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骨髓增生异常综合征患者GDF11水平检测及其临床意义

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中华医学杂志 2016年第8期96卷 620-624页

作者：韩宇王化泉付蓉瞿文阮二宝王晓明王国锦吴玉红刘鸿宋嘉关晶邢莉民李丽娟江汇涓刘惠王一浩刘春燕张薇邵宗鸿天津医科大学总医院血液科 300052

目的观察骨髓增生异常综合征（MDS）患者生长分化因子11（GDF11）的表达，分析其与红系造血功能的相关性。方法选取2014年9月至2015年6月天津医科大学总医院血液内科MDS患者44例，其中低危组18例，高危组26例，采用酶联免疫吸附试验检... 详细信息

目的观察骨髓增生异常综合征（MDS）患者生长分化因子11（GDF11）的表达，分析其与红系造血功能的相关性。方法选取2014年9月至2015年6月天津医科大学总医院血液内科MDS患者44例，其中低危组18例，高危组26例，采用酶联免疫吸附试验检测外周血GDF11的浓度、RT－PCR方法检测骨髓单个核细胞（BMMNC） GDF11基因mRNA的表达水平、流式细胞术检测MDS患者骨髓红系（CD235a）的百分比，并与10名健康对照做比较；分析上述变化与外周血红细胞计数（RBC）、血红蛋白（Hb）、红细胞比容（Hct）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、网织红细胞（Ret）百分比、骨髓有核红细胞比例的相关性。结果（1） MDS患者外周血GDF11的水平：高危组MDS患者外周血GDF11水平显著高于低危组[（128.67±47.62）比（65.96±36.55） μg/L, P〈0.01]和健康对照组[（29.76±10.10） μg/L, P〈0.01]；低危组显著高于健康对照组（P〈0.05）。中重度贫血MDS患者外周血GDF11水平高于正常和轻度贫血患者[（80.97±9.94）比（66.82±19.52） μg/L]，但两组差异未达统计学意义（P〉0.05）。（2） MDS患者骨髓CD235a的水平：高危组MDS患者骨髓单个核细胞CD235a的表达率为38.49%±5.42%，低危组为42.64%±7.36%，两组差异没有统计学意义（P〉0.05）。（3）不同危险度MDS患者外周血GDF11水平与红系指标的相关性：高危组MDS患者外周血GDF11浓度与外周血Hb、RBC、Hct均呈负相关（r＝－0.437、－0.430、－0.306，均P〈0.05），与骨髓有核红细胞比例、Ret百分比、MCV和骨髓CD235a的表达呈正相关（r＝0.465、0.392、0.505、0.387，P〈0.05），与MCHC和MCH无相关性（均P〉0.05）。低危组MDS患者外周血GDF11浓度与骨髓CD235a的表达呈正相关（r＝0.429，P〈0.05），与外周血Hb、RBC、Ret百分比、MCV、MCH、MCHC、Hct及骨髓有核红细胞比例均无相关性（均P〉0.05）。（4） RT－PCR方法检测GDF11基因的表达：MDS组GDF11 mRNA表达水平高于健康对照组（39.82±14.55比1.84±0.64），差异有统计学意义（P〈0.01）。结论MDS患者外周血GDF11水平高，且随着危险度升高而升高，贫血严重程度越高，GDF11水平越高，与MDS红系造血指标密切相关。

关键词：骨髓增生异常综合征贫血生长分化因子11

骨髓增生异常综合征患者有核红细胞自噬水平的研究

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中华血液学杂志 2017年第5期38卷 432-436页

作者：杨丽艳王化泉付蓉瞿文阮二宝王晓明王国锦吴玉红刘鸿宋嘉关晶邢莉民李丽娟江汇涓刘惠王一浩刘春燕张薇邵宗鸿天津医科大学总医院血液科 300052

目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者有核红细胞的自噬水平。方法54例MDS患者为实验组，对照组33例。采用透射电镜观察自噬过程，流式细胞术检测骨髓细胞中GlycoA＋有核红细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3B（LC3B）的表达水平，Rea... 详细信息

