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应用RNAi技术培育抗2种病毒病的转基因烟草

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中国生物工程杂志 2007年第11期27卷 27-31页

作者：颜培强李丽杰康宏万秀清白先权郭兆奎储成才黑龙江省烟草科学研究所牡丹江157011 黑龙江大学生命科学学院哈尔滨150080 中国科学院遗传与发育生物学研究所北京100101

分别提取烟草普通花叶病(tMV)和烟草黄瓜花叶病(CMV)的病毒RNA。经反转录和外壳蛋白阅读框PCR扩增,获得tMV和CMV外壳蛋白基因cDNA,分别进行两种病毒已知株系cDNA序列比对获得各自的保守序列。设计干涉序列,将干涉片段扩增产物连接到pMD1... 详细信息

分别提取烟草普通花叶病(tMV)和烟草黄瓜花叶病(CMV)的病毒RNA。经反转录和外壳蛋白阅读框PCR扩增,获得tMV和CMV外壳蛋白基因cDNA,分别进行两种病毒已知株系cDNA序列比对获得各自的保守序列。设计干涉序列,将干涉片段扩增产物连接到pMD18-t的相邻酶切位点,制备融合序列,并将其正向和反向序列插入pUCCRNAi载体,再转化到pCAMBIA2300-35S-OCS表达载体中。利用农杆菌LBA4404侵染烟草K326,获得3份含有tMV和CMV外壳蛋白基因干涉序列的转化材料,经分子鉴定证实干涉序列已导入烟草。采用荧光定量PCR技术对其mRNA表达差异进行分析。抗病性调查表明转化烟株对tMV和CMV抗性都显著增强。

关键词： RNAi 烟草普通花叶病烟草黄瓜花叶病烟草

马立克氏病病毒致瘤相关基因meq在不同病变组织中的变化

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中国兽医学报 2007年第5期27卷 620-623页

作者：付本懂王鲁申海清褚秀玲王春元郭志廷伊鹏霏韦旭斌吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062

以MSB-1肿瘤细胞建立的马立克氏病为病理模型,利用PCR技术扩增不同病变组织中的meq基因,构建meq基因重组阳性质粒,测定和比较它们的核苷酸和氨基酸序列。结果显示,与L-meq(1 200 bp)和标准株GA的meq(1 020 bp)比较,MSB-1细胞和脾脏肿瘤... 详细信息

以MSB-1肿瘤细胞建立的马立克氏病为病理模型,利用PCR技术扩增不同病变组织中的meq基因,构建meq基因重组阳性质粒,测定和比较它们的核苷酸和氨基酸序列。结果显示,与L-meq(1 200 bp)和标准株GA的meq(1 020 bp)比较,MSB-1细胞和脾脏肿瘤组织的meq基因(1 197 bp)、羽髓meq基因(1 017 bp)分别相应缺失3个碱基(CCA);MSB-1细胞和脾脏肿瘤组织的meq基因具有与L-meq相同的180 bp插入序列;氨基酸序列也发生相应变化。结果表明,meq基因在不同病变组织中的核苷酸序列发生了变化,这种变化可能与马立克氏病病毒的致瘤机制有关。

关键词：马立克氏病病毒 meq基因病变组织

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中国新兵心理弹性特点及影响因素分析

中华行为医学与脑科学杂志 2010年第12期19卷 1105-1107页

作者：缪毅冯国君李敏楚前支莉郭禹张佳佳许莹彭李第三军医大学护理系心理学教研室重庆400038 西藏林芝115医院

目的了解中国部队新兵的心理弹性特点及其影响因素，为部队新兵的心理健康教育和训练提供科学依据。方法新兵到达部队两周内，采用成人心理弹性量表（RSA）、症状自评量表（SCL一90）、艾森克人格问卷（EPQ）、情绪调节方式问卷（ERS）... 详细信息

