检索结果-南通市图书馆

高师理科学刊 2022年第5期42卷 107-110页

作者：尹海畅万德财齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔161006

现今是信息技术高速发展的时代,在教育教学中融合现代信息技术,能够极大程度地创新教育模式,更能够以年轻人可以接受的形式传递课程内容.人体及动物生理学的课程对于学生而言相对晦涩难懂,通过四位一体教学模式的应用,能够让学生轻松理... 详细信息

现今是信息技术高速发展的时代,在教育教学中融合现代信息技术,能够极大程度地创新教育模式,更能够以年轻人可以接受的形式传递课程内容.人体及动物生理学的课程对于学生而言相对晦涩难懂,通过四位一体教学模式的应用,能够让学生轻松理解课程内容,并且由此结合对课程的理解,让思维得到拓展,使人体及动物生理学课程能够真正对学生的专业方向起到重要的作用.

关键词：人体及动物生理学四位一体教学模式

抗体依赖性增强效应的作用机制及在人类冠状病毒感染中的表现概述

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黑龙江科学 2022年第14期13卷 78-80页

作者：李静尹海畅于天飞齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔161006

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)抗体可能造成抗体依赖性增强效应(ADE),从而加重新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病情。综述了ADE的作用机制,重点抗体介绍了SARS-CoV-2感染后所引起的潜在ADE及解决方案。阐明SARS-CoV-2与ADE的关... 详细信息

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)抗体可能造成抗体依赖性增强效应(ADE),从而加重新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病情。综述了ADE的作用机制,重点抗体介绍了SARS-CoV-2感染后所引起的潜在ADE及解决方案。阐明SARS-CoV-2与ADE的关系可能还需要一定的时间,但实际意义重大。

关键词： COVID-19 抗体依赖性增强效应 SARS-CoV-2 病毒感染疫苗

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鸭致病性大肠杆菌研究进展

黑龙江畜牧兽医 2017年第8期 72-77页

作者：孙畅牛银杰尹海畅徐丽晶陈洪岩弥春霞赵丽丽中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150069 牡丹江师范学院生命科学与技术学院黑龙江牡丹江157011

近年来,由禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)引起的禽大肠杆菌病给全球的养禽行业造成了重大的经济损失,并且APEC引起的禽大肠杆菌病在中国是最主要的家禽细菌病。越来越多的证据显示,APEC是人源尿路感染大肠杆... 详细信息

近年来,由禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)引起的禽大肠杆菌病给全球的养禽行业造成了重大的经济损失,并且APEC引起的禽大肠杆菌病在中国是最主要的家禽细菌病。越来越多的证据显示,APEC是人源尿路感染大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC)和致脑膜炎大肠杆菌(neonatal meningitis Escherichia coli,NMEC)的毒力基因储藏库,甚至可能会直接导致两种疾病的发生。因此,如何有效地控制APEC不仅是一个紧迫的问题,更是一个巨大的挑战。对APEC的分离鉴定、流行病学特征、药物敏感性等内容的研究对APEC引起的禽大肠杆菌病的控制具有指导意义。为了更好地防控大肠杆菌病,文章主要从临床症状、病理变化、毒力因子、致病机理和诊断方法几个方面对鸭致病性大肠杆菌进行了综述,以期为进一步研究提供参考。

关键词：鸭大肠杆菌病毒力因子致病机理诊断方法

微生物组-转录组联合分析肠道菌群对SPF鸡的调节作用

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黑龙江畜牧兽医 2023年第15期 57-63,134,135页

作者：尹海畅万德财王含琼姚婉岐李忠秋刘娣黑龙江省农业科学院2021年博士后科研工作站哈尔滨150086 齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔161006 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

为了探究肠道菌群对SPF鸡的作用,试验采用广谱抗生素(ABX)鸡尾酒法构建肠道菌群削减SPF鸡模型(ABX鸡),并以SPF鸡为对照,应用微生物组测序技术分析鸡肠道菌群变化情况,转录组测序技术分析鸡回肠和气管差异基因表达情况,同时评估肠道菌群... 详细信息

