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类风湿关节炎患者外周血CD4＋T和CD8＋T细胞TIGIT的表达和意义

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中华微生物学和免疫学杂志 2017年第5期37卷 325-332页

作者：黄自坤李雪邓桢罗忠勤鞠北华罗清南昌大学第一附属医院检验科 330006

目的探讨含T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白（T cell immunoreceptor with Ig and immunoreceptor tyrosine-based inhibitory domains, TIGIT）在类风湿关节炎（RA）患者外周血CD4＋T和CD8＋T细胞上的表达及临床意义,以阐明其在RA发生和发展中的作用.方法应用流式细胞仪检测81例RA患者和33例健康对照者外周血各白细胞表面TIGIT表达水平,比较RA组和健康对照组之间各白细胞表面TIGIT表达水平,并分析CD4＋T、CD8＋T细胞TIGIT表达与实验室检查数据的相关性.两组间比较采用t检验或者非参数检验,两变量之间相关性采用Pearson或Spearman相关分析.结果（1） RA组CD3＋T细胞TIGIT表达百分率高于对照组（P〈0.01）,RA组CD3＋T细胞TIGIT表达平均荧光强度（MFI）高于对照组（P〈0.01）,而在B细胞、单核细胞和中性粒细胞上表达的TIGIT无差异.（2）RA组CD4＋T和CD8＋T细胞TIGIT表达百分率显著高于健康对照组（P〈0.01）,RA组CD4＋T和CD8＋T细胞TIGIT表达MFI显著高于健康对照组（P〈0.01）.（3） RA患者外周血CD4＋T细胞TIGIT表达百分率与红细胞沉降率（ESR）呈正相关（rs=0.355, P〈0.01）;RA患者外周血CD8＋T细胞TIGIT表达百分率与ESR呈正相关（rs=0.277, P=0.013）.（4）RA患者外周血CD4＋T细胞TIGIT表达百分率与类风湿因子（RF）呈正相关（rs=0.265, P=0.017）;RA患者外周血CD4＋T细胞TIGIT表达MFI与RF呈正相关（rs=0.226, P=0.043）;RA患者外周血CD8＋T细胞TIGIT表达百分率与RF呈正相关（rs=0.366, P〈0.01）;抗CCP抗体阳性RA患者外周血CD4＋T细胞TIGIT表达百分率与抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体呈正相关（rs=0.324, P=0.012）.（5） RA患者外周血CD4＋T细胞TIGIT表达百分率与RA疾病活动性评分（DAS28）呈正相关（r=0.232, P=0.038）;RA患者外周血CD4＋T细胞TIGIT表达MFI与DAS28呈正相关（r=0.343, P〈0.01）.结论 RA患者外周血T细胞TIGIT表达异常,与炎症水平、自身抗体产生和疾病活动性有明确的相关性.

关键词：类风湿关节炎 CD4+T细胞 CD8+T细胞

方阵倾角变化对基站供电系统低碳经济性的影响分析

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电气应用 2023年第7期42卷 9-17页

作者：王文柯杨晓辉辛利军臧紫坤邓晓峰邓福伟中国电建集团江西省水电工程局有限公司江西南昌330000 南昌大学信息工程学院江西南昌330000

为分析倾角变化对固定式基站光伏供电系统低碳经济的影响,首先对各向同性、各向异性及Klein和Theilacker(KT)提出的三种斜面辐射计算模型得到的总辐射值与真实值进行欧氏距离(ED)分析,再通过对比得出最合适的理论研究模型。利用电站输... 详细信息

为分析倾角变化对固定式基站光伏供电系统低碳经济的影响,首先对各向同性、各向异性及Klein和Theilacker(KT)提出的三种斜面辐射计算模型得到的总辐射值与真实值进行欧氏距离(ED)分析,再通过对比得出最合适的理论研究模型。利用电站输出功率模型建立系统减排及发电收益计算模型,提出蓄电池均衡充放电系数计算蓄电池损失成本,通过模型计算倾角变化时基站供电系统减排量、发电收益以及损失成本的对应值。最后,利用Visio画出变化曲线图,从平衡系统经济性与低碳性的角度确定最佳倾角的取值范围。以广州、敦煌为例,广州地区各向同性、各向异性与KT三种模型的ED分别为242.90、181.66和135.65,而敦煌地区为295.50、156.21、213.48。广州、敦煌两地最佳倾角取值范围分别为20°~50°和40°~50°。

