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Semaphorin 7A impairs barrier function in cultured human corneal epithelial cells in a manner dependent on nuclear factor-kappa B

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International Journal of Ophthalmology(English edition) 2024年第3期17卷 444-453页

作者： cheng-cheng Yang Xiu-Xia Yang Xiao-Jing Zhao Heng Wang Zi-Han Guo Kai Jin Yang Liu Bin-Hui Li Department of Ophthalmology the Fifth Affiliated HospitalSun Yat-sen UniversityZhuhai 519000Guangdong ProvinceChina Department of Ophthalmology Hangzhou TCM Hospital Affiliated to Zhejiang Chinese Medical UniversityHangzhou 310006Zhejiang ProvinceChina Eye Institute of Xiamen University Fujian Provincial Key Laboratory of Ophthalmology and Visual ScienceSchool of MedicineXiamen UniversityXiamen 361005Fujian ProvinceChina

●AIM:To evaluate the role of semaphorin 7A(Sema7A)and its associated regulatory mechanisms in modulating the barrier function of cultured human corneal epithelial cells(HCEs).●METHODS:Barrier models of HCEs were treated with recombinant human Sema7A at concentrations of 0,125,250,or 500 ng/mL for 24,48,or 72h in *** electrical resistance(TEER)as well as Dextran-fluorescein isothiocyanate(FITC)permeability assays were conducted to assess barrier *** quantify tight junctions(TJs)such as occludin and zonula occludens-1(zo-1)at the mRNA level,reverse transcriptionpolymerase chain reaction(RT-PCR)analysis was *** was used to examine the activity of the nuclear factor-kappa B(NF-κB)signaling pathway and the production of TJs *** analyses were employed to localize the ***-linked immunosorbent assay(ELISA)and RT-PCR were utilized to observe changes in interleukin(IL)-1β*** investigate the role of NF-κB signaling activation and IL^(-1)βin Sema7A’s anti-barrier mechanism,we employed 0.1μmol/L IκB kinase 2(IKK2)inhibitor IV or 500 ng/mL IL^(-1)receptor(IL-1R)antagonist.●RESULTS:Treatment with Sema7A resulted in decreased TEER and increased permeability of Dextran-FITC in HCEs through down-regulating mRNA and protein levels of TJs in a time-and dose-dependent manner,as well as altering the localization of ***,Sema7A stimulated the activation of inhibitor of kappa B alpha(IκBα)and expression of IL-1β.The anti-barrier function of Sema7A was significantly suppressed by treatment with IKK2 inhibitor IV or IL-1R antagonists.●CONCLUSION:Sema7A disrupts barrier function through its influence on NF-κB-mediated expression of TJ proteins,as well as the expression of IL-1β.These findings suggest that Sema7A could be a potential therapeutic target for the diseases in corneal epithelium.

关键词： human corneal epithelial barrier function transepithelial electrical resistance zonula occludens-1 occludin nuclear factor-kappa B

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A semi-analytical pressure and rate transient analysis model for inner boundary and propped fractures exhibiting dynamic behavior under long-term production conditions

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Petroleum Science 2024年第4期21卷 2520-2535页

作者： Lin-Song cheng Chong Cao Quan-Yu Pan Pin Jia Ren-Yi Cao Zhi-Kai Wang Jun-Jie Shi College of Petroleum Engineering China University of Petroleum (Beijing) Sinopec Petroleum Exploration and Production Research Institute CNOOC Research Institute State Key Laboratory of Water Resources Protection and Utilization in Coal Mining

The loss of hydrocarbon production caused by the dynamic behavior of the inner boundary and propped fractures under long-term production conditions has been widely reported in recent studies. However,the quantitative relationships for the variations of the inner boundary and propped fractures have not been determined and incorporated in the semi-analytical models for the pressure and rate transient analysis. This work focuses on describing the variations of the inner boundary and propped fractures and capturing the typical characteristics from the pressure transient curves.A generalized semi-analytical model was developed to characterize the dynamic behavior of the inner boundary and propped fractures under long-term production conditions. The pressure-dependent length shrinkage coefficients, which quantify the length changes of the inner zone and propped fractures, are modified and incorporated into this multi-zone semi-analytical model. With simultaneous numerical iterations and numerical inversions in Laplace and real-time space, the transient solutions to pressure and rate behavior are determined in just a few seconds. The dynamic behavior of the inner boundary and propped fractures on transient pressure curves is divided into five periods: fracture bilinear flow(FR1),dynamic PFs flow(FR2), inner-area linear flow(FR3), dynamic inner boundary flow(FR4), and outer-area dominated linear flow(FR5). The early hump during FR2 period and a positive upward shift during FR4period are captured on the log-log pressure transient curves, reflecting the dynamic behavior of the inner boundary and propped fractures during the long-term production *** transient pressure behavior will exhibit greater positive upward trend and the flow rate will be lower with the shrinkage of the inner boundary. The pressure derivative curve will be upward earlier as the inner boundary shrinks more rapidly. The lower permeability caused by the closure of un-propped fractures in the inner zo

