检索结果-南通市图书馆

杧果脱镁叶绿素酶基因MiPPH的克隆及植物表达载体构建

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分子植物育种 2023年第11期21卷 3628-3635页

作者：俞凯莉赵志常高爱平罗睿雄黄建峰张梦云李茂富海南大学园艺学院海口570228 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与种质创制重点开发实验室国家热带果树品种改良中心海口571101

叶绿素降解是果实色泽形成过程中一个主要的影响因素。脱镁叶绿素酶(pheophytinase, PPH)是叶绿素降解代谢的关键酶。本研究提取杧果果皮总RNA,采用RACE方法,克隆得到一个脱镁叶绿素酶基因,并对其进行了初步的生物信息学分析。序列分析... 详细信息

叶绿素降解是果实色泽形成过程中一个主要的影响因素。脱镁叶绿素酶(pheophytinase, PPH)是叶绿素降解代谢的关键酶。本研究提取杧果果皮总RNA,采用RACE方法,克隆得到一个脱镁叶绿素酶基因,并对其进行了初步的生物信息学分析。序列分析表明MiPPH基因cDNA序列全长1 267 bp,开放阅读框为1 113 bp,可编码370个氨基酸,分子量为41.73 kD,等电点为5.22。使用NCBI上的Conserved domains分析MiPPH蛋白结构域,结果显示MiPPH含有PLN02578、Abhydrolase_1共2个结构域,其中PLN02578为保守域,其他物种PPH也都含有这个水解酶(Hydrolase)保守域,说明PPH蛋白有高度的保守性。通过BLAST上其他植物的氨基酸序列进行相似性比对,利用DNAMAN生成的系统进化树发现杧果MiPPH蛋白序列和与同为漆树科的开心果的PPH蛋白序列相似度较高,亲缘关系较近。利用定量PCR技术对不同品种中的MiPPH基因表达量进行分析,发现绿色‘桂七’品种表达量最高,而黄色‘金煌’品种表达量最低,黄色‘金煌’品种和红色‘贵妃’品种表达量相差不大。本试验成功构建pCAMBIA2300-GFP-MiPPH植物表达载体,通过农杆菌介导的烟草瞬时表达,亚细胞定位MiPPH主要定位于细胞核。本试验为后续进行PPH基因的功能验证提供试验基础。

关键词：杧果(Mangifera indica L.) 脱镁叶绿素酶(PPH) 基因克隆植物表达载体

芒果果实多酚氧化酶(PPO)基因的克隆与表达分析

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中国热带农业 2023年第5期 9-17,70页

作者：魏婷婷赵志常汪自松黄团刘彩华罗睿雄高爱平中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所海南海口571101 广西芒果生物学重点实验室广西百色533000 华中农业大学园艺林学学院湖北武汉430070

多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)是引起水果褐变的关键酶。为了研究芒果果实中PPO基因的功能,本试验采用RACE方法从‘贵妃’芒果果实中克隆得到了1个PPO基因,该基因cDNA序列全长为1930bp,开放阅读框为1782bp,编码593个氨基酸。芒果... 详细信息

多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)是引起水果褐变的关键酶。为了研究芒果果实中PPO基因的功能,本试验采用RACE方法从‘贵妃’芒果果实中克隆得到了1个PPO基因,该基因cDNA序列全长为1930bp,开放阅读框为1782bp,编码593个氨基酸。芒果PPO基因编码的多酚氧化酶属于亲水性蛋白质,分子重量为66.82KD,等电点为6.95,不含跨膜结构和信号肽,为非分泌蛋白,包含Tyrosinase、PP01_DWL和PP01_KFDV保守结构域。芒果PPO蛋白的二级结构无规则卷曲、β-折叠和α-螺旋占比分别为63.58%、22.60%和13.83%,三级结构与模板6els.1.A-致性达70.94%,可能与C2H2 and C2HC zinc fingers superfamily protein(TT1),Multidrug resistance protein,mate family(TT12)和Autoinhibited H(+)-ATPase isoform 10(AHA10)等存在相互作用。聚类分析表明该蛋白与开心果、橄榄、克莱门柚和甜橙等植物的亲缘关系较近。通过qRT-PCR分析,芒果PPO基因主要在‘桂七’果皮中表达量较高,而在‘贵妃’果皮中表达量较低。该基因的克隆及其功能的研究对芒果抗酶促褐变品种的培育以及分子改良具有重大意义。

关键词：芒果多酚氧化酶克隆表达分析

高思华“地黄汤”类方肝、脾、肾3脏同调辨治糖尿病经验浅析

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天津中医药大学学报 2021年第1期40卷 15-18页