目的了解中国部队新兵的心理弹性特点及其影响因素，为部队新兵的心理健康教育和训练提供科学依据。方法新兵到达部队两周内，采用成人心理弹性量表（RSA）、症状自评量表（SCL一90）、艾森克人格问卷（EPQ）、情绪调节方式问卷（ERS）和一般自我效能感量表（GSES）对中国大陆范围内来自不同地区的2459名新兵进行调查。结果①中国新兵心理弹性状况较好[RSA总均分为（2．94±0．47）分]；女新兵RSA总分[（101．76±14．06）分]显著高于男新兵[（96．65±15．62）分，（t=4．13，P〈0．01）]；大专及以上文化程度的新兵在RSA总分上显著高于初中及高中文化程度的新兵（P〈0．01）；独生子女与非独生子女新兵在RSA总分上无显著差异，仅在RSA组成因子的社会能力（t=2．23，P=0．026）、社会资源（t=2．44，P=0．015）和计划风格（t=2．34，P=0．020）上存在差异。②RSA高分组在性格的内外向（Z=19．13，P=0．000）和情绪的宣泄调节（Z=8．67，P=0．000）及自我效能（Z=19．48，P=0．000）的得分上均显著高于RSA低分组，而在SCL-90（Z=16．28，P=0．000）、神经质（Z=18．14，P=0．000）和情绪的抑制调节因子（Z=3．68，P=0．000）的得分均显著低于RSA低分组。③中国新兵的心理弹性与内外向、宣泄调节和自我效能有显著的正相关，与抑制调节及神经质有显著的负相关。进一步回归分析发现，内外向、神经质、宣泄调节、抑制调节及自我效能对心理弹性有显著的预测力，能解释其变异的41％。结论中国新兵心理弹性状况较好。情绪调节方式（宣泄调节／抑制调节）、内外向、神经质及自我效能感是中国新兵心理弹性重要的影响因素。

关键词：心理弹性中国新兵影响因素

表没食子儿茶素没食子酸酯逆转小剂量辐射引起的DNA甲基化

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中华放射医学与防护杂志 2014年第9期34卷 647-651页

作者：徐凯王静子杨丹张有为薛利军耿建陈亚楠郁红菊褚晓源南方医科大学南京临床学院南京军区南京总医院肿瘤内科南京210002

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对0.5 Gy X射线引起的小鼠Rad23b和Ddit3基因启动子CpG岛甲基化及表达改变的逆转作用。方法 BALB/c雄性小鼠30只按随机数字表法均分为6组：对照组、单纯照射组、EGCG低剂量单纯给药组、EGCG高... 详细信息

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对0.5 Gy X射线引起的小鼠Rad23b和Ddit3基因启动子CpG岛甲基化及表达改变的逆转作用。方法 BALB/c雄性小鼠30只按随机数字表法均分为6组：对照组、单纯照射组、EGCG低剂量单纯给药组、EGCG高剂量单纯给药组、EGCG低剂量给药照射组、EGCG 高剂量给药照射组。照射方式为6 MV X 射线分次照射（0.05 Gy/d ×10 d）。小鼠在末次照射后2 h取血后处死，收集肾脏、肝脏、脾脏、脑及肺组织。采用BSP和Real-time PCR法检测各组小鼠外周血单个核细胞（PBMC）及各组织Rad23b和Ddit3启动子CpG岛的甲基化水平和 mRNA 表达变化。结果末次照射后2 h，与对照组比较，单纯照射组Rad23b在PBMC、肝脏、脾脏、脑和肺组织中甲基化水平均升高（ t ＝-20.19、-14.80、-12.05、-28.42、-12.58，P＜0.05），同时mRNA水平在PBMC、肝脏、脑和肺组织中表达降低（t＝25.25、17.43、11.53、22.85，P ＜0.05）；Ddit3甲基化水平在 PBMC、肝脏和肺组织中升高（t ＝-52.89、-20.31和-3.85，P ＜0.05），mRNA 水平在 PBMC 和肝脏中表达降低（t ＝11.89和16.52，P ＜0.05）。与单纯照射组比较，除脾脏中Rad23b外，不同浓度EGCG（10、20 mg/kg）给药照射组均能明显降低X射线引起的Rad23b和Ddit3启动子CpG岛高甲基化（t＝-13.39～7.99，P＜0.05），并诱导mRNA重新表达（t＝-34.02～-2.89，P＜0.05），且转录激活作用在高剂量给药照射组中更加明显。结论 EGCG作为逆转小剂量辐射损伤效应的天然药物，可能通过影响DNA甲基化来发挥作用。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯辐射损伤甲基化 Ddit3

巨尾桉与几种阔叶树和针叶树碳储量的比较研究

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广西科学院学报 2014年第4期30卷 229-232页

作者：韦宇静梁士楚黄雅丽李冰石贵玉珍稀濒危动植物生态与环境保护教育部重点实验室广西桂林541004 广西师范大学生命科学学院广西桂林541004

【目的】研究广西北海市巨尾桉（Eucalyptus grandis×***）、红锥（Castanopsis hystrix）、海南蒲桃（Szygium cumini）、香梓楠（Michelia hedyosperma）、闽楠（Michelia macclurei）、杉木（Cunninghamia lanceolata）、马尾松（Pinus massoniana）的冠幅、生物量和碳储量情况，为该地区建立人工林优势树种选择提供科学依据。【方法】对两年生的巨尾桉、红锥、海南蒲桃、香梓楠、闽楠、杉木、马尾松进行常规的群落调查，采用收获法收集各树种的根、茎、叶、枝，通过实验手段测定其生物量、含碳率、碳储量。【结果】巨尾桉冠幅为其他树种的1．7～8．6倍，高度为3．1～6倍，基径为1．6～3．6倍；巨尾桉生物量高达17．2t·hm^2，其次海南蒲桃为3．6t·hm^2，其余树种生物量较低；巨尾桉含碳率在所有树种中居于中间水平，碳储量为其他树种的6～30倍。【结论】在同龄树种中，巨尾桉的固碳能力较强，可作为人工林生态固碳的优选树种。

