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芒柄花素调节Hippo/YAP信号通路对炎症性肠病大鼠肠上皮细胞凋亡的影响

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中国药房 2024年第13期35卷 1564-1569页

作者：谢栋刘媛媛李正翔袁恒杰曹晓沧天津医科大学总医院药剂科天津300052 天津医科大学基础医学院遗传学系天津300070 天津医科大学总医院消化科天津300052

目的探究芒柄花素(FMN)对炎症性肠病(IBD)大鼠肠上皮细胞凋亡的影响及可能机制。方法采用三硝基苯磺酸诱导的方法构建大鼠IBD模型。将造模成功的48只大鼠按照随机数字表法分为模型组(生理盐水),低、高剂量FMN组(20、40 mg/kg FMN)和... 详细信息

目的探究芒柄花素(FMN)对炎症性肠病(IBD)大鼠肠上皮细胞凋亡的影响及可能机制。方法采用三硝基苯磺酸诱导的方法构建大鼠IBD模型。将造模成功的48只大鼠按照随机数字表法分为模型组(生理盐水),低、高剂量FMN组(20、40 mg/kg FMN)和高剂量FMN+YAP抑制剂Verteporfin(VTPF)组(40 mg/kg FMN+10 mg/kg VTPF),每组12只;另取12只大鼠设为正常组(生理盐水);每天给药/生理盐水1次,连续7 d。末次给药后,对大鼠疾病活动指数(DAI)进行评分;测量大鼠结肠长度;观察大鼠结肠组织的病理学变化;检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平;检测大鼠肠上皮细胞的凋亡情况;检测大鼠结肠组织中Yes相关蛋白(YAP)、切割型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果与正常组比较,模型组大鼠DAI评分,TNF-α、IL-6水平,肠上皮细胞凋亡率,cleaved-caspase-3、Bax蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);结肠长度显著变短(P<0.05);IL-10水平和YAP、Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);结肠组织出现细胞形态异常、排列紊乱,炎症细胞浸润等病理学变化。与IBD组比较,低剂量FMN组、高剂量FMN组大鼠上述指标水平均显著改善(P<0.05),且具有剂量依赖性(P<0.05);而加入VTPF后,显著逆转了FMN对IBD大鼠上述指标的改善作用(P<0.05)。结论 FMN可能是通过抑制Hippo/YAP信号通路,促进YAP的表达,进而抑制IBD大鼠肠上皮细胞凋亡。

关键词：芒柄花素 Hippo/YAP信号通路炎症性肠病肠上皮细胞细胞凋亡

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人胎盘间充质干细胞来源细胞外囊泡调节肠炎小鼠肠黏膜胶原的沉积

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中国组织工程研究 2021年第7期25卷 1026-1031页

作者：段丽芸曹晓沧天津医科大学总医院消化内科天津市300052

背景:肠道纤维化是炎症性肠病的常见并发症,可导致肠道功能损害和肠梗阻。肠道纤维化发生主要与细胞外基质成分如胶原、纤连蛋白的沉积和降解失衡有关。有研究发现间充质干细胞通过旁分泌机制分泌可溶性生物活性物质如细胞外囊泡,具有... 详细信息