关键词：光伏发电通信基站方阵倾角均衡系数低碳经济

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长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1在结核感染中的表达及意义

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中华微生物学和免疫学杂志 2016年第11期36卷 824-830页

作者：黄自坤姚芳苡罗清邓桢彭亦平呙阳李俊明南昌大学第一附属医院检验科 330006 江西省血液中心检验科南昌330006 江西省胸科医院内三科南昌330006

目的：探讨长链非编码RNA（lncRNA）肺腺癌转移相关转录本1（MALAT1）在结核感染中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR（ RT-PCR）技术检测75例肺结核病患者（结核组）及32例健康体检者（健康对照组）外周血单个核细胞（ PBM... 详细信息

目的：探讨长链非编码RNA（lncRNA）肺腺癌转移相关转录本1（MALAT1）在结核感染中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR（ RT-PCR）技术检测75例肺结核病患者（结核组）及32例健康体检者（健康对照组）外周血单个核细胞（ PBMC）中MALAT1的表达量,分析其与结核病发生发展以及转归的相关性。采用RT-PCR技术检测感染结核分枝杆菌（ Mycobacterium tuberculosis,Mtb）的人巨噬细胞（THP-1）中MALAT1的差异表达；用小干扰RNA诱导THP-1细胞中MALAT1沉默,检测Mtb感染后炎症因子TNF-α、IL-6的表达及THP-1细胞对Mtb杀菌功能的变化。结果 RT-PCR检测结果显示 MALAT1在肺结核患者 PBMC 中的相对表达水平是健康对照组的（4.05＆#177;0.86）倍,差异有统计学意义（P〈0.01）。 MALAT1在初治和复治肺结核病例中表达差异无统计学意义（P〉0.05）；MALAT1随结核病患者肺部空洞累及范围的增加而升高。肺结核患者PBMC中MALAT1表达量随着治疗时间逐渐下降,恢复至正常水平。 THP-1细胞感染Mtb后MALAT1表达显著上调（P〈0.01）；沉默MALAT1的THP-1细胞感染Mtb后TNF-α和IL-6水平显著升高（P〈0.01）。以Mtb感染后0 h时间点的细胞内荷菌量为基准,Mtb感染后72 h时沉默MALAT1的THP-1细胞内Mtb的存活率显著低于对照感染组（P〈0.01）。结论 MALAT1在结核感染过程中表达升高,且与结核的发展和转归有关。下调MALAT1表达可增强巨噬细胞对胞内Mtb的清除能力。

关键词：结核病长链非编码RNA 肺腺癌转移相关转录本1 巨噬细胞

兴趣点、夜光遥感和微博签到的空间耦合分析——以北京市为例

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遥感信息 2019年第6期34卷 18-26页

作者：王毓乾王紫锟邓志杰程朋根李岳东华理工大学江西省数字国土重点实验室南昌330013 东华理工大学测绘工程学院南昌330013 中国地质大学(武汉)地理与信息工程学院武汉430078

针对POI(兴趣点)、夜光遥感和微博签到数据的空间耦合关系与联合应用在城市空间结构研究中缺乏的现状,选取2016年的以上3种数据对北京市空间分布进行耦合研究。通过核密度分析与叠加分析对3种数据进行网格化,之后利用双因素制图法对3种... 详细信息

针对POI(兴趣点)、夜光遥感和微博签到数据的空间耦合关系与联合应用在城市空间结构研究中缺乏的现状,选取2016年的以上3种数据对北京市空间分布进行耦合研究。通过核密度分析与叠加分析对3种数据进行网格化,之后利用双因素制图法对3种数据两两之间的空间耦合关系可视化,得到3组数据空间耦合相同及相异区域,并进一步比较其与城市空间结构的联系。研究表明,3种数据在北京市的空间分布高度一致,都呈现出空间高耦合状态;夜光亮度和POI在机场、景区等大范围同质化区域存在一些耦合相异区;夜光亮度和微博签到在有工厂或夜间行车等情况的区域也有耦合相异的情况,其分布与老龄化比重分布有相似性;POI高于微博签到的地区正是表现出北京城市化高度完善的区域已经出现了基础建设POI供大于求的情况。本研究表明将3种数据结合分析,可以有效地体现城市空间结构。