作者：张泽涵陈佳祺孔维嘉暴雪丽马如风白颖高思华赵丹丹北京中医药大学中医学院北京100029 北京中医药大学第三附属医院北京100029

地黄汤类方由钱乙六味地黄丸发展而来,原方由熟地黄、山药、山茱萸、牡丹皮、泽泻、茯苓6味药物组成,即张仲景的肾气丸去桂枝、附子。后世医家在此基础上加减化裁出诸多地黄汤类方,拓展了其临床应用范围。高思华教授广泛吸纳前贤使用地... 详细信息

地黄汤类方由钱乙六味地黄丸发展而来,原方由熟地黄、山药、山茱萸、牡丹皮、泽泻、茯苓6味药物组成,即张仲景的肾气丸去桂枝、附子。后世医家在此基础上加减化裁出诸多地黄汤类方,拓展了其临床应用范围。高思华教授广泛吸纳前贤使用地黄汤类方的经验,并将其与自身肝、脾、肾3脏同调治疗2型糖尿病的经验结合,善用参芪地黄汤、杞菊地黄汤、黄连地黄汤、归芍地黄汤辨治糖尿病,临床疗效显著。文章特举4例临床验案,浅析高思华教授使用地黄汤类方经验。

关键词：地黄汤类方肝、脾、肾同调糖尿病验案

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归芪补血口服液对失血性贫血小鼠血象的影响

海峡药学 2017年第12期29卷 22-24页

作者：林彩霞王捷马劼许立拔高玲巫玲玲蒋伟哲孔晓龙广西医科大学南宁530021 广西医科大学制药厂南宁530021 广西医科大学第一附属医院南宁530021

目的探讨归芪补血口服液对失血性贫血小鼠血象的影响。方法将72只KM小鼠随机分成正常对照组、模型组、硫酸亚铁组和归芪补血口服液高、中、低剂量组,每组12只,雌雄各半,1日灌胃1次,连续灌胃28天,给药23天后,除正常对照组外,其余组别采... 详细信息

目的探讨归芪补血口服液对失血性贫血小鼠血象的影响。方法将72只KM小鼠随机分成正常对照组、模型组、硫酸亚铁组和归芪补血口服液高、中、低剂量组,每组12只,雌雄各半,1日灌胃1次,连续灌胃28天,给药23天后,除正常对照组外,其余组别采用尾静脉放血法,连续放血3天,造成失血性贫血动物模型,末次给药后30min取血,观察给药后各组小鼠血象指标和脏器系数。结果小鼠造成失血性贫血模型后,归芪补血口服液可显著升高血象红细胞总数、血红蛋白含量、红细胞容积、网织红细胞计数、血小板总数、白细胞总数(P<0.05),可有效抑制免疫器官的萎缩和抑制体重减轻(P<0.05)。结论归芪补血口服液有良好的补血效果,同时具有免疫器官保护作用。

关键词：失血性贫血归芪补血口服液益气补血

归芪合剂联合蜂疗预防肺腺癌患者二线化疗后骨髓抑制临床效果

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吉林中医药 2021年第5期41卷 625-628页

作者：安香珍张淼张燕孙毅李国英赵新王培培李亚茹段媛媛梁欢高振林陈吉红石家庄市第一医院中医科石家庄050011 石家庄市第一医院肿瘤科石家庄050011

目的探讨归芪合剂联合蜂疗预防肺腺癌患者二线化疗后骨髓抑制临床效果。方法选择培美曲塞化疗后肺腺癌患者124例,以随机数字表法分为对照组与观察组,各62例。对照组采用单纯西医治疗,观察组在对照组基础上加用归芪合剂联合蜂疗治疗。比... 详细信息

目的探讨归芪合剂联合蜂疗预防肺腺癌患者二线化疗后骨髓抑制临床效果。方法选择培美曲塞化疗后肺腺癌患者124例,以随机数字表法分为对照组与观察组,各62例。对照组采用单纯西医治疗,观察组在对照组基础上加用归芪合剂联合蜂疗治疗。比较2组骨髓抑制发生率、骨髓抑制分级情况、KPS评分变化情况及治疗前后GM-CSF水平。结果观察组骨髓抑制发生率显著低于对照组(P<0.05);观察组Ⅰ~Ⅱ级白细胞、红细胞及中性粒细胞抑制发生率均显著低于对照组(P<0.05);观察组II级血小板抑制发生率显著低于对照组(P<0.05);观察组KPS评分提高和稳定比例均显著高于对照组(P<0.05);观察组KPS评分降低比例均显著低于对照组(P<0.05);观察组治疗后GM-CSF水平显著高于对照组(P<0.05);对照组治疗后GM-CSF水平显著低于治疗前(P<0.05)。结论归芪合剂联合蜂疗用于肺腺癌化疗后患者可有效预防骨髓抑制发生,提高生活质量,可能与该方案能够更有效上调GM-CSF表达有关。

关键词：肺癌中药方剂蜂疗化疗疗效机制