关键词： Semi-analytical model Length shrinkage Dynamic behavior Boundary changes Transient behavior

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褐藻寡糖对肉鸡生长性能、免疫器官指数、血清抗氧化指标和肠道健康的影响

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动物营养学报 2024年第4期36卷 2331-2343页

作者：胡蝶阿拉腾珠拉程志钱张美红肖瑀轩程功胡永飞中国农业大学动物科学技术学院动物营养学国家重点实验室北京100193 湖州检验检疫综合技术服务中心湖州313000 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190

本试验旨在研究褐藻寡糖(AOS)对肉鸡生长性能、免疫器官指数、血清抗氧化指标和肠道健康的影响。试验分别用100、200和800 U的褐藻胶裂解酶PDE9水解褐藻酸钠制备不同分子量的AOS,之后使用高效分子排阻色谱方法测定AOS的重均分子量,得出3... 详细信息

本试验旨在研究褐藻寡糖(AOS)对肉鸡生长性能、免疫器官指数、血清抗氧化指标和肠道健康的影响。试验分别用100、200和800 U的褐藻胶裂解酶PDE9水解褐藻酸钠制备不同分子量的AOS,之后使用高效分子排阻色谱方法测定AOS的重均分子量,得出3种AOS的重均分子量分别为23981、5038和3766 u,依次标记为高分子量、中分子量和低分子量。然后选取体况一致和体重接近的1日龄爱拔益加(AA)雄性肉鸡280只,随机分为4组,每组7个重复,每个重复10只。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加200 mg/kg低分子量(AL组)、中分子量(AM组)和高分子量(AH组)的AOS。试验期40 d。结果表明:1)与CON组相比,AL组、AM组和AH组肉鸡40日龄体重均显著提高(Pzo-1)、黏蛋白2(mucin-2)和闭合蛋白(occludin)的mRNA相对表达量均显著提高(P<0.05),空肠封闭蛋白-3(claudin-3)的mRNA相对表达量有提高趋势(P=0.081)。4)与CON组相比,AH组肉鸡盲肠扁桃体白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA相对量表达均显著降低(P<0.05)。5)与CON组相比,AH组肉鸡盲肠微生物β多样性差异有显著性趋势(P=0.055),且AH组盲肠拟杆菌属、瘤胃球菌科UCG-005、瘤胃梭菌属、考拉杆菌属、帕拉苏特氏菌属、弯曲杆菌属、鸡杆菌属和埃希氏-志贺氏菌属的相对丰度显著提高(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加不同分子量AOS均能有效提高肉鸡生长性能;其中,高分子量AOS在制备中所需的酶量更少,生产成本相对更低,且能增强肉鸡免疫功能和改善肠道健康。

关键词：褐藻寡糖肉鸡生长性能免疫器官指数血清抗氧化指标肠道健康

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LANDMARC室内定位改进算法

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计算机工程与设计 2019年第11期40卷 3111-3117页

作者：邹承明黄明凯武汉理工大学计算机科学与技术学院

传统基于动态主动式射频识别标定的定位识别(LANDMARC)定位算法在实际定位环境中受到多径效应、随机噪声以及各种的障碍物的影响,导致所有参与定位标签实时测量的收信场强指示值(RSSI)变化波动非常剧烈,影响了定位精度和系统稳定,为此... 详细信息

传统基于动态主动式射频识别标定的定位识别(LANDMARC)定位算法在实际定位环境中受到多径效应、随机噪声以及各种的障碍物的影响,导致所有参与定位标签实时测量的收信场强指示值(RSSI)变化波动非常剧烈,影响了定位精度和系统稳定,为此提出引入指纹库的方法,建立相对稳定的RSSI值与坐标位置对应关系,对实时获得的近邻参考标签RSSI值进行修正,改进邻近标签的选择方法,降低系统误差,在提高系统定位精度的同时,系统稳定性和可靠性大幅增强。实验结果表明,与传统LANDMARC相比,提出算法在定位精度上有35%的提升。