目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者有核红细胞的自噬水平。方法54例MDS患者为实验组，对照组33例。采用透射电镜观察自噬过程，流式细胞术检测骨髓细胞中GlycoA＋有核红细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3B（LC3B）的表达水平，Real-time PCR法检测GlycoA＋有核红细胞自噬相关基因AMPK、ULK1和mTOR mRNA的表达，Western blot法检测GlycoA＋有核红细胞线粒体外膜蛋白TOM20的表达。结果MDS患者有核红细胞中不易观察到自噬体及自噬溶酶体。相对高危组MDS患者有核红细胞LC3B表达（0.22±0.12）显著低于对照组（0.43±0.22，P〈0.001）及相对低危组（0.40±0.16，P=0.001）。相对高危组患者AMPK、ULK1 mRNA表达水平明显低于对照组[AMPK：0.26（0.60）对1.00（2.07），ULK1：0.27（3.31）对1.07（4.41），P值均〈0.017]，mTOR mRNA表达水平明显高于对照组[1.82（3.74）对1.26（1.38），P〈0.017]。相对高危组MDS患者有核红细胞LC3B水平与HGB呈正相关（r=0.529，P=0.009）。相对高危组MDS患者有核红细胞TOM20蛋白（9.42±4.42）表达升高。结论高危MDS患者有核红细胞自噬水平下降。

关键词：骨髓增生异常综合征自噬贫血

骨髓增生异常综合征患者单个核细胞诱导的巨噬细胞的特征及功能

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中华血液学杂志 2017年第8期38卷 706-709页

作者：韩宇王化泉付蓉瞿文阮二宝王晓明王国锦吴玉红刘鸿宋嘉关晶邢莉民李丽娟江汇涓刘惠王一浩刘春燕张薇邵宗鸿天津医科大学总医院血液科 300052

目的观察骨髓增生异常综合征（MDS）患者单个核细胞诱导的巨噬细胞的功能，分析其与MDS疾病发展的关系。方法以2014年9月至2015年12月天津医科大学总医院血液科24例MDS患者为病例组，以15名健康志愿者为正常对照组。收集外周血标本并分... 详细信息

目的观察骨髓增生异常综合征（MDS）患者单个核细胞诱导的巨噬细胞的功能，分析其与MDS疾病发展的关系。方法以2014年9月至2015年12月天津医科大学总医院血液科24例MDS患者为病例组，以15名健康志愿者为正常对照组。收集外周血标本并分离单个核细胞，体外以GM—CSF诱导分化形成巨噬细胞。在光学显微镜下观察巨噬细胞的形态；使用流式细胞术检测巨噬细胞的数量及其表面受体CD206、SIRPot的表达水平；分别采用流式细胞术和免疫荧光显微镜检测巨噬细胞的吞噬功能。结果MDS来源的巨噬细胞形态较正常对照差（形态不规则、细胞体积小、异形明显、无足突、数量减少），MDS外周血单个核细胞转化为巨噬细胞的转化率为（5．17±3．47）％，显著低于正常对照组的（66．18±13．43）％（t=3．529，P=0．001）；MDS来源的巨噬细胞表面识别受体CD206的表达水平[（9．73±2．59）％]显著低于正常对照组[（51．15±10．82）％]（t=-4．551，P〈0．001），SIRPa的表达水平[（0．51±0．09）％]显著低于正常对照组[（O．77±0．06）％]（t=2．102，P=-0．043）；@MDS来源的巨噬细胞吞噬免疫微球的吞噬指数、吞噬百分率分别为0．45±0．08、（23．69±3．22）％，显著低于正常对照组的0．92±0．07、（42．75±2．13）％（P值均〈0．05），MDS来源的巨噬细胞吞噬单个核细胞的吞噬指数（0．24±0．04）显著低于正常对照组（0．48±0．96，t=-3．464，P=0．001）。结论MDS患者外周血单个核细胞诱导形成巨噬细胞能力下降，吞噬识别受体减少，吞噬能力减弱。

