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基于GADD153-LUC的重组人肺上皮细胞快速检测痕量PM_(2.5)致DNA损伤效应

医学检验与临床 2024年第11期35卷 1-5页

作者：姚炜詹劲基姚云英汪东篱李燕杜海荣深圳市光明区疾病预防控制中心广东深圳518106

目的:利用重组人体肺上皮细胞(BEAS-2B)快速检测细颗粒物(PM_(2.5))导致的DNA损伤效应。方法:制备不同浓度的PM_(2.5)并作用于重组肺上皮细胞,观察不同浓度条件下MTS(内盐法,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-5-(3-羧甲基苯基)-2-(4-磺苯基)-2氢-... 详细信息

目的:利用重组人体肺上皮细胞(BEAS-2B)快速检测细颗粒物(PM_(2.5))导致的DNA损伤效应。方法:制备不同浓度的PM_(2.5)并作用于重组肺上皮细胞,观察不同浓度条件下MTS(内盐法,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-5-(3-羧甲基苯基)-2-(4-磺苯基)-2氢-四唑内盐法)检测重组人肺上皮细胞细胞生存率、彗星实验检测DNA损伤、RT-PCR检测GADD153-luc基因表达变化、荧光素酶发光检测DNA损伤情况。结果:相比于阴性对照,25、125μg/mLPM_(2.5)可诱导重组细胞活性显著下降和DNA损伤显著增加,相比于阴性对照,5、25、125μg/mL PM_(2.5)可诱导重组细胞内源性GADD153mRNA基因表达、荧光素酶活性显著增加,且GADD153mRNA基因表达、荧光素酶活性具有良好的相关性(r^(2)=0.992,P<0.01)。结论:相比传统细胞DNA损伤的方法,基于GADD153-LUC的重组人肺上皮细胞可快速检测更痕量PM_(2.5)所致DNA损伤效应。

关键词：细颗粒物人肺上皮细胞 DNA损伤 Gadd153-luc

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