关键词：基于动态主动式射频识别标定的定位识别(LANDMARC) 室内定位指纹库滤波算法最近邻算法

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丁香酸调控胆汁酸代谢和肠道屏障改善胆汁淤积肝病的研究

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南京中医药大学学报 2024年第4期40卷 350-358页

作者：罗欣成鹏陆茵韦忠红南京中医药大学药学院江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023 江苏省中医药与再生医学研究国际合作联合实验室江苏南京210023

目的基于胆汁酸代谢和肠道屏障探讨丁香酸对胆汁淤积小鼠的调控作用。方法20只小鼠随机分为对照组、模型组和丁香酸低、高剂量(70、140 mg·kg^(-1))组。连续7 d灌胃给予相应药物,于第5天给药2 h后腹腔注射α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导肝... 详细信息

目的基于胆汁酸代谢和肠道屏障探讨丁香酸对胆汁淤积小鼠的调控作用。方法20只小鼠随机分为对照组、模型组和丁香酸低、高剂量(70、140 mg·kg^(-1))组。连续7 d灌胃给予相应药物,于第5天给药2 h后腹腔注射α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导肝内胆汁淤积小鼠模型。末次给药后,记录小鼠体质量及肝质量变化;检测小鼠血清中肝功能指标、组织病理学变化,qPCR验证小鼠结肠组织中紧密连接蛋白闭锁小带蛋白-1(zo-1)、闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-5(Claudin-5)mRNA的表达,采用非靶向代谢组学分析血清中代谢产物的变化,检测肝脏和粪便中总胆汁酸变化。结果丁香酸可以显著降低模型组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性和总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)水平(Pzo-1、Occludin、Claudin-5的mRNA表达水平(P<0.05);显著上调11个代谢物,下调29个代谢物,代谢产物主要涉及次生代谢物的生物合成、次级胆汁酸生物合成和胆汁分泌通路。丁香酸降低肝脏中总胆汁酸含量及增加粪便总胆汁酸的排出(P<0.05,P<0.01)。结论丁香酸可以显著改善胆汁淤积小鼠肠道屏障的受损,并且促进胆汁酸的代谢,这可能是丁香酸改善胆汁淤积的关键调控环节。

关键词：丁香酸胆汁淤积肝损伤肠道屏障胆汁酸代谢

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探讨“天麻-红景天”药对调控TNF-α/NF-κB保护低灌注-脑小血管病模型小鼠内皮细胞屏障的作用机制

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北京中医药大学学报 2024年第5期47卷 611-624页

作者：张影程宏发刘时祺张雅文张秋霞首都医科大学中医药学院中医临床基础学学系北京100069 中医络病研究北京市重点实验室首都医科大学基础医学院

目的探讨“天麻-红景天”药对通过调控肿瘤坏死因子-α(TNF-α)/核因子κB(NF-κB),保护低灌注-脑小血管病小鼠内皮细胞屏障的作用机制。方法将70只雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组、天麻-红景天1~3组(天麻与红景天质量比分别为1... 详细信息

目的探讨“天麻-红景天”药对通过调控肿瘤坏死因子-α(TNF-α)/核因子κB(NF-κB),保护低灌注-脑小血管病小鼠内皮细胞屏障的作用机制。方法将70只雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组、天麻-红景天1~3组(天麻与红景天质量比分别为1∶1、2∶1、1∶2),每组14只。采用单侧颈总动脉闭塞法制备脑小血管病小鼠模型。术后6 h灌胃1次,之后每24 h灌胃1次,天麻-红景天1~3组小鼠给药剂量分别为1.30、1.95、1.95 g/(kg·d),假手术组、模型组小鼠灌胃等体积生理盐水。在实验第3天(急性期)、第7天(亚急性期)进行脑血流量和行为学检测后取材。激光散斑衬比成像观察脑血流量的变化;步态分析仪评价运动协调能力;HE染色观察脑组织病理形态学变化;蛋白质印迹法检测白蛋白的表达水平;免疫荧光法和蛋白质印迹法检测咬合蛋白(Occludin)和闭锁连接蛋白-1(zo-1)的表达水平;实时荧光PCR和蛋白质印迹法检测TNF-α、NF-κB、白细胞介素-β(IL-β)、白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。结果与假手术组比较,第3、7天模型组小鼠脑血流量降低(Pzo-1蛋白表达水平下降(Pzo-1蛋白表达水平升高(P<0.05);TNF-α、NF-κB、IL-β、IL-6的mRNA及蛋白表达降低(P<0.05)。其中,天麻-红景天2组在第3天综合疗效较好,天麻-红景天3组在第7天综合疗效更佳。结论 “天麻-红景天”药对能提高低灌注-脑小血管病小鼠脑血流量,改善步态异常,减轻脑组织病理损伤,保护内皮细胞屏障的功能和结构,其机制可能与降低炎症因子表达有关。

