检索结果-南通市图书馆

小麦组蛋白H1基因保守序列原核载体的构建及表达

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吉林农业大学学报 2010年第1期32卷 39-42页

作者：宋红肖谭广云王春艳张瑞兴朱乾琨孙浩然吉林大学农学部畜牧兽医学院长春130062

采用PCR技术扩增tat-H1bs融合基因,并通过基因操作构建了融合基因的原核重组载体pET-28a-tat-Hlbs。将阳性重组质粒转化至受体菌Rosseta(DE3)感受态细胞中,以IPTG诱导表达,表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测和Western-blot检测。结果表... 详细信息

采用PCR技术扩增tat-H1bs融合基因,并通过基因操作构建了融合基因的原核重组载体pET-28a-tat-Hlbs。将阳性重组质粒转化至受体菌Rosseta(DE3)感受态细胞中,以IPTG诱导表达,表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测和Western-blot检测。结果表明:重组菌能够表达目的蛋白,软件分析结果表明表达蛋白约占菌体蛋白的40%,上清表达量约为20%。上清蛋白经纯化后,Western-blot结果显示,His-Tag单克隆抗体可以很好地与所表达的蛋白带特异性结合。所获得的融合蛋白以高效胞质可溶形式表达。

关键词：小麦组蛋白H1 融合蛋白可溶性表达穿膜肽tat

PDCA质量管理工具对急诊检验出报告时间的调查分析

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中国卫生检验杂志 2016年第2期26卷 281-282,289页

作者：杨小燕陈先春吴天恩张荣山赣州市人民医院检验科江西赣州341000

目的缩短急诊检验出报告时间,将急诊检验报告时间,临床检验项目(血常规)≤30 min出报告,生化、凝血项目≤2 h出报告,缩短为临床检验项目(血常规)≤20 min出报告,生化、凝血项目≤1 h出报告。方法运用PDCA质量管理工具。结果 2014年1月-... 详细信息

目的缩短急诊检验出报告时间,将急诊检验报告时间,临床检验项目(血常规)≤30 min出报告,生化、凝血项目≤2 h出报告,缩短为临床检验项目(血常规)≤20 min出报告,生化、凝血项目≤1 h出报告。方法运用PDCA质量管理工具。结果 2014年1月-4月运用PDCA质量管理工具后,各检验仪器出报告时间明显缩短;运用PDCA质量管理工具后,急诊检验出报告时间能从临床检验项目(血常规)≤30 min出报告,生化、凝血项目≤2 h出报告,缩短为临床检验项目(血常规)≤20 min出报告,生化、凝血项目≤1 h出报告。结论通过PDCA质量管理工具,缩短了急诊检验出报告时间,提高了检验质量,更好地为临床和患者服务。

关键词： PDCA 缩短急诊检验报告时间

NT4-Apoptin-HA2-tat融合基因重组腺相关病毒的构建及鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第8期24卷 754-756页

作者：王健生张明鑫刘德纯段小艺周苏娜张广健杨广笑王全颖西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤外科陕西西安710061 河南科技大学第一附属医院普外科河南洛阳471003 西安交通大学医学院第一附属医院核医学科陕西西安710061 西安交通大学医学院第一附属医院胸外科陕西西安710061 西安华广生物工程公司陕西西安710025

目的:构建编码融合基因NT4-Apoptin-HA2-tat的重组腺相关病毒表达载体。方法:利用限制性内切酶切相应载体后将Apoptin和HA2-tat连入pUC19/NT4质粒,再将融合基因NT4-Apoptin-HA2-tat亚克隆至腺相关病毒的穿梭质粒内,与辅助质粒pAAV/Ad、... 详细信息

