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性别及日龄对转人神经生长因子基因小鼠唾液中蛋白分泌的影响

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生物工程学报 2019年第6期35卷 1041-1049页

作者：廖莎朱庆春吴珍芳李紫聪曾芳华南农业大学动物科学学院广东广州510642 华南农业大学海洋学院广东广州510642

神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)是一种能促进神经元发育、分化、再生的蛋白。为高效生产药效更佳的人源NGF (hNGF)药物,最近,笔者实验室构建出唾液腺特异表达hNGF的转基因小鼠,并从该转基因小鼠唾液中纯化获得具有高生物学活性... 详细信息

神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)是一种能促进神经元发育、分化、再生的蛋白。为高效生产药效更佳的人源NGF (hNGF)药物,最近,笔者实验室构建出唾液腺特异表达hNGF的转基因小鼠,并从该转基因小鼠唾液中纯化获得具有高生物学活性的h NGF蛋白。为了选择性别和日龄最适宜的转hNGF基因小鼠用于收集纯化hNGF蛋白,文中比较了28日龄(性成熟前)雄性、雌性,63日龄(性成熟后)雄性、雌性转hNGF基因小鼠,共4组转hNGF基因小鼠分泌的唾液量、唾液总蛋白量、唾液鼠源NGF (mNGF)蛋白量和唾液h NGF蛋白量等指标。结果显示,63日龄的转hNGF基因小鼠分泌的唾液量、唾液总蛋白量、唾液mNGF蛋白量和唾液hNGF蛋白量显著高于28日龄同一性别的转hNGF基因小鼠,且63日龄的雄性转hNGF基因小鼠分泌的唾液hNGF蛋白量显著高于同一日龄的雌性转hNGF基因小鼠;在4组小鼠中,63日龄的雄性转hNGF基因小鼠分泌的唾液hNGF含量最高,比28日龄雌性转hNGF基因小鼠高出约46倍,最适宜用于收集唾液并从中纯化hNGF。

关键词：转基因小鼠性别日龄人神经生长因子唾液

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黄野螟化学感受基因的鉴定与分析

植物保护 2021年第6期47卷 34-48页

作者：李资聪刘磊杨斌严善春王桂荣东北林业大学林学院哈尔滨150040 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193

昆虫的化学感受系统在昆虫的取食、交配等多种行为中发挥着重要作用。黄野螟Heortia vitessoides是一种寡食性害虫,幼虫具有聚集性、暴食性等特点,对土沉香Aquilaria sinensis危害严重。本研究使用高通量测序技术对黄野螟成虫触角和口... 详细信息

昆虫的化学感受系统在昆虫的取食、交配等多种行为中发挥着重要作用。黄野螟Heortia vitessoides是一种寡食性害虫,幼虫具有聚集性、暴食性等特点,对土沉香Aquilaria sinensis危害严重。本研究使用高通量测序技术对黄野螟成虫触角和口器的转录组进行了测序,共鉴定到124个化学感受基因,包括50个气味受体(odorant receptor,OR)基因,19个离子型受体(ionotropic receptor,IR)基因,17个味觉受体(gustatory receptor,GR)基因,19个气味结合蛋白(odorant binding protein,OBP)基因,17个化学感受蛋白(chemosensory protein,CSP)基因和2个感觉神经元膜蛋白(sensory neuron membrane protein,SNMP)基因。通过系统进化和差异表达分析,对黄野螟化学感受基因的分化,以及不同性别、不同组织间的表达差异进行系统性的研究。以气味受体为例,HvitOR42、HvitOR43和HvitOR48聚在传统的性信息素受体(pheromone receptor,PR)分支,其中HvitOR42和HvitOR43在雄性成虫触角中特异性高表达,这3个气味受体可能参与识别黄野螟雌性成虫释放的性信息素。此外,HvitOR20在雌性成虫触角中特异性高表达,可能与雌性成虫交配和产卵等行为相关。本研究为进一步探究黄野螟的化学感受机制提供了分子基础,为开发以化学生态学为基础的黄野螟绿色害虫防控技术提供了理论依据。

关键词：黄野螟转录组高通量测序化学感受基因

G418处理核供体细胞对猪克隆胚胎体外发育效率的影响

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华南农业大学学报 2016年第5期37卷 13-18页

作者：李嘉琪李紫聪吴珍芳刘德武华南农业大学动物科学学院/国家生猪种业工程技术研究中心广东广州510642

【目的】探索G418处理供体细胞对其核移植胚胎发育效率的影响。【方法】利用G418单独处理猪成体成纤维细胞6 d后,收集细胞,利用荧光定量PCR的方法检测处理前后细胞中抗氧化应激、细胞凋亡相关基因的表达水平,运用亚硫酸盐结合测序法分... 详细信息

【目的】探索G418处理供体细胞对其核移植胚胎发育效率的影响。【方法】利用G418单独处理猪成体成纤维细胞6 d后,收集细胞,利用荧光定量PCR的方法检测处理前后细胞中抗氧化应激、细胞凋亡相关基因的表达水平,运用亚硫酸盐结合测序法分别检测基因组重复序列liNE-1、微卫星的DNA甲基化状态,以及其核移植胚胎体外发育的能力。【结果】经不同质量浓度G418处理的供体细胞的抗氧化应激酶相关基因及细胞凋亡基因表达发生显著变化(P0.05);经G418处理的供体细胞的核移植胚胎的体外发育效率显著低于对照组(P<0.05)。【结论】G418处理供体细胞可能对其克隆胚胎体外发育效率有抑制作用。