关键词：天麻红景天脑小血管病内皮细胞屏障小鼠

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乳酸菌与益生元组合的筛选并利用IPEC-J2细胞模型验证其对肠道屏障的作用

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动物营养学报 2024年第7期36卷 4693-4705页

作者：荆学毅禹爱兵程雨菲高杨姜南洪亮天津市现代天骄农业科技有限公司天津市绿色生态饲料重点实验室天津301800 天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392 西藏自治区畜牧兽医研究所拉萨850000

为开发改善动物肠道健康的绿色添加剂产品,本研究旨在筛选乳酸菌与益生元组合,并探究其对肠道屏障的影响。首先,根据碳水化合物生化鉴定试剂条的发酵结果确定5种乳酸菌[植物乳杆菌177(LP)、唾液乳杆菌KLW001(LSa)和罗伊氏乳杆菌(LRe)、... 详细信息

为开发改善动物肠道健康的绿色添加剂产品,本研究旨在筛选乳酸菌与益生元组合,并探究其对肠道屏障的影响。首先,根据碳水化合物生化鉴定试剂条的发酵结果确定5种乳酸菌[植物乳杆菌177(LP)、唾液乳杆菌KLW001(LSa)和罗伊氏乳杆菌(LRe)、类干酪乳杆菌(LPa)和鼠李糖乳杆菌(LRh)]对应的候选益生元;其次,根据5种乳酸菌和候选益生元[山梨醇(So)、甘露醇(Ma)、鼠李糖(Rh)、低聚木糖(Xyo)、海藻糖(Tr)、棉子糖(Ra)和普鲁兰多糖(Pu)]的短链脂肪酸(SCFA)发酵能力选择合生元组合,将筛选得到的3种合生元组合(LP+Pu、LSa+Pu、LRe+Ra)通过脂多糖(LPS)构建的“肠漏”细胞模型,以测定单层细胞渗透率、跨上皮细胞电阻(TEER)值的变化、肠道紧密连接蛋白[跨膜蛋白-1(Claudin-1)、闭合蛋白(Occludin)和闭锁小带蛋白-1(zo-1)]的表达,验证合生元对肠道屏障的作用效果。结果表明:LP+Pu组合能发酵产生更多的SCFA,特别是能增加丁酸含量;“肠漏”细胞模型结果表明,LP+Pu组合上调了Claudin-1和zo-1的mRNA相对表达量,维持了细胞上皮完整性。综上所述,LP+Pu组合可以作为增加SCFA产量、增加肠道紧密连接蛋白表达的合生元,为今后治疗及预防畜禽肠道屏障相关疾病提供新思路。

关键词：乳酸菌合生元短链脂肪酸肠道屏障 IPEC-J2细胞系

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流体剪切力调控血脑屏障的力学生物学机制研究

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四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 74-80页

作者：杜聆语许博闻程琳岳红燕张怀奕沈阳四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041

目的血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)主要由脑微血管内皮细胞组成。本研究以大鼠脑微血管内皮细胞(rat brain microvascular endothelial cells,rBMECs)为模式细胞,探索正常生理、缺血低灌注和术后高灌注条件下的流体剪切力(flow she... 详细信息