为了探究肠道菌群对SPF鸡的作用,试验采用广谱抗生素(ABX)鸡尾酒法构建肠道菌群削减SPF鸡模型(ABX鸡),并以SPF鸡为对照,应用微生物组测序技术分析鸡肠道菌群变化情况,转录组测序技术分析鸡回肠和气管差异基因表达情况,同时评估肠道菌群对鸡体重和Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)表达的影响,并通过计算Spearman相关系数分析肠道微生物组变化与SPF鸡转录组变化之间的功能相关性。结果表明:与SPF鸡相比,ABX鸡肠道菌群的物种多样性和丰度明显降低;从ABX鸡肠组织共获得156个差异表达基因,其中79个基因上调表达,77个基因下调表达;从气管组织共获得779个差异表达基因,其中176个基因上调表达,603个基因下调表达。气管组织共比对到3152个GO功能条目,回肠组织共对比到1202个GO功能条目。气管组织转录组显著富集的KEGG信号通路分别为补体和凝血级联、金黄色葡萄球菌感染、类风湿关节炎、自身免疫性甲状腺疾病,回肠组织转录组显著富集的KEGG信号通路分别为Ⅰ型糖尿病、类固醇生物合成、移植物抗宿主病、同种异体排斥等。从广谱抗生素处理的第11天开始,ABX鸡和SPF鸡的体重差异显著(P<0.05)。与SPF鸡相比,ABX鸡脾脏组织中干扰素-α(IFN-α)、干扰素-β(IFN-β)相对表达量显著降低(P<0.05)。与免疫相关的基因MHCI-Y、MHC-F10、DOCK3、MB和DNAJC22在ABX鸡中明显减少,与克雷伯氏杆菌属呈负相关,与乳杆菌属呈正相关。说明肠道菌群对SPF鸡差异表达基因、体重和IFN-Ⅰ表达均具有重要的调节作用。

关键词：肠道菌群微生物组转录组体重免疫

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细胞自噬与细小病毒感染相互作用的研究进展

高师理科学刊 2021年第6期41卷 64-68页

作者：于天飞刘昕田丰尹海畅齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔大学黑龙江省抗性基因工程与寒地生物多样性保护重点实验室黑龙江齐齐哈尔161006

细胞自噬是生物体内一个保守的生物学过程,通过溶酶体对外源微生物、胞内长寿蛋白以及衰老细胞器的吞噬和降解实现能量再循环.当细胞被外源性病原微生物(如病毒)刺激时,往往会触发自噬的激活或抑制.由于自噬具有抗病毒作用,因此许多病... 详细信息

细胞自噬是生物体内一个保守的生物学过程,通过溶酶体对外源微生物、胞内长寿蛋白以及衰老细胞器的吞噬和降解实现能量再循环.当细胞被外源性病原微生物(如病毒)刺激时,往往会触发自噬的激活或抑制.由于自噬具有抗病毒作用,因此许多病毒可能通过编码一些蛋白逃逸并抵抗该过程,同时病毒还可以利用自噬增强其自身复制或增加潜伏感染的持续性.关于病毒与细胞自噬的相互作用是十分复杂的.主要综述已发表的细小病毒与细胞自噬相互作用的研究进展,简要概述了自噬和细小病毒,并回顾了人类和动物细小病毒与自噬之间的已知相互作用,及自噬在细小病毒DNA复制中的作用和机制.

关键词：细胞自噬细小病毒病毒感染

抗鹅细小病毒NS1蛋白单克隆抗体可变区的原核表达

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华北农学报 2021年第5期36卷 211-215页

作者：于天飞谢鹏宇孙婉姝李静尹海畅黎明于志丹齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔161006 黑龙江省抗性基因工程与寒地生物多样性保护重点实验室黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔大学计算机与控制工程学院黑龙江齐齐哈尔161006

为了在大肠杆菌中表达抗鹅细小病毒(GPV)NS1蛋白单克隆抗体轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因,并测定其与NS1蛋白结合活性。对抗GPV NS1蛋白单克隆抗体VL、VH基因核苷酸序列依据大肠杆菌偏爱密码子进行优化,人工合成获得了含有可变区... 详细信息

