κB p65主要定位在耳蜗的螺旋缘、盖膜、血管纹、螺旋韧带、螺旋神经节和神经纤维。整个耳蜗各回均可观察到免疫反应,而螺旋韧带、盖膜、螺旋突、螺旋神经节和神经纤维均可观察到较强的NF-κB p65免疫反应,Corti器的免疫反应比上述结构要弱一些。Corti器的内、外毛细胞,内、外柱细胞,Deiter细胞和Claudious细胞均可观察到NF-κB p65的免疫反应,这些免疫反应在内沟细胞、Hensen细胞和Claudious细胞显示较弱,而在螺旋神经节较强,内、外毛细胞核未见免疫反应。省去一抗的对照染色未观察到NF-κB p65的阳性反应。用脂多糖和卡那霉素处理的小鼠耳蜗NF-κB p65的免疫反应与注射正常生理盐水的小鼠耳蜗有显著性差异,而注射脂多糖和卡那霉素3d和7d NF-κB p65的免疫反应无差异。结论注射脂多糖和卡那霉素可使NF-κB p65在耳蜗的表达增强。

关键词：转录因子核因子-κB p65小鼠耳蜗免疫组织化学脂多糖

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氨基甙类抗生素的耳毒性机理及其预防的新进展

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听力学及言语疾病杂志 2001年第3期9卷 180-182页

作者：沙素华高起学李兴启姜泗长 jochen schacht 美国密歇根大学Kresge听力研究所华中科技大学同济医学院附属同济医院耳鼻咽喉科解放军总医院耳鼻咽喉科研究所

半个多世纪以来氨基甙类抗生素(Aminoglycoside antibiotics,AmAn)成为抗革兰氏阴性细菌的有效的广谱抗生素。尽管它有其耳毒性和肾毒性，尤其是导致不可逆的感音神经性聋，但由于它们具有性质稳定、抗菌谱广、杀菌力强、使用简便、价... 详细信息

半个多世纪以来氨基甙类抗生素(Aminoglycoside antibiotics,AmAn)成为抗革兰氏阴性细菌的有效的广谱抗生素。尽管它有其耳毒性和肾毒性，尤其是导致不可逆的感音神经性聋，但由于它们具有性质稳定、抗菌谱广、杀菌力强、使用简便、价格便宜等优点，AmAn仍为目前临床治疗严重感染的主要抗菌药物之一，特别是肺囊性纤维性变(cystic fibrosis)及进行腹膜透析的患者需有经常使用AmAn，并且随着结核病发病率在世界范围内的回升及结核菌耐药性的不断增强，该类抗生素的应用将呈现增长趋势。

关键词：氨基苷类抗生素耳毒性机理预防

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小鼠耳蜗核因子-κB P50的表达

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标记免疫分析与临床 2006年第3期13卷 157-159,164,194页

作者：孙建和杨伟炎沙淑花 jochen schacht 解放军总医院耳鼻咽喉科研究所北京100853 美国密歇根大学Kresge听力研究所

核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NFκ-B)是许多细胞对各种刺激反应起重要作用的转录因子之一,NF-κB P50是其家族成员。为了显示NF-κB P50在耳蜗的表达,给实验组小鼠皮下注射卡那霉素(kanamycin,KA),或鼓室注射脂多糖(lipopolysacc... 详细信息

核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NFκ-B)是许多细胞对各种刺激反应起重要作用的转录因子之一,NF-κB P50是其家族成员。为了显示NF-κB P50在耳蜗的表达,给实验组小鼠皮下注射卡那霉素(kanamycin,KA),或鼓室注射脂多糖(lipopolysaccharides,LPS),对照组小鼠注射等量生理盐水,用NFκ-B P50兔多克隆抗体(PcAb)免疫组化染色(DAB显色),观察NFκ-B P50在小鼠耳蜗的表达。结果显示:在小鼠耳蜗各圈螺旋韧带、盖膜(TM)、螺旋突、螺旋神经节和神经纤维可观察到较强的表达;Corti器的内毛细胞(inner hair cells,IHC)、外毛细胞(outer hair cells,OHC),内柱细胞(inner pillar cell,IP)、外柱细胞(outer pillar cell,OP)、Deiter细胞(DC)、Hensen细胞(HC)和Claudious细胞的细胞质也有NF-κB P50的表达;IHC、OHC和上述细胞的核及基底膜(B)和对照组均未见表达。注射LPS和KA处理的小鼠耳蜗NFκ-B P50的表达,都比对照小鼠明显增强。注射LPS和KA后3d和7d的小鼠,NF-κB P50的表达没有显著性差别。注射LPS和KA可使NFκ-B P50在小鼠耳蜗产生急性免疫反应。

关键词：转录因子核因子NF-κB P50 小鼠耳蜗免疫组化脂多糖

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小鼠耳蜗核因子-kB P65免疫组化定位

小鼠耳蜗核因子-kB P65免疫组化定位

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第六届全国生物医学体视学学术会议暨第九届全军军事病理学学术会议、第五届全军定量病理学学术会议

作者：孙建和杨伟炎沙淑花 jochen schacht 解放军总医院耳鼻咽喉科研究所耳鼻咽喉-头颈外科美国密歇根大学Kresge听力研究所

目的核因子-kB(Nuclear factor-kappa B,NF-KB)是许多细胞对各种刺激反应起重要作用的转移因子之一,为了显示NF-kB 在耳蜗的表达。方法给小鼠皮下注射卡那霉素(kanamycin,KA),鼓室注射粘多糖(LipopolysaccharidesLPS),并注射等量生理盐... 详细信息

目的核因子-kB(Nuclear factor-kappa B,NF-KB)是许多细胞对各种刺激反应起重要作用的转移因子之一,为了显示NF-kB 在耳蜗的表达。方法给小鼠皮下注射卡那霉素(kanamycin,KA),鼓室注射粘多糖(LipopolysaccharidesLPS),并注射等量生理盐水作为对照,用多克隆兔抗体NF-kBp65免疫组化染色,观察NF-kBp65在小鼠耳蜗的表达。结果NF-kBp65主要定位在耳蜗的螺旋缘、盖膜、血管纹、螺旋韧带、螺旋神经节和神经纤维。整个耳蜗各圈均可观察到免疫反应,而螺旋韧带、盖膜、螺旋突、螺旋神经节和神经纤维均可观察到较强的免疫反应,Corti 器的免疫反应比上述结构要弱一些。Corti 器的内、外毛细胞,内、外柱细胞,Deiter 细胞和Claudious 细胞均可观察到NF-kBp65的免疫反应,这些免疫反应在内沟细胞、Hensen 细胞和Claudious 细胞显示较弱,而在螺旋神经节可观察到较强的免疫反应,内、外毛细胞核未见免疫反应。省去NF-kBp65抗体染色未观察到NF-kBp65的阳性反应。结论用脂多糖和卡那霉素处理的小鼠耳蜗NF-kBp65的免疫反应与注射正常生理盐水的小鼠耳蜗可见有显著性差异,而注射脂多糖和卡那霉素3d 和7d NF-rBp65的免疫反应没有显著性差异,注射脂多糖和卡那霉素可使NF-kBp65在耳蜗产生急性反应。

关键词：转录因子核因子 NF-kBp65 小鼠耳蜗免疫组化脂多糖

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