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Differentiation trajectories and biofunctions of symbiotic and un-symbiotic fate cells in root nodules of Medicago truncatula

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Molecular Plant 2022年第12期15卷 1852-1867页

作者： Qinyi Ye Fugui Zhu fanghao sun Tai-Cheng Wang Jiale Wu Peng Liu Chen Shen Jiangli Dong Tao Wang State Key Laboratory of Agrobiotechnology College of Biological SciencesChina Agricultural UniversityBeijing 100193China College of Grassland Science and Technology China Agricultural UniversityBeijing 100193China

The root nodule is a complex symbiotic nitrogen fixation factory,in which cells are highly ***,the differentiation trajectories and interconnection of nodule cells remain largely *** this study,we set up a modified protocol for nodule protoplast preparation and performed a single-cell RNA sequencing profiling of the indeterminate Medicago truncatula *** designated 13 cell clusters with specific expression patterns in 14-day post inoculation nodules and constructed a spatial and functional cellular map based on experimental data and bioinformatic *** analysis further revealed that two groups of apical meristematic cells develop into symbiotic and un-symbiotic fate cells along their particular *** analysis of each cell cluster revealed their particularity and interrelation,especially that the un-infected cells in nitrogen fixation zone are also involved in nitrogen assimilation by undertaking the asparagine ***,our data offer an important resource for investigating the mechanism of nodule organogenesis and symbiotic nitrogen fixation.

关键词： single-cell RNA sequencing scRNA-seq nodule organogenesis symbiotic nitrogen fixation indeterminate nodule legume plant

不同潮气量和PEEP对脉搏轮廓法与经肺热稀释法测量巴马猪心排血量的影响

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中山大学学报（医学科学版） 2024年第1期45卷 93-99页

作者：刘军孙方昊陈珊张赫元黎尚荣中山大学附属第三医院手术麻醉中心广东广州510000 惠州市第一人民医院麻醉科广东惠州516000 广州市胸科医院麻醉科广东广州510000

【目的】探究机械通气时不同潮气量和呼气末正压(PEEP)对脉搏轮廓法与经肺热稀释法测量巴马猪心排血量的影响。【方法】选取实验用巴马猪12只,随机分为对照组(肺动脉导管热稀释法)、研究组A(经肺热稀释法)和研究组B(脉搏轮廓法),各4只... 详细信息

【目的】探究机械通气时不同潮气量和呼气末正压(PEEP)对脉搏轮廓法与经肺热稀释法测量巴马猪心排血量的影响。【方法】选取实验用巴马猪12只,随机分为对照组(肺动脉导管热稀释法)、研究组A(经肺热稀释法)和研究组B(脉搏轮廓法),各4只。建立模型,采用不同方法测量心排出量,分析其一致性,比较不同潮气量和PEEP对心排出量的影响。【结果】脉搏轮廓法与热稀释法测定猪心排血量的相关系数为r=0.754,两者具有正相关性。经肺热稀释法与热稀释法测定猪心排血量的相关系数为r=0.771,两者具有正相关性。脉搏轮廓法、与热稀释法测定猪心排血量相对误差为13.5%,两者具有一致性。经肺热稀释法与热稀释法测定猪心排血量相对误差为12.9%,两者具有一致性。随着潮气量增加,心排出量值明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。随着PEEP增加,猪心排出量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。【结论】脉搏轮廓法、经肺热稀释法与热稀释法测定猪心排血量的一致性良好;当机械通气潮气量或PEEP增加时猪心排血量逐渐下降。

关键词：热稀释法经肺热稀释法脉搏轮廓法潮气量呼气末正压心排血量一致性

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地层冻融过程井壁受力模型试验研究

中国测试 2021年第6期47卷 33-37页

作者：王博刘志强孙方浩袁帅中国矿业大学深部岩土力学与地下工程国家重点实验室江苏徐州221116 中国矿业大学力学与土木工程学院江苏徐州221116

为进一步探索深厚表土层冻结法凿井井壁融沉附加力的作用规律,开展地层冻融过程井壁受力物理模拟试验,获得地层冻融温度场、井壁融沉附加力等的演化规律。试验结果表明:研制的试验平台可较好模拟实际冻结法凿井工程中冻结壁-井壁的一维... 详细信息

