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3种对虾病毒囊膜蛋白对假型昆虫杆状病毒的包装与对虾组织亲嗜性的影响

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中国海洋大学学报:自然科学版 2023年第11期53卷 65-78页

作者：马振龙陶奕文赵亚琦宋柳郭华荣中国海洋大学海洋生命学院海洋生物遗传与育种教育部重点实验室山东青岛266003 中国海洋大学海洋生物进化与多样性研究所山东青岛266003

为探究对虾白斑综合征病毒(WSSV)3种囊膜蛋白VP19、VP24和VP28对其假型昆虫杆状病毒的包装与对虾组织亲嗜性的影响,本研究首先分析了过表达的上述3种囊膜蛋白在包装细胞(Sf9)中的亚细胞定位,然后通过共转染的方法分别构建了其假型杆状病... 详细信息

为探究对虾白斑综合征病毒(WSSV)3种囊膜蛋白VP19、VP24和VP28对其假型昆虫杆状病毒的包装与对虾组织亲嗜性的影响,本研究首先分析了过表达的上述3种囊膜蛋白在包装细胞(Sf9)中的亚细胞定位,然后通过共转染的方法分别构建了其假型杆状病毒:Bacmid-GUS/VP19、Bacmid-GUS/VP24和Bacmid-GUS/VP28,比较了上述3种假型杆状病毒的包装效率及其在感染对虾组织上的特异性。结果表明,过表达的VP19、VP24和VP28均可定位于包装细胞的细胞膜上,均能促进假型病毒的包装效率,并分别提高了14.1%、11.5%和11.7%,且携带不同囊膜蛋白的假型病毒在感染对虾成体时具有不同的最低感染剂量和不同的组织特异性。其中,假型病毒Bacmid-GUS/VP19和Bacmid-GUS/VP24仅能感染对虾成体的心脏和肌肉组织,且在单个对虾肌肉组织中两者的最低感染剂量分别为1×1011、1×108个具有生物活性的病毒颗粒数。而假型病毒Bacmid-GUS/VP28不仅能感染对虾的心脏和肌肉组织,还能感染对虾的鳃组织,且其在单个对虾鳃组织中的最低感染剂量为1×108个转导单位,在单个对虾肌肉组织中的最低感染剂量为1×109个转导单位。病毒感染对虾的成体组织的电镜分析结果提示,同哺乳动物细胞中的感染结果相似,假型昆虫杆状病毒在对虾成体组织中的感染也是复制缺陷的。本研究成果拓展了人们对于对虾WSSV病毒囊膜蛋白的生物学功能的认知,为假型昆虫杆状病毒介导的基因转移与表达系统的构建及其在对虾活体基因转移中的应用提供指导。

关键词：对虾假型昆虫杆状病毒包装白斑综合征病毒囊膜蛋白组织特异性

Cloning and sequencing of the full length cDNA encoding the catalytic beta subunit of protein phosphatase 1 from the skin tissue of flatfish turbot Scophthalmus maximus by RACE technique

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Cloning and sequencing of the full length cDNA encoding the ...

The only one cysteine at the C-end of translationally controlled tumor protein of Turbot (Scophthalmus maximus) plays key role in its antioxidant and growth-promoting functions

中国海洋学会海洋生物工程2005年学术年会

作者： Fei Qi, huarong guo Shicui Zhang Ocean university of China, Qingdao, 266003

Reversible protein phosphorylation is an important and versatile mechanism by which cells transduce external signals into biological responses. Cellular levels of protein phosphorylation are determine

关键词： Scophthalmus maximus protein phosphatasesl RACE

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The only one cysteine at the C-end of translationally contro...

2012全国发育生物学大会

作者： Zhixia Zhang,Deyu Geng,Qian Han,huarong guo Department of Marine Biology,Ocean University of China,266003

