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c-myc基因和IGF-Ⅱ基因在WHV/myc转基因小鼠肝癌发生过程中的双相性表达

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肿瘤 1998年第5期18卷 343-345页

作者：刘平 dominique bernuau gerard feldmann 南京医科大学第一附属医院消化科法国巴黎第七大学ＢＩＣＨＡＴ医学院

肝癌的发生机理尚未阐明，流行病学调查的资料表明，肝癌的发生与乙型、丙型肝炎病毒（ＨＢＶ、ＨＣＶ）的感染有密切的联系。用土拨鼠肝炎病毒（ＷＨＶ）ＤＮＡ操纵下的ｃ－ｍｙｃ基因建成的转基因小鼠模型，其肝脏肿瘤自然形成率高达... 详细信息

肝癌的发生机理尚未阐明，流行病学调查的资料表明，肝癌的发生与乙型、丙型肝炎病毒（ＨＢＶ、ＨＣＶ）的感染有密切的联系。用土拨鼠肝炎病毒（ＷＨＶ）ＤＮＡ操纵下的ｃ－ｍｙｃ基因建成的转基因小鼠模型，其肝脏肿瘤自然形成率高达９０％～１００％［１］，可用于研究...

关键词：基因表达 c-myc 肝肿瘤原位杂交转基因动物

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c-Fos overexpression increases the proliferation of human hepatocytes by stabilizing nuclear Cyclin D1

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World Journal of Gastroenterology 2008年第41期14卷 6339-6346页

作者： Meryem Güller Kahina Toualbi-Abed Agnès Legrand Laurence Michel Alain Mauviel dominique bernuau Fanny Daniel Institut National de laSanté et de la Recherche Médicale U697 Hpital Saint-Louis Institut National de la Santé et de la RechercheMédicale U591 Faculté de Médecine Necker Institut National de la Santé et de la RechercheMédicale U773 Centre de Recherche Bichat Beaujon CRB3and Université Paris 7 Denis Diderot site Bichat

AIM: To investigate the effect of stable c-Fos overexpression on immortalized human hepatocyte (IHH) proliferation. METHODS: IHHs stably transfected with c-Fos (IHH-Fos) or an empty vector (IHH-C) were grown in medium supplemented with 1% serum or stimulated with 10% serum. Cell proliferation was assessed by cell counts, 3H-thymidine uptake and fl ow cytometry analyses. The levels of cell cycle regulatory proteins (Cyclin D1, E, A) cyclin dependent kinases (cdk) cdk2, cdk4, cdk6, and their inhibitors p15, p16, p21, p27, to- tal and phosphorylated GSK-3β and epidermal growth factor receptor (EGF-R) were assayed by Western blot- ting. Analysis of Cyclin D1 mRNA levels was performed by reverse transcription-polymerase chain reaction and real-time polymerase chain reaction (PCR) analysis. Stability of Cyclin D1 was studied by cycloheximide blockade experiments. RESULTS: Stable c-Fos overexpression increased cell proliferation under low serum conditions and resulted in a two-fold increase in [3H]-thymidine incorpora- tion following serum addition. Cell cycle analysis by fl ow cytometry showed that c-Fos accelerated the cell cycle kinetics. Following serum stimulation, Cyclin D1 was more abundantly expressed in c-Fos overexpressing cells. Cyclin D1 accumulation did not result from increased transcriptional activation, but from nuclear stabilization. Overexpression of c-Fos correlated with higher nuclear levels of inactive phosphorylated GSK- 3β, a kinase involved in Cyclin D1 degradation and higher levels of EGF-R mRNA, and EGF-R protein compared to IHH-C both in serum starved, and in serum stimulated cells. Abrogation of EGF-R signalling in IHH- Fos by treatment with AG1478, a specif ic EGF-R tyrosine kinase inhibitor, prevented the phosphorylation of GSK-3β induced by serum stimulation and decreased Cyclin D1 stability in the nucleus. CONCLUSION: Our results clearly indicate a positive role for c-Fos in cell cycle regulation in hepatocytes. Importantly, we delineate a n

关键词：细胞周期蛋白 GSK-3 细胞生长细胞循环肝细胞瘤

肝硬化组织中C-H-ras、C-fos、C-jun和P^(53)基因的表达

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南京医科大学学报（自然科学版） 1996年第2期16卷 121-124页

