检索结果-南通市图书馆

Phage display library based antiviral screening: porcine respiratory and reproductive syndrome virus endoribonuclease is a targetfor antiviral screening

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Phage display library based antiviral screening: porcine res...

第十三届中国实验动物科学年会

作者： Zhou Jie Hu Jianhua shi zixue Tao Lingyun Gao Cheng Shanghai Laboratory Animal Research Center

Viral endoribonuclease plays a vital role in the physiological and biochemical activities of viral RNA. In our studies on PRRSV, we seek to screen candidate antiviral molecules that target this endoribonuclease. Through 5 rounds of phage-display screening of 12-ammino acid peptides, 4 peptides that show high affinity to the viral endoribonuclease were identified. In vitro experiments showed very high antiviral activity of all these 4 peptides. Wherein, the E4 peptide(NIPIKPRPRLMK) showed the highest antiviral activity(IC50 = 39.21μM), yet the lowest cytotoxicity. E4 can directly bind to the endoribonuclease of PRRSV(NSP11) and reduce copy number of viral RNA by 23.68 folds. Through large-scale phage-display screening and following in vitro analysis, we proved that viral endoribonuclease is a potential target of antiviral drugs.

关键词： Viral endoribonuclease phage display library porcine reproductive and respiratory syndrome virus antiviral screening antiviral peptide

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

H3N2型猪流感病毒M2蛋白表达分析

生物工程学报 2010年第1期26卷 16-21页

作者：王晓杜陈培君沈阳邱亚峰邓绪芳史子学彭丽娜罗金燕刘超马志永中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

流感病毒的M2蛋白在流感病毒复制中起着重要作用,是抗流感病毒的靶标分子。本研究以提取的病毒基因组RNA作为模板,RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒M2基因,分别构建了重组原核表达载体和重组真核表达载体,建立了M2蛋白的原核和真核表达系... 详细信息

流感病毒的M2蛋白在流感病毒复制中起着重要作用,是抗流感病毒的靶标分子。本研究以提取的病毒基因组RNA作为模板,RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒M2基因,分别构建了重组原核表达载体和重组真核表达载体,建立了M2蛋白的原核和真核表达系统。通过大肠杆菌表达系统,制备了M2重组蛋白,并免疫大鼠制备了多克隆抗体。Western blotting和间接免疫荧光方法检测表明所制备的抗体能识别真核表达的M2蛋白和病毒感染细胞后表达M2蛋白,具有良好的特异性。重组M2真核表达载体转染Vero细胞,表达的重组M2蛋白大小为20kDa,定位于细胞浆中,与病毒感染细胞中的M2蛋白定位相同。Western blotting检测表明M2蛋白在病毒感染细胞12h后才能检出,晚于NS1、NP和M1,属于病毒复制的晚期蛋白,可作为病毒复制晚期的指示分子。本研究为弄清M2蛋白在病毒复制过程中的生物学功能奠定了基础。

关键词： H3N2 猪流感病毒 M2蛋白多克隆抗体

EBOV-Z和MARV的NP基因在杆状病毒表达系统的表达及反应原性鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术通报 2012年第9期28卷 104-108页

作者：王宗尧史子学刘阳朱紫祥吴德峰王水明刘学辉马志永中国农业科学院上海兽医研究所、兽医公共卫生研究室上海200241 福建农林大学动物科学学院福州350002 南京出入境检验检疫局南京211136

利用昆虫杆状病毒表达系统,成功地对埃博拉(EBOV)扎伊尔型病毒和马尔堡病毒(MARV)的NP基因进行表达。Western blot结果显示,重组EBOV蛋白和重组MARV-NP与各自阳性血清有特异的反应原性,在血清学上无交叉反应。IFA检测感染重组昆虫杆状... 详细信息

利用昆虫杆状病毒表达系统,成功地对埃博拉(EBOV)扎伊尔型病毒和马尔堡病毒(MARV)的NP基因进行表达。Western blot结果显示,重组EBOV蛋白和重组MARV-NP与各自阳性血清有特异的反应原性,在血清学上无交叉反应。IFA检测感染重组昆虫杆状病毒的Sf9细胞表明,EBOV和MARV NP获得大量表达,呈现强烈的荧光,对照组细胞无特异荧光。该研究为EBOV和MARV流行病学调查和研制诊断试剂盒奠定了基础。

关键词：丝状病毒埃博拉病毒马尔堡病毒 NP 杆状病毒表达反应原性

氧化苦参碱下调免疫细胞TLR7 mRNA的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术通报 2011年第11期27卷 150-153,159页

作者：高小琪彭丽娜李力邱亚峰繆剑华徐永莉史子学邵东华魏建超马志永中国农业科学院上海兽医研究所公共卫生研究室上海200241 广西壮族自治区药用植物园南宁530023

为了探讨氧化苦参碱对免疫细胞Toll-like receptor 7(TLR7)mRNA表达的影响,使用CCK-8试剂盒检测氧化苦参碱对RAW264.7细胞的生长抑制作用。应用荧光定量PCR方法检测氧化苦参碱对RAW264.7细胞TLR7 mRNA及其下游因子TNF-αmRNA表达的影响... 详细信息

