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Protective effect of resveratrol on rat cardiomyocyte H9C2 cells injured by hypoxia/reoxygenation by regulating mitochondrial autophagy via PTEN-induced putative kinase protein 1/Parkinson disease protein 2 signaling pathway

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Journal of Traditional Chinese Medicine 2022年第2期42卷 176-186页

作者： ZHAO Lixia SUN Wei bai decheng Institute of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine School of Basic Medical SciencesLanzhou UniversityLanzhou 730000China School of Nursing Gansu University of Chinese MedicineLanzhou 730000China Key Laboratory of Dunhuang Medicine Ministry of EducationGansu University of Chinese MedicineLanzhou 730000China Cardiac Surgery the First Hospital of Lanzhou UniversityLanzhouGansu 730000China

OBJECTIVE:To investigate the protective effect of resveratrol on cardiomyocytes after hypoxia/reoxygenation intervention based on PTEN-induced putative kinase protein 1/Parkinson disease protein 2(PINK1/PARKIN)signaling pathway.METHODS:3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide was used to detect the effect of resveratrol on the viability of H9C2 cells;the hypoxia/reoxygenation(H/R)model was established in tri-gas incubator;2’,7’-Dichlorofluorescin diacetate staining was used to measure the content of reactive oxygen species(ROS);the changes of mitochondrial membrane potential was determined by 5,5’,6,6’-Tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide staining;the changes of mitochondrial respiratory chain complex activity was evaluated by enzyme activity kits;flow cytometry was used to detect the ratio of apoptotic cells;transmission electron microscope was used to observe the ultrastructure of H9C2 cells;Western blot was used to detect the protein changes of mitochondrial 20 k Da outer membrane protein(TOM20),translocase of inner mitochondrial membrane 23(TIM23),presenilins associated rhomboid-like protein(PARL),PINK1,PARKIN and mitofusin 1(Mfn1),mitofusin 2(Mfn2),phosphotyrosine independent ligand for the Lck SH2 domain of 62 k Da(P62),microtubule-associated protein 1 light chain 3 beta(LC3B);the m RNA levels of PINK1 and PARKIN was detected by quantitative polymerase chain reaction;immunoprecipitation assay was used to detect the interaction between PARKIN and Ubiquitin.RESULTS:Resveratrol could inhibit the proliferation of H9C2 cells in a time-and concentration-dependent manner;however,pretreatment with low cytotoxic resveratrol could reduce the H/R-induced increase in cellular ROS levels,alleviate the loss of mitochondrial membrane potential induced by H/R,inhibit H/R-induced apoptosis of H9C2 cells,and protect the mitochondrial structure and respiratory chain of H9C2 cells from H/R damage.Resveratrol could further increase the levels of p62,PINK1,PARKIN protein,the expression of

关键词： resveratrol myocytes cardiac hypoxia PTEN phosphohydrolase Parkinson disease associated proteins mitochondrial autophagy

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Potentilla anserina polysaccharide alleviates cadmium-induced oxidative stress and apoptosis of H9c2 cells by regulating the MG53-mediated RISK pathway

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Chinese Journal of Natural Medicines 2023年第4期21卷 279-291页

作者： ZHAO Lixia CHENG Ju LIU Di GONG Hongxia bai decheng SUN Wei Institute of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine School of Basic Medical SciencesLanzhou UniversityLanzhou 730000China School of Nursing Gansu University of Chinese MedicineLanzhou 730000China Key Laboratory of Dunhuang Medicine Ministry of EducationGansu University of Chinese MedicineLanzhou 730000China Institute of Genetics School of Basic Medical SciencesLanzhou UniversityLanzhou 730000China Key laboratory of Evidence Science Techniques Research and Application of Gansu Province Gansu University of Political Science and LawLanzhou 730000China School of Basic Medical Sciences Gansu University of Chinese MedicineLanzhou 730000China Department of Cardiac Surgery The First Hospital of Lanzhou UniversityLanzhou 730000China