作者：刘平吕秀珍 dominique bernuau 南京医科大学第一附属医院消化科南京210029 法国巴黎第七大学

用原位杂交及免疫组化的方法检测11例硬化肝脏、7例正常肝脏中 C-H-ras、C-fos、C-jun 和 p^(53)基因的表达。结果,正常肝脏均为阴性;10例(91%)肝硬化中 C-H-ras 基因异常表达;5例检出 C-fos 基因的异常表达;1例检出 C-jun 基因表达;未... 详细信息

用原位杂交及免疫组化的方法检测11例硬化肝脏、7例正常肝脏中 C-H-ras、C-fos、C-jun 和 p^(53)基因的表达。结果,正常肝脏均为阴性;10例(91%)肝硬化中 C-H-ras 基因异常表达;5例检出 C-fos 基因的异常表达;1例检出 C-jun 基因表达;未检出突变型 P^(53)蛋白在硬化肝脏中的表达。提示,C-H—ras 和 C-fos 基因在肝硬化组织中的异常表达构成肝癌发生早期事件中基因异常的一部分。

关键词：肝硬化基因表达原位杂交原癌基因抑癌基因

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WHV/myc转基因小鼠肝癌发生过程中c-jun,c-fos和c-H-ras基因的表达

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南京医科大学学报（自然科学版） 1997年第4期17卷 305-308页

作者：刘平 dominique bernuau Gerard Feldmann 南京医科大学第一附属医院消化科巴黎第七大学ＢＩＣＨＡＴ医学院

用核酸分子原位杂交的方法，检测了ＷＨＶ／ｍｙｃ转基因小鼠肝癌发生过程中ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｆｏｓ和ｃ－Ｈ－ｒａｓ基因的表达情况。正常小鼠（１０天龄和４月龄）肝脏中可检测出上述三种基因呈低水平的表达。１０天龄转基因小鼠肝脏... 详细信息

用核酸分子原位杂交的方法，检测了ＷＨＶ／ｍｙｃ转基因小鼠肝癌发生过程中ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｆｏｓ和ｃ－Ｈ－ｒａｓ基因的表达情况。正常小鼠（１０天龄和４月龄）肝脏中可检测出上述三种基因呈低水平的表达。１０天龄转基因小鼠肝脏中这三种基因的表达与正常同龄小鼠相似，而４月龄转基因小鼠肝脏中三种基因的表达强度明显高于正常小鼠，且杂交信号的分布范围广。肿瘤形成阶段，仍可在肝肿瘤结节中检测到这三种癌基因较弱的表达信号。结果表明，在ＷＨＶ／ｍｙｃ转基因小鼠肝肿瘤发生前ｃ－ｍｙｃ转染基因表达的“沉默”期，存在一些癌基因在肝脏中异常表达的现象。

关键词：基因表达肝肿瘤原位杂交转基因动物小鼠

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WHV/myc转基因小鼠肝癌发生过程中的基因异常

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南京医科大学学报(自然科学版) 2000年第5期20卷 394-394页

作者：刘平,赵志泉,dominique bernuau,Gerard Feldmann 南京医科大学第一附属医院消化科南京医科大学第一附属医院消化科南京医科大学第一附属医院消化科南京医科大学第一附属医院消化科

目的　探测WHV/myc转基因小鼠肝癌发生过程中有关基因在肝脏中的异常表达。方法　用原位杂交方法检测WHV/myc转基因小鼠肝肿瘤形成的不同阶段 ,c myc转染基因、胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF Ⅱ )基因c jun、c fos和c H ras等基因的表达。结... 详细信息

目的　探测WHV/myc转基因小鼠肝癌发生过程中有关基因在肝脏中的异常表达。方法　用原位杂交方法检测WHV/myc转基因小鼠肝肿瘤形成的不同阶段 ,c myc转染基因、胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF Ⅱ )基因c jun、c fos和c H ras等基因的表达。结果　c myc转染基因IGF Ⅱ基因在转基因小鼠出生后早期的肝脏中异常表达 ,随后表达水平即降低至不能测出。上述两基因的表达在肝肿瘤形成期重新出现。c jun、c fos和c H ras基因在转基因小鼠肝癌发生前肝脏中的表达强度明显高于正常小鼠。结论　c myc转染基因和IGF Ⅱ基因在小鼠出生后早期和肿瘤形成期的异常表达对肝肿瘤的发生和瘤细胞转化表型的维持可能具有重要意义 ;在c myc转染基因表达的“沉默”期 ,一些癌基因在肝脏中的异常表达对日后肝脏肿瘤的形成可能也具有一定作用。

关键词：小鼠肝癌肝脏 WHV/myc 转基因基因转移