为进一步探索深厚表土层冻结法凿井井壁融沉附加力的作用规律,开展地层冻融过程井壁受力物理模拟试验,获得地层冻融温度场、井壁融沉附加力等的演化规律。试验结果表明:研制的试验平台可较好模拟实际冻结法凿井工程中冻结壁-井壁的一维冻融过程,模拟试验中井壁周围地层温度梯度变化范围在–70~140℃/m;在无荷载作用下,井壁融沉附加力主要产生在周围冻土的热融压缩阶段,融沉附加力的最大值接近土体自重应力水平的50%,可为我国应用冻结法进行深立井以及其他城市地下工程建设提供科学依据。

关键词：深厚表土冻结法凿井冻融土-结构相互作用融沉附加力

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前列腺增生症术后膀胱痉挛的预防和护理

实用临床医药杂志 2013年第8期17卷 90-93页

作者：吴伟孙方浩陈伟江苏徐州市第一人民医院泌尿外科江苏徐州221002

目的探讨前列腺增生症(BPH)术后膀胱痉挛的原因和有效的护理措施。方法通过对50例前列腺电切术(TURP)与50例开放性手术(OP)出现膀胱痉挛频率的术后临床观察,分析膀胱痉挛的原因并采取积极的预防护理措施。结果与OP比较,TURP术后出现膀... 详细信息

目的探讨前列腺增生症(BPH)术后膀胱痉挛的原因和有效的护理措施。方法通过对50例前列腺电切术(TURP)与50例开放性手术(OP)出现膀胱痉挛频率的术后临床观察,分析膀胱痉挛的原因并采取积极的预防护理措施。结果与OP比较,TURP术后出现膀胱痉挛的频率低(P<0.05),差异有统计学意义;TURP术后留置无痛尿管较留置三腔尿管出现膀胱痉挛少(P<0.01),差异有统计学意义。结论膀胱痉挛是BPH术后的常见并发症,术式的选择、无痛尿管的应用及精心的围术期护理能显著降低术后膀胱痉挛的发生率。

关键词：前列腺增生症电切术开放性手术无痛尿管膀胱痉挛预防和护理

局麻下微通道经皮肾镜取石术治疗复杂性输尿管上段结石106例疗效分析

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国际泌尿系统杂志 2018年第1期38卷 86-88页

作者：陈伟刘星孙方浩甄欣徐州市第一人民医院泌尿外科江苏徐州221002

目的探讨局麻下微通道经皮肾镜取石术治疗复杂性输尿管上段结石的安全性及有效性.方法回顾性分析2013年4月至2016年5月在局麻下行微通道经皮肾镜取石术治疗复杂性输尿管上段结石106例患者的临床资料.39例合并息肉或肉芽组织包裹行输... 详细信息

目的探讨局麻下微通道经皮肾镜取石术治疗复杂性输尿管上段结石的安全性及有效性.方法回顾性分析2013年4月至2016年5月在局麻下行微通道经皮肾镜取石术治疗复杂性输尿管上段结石106例患者的临床资料.39例合并息肉或肉芽组织包裹行输尿管镜取石失败,28例结石远端输尿管扭曲或狭窄,16例行输尿管切开取石术后复发,23例行体外冲击波碎石术（extracorporeal shock wave lithotripsy,ESWL）效果较差.结果 106例患者手术均在局麻下顺利完成,结石总清除率为98.1％（104/106）,一期取净结石101例,3例术中出血行二期取净结石,2例因输尿管穿孔行切开取石.结论局麻下微通道经皮肾镜取石术治疗复杂性输尿管上段结石具有安全有效、创伤小、恢复快、结石清除率高等优点,值得临床推广运用.