背景:肠道纤维化是炎症性肠病的常见并发症,可导致肠道功能损害和肠梗阻。肠道纤维化发生主要与细胞外基质成分如胶原、纤连蛋白的沉积和降解失衡有关。有研究发现间充质干细胞通过旁分泌机制分泌可溶性生物活性物质如细胞外囊泡,具有显著的抗纤维化作用。目的:探讨人胎盘间充质干细胞来源细胞外囊泡对肠炎小鼠肠黏膜胶原沉积的影响。方法:将24只BALB/c小鼠随机分为假手术组、模型组、细胞外囊泡组,每组8只。除假手术组外,其余两组使用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法诱导建立肠纤维化模型,每日1次,持续6周。实验第3周开始细胞外囊泡组尾静脉注射细胞外囊泡,模型组给予等体积PBS,每日1次,持续到第6周。实验第1-7周统计比较小鼠疾病活动度指数评分、结肠质量/长度比值以评价细胞外囊泡的治疗效果,取病变肠段进行组织学染色及Western blot、RT-PCR检测纤维化相关指标以评估肠纤维化程度。结果与结论:①与模型组相比,细胞外囊泡组小鼠疾病活动度指数评分明显降低,结肠质量/长度比值明显降低,结肠病理表现明显改善;②与模型组相比,细胞外囊泡组小鼠结肠黏膜胶原沉积明显减轻,Ⅰ型、Ⅲ胶原及转化生长因子β1蛋白表达均明显下降;③与模型组相比,细胞外囊泡组小鼠结肠组织中基质金属蛋白酶2及基质金属蛋白酶9表达水平均明显升高,而金属蛋白酶组织抑制因子1表达水平下降;④结果表明,人胎盘间充质干细胞来源细胞外囊泡可明显改善小鼠结肠损伤严重程度及减少肠炎小鼠肠黏膜胶原沉积。

关键词：干细胞人胎盘间充质干细胞细胞外囊泡炎症性肠病肠纤维化胶原实验鼠

炎症性肠病患者接受抗肿瘤坏死因子制剂治疗的肿瘤新发与复发风险

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中华炎性肠病杂志（中英文） 2020年第2期4卷 142-145页

作者：陈梦诗曹晓沧福建省立医院消化内科福州350000 天津医科大学总医院消化内科天津300070

炎症性肠病(IBD)患者肿瘤的患病风险显著高于正常人群,但接受抗肿瘤坏死因子(TNF)制剂治疗是否增加IBD患者发生恶性肿瘤的风险,合并既往恶性肿瘤病史的患者是否仍可继续使用抗TNF制剂,是制定IBD临床决策所面临的重要问题。

关键词：炎症性肠病抗肿瘤坏死因子制剂肿瘤风险

CDX2 COX-2和NF-κB在胃癌和癌前病变中的表达和意义

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中国肿瘤临床 2013年第22期40卷 1387-1390页

作者：苏帅陈鑫姜葵曹晓仓王邦茂天津医科大学总医院消化内科天津市300052

目的:探讨CDX2、COX-2和NF-κB在胃癌和癌前病变中的表达以及相互之间的关系。方法:采用免疫组织化学染色法(SP法和SABC法)检测正常胃黏膜组20例、胃癌癌前病变组38例及胃癌组48例中CDX2、COX-2和NF-κB的表达情况。结果:NF-κB和COX-2... 详细信息

目的:探讨CDX2、COX-2和NF-κB在胃癌和癌前病变中的表达以及相互之间的关系。方法:采用免疫组织化学染色法(SP法和SABC法)检测正常胃黏膜组20例、胃癌癌前病变组38例及胃癌组48例中CDX2、COX-2和NF-κB的表达情况。结果:NF-κB和COX-2在胃癌组中的表达明显增强,其阳性率显著高于正常胃黏膜组(P<0.01)和癌前病变组(P<0.01);CDX2在正常胃黏膜组中低表达,癌前病变组CDX2的表达阳性率高于胃癌组(P<0.01);CDX2与胃癌分化程度、胃癌的病灶大小和浸润深度相关(P<0.05);COX-2和NF-κB与胃癌病灶大小、浸润深度和淋巴结转移相关(P<0.05);NF-κB与COX-2在胃癌组织中表达呈正相关;CDX2与COX-2、NF-κB的表达呈负相关。结论:CDX2、COX-2和NF-κB可能相互作用参与了胃癌的发生发展和侵袭转移。

关键词：胃肿瘤 CDX2 NF—κB COX-2 癌前病变免疫组织化学

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生物制剂时代溃疡性结肠炎的手术治疗

中华消化外科杂志 2016年第12期15卷 1226-1230页

作者：赵春山曹晓沧王邦茂天津医科大学总医院消化内科 300052

溃疡性结肠炎是一种病因尚不十分明确的直肠和结肠慢性非特异性炎症性疾病。英夫利昔单克隆抗体（IFX）是一种肿瘤坏死因子抗体，已被美国食品药品监督管理局批准用于治疗溃疡性结肠炎，并可诱导受损的肠黏膜愈合。全结直肠切除回肠贮... 详细信息