关键词：骨髓增生异常综合征巨噬细胞

重型再生障碍性贫血免疫抑制治疗后恶性克隆造血临床分析

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中华医学杂志 2015年第32期95卷 2620-2622页

作者：崔宁博付蓉瞿文阮二宝王晓明王国锦吴玉红刘鸿关晶宋嘉邢莉民李丽娟江汇涓刘惠王一浩刘春燕张薇王化泉邵宗鸿天津医科大学总医院血液科 300052

目的探讨重型再生障碍性贫血（SAA）患者联合免疫抑制治疗（IST）后出现7号染色体缺失（-7）恶性克隆造血的临床特征和危险因素.方法回顾性分析天津医科大学总医院血液科2004年10月至2012年1月IST后出现-7染色体异常的SAA患者的临床资... 详细信息

目的探讨重型再生障碍性贫血（SAA）患者联合免疫抑制治疗（IST）后出现7号染色体缺失（-7）恶性克隆造血的临床特征和危险因素.方法回顾性分析天津医科大学总医院血液科2004年10月至2012年1月IST后出现-7染色体异常的SAA患者的临床资料.结果 SAA患者IST后出现-7染色体异常的比例为4.2％（6/143）,出现异常的中位时间是IST后36（12～ 75）个月.此6例患者均诊断为骨髓增生异常综合征（MDS）,其中3例进展为急性髓系白血病（AML）,时间分别为IST后24、45和51个月.中位随访时间42（17～84）个月,4例患者随访期间死亡,从确诊MDS到死亡中位时间是9（5 ～17）个月,3例患者死于感染,1例患者死于脑出血.6例患者临床特点包括IST后6个月治疗无效、IST联合重组人粒细胞集落刺激因子（rHu-GCSF）治疗后1个月单核细胞百分比升高、IST联合rHu-GCSF后3个月处于粒细胞缺乏状态.结论 SAA患者经IST后粒系反应不良提示恶性克隆性造血存在,且预后差.

关键词：贫血,再生障碍性染色体缺失染色体,人,7对

骨髓增生异常综合征患者骨髓单个核细胞白噬水平的研究

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中华血液学杂志 2015年第12期36卷 1016-1019页

作者：郭利芳崔宁博王化泉付蓉瞿文阮二宝王晓明王国锦吴玉红刘鸿宋嘉关晶邢莉民李丽娟江汇涓刘惠王一浩刘春燕张薇邵宗鸿天津医科大学总医院血液科 300052

目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓单个核细胞（BMMNC）自噬水平的变化，探讨细胞自噬在MDS中的作用。方法以38例MDS患者为实验组，以26例巨幼细胞贫血患者为对照组，抽取骨髓并分离BMMNC。应用透射电镜观察自噬情况；采用单... 详细信息

目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓单个核细胞（BMMNC）自噬水平的变化，探讨细胞自噬在MDS中的作用。方法以38例MDS患者为实验组，以26例巨幼细胞贫血患者为对照组，抽取骨髓并分离BMMNC。应用透射电镜观察自噬情况；采用单丹（磺）酰戊二胺（MDC）染色法检测自噬泡水平；采用RT-PCR、免疫荧光技术及蛋白免疫印迹法检测微管相关蛋白轻链3（LC3）、BeclinlmRNA及蛋白的表达水平。结果MDS患者BMMNC内易见自噬泡；MDC染色显示MDS患者BMMNC含自噬泡细胞数量显著高于对照组[（9．75±2．63）％对（2．90±0．89）％，P〈0．05]；MDS患者BMMNCLC3阳性细胞比例显著高于对照组[（6．13±1．03）％对（1．50±0．58）％，P〈0．05]。低危／中危．1MDS患者BMMNCBeclin1及LC3AmRNA表达水平显著高于对照组（3．61±3．02对1．55±1．03，P〈0．05；6．56±3．97对1．21±0．95，P〈0．05）；低危／中危-1MDS患者BMMNC自噬负性调控基因-哺乳动物雷帕霉素靶点（mTOR）mRNA水平显著低于对照组（0．39±0．37对1．50±1．03，P〈0．05）；中危-2／高危MDS患者BMMNCBeclinl、LC3和roTORmRNA表达水平与对照组比较差异均无统计学意义（尸值均〉0．05）。蛋白免疫印迹法显示低危／中危-1患者BMMNC Beclin1蛋白表达（1．257±0．197）高于对照组（0．528±0．086）及中危-2／高危（0．622±0．118），差异均有统计学意义（P〈0．05）。中危-2／高危组和对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论低危／中危-1MDS患者BMMNC自噬水平升高，中危-2／高危MDS组患者BMMNC自噬水平无明显改变，自噬对MDS患者可能起保护性作用，自噬水平相对不足可能与MDS的进展有关。