关键词：输尿管结石肾造口术,经皮

溶瘤腺病毒ZD55-特异性核基质结合区结合蛋白1对裸鼠前列腺癌DU145细胞移植瘤的治疗作用

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中华实验外科杂志 2017年第2期34卷 258-260页

作者：王尚魏晋刘星陈伟张义静毛立军徐州市第一人民医院泌尿科江苏221002 徐州医学院附属医院泌尿科江苏221002

目的观察携带特异性核基质结合区结合蛋白1（SATB1）基因短发卡RNA（shRNA）的溶瘤腺病毒ZD55-SATB1对裸鼠前列腺癌DU145细胞移植瘤的治疗作用。方法构建前列腺癌DU145细胞的裸鼠皮下移植瘤模型，将裸鼠随机分成4组，每组8只，分别用ZD5... 详细信息

目的观察携带特异性核基质结合区结合蛋白1（SATB1）基因短发卡RNA（shRNA）的溶瘤腺病毒ZD55-SATB1对裸鼠前列腺癌DU145细胞移植瘤的治疗作用。方法构建前列腺癌DU145细胞的裸鼠皮下移植瘤模型，将裸鼠随机分成4组，每组8只，分别用ZD55-SATB1、ZD55-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）、Ad-SATB1、磷酸盐缓冲液（PBS）进行瘤内注射治疗，每次病毒100 μl（5×108 pfu），隔天1次，共3次。每周测量肿瘤体积，绘制肿瘤时间-体积生长曲线，治疗第49天将裸鼠全部处死，免疫组织化学检测SATB1基因表达水平，取肺脏组织苏木素-伊红（HE）染色检测肿瘤转移。原位缺口末端标记法（TUNEL）法检测肿瘤组织细胞的凋亡。结果成功构建前列腺癌DU145细胞裸鼠皮下移植瘤模型。ZD55-SATB1组肿瘤体积为（295.3±51.9） mm3，与ZD55-EGFP组（525.6±89.3） mm3（P＝0.017）、Ad-SATB1组（582.3±97.0） mm3（P＝0.010）和PBS组（777.1±139.8） mm3（P＝0.009）比较，差异有统计学意义。肺组织HE染色显示：PBS组全部出现肺转移，ZD55-EGFP组2只出现转移，而ZD55-SATB1和Ad-SATB1组则无转移。TUNEL显示：ZD55-SATB1组凋亡率为（87.3±4.8）%，ZD55-EGFP组为（51.2±3.4）%（P＝0.013），Ad-SATB1组为（41.3±3.2）% （P＝0.010），PBS组为（20.1±1.9）%（P＝0.009），ZD55-SATB1组凋亡率显著增高，差异有统计学意义。免疫组织化学法显示：SATB1在ZD55-SATB1、ZD55-EGFP、Ad-SATB1和PBS组吸光度值分别为13.8±1.2、81.1±7.3（P＝0.010），26.9±2.4（P＝0.025）和88.3±7.8（P＝0.009），与对照组间比较，差异均有统计学意义。结论ZD55-SATB1可有效抑制人前列腺癌裸鼠移植瘤的生长和转移、促进其凋亡。

关键词：溶瘤腺病毒特异性核基质结合区结合蛋白1 前列腺癌

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中华实验外科杂志 2023年第12期40卷 2446-2450页

作者：刘万启孙方浩魏晋马赛娄禄高超徐州医科大学附属市立医院泌尿外科徐州221002

目的观察荷载精子相关抗原9(SPAG9)基因短发卡RNA(shRNA)的溶瘤腺病毒ZD55-SPAG9联合放疗对前列腺癌LNCaP细胞的治疗作用并初步探讨其机制。方法将前列腺癌LNCaP细胞分为4组,分别为磷酸盐对照组(PBS组)、放疗组(10 GY)、病毒组[ZD55-SPA... 详细信息