Translationally controlled tumor protein(TCTP) is a highly conservative,ubiquitously expressed and fairly abundant protein in *** is growing evidence in the literature that TCTP is a multifunctional protein and exerts its biological activity at both extra- and intracellular ***,the primary function and the corresponding mechanism of action of TCTP still remain *** interest,turbot(Scophthamus maximus) TCTP(SmTCTP) contains only one cysteine(Cys) located at the C-terminus(aa170),and this C-end Cys is highly conserved in all known vertebrate *** we first examined the biological role of the C-end Cys of SmTCTP in its antioxidant and growth-promoting activity by site-directed mutation of C170A(Cys→Ala).It was found that,this C-end Cys residue plays key role in the antioxidant and growth-promoting functions of *** absence of Cys residue not only significantly decreased the antioxidant activity of SmTCTP,but also affected the normal growth and survival of the transformed *** results were observed in in vitro cultured flounder gill cells(FG) transformed with wild-type SmTCTP or C170A-mutant *** was found that over-expression of C170A-mutant SmTCTP in FG cells obviously interrupted the normal growth of transformed FG cells in contrast to the untransformed FG *** above data infer that the C170A mutation has made a difference to the growth-promoting function of ***,this C-end Cys residue is exposed on the surface of the three-dimensional structure of SmTCTP protein,thus no conformational alteration occurred after C170A mutation. Considering the blockage of dimerization by C170A mutation,it is hypothesized that the self-dimerization,or dimerization with other receptors is the possible mechanism of action for growth-promoting function of SmTCTP.

关键词：

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两种中药制剂微生物限度检查方法验证

中兽医医药杂志 2022年第1期41卷 68-72页

作者：陈慧洁郭华荣顾崇梅甘肃省酒泉市药品检验检测中心甘肃酒泉735000

建立滋阴清热降糖丸、金水咳喘康胶囊的微生物限度检查方法,并对其进行验证。取滋阴清热降糖丸、金水咳喘康胶囊各10 g,用TSB制成1∶10的供试液,混匀,采用平皿法进行检查,需氧菌采用1∶50、1∶100、1∶1 000 3个稀释度,霉菌、酵母菌采用... 详细信息

建立滋阴清热降糖丸、金水咳喘康胶囊的微生物限度检查方法,并对其进行验证。取滋阴清热降糖丸、金水咳喘康胶囊各10 g,用TSB制成1∶10的供试液,混匀,采用平皿法进行检查,需氧菌采用1∶50、1∶100、1∶1 000 3个稀释度,霉菌、酵母菌采用1∶10、1∶100 2个稀释度,加入金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉,测定回收率。控制菌按照《中华人民共和国药典》2020年版四部中规定检查大肠埃希菌、沙门菌、耐胆盐革兰阴性菌。按上述方法进行验证,测定菌种回收率均为0.5~2.0,方法适用性试验结果满足要求。说明平皿法经验证有效,可用于这两种中药制剂的微生物限度检查,能有效控制药品质量,结果准确可靠。

关键词：滋阴清热降糖丸金水咳喘康胶囊微生物限度检查法平皿法

法国近现代一种难于避免的社会互动：创造发明与“恐新症”

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世界历史评论 2019年第1期6卷 72-92,M0005页

作者：郭华榕北京大学历史系

社会的总体发展是一种可以感受的、自然而然的、巨大的运动。这个运动包含丰富的内容与不同的趋向,也是矛盾的产生、演化、引发冲突以及在一定条件和时间范围内的解决。它涵盖日常生活的各个方面。法国与欧洲近现代历史上的创造发明与... 详细信息

社会的总体发展是一种可以感受的、自然而然的、巨大的运动。这个运动包含丰富的内容与不同的趋向,也是矛盾的产生、演化、引发冲突以及在一定条件和时间范围内的解决。它涵盖日常生活的各个方面。法国与欧洲近现代历史上的创造发明与“恐新症”的较量,展示了社会矛盾是一种重要的社会互动。在所知的国际史学研究中,这种社会互动未曾得到足够的重视。本文对它进行初步探讨,以求加深对法兰西文明的了解。

关键词：蒸汽机 “职业军队” 画作《浴女》 “恐新症” 社会地位

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清肺化痰口服液微生物检验方法适用性研究

中兽医医药杂志 2023年第4期42卷 78-81页

作者：李瑶侯晓玲郭华荣向雪娇甘肃省酒泉市药品检验检测中心甘肃酒泉735000 甘肃省酒泉市中医院甘肃酒泉735000

研究清肺化痰口服液的微生物检验方法适用性,并建立其检验检测方法。按照《中华人民共和国药典》2020年版(四部)通则1105、通则1106和通则1107相关要求进行适用性试验,以枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉菌为试验菌,... 详细信息

研究清肺化痰口服液的微生物检验方法适用性,并建立其检验检测方法。按照《中华人民共和国药典》2020年版(四部)通则1105、通则1106和通则1107相关要求进行适用性试验,以枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉菌为试验菌,大肠埃希菌为控制菌,对清肺化痰口服液进行微生物限度检查的方法学验证。结果显示,需氧菌总数计数采用培养基稀释法(1∶100),霉菌和酵母菌计数采用平皿法,在计数方法验证试验中试验菌的回收率均大于70%;控制菌大肠埃希菌检查采用常规法,其菌落生长良好且生化试验结果准确可靠。上述验证方法符合规定要求,可用于清肺化痰口服液微生物限度检查。