Oxidative stress plays a crucial role in cadmium(Cd)-induced myocardial injury.Mitsugumin 53(MG53)and its mediated reperfusion injury salvage kinase(RISK)pathway have been demonstrated to be closely related to myocardial oxidative damage.Potentilla anserina L.polysaccharide(PAP)is a polysaccharide with antioxidant capacity,which exerts protective effect on Cd-induced damage.However,it remains unknown whether PAP can prevent and treat Cd-induced cardiomyocyte damages.The present study was desgined to explore the effect of PAP on Cd-induced damage in H9c2 cells based on MG53 and the mediated RISK pathway.For in vitro evaluation,cell viability and apoptosis rate were analyzed by CCK-8 assay and flow cytometry,respectively.Furthermore,oxidative stress was assessed by 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate(DCFH-DA)staining and using superoxide dismutase(SOD),catalase(CAT),and glutathione/oxidized glutathione(GSH/GSSG)kits.The mitochondrial function was measured by JC-10 staining and ATP detection assay.Western blot was performed to detect the expression of proteins related to MG53,the RISK pathway,and apoptosis.The results indicated that Cd increased the levels of reactive oxygen species(ROS)in H9c2 cells.Cd decreased the activities of SOD and CAT and the ratio of GSH/GSSG,resulting in decreases in cell viability and increases in apoptosis.Interestingly,PAP reversed Cd-induced oxidative stress and cell apoptosis.Meanwhile,Cd reduced the expression of MG53 in H9c2 clls and inhibited the RISK pathway,which was mediated by decreasing the ratio of p-Akt^(Ser473)/Akt,p-GSK3β^(Ser9)/GSK3β and p ERK1/2/ERK1/2.In addition,Cd impaired mitochondrial function,which involved a reduction in ATP content and mitochondrial membrane potential(MMP),and an increase in the ratio of Bax/Bcl-2,cytoplasmic cytochrome c/mitochondrial cytochrome c,and Cleaved-Caspase 3/Pro-Caspase 3.Importantly,PAP alleviated Cd-induced MG53 reduction,activated the RISK pathway,and reduced mitochondrial damage.Interestingly,knockdown of MG53 or inhibition

关键词： Potentilla anserina L. Cadmium MG53 RISK pathway Oxidative stress Apoptosis Polysaccharide

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非白色假丝酵母菌代谢产物对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖的诱导作用

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华西口腔医学杂志 2013年第2期32卷 186-190页

作者：陈斌车团结白德成何祥一兰州大学口腔医学院口腔修复学教研室兰州大学生命科学院细胞与分子生物学实验室兰州大学基础医学院甘肃省新药临床前研究重点实验室兰州730000

目的研究3种常见的非白色假丝酵母菌对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖及细胞周期的影响。方法制备热带假丝酵母菌、克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌上清液并行倍比稀释,设1、4、16倍3个稀释度以及对照组。体外培养ECV304细胞,分别... 详细信息

目的研究3种常见的非白色假丝酵母菌对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖及细胞周期的影响。方法制备热带假丝酵母菌、克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌上清液并行倍比稀释,设1、4、16倍3个稀释度以及对照组。体外培养ECV304细胞,分别将3种非白色假丝酵母菌不同稀释度的上清液与ECV304细胞共培养,采用MTT法测定培养24、48、72 h后的细胞增殖率;倒置显微镜观察培养48 h后细胞密度的变化;流式细胞术测定培养48 h后对ECV304细胞周期的影响。结果培养24 h后,3种假丝酵母菌1倍稀释的上清液均可促进细胞增殖,4倍稀释的克鲁斯假丝酵母菌也可促进细胞增殖(P0.05)。结论克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌的代谢产物对ECV304细胞的增殖有诱导作用,临床上应加强非白色假丝酵母菌感染的检测和治疗。

关键词： ECV304细胞非白色假丝酵母菌增殖代谢产物

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猫臂旁核向大脑皮质的投射——HRP逆轴突传递法研究

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神经解剖学杂志 1987年第1期 27-30,34,133页

作者：白德成兰州医学院解剖学教研室

用HRP逆轴突传递法观察了24只猫臂旁核(PB)向大脑皮质的投射。结果表明:本实验所涉及到的所有皮质区均从PB接受数量不等的投射纤维。PB投射纤维的起源细胞主要分布在臂旁内侧核(PBm),少量在臂旁外侧核(PB1)和结合臂(CB)内;这些细胞主要... 详细信息

用HRP逆轴突传递法观察了24只猫臂旁核(PB)向大脑皮质的投射。结果表明:本实验所涉及到的所有皮质区均从PB接受数量不等的投射纤维。PB投射纤维的起源细胞主要分布在臂旁内侧核(PBm),少量在臂旁外侧核(PB1)和结合臂(CB)内;这些细胞主要出现在PB的吻侧2/3,以中等大的梭形细胞居多。根据各注射例PB内标记细胞数的多少可知:PB发出的纤维广泛投向皮质各脑回,重点投向前半皮质,其中前,后乙状回是投射中心,其余各脑回(包括未见报道的听区、梨状区、压上回、压旁回和海马)只接受PB的少量上行投射纤维。