目的观察荷载精子相关抗原9(SPAG9)基因短发卡RNA(shRNA)的溶瘤腺病毒ZD55-SPAG9联合放疗对前列腺癌LNCaP细胞的治疗作用并初步探讨其机制。方法将前列腺癌LNCaP细胞分为4组,分别为磷酸盐对照组(PBS组)、放疗组(10 GY)、病毒组[ZD55-SPAG9,10感染复数(MOI)]、联合组(ZD55-SPAG9+放疗,5 MOI+5 GY);细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组LNCaP细胞增殖能力的变化;Hoechst-33258染色法检测各组细胞的凋亡;Transwell迁移及侵袭实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞SPAG9蛋白、凋亡相关蛋白及侵袭相关蛋白的表达。两组间差异的比较采用独立样本t检验,多组间差异比较采用One-way ANOVA分析。结果CCK-8结果显示,联合组LNCaP细胞的存活率为(46.02±2.20)%、病毒组为(56.83±2.40)%(t=12.855,P<0.01)、放疗组为(64.12±2.23)%(t=22.389,P<0.01)、PBS组为(99.63±2.72)%(t=59.407,P<0.01),各治疗组的细胞存活率均低于PBS组,差异有统计学意义(F=1407.384,P<0.01),联合组与单一治疗组比较,LNCaP细胞的存活率更低。Hoechst-33258染色实验结果显示,联合组LNCaP细胞的凋亡率为(55.80±1.49)%、病毒组为(36.42±1.78)%(t=-32.295,P<0.01)、放疗组为(30.01±1.80)%(t=-42.814,P<0.01)、PBS组为(9.30±1.53)%(t=-84.343,P<0.01),各治疗组的细胞凋亡率均高于PBS组,差异有统计学意义(F=2010.396,P<0.01),联合组与单一治疗组比较,LNCaP细胞的凋亡更加明显。Transwell迁移和侵袭实验结果显示,(1)迁移实验:联合组迁移细胞数为(102.60±16.03)个、病毒组为(163.67±11.00)个(t=12.166,P<0.01)、放疗组为(206.47±17.05)个(t=17.192,P<0.01)、PBS组为(304.73±17.16)个(t=33.345,P<0.01),各治疗组迁移细胞数均少于PBS组,差异有统计学意义(F=450.498,P<0.01),联合组迁移细胞数明显少于单一治疗组;(2)侵袭实验:联合组侵袭细胞数为(90.93±13.91)个、病毒组为(145.33±15.31)个(t=10.184,P<0.01)、放疗组为(191.33±13.32)个(t=20.187,P<0.01)、PBS组为(295.47±19.00)个(t=33.645,P<0.01),各治疗组侵袭细胞数均少于PBS组,差异有统计学意义(F=467.586,P<0.01),联合组侵袭细胞数明显少于单一治疗组。Western blot实验结果显示,联合组、病毒组、放疗组、PBS组内,SPAG9蛋白相对表达量分别为0.41±0.07、0.81±0.13、1.41±0.17、1.98±0.10,各治疗组SPAG9的相对表达量均低于PBS组,差异有统计学意义(F=98.785,P<0.01),联合组内SPAG9表达明显低于单一治疗组,差异有统计学意义(t=4.868、9.603,P<0.01);凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8在联合组、病毒组、放疗组、PBS组内相对表达量分别为1.51±0.11、1.26±0.05、1.11±0.07、0.64±0.10,各治疗组内Caspase-8的表达高于PBS组,差异有统计学意义(F=56.728,P<0.01),与单一治疗组比较,联合组内Caspase-8的上调更加显著,差异有统计学意义(t=-3.713、-5.499,P<0.05);侵袭相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)在联合组、病毒组、放疗组、PBS组内相对表达量分别为(1.44±0.05、0.26±0.06)、(1.23±0.05、0.56±0.01)、(0.91±0.06、0.79±0.07)、(0.25±0.04、1.21±0.07),各治疗组内E-cadherin表达高于PBS组,Vimentin表达低于PBS组,差异有统计学意义(F=287.276、138.020,P<0.01),与单一治疗组比较,联合组内E-cadherin的上调和Vimentin的下调更加显著,差异有统计学意义(t=-5.017、8.386,P<0.01;t=-10.982、10.034,P<0.01)。结论ZD55-SPAG9联合