关键词：清肺化痰口服液方法验证微生物限度检查

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康卫氏皿扩散法测定中药制剂的水分活度

中兽医医药杂志 2022年第5期41卷 57-59页

作者：侯晓玲李瑶郭华荣向雪娇甘肃省酒泉市药品检验检测中心甘肃酒泉735000 甘肃省酒泉市中医院甘肃酒泉735000

探索研究中药制剂降脂口服液和温寒平喘口服液在2种不同的六元体系中的水分活度值。参照《食品安全国家标准GB 5009.238-2016》食品水分活度测定的第一法,运用康卫氏皿扩散法在25℃选择NaNO_(3)-NaCl-KBr-KCl-BaCl_(2)-KNO_(3)与SrCl_(2... 详细信息

探索研究中药制剂降脂口服液和温寒平喘口服液在2种不同的六元体系中的水分活度值。参照《食品安全国家标准GB 5009.238-2016》食品水分活度测定的第一法,运用康卫氏皿扩散法在25℃选择NaNO_(3)-NaCl-KBr-KCl-BaCl_(2)-KNO_(3)与SrCl_(2)-NaCl-(NH_(4))_(2)SO_(4)-Sr(NO_(3))_(2)-BaCl_(2)-K_(2)SO_(4)两种不同的六元体系,经过24 h的水分交换平衡,分别测定中药制剂降脂口服液与温寒平喘口服液的水分活度值。结果表明,将口服液分别置于2种不同的六元体系,使得在6种不同饱和盐溶液环境中,水分随周围环境的变化而变化,经过一段时间口服液中的水分与环境达到平衡,通过测定口服液的质量增减量计算水分活度值,用坐标插值法得出拟合结果,线性关系较好。结果提示,该方法试验结果误差小、精密度高,可用于测定口服液的水分活度,为中药制剂口服液的贮藏和优化处方设计提供了有效支撑。

关键词：水分活度康卫氏皿扩散法中药制剂降脂口服液温寒平喘口服液

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中药饮片金银花微生物污染状况考察

中兽医医药杂志 2023年第1期42卷 68-72页

作者：侯晓玲李瑶郭华荣向雪娇甘肃省酒泉市药品检验检测中心甘肃酒泉735000 甘肃省酒泉市中医院甘肃酒泉735000

对河北、安徽及四川3省10家不同企业、不同环节的20批中药饮片金银花进行检测,全面考察微生物污染程度。按照《中华人民共和国药典》2020年版(四部)通则1108中药饮片微生物限度检查法,对20批中药饮片金银花采用常规平皿法(倾注法)进行... 详细信息

对河北、安徽及四川3省10家不同企业、不同环节的20批中药饮片金银花进行检测,全面考察微生物污染程度。按照《中华人民共和国药典》2020年版(四部)通则1108中药饮片微生物限度检查法,对20批中药饮片金银花采用常规平皿法(倾注法)进行需氧菌总数(TAMC)、酵母和霉菌总数(TYMC)、耐热菌总数、耐胆盐革兰阴性菌及沙门菌检测,参照其他国家药典增加金黄色葡萄球菌和洋葱伯克霍尔德菌的检验,统计微生物限度污染情况。结果显示,饮片中TAMC与耐热菌和耐胆盐革兰阴性菌呈正相关系;5批样品检出霉菌,在种植和加工环节尤为突出;15%的饮片耐胆盐革兰阴性菌N>103;50%的饮片检出大肠埃希菌;沙门菌、金黄色葡萄球菌及洋葱伯克霍尔德菌均未检出。从考察结果看,亟需完善国内中药饮片分类体系,建立适合国内中药饮片的培养体系和标准,从而加强中药饮片种植和加工环节微生物污染的管控。

关键词：中药饮片金银花微生物限度检查

cDNA代表性差异分析和抑制性减法杂交技术的比较

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海洋湖沼通报 2005年第1期 61-66页

作者：郭华荣黄冰张士璀亓飞郭燕中国海洋大学海洋生命学院山东青岛266003

本文就cDNA代表性差异分析和抑制性减法杂交这两种技术的主要原理、基本操作过程和优缺点进行了介绍和比较,并展望了这两种技术在海洋生物技术领域的应用前景。

关键词： cDNA代表性差异分析杂交技术优缺点海洋生物技术基本操作减法过程领域