目的血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)主要由脑微血管内皮细胞组成。本研究以大鼠脑微血管内皮细胞(rat brain microvascular endothelial cells,rBMECs)为模式细胞,探索正常生理、缺血低灌注和术后高灌注条件下的流体剪切力(flow shear force,FSF)对BBB结构功能的保护、损伤和破坏的力学生物学机制。方法以1×10^(5)细胞/cm^(2)的密度接种rBMECs培养48 h,对rBMECs分别施加0.5、2和20 dyn/cm2的FSF,模拟脑血管狭窄的低灌注、正常生理和搭桥术后高剪切力作用下BBB结构的受力情况;同时设置静态培养组rBMECs作为对照(不施加力)。光学显微镜、扫描电子显微镜(SEM)以及激光共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞形态和骨架的变化。透射电子显微镜(TEM)观察细胞紧密连接,免疫荧光染色检测紧密连接相关蛋白(claudin-5、occludin、zo-1)、黏着连接相关蛋白(VE-cadherin、PECAM-1)分布的变化。Western blot检测不同强度FSF下紧密连接相关蛋白(claudin-5、zo-1、JAM4),黏着连接相关蛋白(VE-cadherin)和Rho GTPases信号关键蛋白(Rac1、Cdc42、RhoA)的表达。结果镜下观察发现:静态培养和低剪切作用(0.5 dyn/cm2)下细胞骨架排列紊乱,取向无规律;正常生理剪切作用(2 dyn/cm^(2))下,细胞骨架顺应FSF方向重排,胞间观察到有效的紧密连接结构;高剪切作用(20 dyn/cm^(2))下,细胞间间隙增大,未观察到有效的紧密连接结构。免疫荧光染色发现低剪切作用时,细胞间距减小,但胞间连接处紧密连接相关蛋白和黏着连接相关蛋白分布较少;正常生理条件下细胞连接紧密,大部分紧密连接相关蛋白的分布集中在胞间连接处;高剪切作用时,胞间距离显著增大,连接紧密和黏着连接的结构被破坏。Western blot结果发现:低剪切作用下,claudin-5、zo-1和VE-cadherin与对照组相比均上调(Pzo-1、JAM4以及VE-cadherin与对照组相比均呈现高表达(Pzo-1、JAM4以及VEcadherin的表达与正常生理剪切作用组比较下调(P<0.05);生理条件下胞内的Rho GTPases(Rac1、Cdc42、RhoA)表达上调,高于其他实验组(P<0.05),而低剪切和高剪切作用下的Rho GTPases表达均较正常生理剪切作用组下调(P<0.05)。结论正常生理条件下的FSF有助于维持BBB结构的完整性,而低剪切或高剪切均会损伤或破坏血脑屏障的结构,FSF对BBB的调控与紧密连接相关蛋白和黏着连接相关蛋白的表达和分布密切相关。

关键词：血脑屏障流体剪切力大鼠脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白黏着连接相关蛋白

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不同钙离子浓度可通过内质网应激影响人腹膜间皮细胞上皮间质转化

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中华危重病急救医学 2024年第1期36卷 50-55页

作者：郭宝珠程锦绣靳鑫贺玉桃孙羡敏河北北方学院附属第一医院肾内科河北张家口075000

目的探讨不同钙离子浓度通过内质网应激(ERS)对人腹膜间皮细胞(HPMC)上皮间质转化(EMT)的影响。方法体外培养HPMC细胞株HMrSV5并分组处理,对照组、高钙1组、高钙2组分别用含1.25、1.75、2.25 mmol/L钙离子浓度的培养基处理,溶剂对照组用... 详细信息