关键词：巨尾桉红锥海南蒲桃香梓楠闽楠杉木马尾松生物量碳储量

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自身免疫性肝病合并胆囊结石的临床特征

中华消化杂志 2020年第2期40卷 105-109页

作者：刘曼郑忠青周思敏张红霞褚洪玉王晓艺张洁周璐王邦茂天津医科大学总医院消化科 300052

目的探讨自身免疫性肝病(AILD)患者合并胆囊结石的临床特征,以指导临床实践。方法回顾性分析2009年11月至2018年10月于天津医科大学总医院就诊的386例AILD患者的临床资料。根据相关诊断标准筛选出自身免疫性肝炎(AIH)208例、原发性胆汁... 详细信息

目的探讨自身免疫性肝病(AILD)患者合并胆囊结石的临床特征,以指导临床实践。方法回顾性分析2009年11月至2018年10月于天津医科大学总医院就诊的386例AILD患者的临床资料。根据相关诊断标准筛选出自身免疫性肝炎(AIH)208例、原发性胆汁性胆管炎(PBC)129例和PBC-AIH重叠综合征患者49例。分析AILD患者合并胆囊结石的比例、基本特征和实验室检查指标如白蛋白、ALP、GGt等的变化。应用卡方检验、t检验、秩和检验进行统计学分析。结果AILD、AIH、PBC和PBC-AIH重叠综合征患者合并胆囊结石的比例比较[分别为32.9%(127/386)、28.8%(60/208)、36.4%(47/129)和40.8%(20/49)],差异无统计学意义(P>0.05)。合并胆囊结石的AILD患者以多发和小结石(最大径t水平均高于未合并胆囊结石的AILD患者[分别为(60.5±11.5)岁比(57.6±11.5)岁,53.5%(68/127)比42.1%(109/259),154.00 U/L(89.00 U/L,257.00 U/L)比125.00 U/L(86.00 U/L,212.00 U/L),169.00 U/L(79.00 U/L,343.00 U/L)比128.60 U/L(48.00 U/L,284.00 U/L)],而白蛋白水平低于未合并胆囊结石者[(36.46±7.30)g/L比(38.34±7.58)g/L],差异均有统计学意义(t=-2.361,χ^2=4.506,Z=-2.192、-2.443,t=2.322;P均<0.05)。≥60岁AILD患者合并胆囊结石的比例高于<60岁患者[37.6%(73/194)比28.1%(54/192)],差异有统计学意义(χ^2=3.948,P=0.047)。伴肝硬化的AILD和AIH患者合并胆囊结石的比例均高于无肝硬化者[分别为38.4%(68/177)比28.2%(59/209),35.7%(35/98)比22.7%(25/110)],差异均有统计学意义(χ^2=4.506、4.259,P=0.034、0.039)。结论AILD患者合并胆囊结石较常见,以多发和小结石为主。合并胆囊结石易延误AILD患者的首次诊断并增高首诊肝硬化的比例。高龄和肝硬化AILD患者合并胆囊结石的比例更高。

关键词：肝硬化自身免疫性肝病胆囊结石肝功能年龄

人tumstatin基因的克隆表达及其鉴定

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肿瘤防治研究 2007年第11期34卷 836-838,841页

作者：颜廷东宋娜玲赵启仁刘家慧贺欣褚丽萍张春明中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

目的重组表达人tumstatin,为人tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础。方法提取HEK293细胞总RNA,通过Rt-PCR扩增人tumstatin基因,导入pMD19-t,测序,然后亚克隆至pEt28a,IPtG诱导表达,产物进行SDS-PAGE分析和western blot鉴定。结果提取的总RNA经电泳,有清晰的28S和18S两条带。Rt-PCR扩增产物长度与理论值750bp相一致。测序证实tumstatin基因正确插入载体中。重组人tumstatin在大肠杆菌中高效表达,表达量约占菌体总蛋白量的30%。western blot证实所表达蛋白为目的蛋白。结论重组人tumstatin蛋白在大肠杆菌中高效表达,为进一步的tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础。

关键词： tumstatin 肿瘤新生血管生成抑制因子基因克隆和表达

1型糖尿病患者微血管并发症与亚临床颈动脉粥样硬化之间关系的研究

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中华糖尿病杂志 2023年第5期15卷 396-401页

