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人牙周膜成纤维细胞对盐酸林可霉素跨膜转运的研究

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临床口腔医学杂志 2009年第5期25卷 268-270页

作者：刘宇刘洪臣吴霞鄂玲玲冷斌海军总医院口腔科北京100037 解放军总医院口腔医学中心北京100853

目的:研究人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,HPDLF)对盐酸林可霉素的跨膜转运,为根管牙周局部及全身给药提供实验依据。方法:盐酸林可霉素溶液孵育HPDLF和MC3T3-e1细胞,超声破碎细胞后,HPLC测定不同时间点的... 详细信息

目的:研究人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,HPDLF)对盐酸林可霉素的跨膜转运,为根管牙周局部及全身给药提供实验依据。方法:盐酸林可霉素溶液孵育HPDLF和MC3T3-e1细胞,超声破碎细胞后,HPLC测定不同时间点的胞内药物含量,考马斯亮蓝法测定细胞蛋白总量。结果:10μg/ml的盐酸林可霉素孵育HPDLF及MC3T3-e1细胞1min、5min、10min时均无法检测出胞内药物的存在,20μg/ml的药物作用5min、10min,同样无法检测。结论:HPLC可以用于盐酸林可霉素的测定。本实验条件下不能检测出HPDLF以及MC3T3-e1细胞对盐酸林可霉素的跨膜转运。

关键词：人牙周膜成纤维细胞盐酸林可霉素生物转运高效液相色谱法

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人牙周膜成纤维细胞对罗红霉素的跨膜转运

北京口腔医学 2008年第3期16卷 138-141页

作者：刘宇刘洪臣吴霞鄂玲玲冷斌解放军总医院口腔医学中心北京海军总医院口腔科100853

目的研究人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,HPDLF)对罗红霉素的跨膜转运,为通过根管局部及全身给药假说提供实验依据。方法罗红霉素溶液孵育HPDLF和MC3T3-e1细胞,超声破碎细胞后,高效液相色谱法(high perform... 详细信息

目的研究人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,HPDLF)对罗红霉素的跨膜转运,为通过根管局部及全身给药假说提供实验依据。方法罗红霉素溶液孵育HPDLF和MC3T3-e1细胞,超声破碎细胞后,高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定不同时间点的胞内药物含量,考马斯亮蓝法测定细胞蛋白总量。结果20μg/ml的罗红霉素孵育HPDLF及MC3T3-e1细胞1、5、10分钟时均无法检测出胞内药物的存在,40μg/ml的药物作用5分钟,同样无法检测。结论在本实验条件下,不能检测出HPDLF以及MC3T3-e1细胞对罗红霉素的跨膜转运。

关键词：人牙周膜成纤维细胞罗红霉素生物转运高效液相色谱法

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大鼠下颌骨成骨细胞对格列本脲的转运

中国医药导报 2008年第18期5卷 35-36页

作者：王威刘洪臣鄂玲玲刘宇吴霞中国医学科学院北京协和医院口腔科北京100730 解放军总医院口腔医学研究所北京100853

目的:研究下颌骨成骨细胞(MO)对格列本脲的跨膜转运,为种植体全身给药提供实验依据。方法:将大鼠MO与含有格列本脲的磷酸盐缓冲液(PBS)共同孵育一定时间后,收集细胞,超声波破碎,用高效液相色谱(HPLC)法测定裂解液中的药物含量,用考马斯... 详细信息

目的:研究下颌骨成骨细胞(MO)对格列本脲的跨膜转运,为种植体全身给药提供实验依据。方法:将大鼠MO与含有格列本脲的磷酸盐缓冲液(PBS)共同孵育一定时间后,收集细胞,超声波破碎,用高效液相色谱(HPLC)法测定裂解液中的药物含量,用考马斯亮蓝法测定细胞蛋白总量。用细胞内药物含量与细胞蛋白的比值作为观察药物转运量的检测指标。结果:实验组MO内可测到格列本脲的存在。结论:MO可以跨膜转运格列本脲进入细胞内,证实了人工种植牙给药的可行性。

关键词：成骨细胞转运高效液相色谱法格列本脲大鼠

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改良大鼠下颌骨成骨细胞原代培养与鉴定

中华老年口腔医学杂志 2007年第4期5卷 226-229页

作者：鄂玲玲刘洪臣吴霞王东胜解放军总医院口腔医学研究所副主任技师北京100853

目的:探讨高效的原代成年大鼠下颌骨成骨细胞培养方法,为进一步的实验研究奠定基础。方法:将4-6周SD成年大鼠处死并取出下颌骨,剪碎,用改良的酶消组织块培养法培养细胞,通过相差显微镜观察,用碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫荧光染色和钙结... 详细信息

目的:探讨高效的原代成年大鼠下颌骨成骨细胞培养方法,为进一步的实验研究奠定基础。方法:将4-6周SD成年大鼠处死并取出下颌骨,剪碎,用改良的酶消组织块培养法培养细胞,通过相差显微镜观察,用碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫荧光染色和钙结节染色等方法对所获得的细胞进行鉴定。结果:所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,碱性磷酸酶染色、骨钙素染色和钙结节染色均呈阳性。结论:改良的酶消组织块培养法,可获得大量高纯度的下颌骨成骨细胞,所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态和功能。