目的探讨不同钙离子浓度通过内质网应激(ERS)对人腹膜间皮细胞(HPMC)上皮间质转化(EMT)的影响。方法体外培养HPMC细胞株HMrSV5并分组处理,对照组、高钙1组、高钙2组分别用含1.25、1.75、2.25 mmol/L钙离子浓度的培养基处理,溶剂对照组用含1.25 mmol/L生理钙离子浓度及0.1%二甲基亚砜(DMSO)的培养基处理,高钙+溶剂组用含2.25 mmol/L钙离子浓度及0.1%DMSO的培养基处理,高钙+4-苯基丁酸(4-PBA)组用含2.25 mmol/L钙离子浓度及1 mmol/L ERS抑制剂4-PBA的培养基处理。各组处理48 h后,光镜下观察细胞形态学变化;采用免疫荧光染色观察细胞中上皮细胞表型标志蛋白紧密连接蛋白-1(zo-1)和间质细胞表型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞中EMT标志基因E-钙黏蛋白(E-cadherin)、zo-1、α-SMA和波形蛋白(Vimentin)的表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测细胞中ERS标志蛋白磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、磷酸化真核翻译起始因子2α(p-eIF2α)、转录激活因子4(ATF4)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达。结果与对照组比较,高钙1组和高钙2组HMrSV5细胞变细长、呈纤维化样改变,zo-1的荧光强度增加、α-SMA的荧光强度减弱,提示细胞从上皮细胞向间质细胞转化;细胞中E-cadherin、zo-1的mRNA表达明显降低,α-SMA、Vimentin的mRNA表达及p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP的蛋白表达明显升高,且高钙2组上述标志基因或蛋白表达较高钙1组变化更明显〔E-cadherin mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.53±0.05比0.75±0.09,zo-1 mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.42±0.06比0.69±0.06,α-SMA mRNA(2^(-ΔΔCt)):1.81±0.16比1.32±0.14,Vimentin mRNA(2^(-ΔΔCt)):2.05±0.22比1.48±0.16,p-PERK蛋白(p-PERK/β-actin):0.81±0.09比0.59±0.06,p-eIF2α蛋白(p-eIF2α/β-actin):0.87±0.10比0.50±0.06,ATF4蛋白(ATF4/β-actin):0.93±0.10比0.72±0.06,CHOP蛋白(CHOP/β-actin):0.79±0.09比0.46±0.04,均Pzo-1的荧光强度增加、α-SMA的荧光强度减弱,细胞中E-cadherin、zo-1的mRNA表达明显增加〔E-cadherin mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.86±0.09比0.57±0.04,zo-1 mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.81±0.06比0.48±0.05,均P<0.05〕,α-SMA、Vimentin的mRNA表达及p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP的蛋白表达明显降低〔α-SMA mRNA(2^(-ΔΔCt)):1.21±0.13比1.77±0.15,Vimentin mRNA(2^(-ΔΔCt)):1.30±0.14比1.94±0.20,p-PERK蛋白(p-PERK/β-actin):0.38±0.04比0.92±0.11,p-eIF2α蛋白(p-eIF2α/β-actin):0.34±0.05比1.05±0.13,ATF4蛋白(ATF4/β-actin):0.57±0.06比0.97±0.11,CHOP蛋白(CHOP/β-actin):0.51±0.04比0.90±0.12,均P<0.05〕。结论1.75 mmol/L和2.25 mmol/L的高钙离子浓度可通过激活ERS的方式促进HPMC发生EMT。

关键词：腹膜透析腹膜纤维化人腹膜间皮细胞上皮间质转化钙离子浓度内质网应激

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新肾病1号方调控miR-199b-5p抑制肾小管上皮间充质转化改善肾纤维化的作用研究

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中草药 2024年第5期55卷 1600-1608页

作者：曾聪聪俞文秀王成功姜程曦程锦国温州医科大学附属第一医院中医科浙江温州325000 温州医科大学浙江温州325000 温州医科大学药学院浙江温州325000

目的研究miR-199b-5p在新肾病1号方抗肾纤维化中的作用。方法36只大鼠随机分为假手术组、模型组及新肾病1号方低、中、高剂量(9.69、19.38、38.76 g/kg)组和氯沙坦(50 mg/kg)组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左侧单侧输尿管梗阻... 详细信息

目的研究miR-199b-5p在新肾病1号方抗肾纤维化中的作用。方法36只大鼠随机分为假手术组、模型组及新肾病1号方低、中、高剂量(9.69、19.38、38.76 g/kg)组和氯沙坦(50 mg/kg)组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左侧单侧输尿管梗阻方法建立大鼠肾纤维化模型,给予药物干预14 d后,检测各组大鼠肾功能;苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察肾脏组织病理变化;对假手术组、模型组和新肾病1号方高剂量组大鼠肾脏组织进行miRNA测序,筛选差异表达miRNAs,qRT-PCR验证,并进行靶基因的基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,生物信息学分析miRNAs与上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、肾纤维化的关联性。免疫荧光法和Western blotting检测肾组织EMT相关蛋白表达情况。结果与模型组比较,新肾病1号方组大鼠血清肌酐(serum creatinine,SCr)和血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平均明显降低(Pzonula occludens1,zo-1)表达上调(P<0.05)。结论新肾病1号方可能通过下调miR-199b-5p表达,抑制EMT,从而发挥抗肾纤维化的作用。

关键词：新肾病1号方上皮间充质转化肾纤维化 RNA测序 miR-199b-5p 柴胡皂苷黄芪甲苷盐酸小檗碱

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