关键词：臂旁核大脑皮质 HRP法猫

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臂旁核—嗅球传入纤维的另一来源

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神经解剖学杂志 1987年第1期 31-34页

作者：白德成兰州医学院解剖学教研室

用HRP逆轴突传递法观察了16只猫臂旁核(PB)向嗅球(OB)投射的起源细胞,将HRP注入OB的所有例均在PB内出现数量不等、而形态、分布相同的标记细胞,以同侧为主。臂旁内侧核(PBm)中出现的标记细胞最多,其次是臂旁外侧核(PB1),结合臂(CB)内最... 详细信息

用HRP逆轴突传递法观察了16只猫臂旁核(PB)向嗅球(OB)投射的起源细胞,将HRP注入OB的所有例均在PB内出现数量不等、而形态、分布相同的标记细胞,以同侧为主。臂旁内侧核(PBm)中出现的标记细胞最多,其次是臂旁外侧核(PB1),结合臂(CB)内最少。这些标记细胞主要出现在PB的吻侧2/3,中等大的梭形细胞居多。实验证明,PB是OB传入纤维的另一来源。

关键词：臂旁核嗅球 HRP法猫

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外源性锌对缺氧神经元的保护作用

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解剖学杂志 2008年第5期31卷 684-686,705页

作者：谢坤程菊侯敏白德成兰州大学基础医学院解剖学与组织胚胎学研究所兰州730000

目的:观察不同浓度外源性锌对神经元细胞内游离钙([Ca2+]i)的影响,探讨低浓度外源性锌对于缺氧神经元保护作用的可能机制。方法:原代培养大鼠皮层神经元,加入不同浓度的外源性锌,激光扫描共聚焦显微镜检测神经元[Ca2+]i的变化;建立细胞... 详细信息

目的:观察不同浓度外源性锌对神经元细胞内游离钙([Ca2+]i)的影响,探讨低浓度外源性锌对于缺氧神经元保护作用的可能机制。方法:原代培养大鼠皮层神经元,加入不同浓度的外源性锌,激光扫描共聚焦显微镜检测神经元[Ca2+]i的变化;建立细胞缺氧模型,检测10μmol/L外源性锌对于缺氧神经元[Ca2+]i和[Zn2+]i的影响。结果:神经元的[Ca2+]i,10μmol/L锌组与对照相比无明显变化;100μmol/L锌组一过性升高,后降至对照水平;500μmol/L锌组,明显高于对照水平。除正常加锌组外,其余各组神经元[Zn2+]i和[Ca2+]i均较正常对照组增高;但正常加锌组、缺氧加锌组神经元[Zn2+]i和[Ca2+]i均较缺氧组降低。结论:外源性锌对于神经元的作用随浓度而不同;10μmol/L外源性锌维持了神经元的钙稳态,它对于缺氧神经元的保护作用,可能通过抑制钙超载实现。

关键词：锌神经元缺氧细胞内游离钙激光扫描共聚焦显微镜

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嗜酸乳杆菌对人舌癌细胞增殖的影响

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华西口腔医学杂志 2012年第1期30卷 87-92页

作者：史晓艳陈骏车团结白德成何祥一兰州大学口腔医院修复科兰州大学生命科学院细胞与分子生物学实验室兰州大学基础医学院甘肃省新药临床前研究重点实验室兰州730000

目的研究嗜酸乳杆菌对人舌癌细胞Tca8113增殖及细胞周期的影响。方法体外培养Tca8113细胞,分别将不同稀释度(原液和4、16倍稀释)的嗜酸乳杆菌上清液、灭活菌液和无细胞提取物与Tca8113细胞共培养,采用倒置显微镜观察细胞形态并行细胞计... 详细信息