关键词：下颌骨成骨细胞牙槽骨细胞培养大鼠

可注射镁合金/硫酸钙成骨复合材料的制备及性能研究

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口腔颌面修复学杂志 2014年第6期15卷 321-327页

作者：张山川鄂玲玲徐宝华刘洪臣解放军总医院口腔医学研究所博士后北京100853 中日友好医院口腔医学中心主治医师北京100029

目的:本研究采用半水硫酸钙晶体(Calcium sulphate hemihydrate,CSH)与可吸收镁合金(Magnesium alloy s,Mgalloy s)制备出一种可注射的新型复合人工骨材料,并研究其可注射性,机械性能,生物相容性、生物降解等各方面的性能。方法:对比不... 详细信息

目的:本研究采用半水硫酸钙晶体(Calcium sulphate hemihydrate,CSH)与可吸收镁合金(Magnesium alloy s,Mgalloy s)制备出一种可注射的新型复合人工骨材料,并研究其可注射性,机械性能,生物相容性、生物降解等各方面的性能。方法:对比不同比例Mg/CSH复合材料的初、终凝时间、压缩强度、注射特性;采用X线衍射分析(X-r ay diffr action analy sis,XR D)和能量弥散X射线探测器(ener gy Disper sive X-r ay Detector,eDX)对材料成分进行分析;模拟体内液态环境,测试材料在37℃浸泡环境下的生物活性及在磷酸缓冲盐浸泡下的重量变化以及p H变化;材料表面形态采用扫描电镜(Scaning electron microscopy,SeM)观察;用大肠杆菌抑菌性实验对材料的抗菌性进行检测。结果:与纯CSH组相比,添加Mg的复合材料凝固时间延长,复合材料的可注射性显著提高(纯CSH的可注射比例为43%,20%Mg/CSH为69%)。随着Mg含量的提高,抗压强度方面也有所提高(PeDX检测结果均证明材料中含有CSH以及Mg晶体。不同复合材料在浸泡环境下的结果表明,Mg的添加对复合材料的p H无影响;降解率方面,在浸泡时间小于21d时,纯CSH与Mg/CSH复合材料的降解速度差异无统计学意义;在浸泡21d后,复合材料的降解性明显优于纯CSH(PeM检测浸泡前后材料表面,结果表明浸泡对材料差异无统计学意义;20%Mg/CSH及10%Mg/CSH与纯CSH 24h后抑菌性能的差异有统计学意义。结论:添加镁合金的可注射硫酸钙复合材料展示出良好的机械性能,在可注射能力、抗菌性,体内生物相容性方面也表现良好。该材料具有潜在的临床应用价值。

关键词：可注射骨半水硫酸钙镁合金骨组织工程骨修复

内皮素-1对牙周膜细胞白介素-6表达的影响

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中华老年口腔医学杂志 2012年第5期10卷 273-275,301页

作者：梁莉刘洪臣鄂玲玲王东胜解放军总医院口腔医学研究所博士后北京100853 解放军309医院口腔科主治医师北京100091

目的:探讨不同浓度内皮素-1(endothelin-1,eT-1)对牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)白介素-6(interleukin-6,IL-6)表达的影响,为进一步探讨内皮素-1在牙周炎发病机制中的作用机理奠定基础。方法:体外培养牙周膜细胞,加入... 详细信息

目的:探讨不同浓度内皮素-1(endothelin-1,eT-1)对牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)白介素-6(interleukin-6,IL-6)表达的影响,为进一步探讨内皮素-1在牙周炎发病机制中的作用机理奠定基础。方法:体外培养牙周膜细胞,加入不同浓度(1,10,100 nM)的eT-1,以未作任何处理的牙周膜细胞为空白对照,加入内皮素受体eTA拮抗剂BQ123(100nM)和eTB拮抗剂BQ788(100nM)作阴性对照,刺激12h后提取细胞培养上清液和细胞裂解物,采用eLISA及实时定量PCR检测eT-1作用下牙周膜细胞IL-6基因及蛋白表达的改变。结果:与对照组相比,eT-1对牙周膜细胞IL-6 mRNA及蛋白分泌具有显著促进作用,并呈剂量依赖性,eTA拮抗剂BQ123和eTB拮抗剂BQ788可以抑制eT-1的作用。结论:内皮素-1可以显著促进牙周膜细胞IL-6的表达,内皮素受体拮抗剂抑制了eT-1的作用。

关键词：内皮素-1 牙周膜细胞白介素-6 牙周炎

矿化液对人脂肪基质细胞(hADSCs)成骨分化的影响

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口腔颌面修复学杂志 2010年第2期11卷 68-70,98页