目的:构建编码融合基因NT4-Apoptin-HA2-tat的重组腺相关病毒表达载体。方法:利用限制性内切酶切相应载体后将Apoptin和HA2-tat连入pUC19/NT4质粒,再将融合基因NT4-Apoptin-HA2-tat亚克隆至腺相关病毒的穿梭质粒内,与辅助质粒pAAV/Ad、腺病毒质粒pFG140共同转染HEK-293细胞,通过同源重组获得NT4-Apoptin-HA2-tat重组腺相关病毒载体,收集病毒上清,Dot blot法测定其滴度。MTT比色法观察NT4-Apoptin-HA2-tat重组腺相关病毒表达载体,对HepG2细胞存活率的影响。结果:经酶切及测序证实克隆出NT4-Apoptin-HA2-tat融合基因;得到高滴度的(3.14×1015pfu/L)重组腺相关病毒表达载体。NT4-Apoptin-HA2-tat重组腺相关病毒表达载体,对HepG2细胞有强烈的诱导凋亡作用,与对照组比较,处理组细胞的存活率明显降低。结论:通过分子克隆体外重组技术成功制备了NT4-Ap-optin-HA2-tat重组腺相关病毒载体,为下一步的Apoptin应用于基因治疗奠定了基础。

关键词： NT4-Apoptin-HA2-tat 重组腺相关病毒肿瘤融合基因

新等位基因HLA-A*01:130的序列分析及HLA分子三维结构模拟

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中国免疫学杂志 2015年第4期31卷 514-516页

作者：李鑫丁镌侯玲王鑫颜廷宇李继红张春燕赵素珍刘颖刘杰哈尔滨市血液中心哈尔滨150056

目的:确认HLA新等位基因HLA-A*01:130并分析其有异常反应格局的核苷酸序列。方法:应用DNA测序分型技术(PCR-SBT)进行HLA分型,对可疑新等位基因采用单链测序基因分型技术直接测定基因序列,分析其与同源性最高的HLA等位基因序列的差异。最... 详细信息

目的:确认HLA新等位基因HLA-A*01:130并分析其有异常反应格局的核苷酸序列。方法:应用DNA测序分型技术(PCR-SBT)进行HLA分型,对可疑新等位基因采用单链测序基因分型技术直接测定基因序列,分析其与同源性最高的HLA等位基因序列的差异。最后,经Swiss-Model对HLA分子进行三维结构模拟。结果:新基因与所有已知的HLA-A等位基因序列均不相同,与HLA-A*01:66基因序列相比在第3外显子368位碱基由A→G,导致第99位密码子改变,酪氨酸→半胱氨酸。替代氨基酸位于抗原肽结合区β片层上。结论:发现一个新的HLA-A等位基因,现已被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-A*01:130。

关键词：分型新等位基因 SBT 三维结构模拟

TIP30在胃癌组织中的表达及其对胃癌血管生成的影响

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中国现代普通外科进展 2009年第2期12卷 110-113页

作者：徐忠凯郑春宁孙少川姜永胜赵东山东大学医学院山东济南250012 山东大学附属济南市中心医院普外科山东济南250013

目的:研究tat作用蛋白30(tat-interactive protein 30,TIP30)基因在胃癌组织中的表达及其对胃癌血管生成的影响。方法:运用免疫组织化学方法检测52例胃癌组织及47例癌旁正常组织中TIP30蛋白的表达水平,同时检测CD34标记的微血管密度(mic... 详细信息

目的:研究tat作用蛋白30(tat-interactive protein 30,TIP30)基因在胃癌组织中的表达及其对胃癌血管生成的影响。方法:运用免疫组织化学方法检测52例胃癌组织及47例癌旁正常组织中TIP30蛋白的表达水平,同时检测CD34标记的微血管密度(microvessel density,MVD)。结果:TIP30在胃癌和癌旁正常组织中的阳性率分别为53.8%和85.1%,两者相比较差异有统计学意义(χ2=11.22,P﹤0.01),TIP30表达水平与患者年龄、性别、病理分化程度及肿瘤大小无关,与有无淋巴结转移及TNM分期有关。胃癌组织和癌旁正常组织中MVD值分别为27.37±2.68和21.87±4.11,两者比较差异有统计学意义(t=7.95,P<0.01),胃癌组织中TIP30表达阳性者较阴性者MVD值显著降低(t=-3.18,P=0.003)。结论:TIP30在胃癌组织中表达降低,其可能通过抑制胃癌血管生成影响胃癌的发生发展。

关键词：胃肿瘤新生血管化病理性 tat作用蛋白30基因

TPLF方案在局部进展期胃癌新辅助化疗中的应用

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临床肿瘤学杂志 2006年第10期11卷 765-767页