关键词：精子相关抗原9 前列腺癌放疗

吉西他滨膀胱灌注化疗联合体外深部热疗预防非肌层浸润性膀胱癌术后复发的临床效果及安全性

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中国医药 2017年第8期12卷 1213-1216页

作者：陈伟刘星甄欣孙方浩江苏省徐州市第一人民医院泌尿外科 221002

目的探讨吉西他滨膀胱灌注化疗联合体外深部热疗预防非肌层浸润性膀胱癌（NMIBC）术后复发的临床效果及安全性。方法选取2013年3月至2015年10月于江苏省徐州市第一人民医院泌尿外科行经尿道膀胱肿瘤切除术的NMIBC患者126例，按... 详细信息

目的探讨吉西他滨膀胱灌注化疗联合体外深部热疗预防非肌层浸润性膀胱癌（NMIBC）术后复发的临床效果及安全性。方法选取2013年3月至2015年10月于江苏省徐州市第一人民医院泌尿外科行经尿道膀胱肿瘤切除术的NMIBC患者126例，按随机数字表法分为观察组和对照组，各63例。对照组术后采用吉西他滨常温膀胱灌注化疗；观察组采用吉西他滨膀胱灌注化疗联合体外深部热疗；治疗时间持续1年。术后随访2年，统计膀胱癌复发的时间及患者例数，统计患者治疗期间的不良反应发生情况。结果 2组患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量、TNM分期及病理分级比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。观察组的复发率明显低于对照组［14.3%（9/63）比27.0%（17/63）］，差异有统计学意义（P＜0.01）。观察组治疗中膀胱区不适发生率明显高于对照组［28.6%（18/63）比7.9%（5/63）］；对照组膀胱刺激征发生率明显高于观察组［23.8%（15/63）比6.3%（4/63）］；差异均有统计学意义（均P＜0.01）。结论吉西他滨膀胱灌注化疗联合体外深部热疗明显降低了NMIBC患者术后的复发率，且安全性较好。

关键词：非肌层浸润性膀胱癌吉西他滨膀胱灌注化疗体外深部热疗

经尿道等离子前列腺剜除术与耻骨上经膀胱前列腺切除术治疗大体积良性前列腺增生效果比较

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中国综合临床 2017年第7期33卷 639-642页

作者：陈伟刘星甄欣孙方浩江苏徐州市第一人民医院泌尿外科 221002

目的比较经尿道等离子前列腺剜除术（PKEP）与耻骨上经膀胱前列腺切除术（SPP）治疗大体积良性前列腺增生（BPH）的临床疗效和安全性.方法选取我院2014年3月至2016年12月收治的80例大体积良性前列腺增生患者作为研究对象,按随机数字... 详细信息

目的比较经尿道等离子前列腺剜除术（PKEP）与耻骨上经膀胱前列腺切除术（SPP）治疗大体积良性前列腺增生（BPH）的临床疗效和安全性.方法选取我院2014年3月至2016年12月收治的80例大体积良性前列腺增生患者作为研究对象,按随机数字表法分为PKEP组（40例）和SPP组（40例）.比较两组手术情况相关指标、随访6个月的术后并发症及及相关疗效指标.结果 SPP组术中出血量明显多于PKEP组[（215.7±10.4） ml 与（75.6±9.2） ml],差异有统计学意义（t=6.541,P〈0.05）;两组患者手术时间、切除腺体量比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）;术后留置导尿管时间、膀胱冲洗时间及住院时间较PKEP组明显延长[（6.3±1.8）d 与（2.4±0.6）d、（5.5±1.4）d 与（1.3±0.6）d、（7.7±2.3）d 与（3.1±0.7）d],差异均有统计学意义（t 值分别为4.357 、2.542、2.975,P均〈0.05）;术后6个月随访,两组患者的前列腺症状评分（IPSS）、最大尿流率（Qmax）、残余尿（PVR）、生活质量评分（QOL）较术前均显著改善（P均〈0.05）,但两组间比较差异无统计学意义（P均〉0.05）;PKEP组术后并发症的发生情况均显著低于SPP组,差异均有统计学意义（P均〈0.05）.结论 PKEP治疗BPH疗效安全可靠,具有术中出血少、并发症少、恢复快等优点,同时还明显提高患者术后的生活质量,是大体积良性前列腺增生的理想治疗方法.

关键词：良性前列腺增生等离子前列腺剜除术耻骨上经膀胱前列腺切除术