为了在大肠杆菌中表达抗鹅细小病毒(GPV)NS1蛋白单克隆抗体轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因,并测定其与NS1蛋白结合活性。对抗GPV NS1蛋白单克隆抗体VL、VH基因核苷酸序列依据大肠杆菌偏爱密码子进行优化,人工合成获得了含有可变区基因的重组质粒pUC57-VL和pUC57-VH。然后用Bam HⅠ/XhoⅠ双酶切pUC57-VL、pUC57-VH,回收340 bp的VL基因和370 bp的VH基因。目的基因通过Bam HⅠ/XhoⅠ多克隆位点分别插入至原核表达载体pET-32a,获得重组质粒pET-VL和pET-VH。重组质粒经Bam HⅠ单酶切和Bam HⅠ/XhoⅠ双酶切及测序鉴定。重组质粒分别转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导,获得了重组蛋白TRX-VL和TRX-VH的表达,分子量分别为30.3,31.4 ku。纯化后的重组蛋白能与His标签单克隆抗体发生特异性结合,鉴定结果表明,获得的纯化蛋白为目的蛋白。间接ELISA分析表明,0.4μg的TRX-VH可与25 ng的GST-NS1蛋白特异性结合而0.4μg的TRX-VL不能与各包被量的GST-NS1蛋白特异性结合,TRX-VH与GST-NS1蛋白的特异性结合可被1∶200稀释的GPV感染鹅血清完全阻断。

关键词：鹅细小病毒非结构蛋白单克隆抗体抗体可变区原核表达

番鸭细小病毒非结构蛋白NS1与水禽真核翻译延伸因子1A1的体外互作分析

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华北农学报 2021年第4期36卷 232-238页

旨在探讨番鸭细小病毒(MDPV)非结构蛋白NS1与水禽真核翻译延伸因子1A1(eEF1A1)之间的互作关系。根据GenBank中已发表的北京鸭和浙东白鹅eEF1A1基因序列,经大肠杆菌偏爱密码子优化,人工合成的质粒分别命名为pUC57-DeEF1A1和pUC57-GeEF1A1... 详细信息

旨在探讨番鸭细小病毒(MDPV)非结构蛋白NS1与水禽真核翻译延伸因子1A1(eEF1A1)之间的互作关系。根据GenBank中已发表的北京鸭和浙东白鹅eEF1A1基因序列,经大肠杆菌偏爱密码子优化,人工合成的质粒分别命名为pUC57-DeEF1A1和pUC57-GeEF1A1;对含有MDPV YL08株NS1基因的重组质粒pUC57-NS1、pUC57-DeEF1A1和pUC57-GeEF1A1进行BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,回收目的片段后分别插入到原核表达载体pGEX-6p-1和pET-32a中,构建了重组质粒pGEX-DeEF1A1、pET-GeEF1A1、pET-NS1和pGEX-NS1;重组质粒分别转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导,获得了重组蛋白GST-DeEF1A1、TRX-GeEF1A1、TRX-NS1和GST-NS1的表达;采用HRP标记的GST单克隆抗体鉴定GST-DeEF1A1、HRP标记的His单克隆抗体鉴定TRX-GeEF1A1;采用HRP标记的His单克隆抗体鉴定TRX-NS1、HRP标记的GST单克隆抗体鉴定GST-NS1,采用MDPV感染番鸭血清鉴定TRX-NS1和GST-NS1的抗原性;采用GST pull-down试验验证GST-DeEF1A1与TRX-NS1、GST-NS1与TRX-GeEF1A1的互作。结果表明,获得的重组蛋白GST-DeEF1A1、TRX-GeEF1A1、TRX-NS1和GST-NS1的分子量分别为76.9,67.9,89.5,98.6 ku;GST-DeEF1A1和GST-NS1可与HRP标记的GST单克隆抗体特异性结合,TRX-GeEF1A1和TRX-NS1可与HRP标记的His单克隆抗体特异性结合;GST-NS1和TRX-NS1可与MDPV感染番鸭血清特异性结合,抗原性良好;GST pull-down试验中,GST-DeEF1A1可与TRX-NS1互作,GST-NS1不与TRX-GeEF1A1互作。本研究表明,MDPV NS1蛋白可以和北京鸭eEF1A1在体外相互作用而不能和浙东白鹅eEF1A1在体外相互作用,互作结果差异性可能与二者的102-106 aa,108 aa的氨基酸残基有关。

关键词：番鸭细小病毒非结构蛋白水禽真核翻译延伸因子 GST pull-down 蛋白互作

猪传染性胃肠炎病毒膜蛋白亲和肽的原核表达及其病毒亲和性分析

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华北农学报 2019年第5期34卷 224-230页

作者：于天飞董慧莹谢鹏宇孙婉姝尹海畅黎明于志丹齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔161006 黑龙江省抗性基因工程与寒地生物多样性保护重点实验室黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔大学计算机与控制工程学院黑龙江齐齐哈尔161006