作者：陈世壮方晓敏刘静白艳春董桂芝解放军第404中心医院肿瘤血液科

目的：研究泰索帝（多西紫杉醇，tat）联合顺铂（CDDP）及氟尿嘧啶／亚叶酸钙（5-FU／CF）方案新辅助化疗（NCT）治疗局部进展期胃癌（LAGC）的疗效和毒副作用。方法：自2003年10月～2005年10月，有28例LAGC入组临床研究。入组病例术前... 详细信息

目的：研究泰索帝（多西紫杉醇，tat）联合顺铂（CDDP）及氟尿嘧啶／亚叶酸钙（5-FU／CF）方案新辅助化疗（NCT）治疗局部进展期胃癌（LAGC）的疗效和毒副作用。方法：自2003年10月～2005年10月，有28例LAGC入组临床研究。入组病例术前接受TPLF化疗方案为：tat（T）75mg/m^2，第1天静滴；CDDP（P）30mg/m^2，第1～3天静滴；5-FU（F）500mg/m^2，第1～5天静滴；CF（L）100mg于5-FU前30分钟静脉冲入，每3周为1周期，共3个周期。观察新辅助化疗后肿瘤原发病灶的缓解情况、手术后病理缓解情况以及新辅助化疗的毒副反应。结果：新辅助化疗后所有患者进行了根治性手术治疗，临床有效率RR（CR＋PR）为57．1％（16／28），其中CR17．9％（5例），PR39．3％（11例），SD21．4％（6例），PD21．4％（6例），术后4例病理水平达到完全缓解（pCR），缓解率为14．3％（4／28）。毒副反应主要为白细胞减少、恶心、脱发、呕吐及粘膜炎，其中Ⅲ～Ⅳ级的白细胞减少共6例（21．4％），未发生严重感染和死亡病例。结论：TPLF方案新辅助化疗在LAGC的治疗中近期疗效显著，耐受性良好。

关键词：局部进展期胃癌新辅助化疗泰索帝顺铂氟尿嘧啶亚叶酸钙

一个先天性白内障家系缝隙连接蛋白基因新突变

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中华医学遗传学杂志 2008年第1期25卷 59-62页

作者：林婴刘妮妮雷春涛樊映川刘小琦杨洋王俊妨刘兵杨正林四川省医学科学院·四川省人民医院人类疾病基因研究四川省重点实验室成都610072 重庆医科大学检验系四川省医学科学院·四川省人民医院眼科

目的鉴定一个中国常染色体显性遗传先天性白内障（autosomal dominant congenital cataract,ADCC）家系其致病与缝隙连接蛋白α3／α8（gap jtmetion protein alpha3/alpha8, GJA3/GJA8 ）基因突变的关系。方法对一个ADCC家系5名家系成... 详细信息

目的鉴定一个中国常染色体显性遗传先天性白内障（autosomal dominant congenital cataract,ADCC）家系其致病与缝隙连接蛋白α3／α8（gap jtmetion protein alpha3/alpha8, GJA3/GJA8 ）基因突变的关系。方法对一个ADCC家系5名家系成员和100名正常健康人进行全面眼科检查。抽取外周血5mL并提取基因组DNA。采用聚合酶链反应扩增GJA3／GJA8编码外显子及其侧翼内含子序列，纯化的PCR产物通过直接测序以筛查致病突变。结果通过双向序列分析，发现GJA8基因第2外显子的第138位发生碱基G→A转换（c. 138G 〉 A, GGG→GGA），产生同义突变（G46G）；第139个碱基因G→T颠换发生错义突变（c．139G〉T，GAT→tat）导致第47位编码天门冬氨酸密码子突变为酪氨酸（D47Y），家系中非患者和100名对照者基因组序列均无此改变，而且生物信息检索显示GJA8基因第47位编码的天门冬氨酸具有高度的物种保守性。家系3例患者GJA3基因突变筛查未见任何碱基改变。结论在一个中国人ADCC家系中发现GJA8基因新致病突变（D47Y）。