关键词： NPP/VIIRS POI 微博签到数据城市空间结构耦合关系

血清长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1在肺结核中的诊断价值

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中华传染病杂志 2017年第11期35卷 684-687页

作者：罗清姚芳苡彭亦平苏日古邓桢黄自坤南昌大学第一附属医院检验科 330006 江西省血液中心检验科姚芳江西省胸科医院内三科

目的检测肺结核患者血清中长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）肺腺癌转移相关转录本1（metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1, MALAT1）的表达水平，探讨其在肺结核诊断中的应用价值。方法肺结核患者56... 详细信息

目的检测肺结核患者血清中长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）肺腺癌转移相关转录本1（metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1, MALAT1）的表达水平，探讨其在肺结核诊断中的应用价值。方法肺结核患者56例、结核潜伏感染者35例及健康对照者40名，采用实时荧光定量PCR检测其血清中MALAT1的表达水平。对16例接受抗结核治疗的肺结核患者治疗前及治疗后3、6个月血清MALAT1水平进行动态监测。应用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic, ROC）分析MALAT1诊断肺结核的敏感度和特异度。两组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析。结果肺结核患者血清MALAT1表达水平为2.10±1.05，显著高于结核潜伏感染者的1.16±0.51和健康对照者的1.02±0.44，差异有统计学意义（F＝28.53，P〈0.01）。痰涂片抗酸阳性的肺结核患者血清MALAT1表达显著高于抗酸阴性的肺结核患者，差异有统计学意义（2.42±1.03比1.43±0.74，t＝2.66，P〈0.01）。与治疗前（2.28±0.79）相比，肺结核患者血清MALAT1表达水平在抗结核治疗后3个月（1.35±0.39）及6个月（1.05±0.30）均显著降低，差异有统计学意义（t值分别为4.33、6.05，P〈0.01）。血清MALAT1诊断肺结核的ROC下面积（area under of ROC curve, AUC）为0.821，敏感度和特异度分别为0.732和0.850。结论肺结核患者血清MALAT1表达水平明显升高，MALAT1有望作为肺结核诊断的潜在生物标志物。

关键词：结核长链非编码RNA MALAT1 标志物

慢病毒介导的 TACO-shRNA 通过促进吞噬体与溶酶体融合提高巨噬细胞清除结核分枝杆菌的能力

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中华微生物学和免疫学杂志 2015年第10期35卷 735-740页

作者：陈洁呙阳邓亚婷江红黄自坤罗清叶建青李俊明南昌大学第一附属医院检验科 330006

目的构建以富含色氨酸天冬氨酸膜蛋白（ TACO）基因为靶点的短发夹状RNA（ shRNA）表达慢病毒载体,鉴定其下调TACO表达的效果,以及对巨噬细胞吞噬和杀伤胞内结核分枝杆菌（ ***）的影响及相关机制. 方法设计3条靶向小鼠TACO基因的shRN... 详细信息