为了研究猪传染性胃肠炎病毒膜蛋白(M蛋白)亲和肽的病毒亲和性,建立快速有效的TGEV检测方法,设计了1条含有TGEV M蛋白亲和肽的串联基因,核苷酸序列依据大肠杆菌偏爱密码子进行优化,人工基因合成获得了含有M蛋白亲和肽基因的重组质粒pUC5... 详细信息

为了研究猪传染性胃肠炎病毒膜蛋白(M蛋白)亲和肽的病毒亲和性,建立快速有效的TGEV检测方法,设计了1条含有TGEV M蛋白亲和肽的串联基因,核苷酸序列依据大肠杆菌偏爱密码子进行优化,人工基因合成获得了含有M蛋白亲和肽基因的重组质粒pUC57-MQHT。然后,根据合成基因的序列,设计合成了1条特异性引物,以pUC57-MQHT为模板,通过PCR获得了150 bp的TGEV M蛋白亲和肽基因。亲和肽基因通过Bam HⅠ/XhoⅠ多克隆位点分别插入至原核表达载体pET-32a和pGEX-6p-1,获得重组质粒pET-32a-MQHT和pGEX-6p-MQHT。重组质粒经Bam HⅠ单酶切和Bam HⅠ/XhoⅠ双酶切及测序鉴定。重组质粒分别转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导,获得了重组蛋白TRX-MQHT和GST-MQHT,分子质量分别为25,31 ku。切胶纯化后,重组蛋白TRX-MQHT和GST-MQHT分别经His标签单克隆抗体和GST标签单克隆抗体鉴定,鉴定结果表明,获得的纯化蛋白为目的蛋白。Western Blot分析表明,2种重组蛋白可与TGEV特异性结合。Dot-ELISA分析表明,在TGEV滴度为1×10 3,5×10 2,2.5×10 2 TCID50/mL时2种重组蛋白都可显示出阳性反应,而在1.25×10 2 TCID50/mL滴度时无可见斑点,具有良好的TGEV亲和性。阻断试验表明,1∶100或1∶200稀释的TGEV阳性血清可完全阻断TGEV H株(1×10 5 TCID50/mL)与2种重组蛋白的结合,特异性良好。为建立TGEV诊断方法奠定了一定的理论和物质基础。

关键词：传染性胃肠炎病毒膜蛋白亲和肽原核表达亲和性

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脊椎动物细小病毒衣壳结构研究进展

黑龙江畜牧兽医 2020年第19期 25-30,167页

作者：于天飞谢鹏宇尹海畅黎明胡丽霞樊兴冬齐岩齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔大学计算机与控制工程学院黑龙江齐齐哈尔161006 黑龙江省嫩江市畜牧兽医总站黑龙江嫩江161400 黑龙江省农业科学院科技推广处哈尔滨150086 中国牧工商(集团)总公司北京100070

脊椎动物细小病毒是一类感染脊椎动物的单链DNA病毒,该病毒衣壳无包膜,呈T=1二十面体对称。从1991年第1个脊椎动物细小病毒--犬细小病毒衣壳结构发布至今,研究人员陆续解析了近100种该类病毒衣壳结构,并揭示了其结构与功能的关联性。尽... 详细信息

脊椎动物细小病毒是一类感染脊椎动物的单链DNA病毒,该病毒衣壳无包膜,呈T=1二十面体对称。从1991年第1个脊椎动物细小病毒--犬细小病毒衣壳结构发布至今,研究人员陆续解析了近100种该类病毒衣壳结构,并揭示了其结构与功能的关联性。尽管脊椎动物细小病毒衣壳蛋白序列多样性高,然而其衣壳的拓扑学结构相对保守。脊椎动物细小病毒衣壳核心蛋白二级结构之间的环状结构构象各不相同,从而使衣壳表面形态具有种属特异性。这些变化使每种病毒可与特定宿主受体结合而产生特定组织嗜性和抗原多样性。文章综述了脊椎动物细小病毒衣壳结构功能和基于衣壳结构的基因工程载体开发的研究进展,以期为我国脊椎动物细小病毒衣壳结构方面的研究提供借鉴。

关键词：脊椎动物细小病毒衣壳结构衣壳蛋白功能基因工程载体