溃疡性结肠炎是一种病因尚不十分明确的直肠和结肠慢性非特异性炎症性疾病。英夫利昔单克隆抗体（IFX）是一种肿瘤坏死因子抗体，已被美国食品药品监督管理局批准用于治疗溃疡性结肠炎，并可诱导受损的肠黏膜愈合。全结直肠切除回肠贮袋肛管吻合术目前是溃疡性结肠炎患者手术治疗的标准手术方式。在IFX越来越被广泛应用的时代，围术期IFX的应用、手术时机及手术方式的选择，是关乎术后患者预后的重要因素。

关键词：溃疡性结肠炎全结直肠切除回肠贮袋肛管吻合术手术时机英夫利昔单克隆抗体

慢性便秘患者肠道菌群对小鼠肠道5-羟色胺转运体表达及排便功能的影响

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中华消化杂志 2017年第6期37卷 399-403页

作者：刘响曹海龙安莹莹曹晓沧姜葵王邦茂天津医科大学总医院消化科 300052

目的探讨慢性便秘患者肠道菌群对小鼠肠道5一羟色胺转运体（SERT）表达及排便功能的影响。方法收集符合罗马Ⅲ诊断标准的慢性便秘患者和健康志愿者的粪便并制成粪菌液。取20只无特定病原体（SPF）级小鼠分为实验组和对照组，两组均予链... 详细信息

目的探讨慢性便秘患者肠道菌群对小鼠肠道5一羟色胺转运体（SERT）表达及排便功能的影响。方法收集符合罗马Ⅲ诊断标准的慢性便秘患者和健康志愿者的粪便并制成粪菌液。取20只无特定病原体（SPF）级小鼠分为实验组和对照组，两组均予链霉素预处理构建伪无菌鼠模型，对照组给予混合健康志愿者的粪菌液灌胃，实验组给予混合慢性便秘患者的粪菌液灌胃。饲养后15d处死小鼠，检N／J,鼠各项排便参数及墨汁排出时间。实时PCR和蛋白质印迹法检测小鼠结肠组织SERTmRNA及SERT蛋白质的表达，ELISA及免疫荧光双标染色检测小鼠结肠组织5-羟色胺的水平。统计学处理采用t检验和卡方检验。结果至第15天，实验组和对照组小鼠2h排便数分别为（8．55±1．83）粒和（12．14±2．90）粒，差异有统计学意义（t=-3．33，P〈0．05）；粪便湿重分别为（151．90±32．42）mg和（246．72±64．01）mg，差异有统计学意义（t=4．18，P％0．01）；粪便干重分别为（65．52±11．76）mg和（92．93±23．07）mg，差异有统计学意义（t=-3．37，P〈O．05）；粪便含水率分别为（56．63±3．01）％和（61．95土3．70）％，差异有统计学意义（t=3．57，P〈0．05）。实验组和对照组小鼠首粒黑便排出时间分别为（83．24±11．31）min和（69．06±2．72）min，差异有统计学意义（t=-2．74，P〈0．05）。实验组小鼠肠道组织SERTmRNA及SERT蛋白质的表达均明显高于对照组（t=2．61、-6．84，P均〈0．05）；实验组和对照组小鼠结肠组织5-羟色胺水平分别为（151．69±10．18）ng／mL和（198．77±25．99）ng／mL，差异有统计学意义（t=-4．13，P〈0．01）。结论慢性便秘患者的肠道菌群可能影响小鼠肠道组织的SERT表达，从而降低5-羟色胺水平，进而减弱小鼠的肠道运动。