目的构建以富含色氨酸天冬氨酸膜蛋白（ TACO）基因为靶点的短发夹状RNA（ shRNA）表达慢病毒载体,鉴定其下调TACO表达的效果,以及对巨噬细胞吞噬和杀伤胞内结核分枝杆菌（ ***）的影响及相关机制. 方法设计3条靶向小鼠TACO基因的shRNA表达片段及1条随机序列对照片段,插入慢病毒表达载体pSicoR 后利用293 T细胞进行病毒包装. 采用包装成功的慢病毒颗粒感染RAW264 .7细胞,分别采用real-time RT-PCR和Western blot方法鉴定干扰效果. 选择沉默效果最佳的重组慢病毒感染RAW264.7细胞,48 h后再采用***对这些巨噬细胞进行感染,倍比稀释培养法进行细胞内荷菌量的检测,免疫荧光结合激光共聚焦显微镜检测巨噬细胞内***与溶酶体的共定位情况,cyto-ID细胞自噬检测试剂盒检测各组细胞的自噬水平,Western blot法检测自噬相关蛋白LC3的表达水平.结果测序结果证实重组慢病毒表达载体均构建成功. 靶向TACO基因的3种重组慢病毒均可下调RAW264 .7细胞中TACO的表达,其中LV-pSRT1的效果最佳. LV-pSRT1感染组RAW264 .7细胞内的荷菌量在感染后0 h时即显著低于对照慢病毒（LV-pSRTc）感染组（5.50×104 vs 8.1×104, P〈0.05）. 以***感染后0 h时间点的细胞内荷菌量为基准,***感染后48 h和72 h时LV-pSRT1感染组RAW264.7细胞内*** 的存活率显著低于对照慢病毒感染组（48 h： 134.54% vs 213.58%, P〈0.05; 72 h：148.18%vs 262.96%, P〈0.05）. 与对照慢病毒感染组比较,LV-pSRT1感染组RAW264.7细胞内***与溶酶体的共定位率显著上调（75.67%vs 10.66%, P〈0.05）,同时细胞的自噬水平显著上调（16.20%vs 8.50%, P〈0.05）,LC3Ⅱ的相对表达水平也显著提高（0.51 vs 0.34, P〈0.05）. 结论 TACO基因特异性RNAi慢病毒表达载体可有效抑制RAW264.7细胞中TACO的表达,抑制巨噬细胞对***的吞噬能力,增强巨噬细胞对胞内***的清除能力. 下调TACO表达对巨噬细胞杀伤胞内***影响的机制与其通过自噬溶酶体途径提高***吞噬体与溶酶体的融合有关.

关键词：富含色氨酸天冬氨酸膜蛋白 RNA干扰慢病毒巨噬细胞结核分枝杆菌

lincRNA—cox2对小鼠RAW264．7巨噬细胞极化的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2016年第12期36卷 881-886页

作者：黄自坤姚芳苡罗清叶建青邓桢呙阳江红李俊明南昌大学第一附属医院检验科 330006 江西省血液中心检验科南昌330006

目的观察小鼠RAW264.7巨噬细胞不同极化状态下lincRNA-cox2表达变化，初步探讨lincRNA-cox2对巨噬细胞极化的影响。方法以IFN-γ/LPS刺激小鼠RAW264.7细胞诱导M1型极化，IL-4刺激RAW264.7细胞诱导M2型极化，采用实时荧光定量PCR（RT-PC... 详细信息

目的观察小鼠RAW264.7巨噬细胞不同极化状态下lincRNA-cox2表达变化，初步探讨lincRNA-cox2对巨噬细胞极化的影响。方法以IFN-γ/LPS刺激小鼠RAW264.7细胞诱导M1型极化，IL-4刺激RAW264.7细胞诱导M2型极化，采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测各组细胞lincRNA-cox2的表达。设计并合成针对lincRNA-cox2基因的siRNA及无关序列，脂质体转染RAW264.7细胞，48 h后分别加入IFN-γ/LPS或IL-4继续诱导M1/M2型巨噬细胞，采用酶联免疫试验（ELISA）检测细胞因子IL-12及IL-10的分泌量；RT-PCR检测与巨噬细胞极化相关的iNOS、TNF-α、Arg-1、Fizz1的表达。将lincRNA-cox2-siRNA转染M1型巨噬细胞，检测其对M1极化表型的影响。结果RT-PCR结果显示，M1型巨噬细胞的lincRNA-cox2表达水平显著高于未极化细胞和M2型巨噬细胞。与对照组相比，lincRNA-cox2-siRNA转染RAW264.7细胞后，经IFN-γ/LPS诱导的M1型巨噬细胞中IL-12分泌降低，iNOS和TNF-α表达下降；而经IL-4诱导的巨噬细胞中IL-10产生增加，Arg-1和Fizz1表达升高。lincRNA-cox2-siRNA转染M1型巨噬细胞后，IL-12分泌降低，IL-10产生增加，其特点向M2样巨噬细胞转换。结论lincRNA-cox2参与调控小鼠巨噬细胞的极化，促进M1型巨噬细胞极化，抑制M2型巨噬细胞极化。