作者：刘蔚方亚宇蔡晓凌朱宇张明霞龚思倩林矗王相清李娟张婉韩学尧纪立农北京大学人民医院内分泌科北京100044 中日友好医院检验科北京100029

目的探讨1型糖尿病(t1DM)患者微血管并发症与亚临床颈动脉粥样硬化之间的关系。方法选择2019年1月至2021年12月在北京大学人民医院内分泌科住院的符合入组标准的t1DM患者314例作为研究对象。收集受试者的一般资料和实验室检查结果,包括... 详细信息

目的探讨1型糖尿病(t1DM)患者微血管并发症与亚临床颈动脉粥样硬化之间的关系。方法选择2019年1月至2021年12月在北京大学人民医院内分泌科住院的符合入组标准的t1DM患者314例作为研究对象。收集受试者的一般资料和实验室检查结果,包括年龄、性别、病程、吸烟史、身高、体重、腰围、血压、糖化血红蛋白、血脂谱。计算体重指数(BMI)。所有受试者均进行眼底照相明确有无糖尿病视网膜病变,完善尿白蛋白/肌酐比值及估算的肾小球滤过率(eGFR)评估有无糖尿病肾脏病,完善振动觉、10 g尼龙丝试验、踝反射、温度觉和针刺痛觉评估有无糖尿病周围神经病变。通过颈动脉彩色超声判定有无颈动脉斑块,根据患者有无颈动脉斑块分为颈动脉斑块组和无颈动脉斑块组。采用χ^(2)检验、t检验或Mann-whitney U检验比较两组之间临床特征的差异,采用logistic回归分析法评估微血管并发症与颈动脉斑块之间的关系。结果受试者年龄(50±11)岁,病程(10±9)年,其中男性162例(51.6%),BMI为(23.1±3.3)kg/m^(2),糖化血红蛋白9.4%±2.1%。颈动脉斑块组共171例(54.5%)。与无颈动脉斑块组(143例)相比,颈动脉斑块组患者的年龄更大,病程更长,同时腰围、收缩压更高,且甘油三酯、尿白蛋白/肌酐比值更高,而eGFR水平更低,并且吸烟、合并糖尿病视网膜病变、合并糖尿病神经病变的比例更高(均Ptic回归分析,结果显示,合并颈动脉斑块的相关因素包括年龄(OR=1.13,P=0.001),吸烟(OR=2.93,P=0.006),eGFR(OR=0.94,P=0.015)和糖尿病神经病变(OR=1.84,P=0.049)。结论t1DM患者糖尿病肾脏病、糖尿病周围神经病变与心血管合并症风险相关。

关键词：糖尿病,1型糖尿病视网膜病变糖尿病肾病糖尿病神经病变心血管疾病颈动脉斑块

副舟骨融合术治疗成人Ⅱ型痛性足副舟骨临床疗效分析

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世界复合医学 2021年第1期7卷 58-60页

作者：楚明刘炜曾德妙孙自力甘泉邹婷红河州第一人民医院骨科云南蒙自661199

目的分析成人Ⅱ型痛性足副舟骨患者行副舟骨融合术治疗的临床价值。方法纳入该院于2011年1月-2014年1月期间收治的,满足入组标准的35例(38足)成人Ⅱ型痛性足副舟骨患者作为研究对象,所有患者均实施副舟骨融合术治疗。记录手术前后临床... 详细信息

目的分析成人Ⅱ型痛性足副舟骨患者行副舟骨融合术治疗的临床价值。方法纳入该院于2011年1月-2014年1月期间收治的,满足入组标准的35例(38足)成人Ⅱ型痛性足副舟骨患者作为研究对象,所有患者均实施副舟骨融合术治疗。记录手术前后临床结果、影像学、患足功能改善情况。结果 35例患者均成功随访,最长随访用时3年,最短随访用时1年,平均随访(53.4±14.6)月;4例患者手术后存在炎性状态,通过换药后痊愈,其余患者手术切口均愈合,无神经以及血管损伤并发症出现;手术后患者进行X线检查,32例(35足)患者影像学显示痊愈,术后愈合最长17周,最短8周,平均(13.69±2.31)周。3例(3足)术后存在螺钉松动以及融合失败反应,均在术后半年进行改良手术处理。手术前后测量指标对比,组间差异无统计学意义(t=1.298、1.266、0.743、1.268,P>0.05);手术后AOFAS足功能分值均高于术前,两组对比差异有统计学意义(t=14.924、6.723、5.363、23.940,P<0.05)。结论对行常规治疗无效、副舟骨骨块较大、未伴有僵硬性扁平足患者,通过副舟骨融合术处理有效改善疼痛反应,提升患侧肢体功能,术后具有较高满意度,手术效果显著。

关键词：副舟骨融合术成人Ⅱ型痛性足副舟骨 AOFAS足功能效果分析