作者：张勇刘洪臣鄂玲玲王东胜解放军总医院口腔医学研究所博士生北京100853

目的:比较人脂肪基质细胞(human adipose-derived mesenehymal stem cells,hADSCs)在矿化条件与非矿化条件下分别培养,评价矿化液对其增殖和分化的影响。方法:酶消法原代培养人脂肪基质细胞,再以含地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的... 详细信息

目的:比较人脂肪基质细胞(human adipose-derived mesenehymal stem cells,hADSCs)在矿化条件与非矿化条件下分别培养,评价矿化液对其增殖和分化的影响。方法:酶消法原代培养人脂肪基质细胞,再以含地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的矿化液进行诱导,MTT检测矿化液对细胞增殖的影响,细胞培养上清液检测碱性磷酸酶(ALP)活性及骨钙素(OCN)含量。结果:矿化液抑制细胞的增殖,提高人脂肪基质细胞ALP活性和骨钙素的含量。结论:人脂肪基质细胞在矿化条件下可以表现出成骨细胞特性。

关键词：人脂肪基质细胞矿化液分化

钛镍记忆合金牵张器复合脱细胞真皮基质增高犬牙槽嵴的组织学研究

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北京口腔医学 2008年第3期16卷 121-124页

作者：肖红喜胡敏王东胜鄂玲玲解放军总医院口腔科

目的通过对牵张成骨增高牙槽嵴新生骨的组织学观察,研究钛镍记忆合金牵张器复合脱细胞真皮基质对成骨质量的影响。方法健康成年雄性杂种犬12只,建立牙槽嵴萎缩模型后1个月,一侧下颌后牙区行牵张手术并放入2个"S"形牵张器及异种脱细胞真... 详细信息

目的通过对牵张成骨增高牙槽嵴新生骨的组织学观察,研究钛镍记忆合金牵张器复合脱细胞真皮基质对成骨质量的影响。方法健康成年雄性杂种犬12只,建立牙槽嵴萎缩模型后1个月,一侧下颌后牙区行牵张手术并放入2个"S"形牵张器及异种脱细胞真皮基质(ADM),另一侧为对照侧,仅行牵张术,不放置ADM。术后1个月、3个月各处死6只实验犬。将牵张区骨组织进行脱钙骨组织学观察,参照Parfit方法进行定量组织学测量。动物处死后取双侧下颌第3前磨牙区骨块,直接做骨切片,荧光显微镜下观察。结果1个月时,实验侧的平均骨小梁体积分数、平均骨小梁厚度、平均骨小梁数目均高于对照侧,平均骨小梁分隔距离低于对照侧;3个月时,实验侧平均骨小梁体积分数、平均骨小梁数目高于对照侧,平均骨小梁分隔距离低于对照侧。结论ADM阻力膜能改善牵张过程中力学的平衡,阻止周围软组织长入,改善成骨环境,提高成骨质量。

关键词：牵张成骨引导骨组织再生脱细胞真皮基质钛镍记忆合金

钛镍记忆合金牵张器复合脱细胞真皮基质增高犬牙槽嵴的初步研究

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中国比较医学杂志 2008年第11期18卷 11-13,86页

作者：肖红喜胡敏王东胜鄂玲玲解放军总医院口腔科北京100853

目的用成年杂种犬建立钛镍记忆合金牵张器复合脱细胞真皮基质增高犬牙槽嵴动物模型,为下一步利用钛镍记忆合金牵张器行下颌后牙牙槽嵴增高术奠定基础。方法健康成年雄性杂种犬4只。全麻下拔除双侧下颌4个前磨牙和第一磨牙,1个月后拍摄... 详细信息

目的用成年杂种犬建立钛镍记忆合金牵张器复合脱细胞真皮基质增高犬牙槽嵴动物模型,为下一步利用钛镍记忆合金牵张器行下颌后牙牙槽嵴增高术奠定基础。方法健康成年雄性杂种犬4只。全麻下拔除双侧下颌4个前磨牙和第一磨牙,1个月后拍摄双侧后牙区X线光片,观察拔牙窝愈合情况。采用4种类型的牵张器随机在4只犬的下颌两侧行牵张手术并观察牵张后1周和1月牙槽嵴增高的情况。结果拔牙后1个月,牙槽嵴黏膜愈合良好。X线片示下颌神经管清晰可见,其上方牙槽窝内有较低密度骨质存在。放置4种牵张器牵张术后1周、1月后牙槽嵴增高的高度分别为3.24 mm、3.76 mm、4.58 mm、5.09 mm;3.15 mm、3.67 mm、4.64 mm、5.01mm,术后一周X线可见后有明显的牵张间隙,1月时牵张区有新骨形成,骨密度增高。结论犬耐受力强,后牙区下颌骨体积大,手术易操作,是理想的牙槽嵴萎缩动物模型。拔牙后1个月,拔牙创愈合良好,可以进行牵张手术。D组"S"形牵张器牵张后的高度比较理想,能满足后期种植体的植入。

关键词：牵张成骨牙槽嵴增高术脱细胞真皮基质钛镍记忆合金模型,动物