关键词：巨噬细胞极化:长链非编码RNA lincRNA—cox2

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单亲家庭孩子的心理问题及教育建议

曲靖师范学院学报 2007年第6期26卷 101-103页

作者：王自坤邓晓燕曲靖师范学院成职教学院云南曲靖655000 重庆文理学院学生处重庆402168

单亲家庭孩子在心理上表现为亲社会性行为减少,产生攻击性行为,多疑、嫉妒,情绪消极、缺乏自信,情绪不稳、易养成双重性格.教育时家庭要有良好的教养方式、加强沟通;教师要处处关心他们,主动与他们沟通和交流;社会公众应给以理解和关爱... 详细信息

单亲家庭孩子在心理上表现为亲社会性行为减少,产生攻击性行为,多疑、嫉妒,情绪消极、缺乏自信,情绪不稳、易养成双重性格.教育时家庭要有良好的教养方式、加强沟通;教师要处处关心他们,主动与他们沟通和交流;社会公众应给以理解和关爱,为孩子的健康成长创造一个和谐的氛围.

关键词：教育心理学单亲家庭孩子教育对策

长链非编码RNA在脂多糖诱导人巨噬细胞炎症反应中的表达变化

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中华危重病急救医学 2017年第4期29卷 306-310页

作者：邓桢姚芳苡叶建青徐建青卿城罗清黄自坤南昌大学第一附属医院检验科江西南昌330006 江西省血液中心检验科江西南昌333000 南昌大学第一附属医院重症医学科江西南昌330006

目的分析长链非编码RNA（lncRNA）在脂多糖（LPS）诱导人巨噬细胞炎症反应中的表达差异.方法分离健康者外周血单个核细胞,采用贴壁法培养纯化为巨噬细胞并分为空白对照组和LPS刺激组.用1 mg/L LPS刺激巨噬细胞12 h后收集细胞及其培养... 详细信息

目的分析长链非编码RNA（lncRNA）在脂多糖（LPS）诱导人巨噬细胞炎症反应中的表达差异.方法分离健康者外周血单个核细胞,采用贴壁法培养纯化为巨噬细胞并分为空白对照组和LPS刺激组.用1 mg/L LPS刺激巨噬细胞12 h后收集细胞及其培养上清液,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清液中白细胞介素（IL-1β、IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量;利用lncRNA基因芯片检测两组细胞中lncRNA表达谱的变化,筛选出差异表达lncRNA分子并进行分析.采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）对部分差异表达lncRNA分子进行验证;并以NR_028034为研究对象,检测LPS诱导巨噬细胞炎症反应中NR_028034的动态表达变化.结果 ① 与空白对照组相比,LPS诱导巨噬细胞12 h后上清液中炎性细胞因子含量均明显升高〔IL-1β（ng/L）：562.93±61.17比59.74±15.68,IL-6（ng/L）：702.46±92.31比71.66±18.25,TNF-α（ng/L）：794.50±63.89比85.12±22.07,均P〈0.01〕,证实巨噬细胞炎症反应模型构建成功.② 以LPS刺激组与空白对照组表达比值≥2倍且P〈0.05作为差异表达***刺激巨噬细胞后差异表达lncRNA有1479条,上调2倍以上的lncRNA共953条,其中上调5倍以上的lncRNA有49条;下调2倍以上的lncRNA共526条,其中下调5倍以上的lncRNA有35条.③ 用qRT-PCR对部分lncRNA进行验证的结果与lncRNA芯片检测结果一致.④LPS刺激巨噬细胞后3、6、12 h,NR_028034表达水平较空白对照组分别上调了（4.41±0.65）、（11.56±2.04）、（18.58±1.36）倍（均P〈0.01）.结论 LPS诱导人巨噬细胞炎症反应后,lncRNA表达谱发生显著变化,lncRNA可能参与调控了巨噬细胞炎症反应.

关键词：长链非编码RNA 脂多糖巨噬细胞炎症反应