关键词：骨髓增生异常综合征自噬

NIX介导线粒体自噬在骨髓增生异常综合征贫血发病机制中的作用

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中华医学杂志 2017年第14期97卷 1071-1075页

作者：杨丽艳崔宁博王化泉付蓉瞿文阮二宝王晓明王国锦吴玉红刘鸿宋嘉关晶邢莉民李丽娟江汇涓刘惠王一浩刘春燕张薇邵宗鸿天津医科大学总医院血液科 300052

目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者有核红细胞线粒体外膜蛋白NIX水平的变化，初步探讨NIX介导线粒体自噬在MDS贫血发病机制中的作用。方法选取2015年7月至2016年7月天津医科大学总医院血液内科收治的54例MDS患者为实验组，并分为... 详细信息

目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者有核红细胞线粒体外膜蛋白NIX水平的变化，初步探讨NIX介导线粒体自噬在MDS贫血发病机制中的作用。方法选取2015年7月至2016年7月天津医科大学总医院血液内科收治的54例MDS患者为实验组，并分为高危组和低危组；免疫性血小板减少症及特发性白细胞减少症患者33例为对照组。流式细胞术检测骨髓细胞中糖蛋白抗原A（GlycoA＋）有核红细胞NIX表达水平、线粒体数量、线粒体膜电位和氧自由基（ROS）水平；实时荧光定量PCR检测骨髓细胞中GlycoA＋有核红细胞NIX mRNA水平。结果（1）流式结果显示高危组MDS患者有核红细胞NIX表达（0.61±0.24）显著低于对照组（0.79±0.16，P＝0.027），显著低于低危组（0.81±0.15，P＝0.011），低危组与对照组比较差异无统计学意义；PCR结果显示高危组MDS患者GlycoA＋有核红细胞NIX mRNA水平（0.36±0.09）显著低于对照组（1.44±0.41, P＝0.027），显著低于低危组（1.02±0.22, P＝0.012），低危组与对照组比较差异无统计学意义。（2）高危组MDS患者有核红细胞线粒体数量（平均荧光强度937.17±707.85）显著高于对照组（513.49±372.33，P＝0.019），显著高于低危组（461.74±438.02，P＝0.008），低危组与对照组比较差异无统计学意义。（3）高危组MDS患者有核红细胞线粒体膜电位水平（0.33±0.18）显著低于对照组（0.61±0.32，P＝0.001），显著低于低危组（0.61±0.34，P＝0.001）；低危组与对照组比较差异无统计学意义。（4）高危组MDS患者有核红细胞ROS水平（平均荧光强度438.65±322.83）显著高于对照组（242.77±136.87，P＝0.006），显著高于低危组（197.40±95.07，P＝0.001）,低危组与对照组比较差异无统计学意义。（5）MDS患者有核红细胞线粒体数量与环形铁粒幼细胞比例呈正相关（r＝0.457，P＝0.028）。（6）高危组MDS患者有核红细胞线粒体数量与血红蛋白浓度呈负相关（r＝－0.521，P＝0.009）；低危组MDS患者有核红细胞线粒体数量与血红蛋白浓度无相关关系。结论高危MDS患者有核红细胞NIX水平下降，线粒体自噬缺陷，线粒体清除障碍，有核红细胞凋亡增加，与贫血相关。

关键词：骨髓增生异常综合征贫血红细胞线粒体