关键词：慢性便秘肠道菌群 5-羟色胺转运体 5-羟色胺排便功能小鼠

次级胆汁酸诱导Apcmin/＋小鼠肠腺瘤癌变及其对肠道菌群的影响

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中华消化杂志 2015年第3期35卷 183-187页

作者：许梦雀曹海龙王姗曹晓沧鄢芳王邦茂天津医科大学总医院消化科 300052

目的观察并分析次级胆汁酸诱导Apcmm什小鼠肠道腺瘤癌变及其对肠道菌群的影响。方法将20只4周龄Apcmin/＋小鼠均分为Apcmin/＋对照组、Apcmin/＋脱氧胆酸组，将20只4周龄野生型C57BL／6J小鼠均分为野生型对照组、野生型脱氧胆酸组。对... 详细信息

目的观察并分析次级胆汁酸诱导Apcmm什小鼠肠道腺瘤癌变及其对肠道菌群的影响。方法将20只4周龄Apcmin/＋小鼠均分为Apcmin/＋对照组、Apcmin/＋脱氧胆酸组，将20只4周龄野生型C57BL／6J小鼠均分为野生型对照组、野生型脱氧胆酸组。对照组常规饮水，脱氧胆酸组饮用水中含0．2％脱氧胆酸。收集给药0周及12周Apcmin/＋小鼠粪便，焦磷酸测序法分析肠道菌群变化。12周后处死，观察各组小鼠肠道腺瘤数目、大小及分布。采用HE染色评价腺瘤病理类型，采用免疫组织化学染色法检测增殖细胞核抗原（PCNA），采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TuNEL）检测细胞凋亡。两组间计量资料的比较采用独立样本t检验。结果所有野生型小鼠肠道均未出现肿瘤。Apcmin/＋脱氧胆酸组小鼠肠道腺瘤总数较Apcmin/＋对照组明显增加（57．00±3．07比21．50±4．69，t=20．03，P〈0．01），以最大径为1～2mm的腺瘤增加最为显著（30．62±7．73比7．75±4．59，t=8．04，P〈O．05），腺瘤癌变率较Apc—片对照组也明显上升。Apcmin/＋脱氧胆酸组小鼠肠道肿瘤PCNA阳性细胞百分比较Apcmin/＋对照组显著增加[（90．17±2．14）％比（41．97±4．26）％，t=31．97，P〈O．01）]，肿瘤细胞凋亡百分比显著减少[（1．40±1．12）％比（7．50±0．65）％，t=14．90，P〈0．01]。Apcmin/＋脱氧胆酸组小鼠肠道菌群多样性明显降低，在菌门水平上厚壁菌门与拟杆菌门比值（0．5867土0．1484）较其对照组（O．3873±0．0136）明显升高（t=2．36，P〈0．05）；在菌属及菌种水平上Apcmin/＋脱氧胆酸组致病菌数量增多，益生菌数量明显降低。结论脱氧胆酸能诱导Apcmin/＋小鼠肠道菌群失衡。并可涌讨增加肠道肿瘤细胞增殖，抑制细胞凋亡促使肠道腺瘤发展成为肠痛。

关键词：脱氧胆酸肠道菌群癌变 Apcmin/+小鼠

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粪微生态肠溶胶囊的制备及其质量控制

中华消化杂志 2016年第6期36卷 407-411页

作者：闫晨曹海龙许梦雀曹晓沧李正翔鄢芳王邦茂天津医科大学总医院药剂科 300052 天津医科大学总医院消化科 300052

目的：初步探讨制备粪微生态肠溶胶囊的可行性及其质量控制。方法采用双层肠溶胶囊制备法灌装分离获得的粪菌液。采用平皿法对新配制的含甘油粪菌液、-80℃下保存72 h 后的不含甘油粪菌液、含甘油粪菌液分别进行菌落数测定，观察其冷冻... 详细信息