为了探讨氧化苦参碱对免疫细胞Toll-like receptor 7(TLR7)mRNA表达的影响,使用CCK-8试剂盒检测氧化苦参碱对RAW264.7细胞的生长抑制作用。应用荧光定量PCR方法检测氧化苦参碱对RAW264.7细胞TLR7 mRNA及其下游因子TNF-αmRNA表达的影响;检测氧化苦参碱对小鼠脾脏淋巴细胞TLR7 mRNA及其下游因子MyD88、TRAF-6 mRNA表达的影响。结果显示,氧化苦参碱对RAW264.7细胞的半数抑制率为5.9 mg/mL。氧化苦参碱下调RAW264.7细胞TLR7、TNF-αmRNA表达;下调小鼠脾脏淋巴细胞TLR7、MyD88、TRAF-6 mRNA表达。由此得出,氧化苦参碱可下调免疫细胞TLR7mRNA的表达。

关键词：氧化苦参碱 TLR7免疫细胞荧光定量PCR

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠TOll样受体3基因的克隆及真核表达

生物技术通报 2011年第6期27卷 94-98页

作者：彭丽娜李力邱亚峰缪剑华王晓杜徐永莉史子学邵东华魏建超马志永中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 广西壮族自治区药用植物园南宁530023

采用RT-PCR方法从小鼠巨噬细胞中克隆小鼠Toll样受体3(TLR3)基因,基因测序表明获得了小鼠全长TLR3cDNA,构建了真核表达质粒p3XFLAG-CMV-7.1-TLR3。重组质粒转染293T细胞,Western blotting检测蛋白表达,表达蛋白质的相对分子量与预计相... 详细信息

采用RT-PCR方法从小鼠巨噬细胞中克隆小鼠Toll样受体3(TLR3)基因,基因测序表明获得了小鼠全长TLR3cDNA,构建了真核表达质粒p3XFLAG-CMV-7.1-TLR3。重组质粒转染293T细胞,Western blotting检测蛋白表达,表达蛋白质的相对分子量与预计相符。采用TLR3的阳性刺激物poly(I:C)刺激重组质粒转染的293T细胞,双荧光素酶报告基因系统检测发现能激活下游转录因子NF-κB的转录活性,并能诱导TLR3下游细胞因子IL-6和TNF-α的表达。小鼠TLR3基因的克隆和表达,为研究TLR3介导的信号通路及其在抗病毒免疫中的作用打下基础。

关键词： TLR3 NF-κB 基因表达信号转导

The non-structural（NS1） protein of influenza A virus associates with p53 and inhibits p53-mediated transcriptional activity and apoptosis

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

The non-structural（NS1） protein of influenza A virus assoc...

中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会

作者： Xiaodu Wang~1 Yang Shen~1 Yafeng Qiu~(1,2) zixue shi~1 Donghua Shao~(1,2) Peijun Chen~1 Guangzhi Tong~1 and Zhiyong Ma ~(1,2*) 1 Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Science,No.518,Ziyue Road,Shanghai,200241, PR China 2 Animal-borne Food Safety Research Center,Chinese Academy of Agricultural Science,No.518,Ziyue Road, Shanghai,200241,PR China)

＜正＞NS1 protein of influenza A virus is involved in regulating the apoptosis of infected *** found that exogenously expressed NS1 was able to associate with the tumor suppressor p53 that plays an essential role in regulating apoptosis of influenza A virus-infected *** expression of NS1 resulted in inhibition of p53-mediated transcriptional activity and *** p53 inhibitory domain of NS1 was located between amino acids 144 and *** domain is necessary for NS1 to inhibit p53 activity,but it requires additional region（s） to cooperatively exert this inhibitory function.

关键词： influenza A virus NS1 p53 apoptosis

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

狂犬病病毒中和抗体ELISA技术的建立

中国动物检疫 2011年第1期28卷 48-51页

作者：罗金燕王水明李向东沈阳邱亚峰史子学丁铲艾峰刘学辉张帆刘佩红马志永中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 南京出入境检验检疫局江苏南京210001 上海动物疫病预防控制中心上海201103

将狂犬病病毒(RV)糖蛋白(G蛋白)中和抗原表位串联表达的重组蛋白作为抗原,建立了检测RV中和抗体的间接ELISA技术。结果表明,最佳抗原包被量为2μg/孔,被检血清最佳稀释倍数为1:200。该方法与快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的阳性符合率为88%... 详细信息

将狂犬病病毒(RV)糖蛋白(G蛋白)中和抗原表位串联表达的重组蛋白作为抗原,建立了检测RV中和抗体的间接ELISA技术。结果表明,最佳抗原包被量为2μg/孔,被检血清最佳稀释倍数为1:200。该方法与快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的阳性符合率为88%,阴性符合率为96%。特异性试验表明,该抗原不与犬腺病毒I型、犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬副流感病毒和犬冠状病毒阳性血清发生交叉反应,具有良好的特异性。板内和板间重复性试验的平均变异系数分别为2.7%和4.2%,具有良好的重复性,为动物RV中和抗体检测提供了简单快捷的检测方法。

关键词：狂犬病病毒 G蛋白中和抗体间接ELISA