关键词：先天性白内障 GJA3基因 GJA8基因突变

血栓调节蛋白联合凝血酶-抗凝血酶复合物对弥散性血管内凝血诊断价值的临床研究

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医学研究生学报 2019年第11期32卷 1184-1188页

作者：钟林翠宋景春林青伟曾庆波胡艳晶邓星平解放军联勤保障部队第九〇八医院重症医学科

目的临床上已尝试结合凝血酶-抗凝血酶复合物(tat)、纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PIC)、血栓调节蛋白(TM)以及组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活剂抑制剂-1复合物(t-PAIC)用于诊断弥散性血管内凝血(DIC),文中旨在探讨其诊断价值。方法对2... 详细信息

目的临床上已尝试结合凝血酶-抗凝血酶复合物(tat)、纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PIC)、血栓调节蛋白(TM)以及组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活剂抑制剂-1复合物(t-PAIC)用于诊断弥散性血管内凝血(DIC),文中旨在探讨其诊断价值。方法对2018年5月至12月第九〇八医院重症医学科154例入住ICU患者进行前瞻性研究。研究对象按照国际血栓与止血协会诊断标准分为非显性DIC组(n=134)和显性DIC组(n=20),比较TM、t-PAIC、tat和PIC的组间差异。结果与非显性DIC组TM[10.5(8.0~14.3)TU/mL]、tat[9.6(4.9~21.8)ng/mL]、PIC[1.253(0.789~2.802)μg/mL]和t-PAIC[11.2(7.1~22.1)ng/mL]相比,显性DIC组的TM[16.8(11.8~21.5)TU/mL]、tat[33.6(10.3~120.0)ng/mL]、PIC[4.080(0.814~8.651)μg/mL]和t-PAIC[19.4(10.0~30.1)ng/mL]均显著升高(P14.85 TU/mL联合tat>23.05 ng/mL作为标准诊断显性DIC的曲线下面积为0.835(P=0.000),灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值依次为0.85、0.761、0.592、0.925。结论TM联合tat对显性DIC具有较高的诊断效能。

关键词：血栓调节蛋白凝血酶-抗凝血酶复合物纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物组织型纤溶酶原激活剂-纤溶酶原激活剂抑制剂-1复合物弥散性血管内凝血

凝血酶抗凝血酶复合物联合纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物诊断创伤性弥散性血管内凝血的临床价值

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医学研究生学报 2020年第12期33卷 1283-1287页

作者：胡艳晶张益明宋景春张昕林青伟钟林翠李兆芳解放军联勤保障部队第九〇八医院重症医学科南昌330002

目的凝血酶抗凝血酶复合物(tat)和纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PIC)均采用高敏化学发光法检测,具有灵.敏度高、检测速度快等优点。文中探讨tat联合PIC诊断创伤患者相关弥散性血管内凝血(DIC)的临床价值。方法收集2018年5月至2019年12月解... 详细信息

目的凝血酶抗凝血酶复合物(tat)和纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PIC)均采用高敏化学发光法检测,具有灵.敏度高、检测速度快等优点。文中探讨tat联合PIC诊断创伤患者相关弥散性血管内凝血(DIC)的临床价值。方法收集2018年5月至2019年12月解放军联勤保障部队908医院重症医学科收治的82例创伤患者临床资料。按照患者人院时创伤严重程度分为普通创伤组(n=63)和创伤性DIC组(n=19)。比较组间患者tat及PIC水平;分析PIC、纤维蛋白降解产物(FDP)与D-二聚体水平的相关性。结果与普通创伤组患者tat[21.7(10.6~47.6)ng/mL]和PIC[2.4(0.9~6.8)μg/mL]水平相比,创伤性DIC组的tat[120.0(63.3~120.0)ng/mL]和PIC[7.0(4.8~10.0)μg/mL]均显著升高(Ptat与FDP和D-二聚体呈高度相关;PIC与FDP和D-二聚体均呈强相关,且tat与DIC评分呈强相关。结论tat≥42.3 ng/mL且PIC≥3.3g/mL可作为创伤性DIC更灵敏的诊断标准。

关键词：创伤弥散性血管内凝血凝血酶抗凝血酶复合物纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物