目的：初步探讨制备粪微生态肠溶胶囊的可行性及其质量控制。方法采用双层肠溶胶囊制备法灌装分离获得的粪菌液。采用平皿法对新配制的含甘油粪菌液、-80℃下保存72 h 后的不含甘油粪菌液、含甘油粪菌液分别进行菌落数测定，观察其冷冻稳定性。用亚甲蓝作为标志物，对肠溶胶囊的耐酸力、释放度等进行评价。采用 t 检验进行统计学分析。结果粪微生态双层肠溶胶囊的制备方法简单易行。每种粪菌液各获得了12个平皿法测定数据，新配制含甘油粪菌液在平皿中形成的菌落数[（5.08±1.37）×107菌落形成单位（cfu）／mL]显著高于-80℃冷冻72 h 的未加甘油粪菌液[（1.73±0.64）×107 cfu／mL]，差异有统计学意义（t ＝7.621，P ＜0.01），冷冻后的含甘油粪菌液形成的菌落数[（4.67±1.56）×107 cfu／mL]与新配制含甘油粪菌液相比，差异无统计学意义（t ＝0.694，P ＝0.495）。运用含亚甲蓝粪菌液建立回归方程，在0.5～8.0μg／mL浓度范围内线性关系良好，制作出3批亚甲蓝粪菌液胶囊，耐酸力分别为96.0%、99.1%和95.5%，释放度分别为88.6%、95.1%和86.5%，符合中华人民共和国药典对肠溶胶囊的质量要求。结论粪微生态双层肠溶胶囊制备技术可行，质量稳定可靠，可为今后防治肠道微生态失衡相关疾病提供参考。

关键词：肠道微生态粪微生态移植胶囊,肠溶质量控制

50Hz 1mT脉冲电磁场对脐带间充质干细胞免疫调节能力的影响及其安全性评价

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国际放射医学核医学杂志 2017年第2期41卷 113-120页

作者：曹芳张焕婷刘强杜利清曹晓沧天津医科大学总医院消化内科 300052 北京协和医学院中国医学科学院放射医学研究所天津市放射医学与分子核医学重点实验室天津300192

目的探讨50 Hz 1 mT脉冲电磁场（PEMF）对脐带间充质干细胞（MSC）免疫调节能力的影响及其安全性.方法采用50 Hz 1 mT PEMF辐照脐带MSC,MTT法检测辐照后细胞活性的变化;实时荧光定量PCR法检测脐带MSC的环氧合酶2（COX2）、IL-10、吲哚... 详细信息

目的探讨50 Hz 1 mT脉冲电磁场（PEMF）对脐带间充质干细胞（MSC）免疫调节能力的影响及其安全性.方法采用50 Hz 1 mT PEMF辐照脐带MSC,MTT法检测辐照后细胞活性的变化;实时荧光定量PCR法检测脐带MSC的环氧合酶2（COX2）、IL-10、吲哚胺-2,3-双加氧酶（IDO）、肝细胞生长因子（HGF）和转化生长因子β（TGF-β）等基因mRNA表达水平的改变;流式细胞仪检测PEMF对脐带MSC活性氧（ROS）水平、细胞凋亡和细胞周期的影响;单细胞凝胶电泳分析脐带MSC DNA损伤的情况.采用SPSS19.0软件,对各组间数据进行独立样本t检验分析.结果 50 Hz 1 mT PEMF辐照可增强脐带MSC的细胞活性,其中每天辐照4h组变化最为明显,差异有统计学意义（t=3.505,P〈0.05）.PEMF辐照可促进COX2、HGF、IDO和TGF-β等免疫调节因子mRNA的表达,但变化不明显,差异无统计学意义（t=0.982～2.376,均P＞0.05）,对于干扰素γ（IFN-γ）激活的MSC,PEMF辐照可显著上调COX2、HGF、IDO和TGF-β的mRNA表达水平,差异有统计学意义（t=2.436～3.747,均P〈0.05）.50 Hz 1 mT PEMF辐照对脐带MSC的ROS水平、DNA损伤及细胞凋亡率、细胞周期无显著影响.结论对于IFN-γ激活的MSC,50 Hz1 mT PEMF可显著上调COX2、HGF、IDO和TGF-β的mRNA表达水平,从而增强脐带MSC的免疫调节能力.50 Hz 1 mT PEMF对脐带MSC的ROS水平、细胞凋亡及DNA损伤无明显影响,此参数下的PEMF辐照对脐带MSC是安全的.

关键词：间质干细胞辐射脉冲电磁场免疫调节