目的研究嗜酸乳杆菌对人舌癌细胞Tca8113增殖及细胞周期的影响。方法体外培养Tca8113细胞,分别将不同稀释度(原液和4、16倍稀释)的嗜酸乳杆菌上清液、灭活菌液和无细胞提取物与Tca8113细胞共培养,采用倒置显微镜观察细胞形态并行细胞计数,磺酰罗丹明B(SRB)法测定细胞增殖率,流式细胞术分析嗜酸乳杆菌各组分对Tca8113细胞增殖及细胞周期的影响,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)检测细胞内自由基和Ca2+含量。结果嗜酸乳杆菌各组分作用于Tca8113细胞48 h后,在倒置显微镜下观察,细胞由菱形、多角形、铺路石状变为细长形。细胞计数与SRB实验分析:在不同稀释度同一培养时间与不同培养时间同一稀释度培养条件下,嗜酸乳杆菌各组分均可明显抑制Tca8113细胞增殖,抑制力随稀释度增加而降低,随培养时间延长而增强。流式细胞术分析:嗜酸乳杆菌各组分作用Tca8113细胞48 h后,细胞增殖指数降低(P<0.01)。CLSM检测:嗜酸乳杆菌各组分作用Tca8113细胞48 h后细胞内自由基和Ca2+含量均升高(P<0.01)。结论嗜酸乳杆菌代谢产物、灭活菌液、无细胞提取物均可抑制Tca8113细胞增殖,可能与菌体及其代谢产物引起细胞内自由基含量增多、Ca2+超载有关。

关键词： Tca8113细胞嗜酸乳杆菌细胞增殖激光扫描共聚焦显微镜

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高校实验室气体钢瓶的安全管理探讨

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实验技术与管理 2012年第4期29卷 216-218页

作者：程世红马旭炅白德成兰州大学实验室与设备管理处甘肃兰州730000

高校实验室涉及到的气体种类众多,对于气体的正确使用是一个非常重要的问题,气体的安全存放管理更是重中之重。该文就高校实验室气体的使用情况及其存在的问题,提出了针对气体钢瓶的安全使用和管理办法,也提出了气体共享实验室建设思路。

关键词：高校实验室气体钢瓶安全管理

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皮质-网状-脊髓通路——HRP法结合溃变电镜法研究

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解剖学杂志 1998年第3期21卷 219-223页

作者：白德成兰州医学院解剖学教研室兰州730000

用HRP逆行标记法结合溃变电镜技术,观察了12只大鼠的蓝斑、外侧网状核、中缝大核、巨细胞网状核和旁正中网状核中皮质纤维终末的超微结构及其与网状脊髓神经元的突触联系.损伤皮质感觉运动区的各例动物,均出现两种溃变型,电子致密型和... 详细信息

用HRP逆行标记法结合溃变电镜技术,观察了12只大鼠的蓝斑、外侧网状核、中缝大核、巨细胞网状核和旁正中网状核中皮质纤维终末的超微结构及其与网状脊髓神经元的突触联系.损伤皮质感觉运动区的各例动物,均出现两种溃变型,电子致密型和微丝增生型.前者为皮质纤维的主要溃变型,分布于各核;后者出现很少,只见于外侧网状核.电子致密型终扣有大小两种,大终扣少.有含圆形清亮型小泡、多形清亮型小泡、清亮型和颗粒型小泡并存的三种终扣.小终扣多,绝大多数含圆形清亮型小泡.各种终扣的一部分与HRP标记的网状脊髓神经元形成轴树突触,少量形成轴体突触.结果表明,至少有一部分皮质网状纤维与网状脊髓神经元形成单突触联系.

关键词：大脑皮质皮质网状纤维网状脊髓神经元

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皮质脑干纤维终末的超微结构——溃变电镜法研究

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解剖学杂志 1998年第3期21卷 214-218页

作者：白德成兰州医学院解剖学教研室兰州730000

用溃变电镜法观察了12只大鼠的中缝大核、蓝斑、旁正中网状核、巨细胞状核、桥核、外侧网状核和下橄榄主核中皮质下行纤维终末的溃变型、超微结构及突触联系.结果如下:(1)皮质纤维有三种演变型,即电子致密型、微丝增生型和电透明型.以... 详细信息

用溃变电镜法观察了12只大鼠的中缝大核、蓝斑、旁正中网状核、巨细胞状核、桥核、外侧网状核和下橄榄主核中皮质下行纤维终末的溃变型、超微结构及突触联系.结果如下:(1)皮质纤维有三种演变型,即电子致密型、微丝增生型和电透明型.以电子致密型为主.(2)三种溃变型在各核中出现的数量和种类不同.(3)电子致密型溃变终扣有含圆形清亮型小泡,多形清亮型小泡和混合型小泡三种终扣.各核中,三种个同小泡终扣的出现种类和数量不尽一致,以圆形清亮型小泡终扣的数量最多.(4)皮质纤维在各核中的突触联系主要是轴树突触,少量轴体突触,偶见轴轴突触.

关键词：大脑皮质神经核溃变纤维突触超微结构

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