关键词： G418 猪克隆核移植转基因胚胎发育

中国大棒缨小蜂属litus Haliday一新种记述(膜翅目:缨小蜂科)

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云南农业大学学报（自然科学版） 2023年第1期38卷 47-52页

作者：沙仁高娃李子聪朱丽得孜·艾山新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室新疆乌鲁木齐830017

[目的]进一步发掘中国缨小蜂科寄生蜂资源、补充大棒缨小蜂种类。[方法]采用马来氏网诱集的方法获取标本,结合文献研究的方法,依据传统形态鉴定和DNA条形码技术对标本进行准确鉴定。[结果]记述了采自西藏林芝市大棒缨小蜂属(litus Halid... 详细信息

[目的]进一步发掘中国缨小蜂科寄生蜂资源、补充大棒缨小蜂种类。[方法]采用马来氏网诱集的方法获取标本,结合文献研究的方法,依据传统形态鉴定和DNA条形码技术对标本进行准确鉴定。[结果]记述了采自西藏林芝市大棒缨小蜂属(litus Haliday)一新种——长大棒缨小蜂(litus longitus Aishan ***.),对种征进行了详细描述,并附形态特征图;提供了中国大棒缨小蜂属已知种的分种检索表;首次报道了长大棒缨小蜂基于COI序列的DNA条形码。[结论]本研究为中国大棒缨小蜂属分类研究提供参考,并为快速准确鉴定提供分子数据,具有重要的理论价值。

关键词：小蜂总科缨小蜂科大棒缨小蜂属新种分类

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克隆哺乳动物的胎盘发育缺陷

遗传 2016年第5期38卷 402-410页

作者：敖政刘德武蔡更元吴珍芳李紫聪华南农业大学动物科学学院国家生猪种业工程研究中心广州510642

克隆又称体细胞核移植（Somatic cell nuclear transfer, SCNT），该技术已在多种哺乳动物中成功建立并被逐渐应用。然而，利用该技术获得的哺乳动物克隆胚胎的发育效率非常低（一般只有1%~5%），这严重限制了克隆技术的应用。胎盘发育... 详细信息

克隆又称体细胞核移植（Somatic cell nuclear transfer, SCNT），该技术已在多种哺乳动物中成功建立并被逐渐应用。然而，利用该技术获得的哺乳动物克隆胚胎的发育效率非常低（一般只有1%~5%），这严重限制了克隆技术的应用。胎盘发育缺陷被认为是抑制克隆胚胎发育的一个主要原因。几乎所有的 SCNT 来源胎盘都会出现不同的发育缺陷，如胎盘增生、胎盘血管缺陷、脐带畸形等。胎盘异常的根本原因是滋养层细胞基因组在发育过程中未能建立正确的表观遗传修饰，导致胎盘发育调控相关的重要基因，特别是印迹基因的表达出现异常。印迹基因表达异常导致胎盘的形态异常和功能缺陷，进而影响克隆胚胎的发育能力。目前，虽然有许多提高克隆胚胎发育能力的研究报道，然而在大多数研究中克隆效率并没有得到大幅度的提高，主要原因之一是克隆胚胎的胎盘发育仍然存在诸多缺陷。本文综述了克隆哺乳动物的胎盘异常及其印迹基因表达，并对未来提高克隆效率的研究提出展望。

关键词：体细胞核移植克隆表观重编程胎盘异常印迹基因

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镇沅县现代林业产业发展规划初步研究

林业调查规划 2020年第3期45卷 97-100页

作者：李自聪刘平书云南省林业调查规划院营林分院云南昆明650021 云南省林业调查规划院云南昆明650051

介绍镇沅县林业产业发展现状;对镇沅县林业产业发展存在的产业整体发展水平仍较低、商品林培育有待加强、林副产品开发不足、林业产业结构不合理等问题进行阐述;对镇沅县林业产业发展具备的林地资源丰富、光热水资源丰富、森林资源丰富... 详细信息

介绍镇沅县林业产业发展现状;对镇沅县林业产业发展存在的产业整体发展水平仍较低、商品林培育有待加强、林副产品开发不足、林业产业结构不合理等问题进行阐述;对镇沅县林业产业发展具备的林地资源丰富、光热水资源丰富、森林资源丰富等优势及存在的交通基础设施发展滞后、资金投入不足、发展模式单一等劣势进行分析;提出确立产业发展规划的近、中、远期目标,调整产业结构、突出优势产业发展,加强商品林培育和林副产品开发,大力发展林下经济和森林旅游,加大林业建设投入、提升林业科技创新能力,扶植龙头企业、加强企业品牌建设等规划对策。

关键词：林业产业发展规划商品林培育林下经济镇沅县

石漠化综合治理“六子”模式在广南县应用研究

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林业调查规划 2020年第5期45卷 105-108页

作者：李自聪刘平书云南省林业调查规划院营林分院云南昆明650021 云南省林业调查规划院云南昆明650051

简述广南县石漠化基本情况及特点,认为人口增长导致耕地扩张、耕作方式落后是造成石漠化的主要原因,提出调整农村产业、能源结构,林业技术与工程措施相结合、创新生态环境建设模式,坚持土地可持续利用,转移区域超载人口等石漠化治理策略... 详细信息

简述广南县石漠化基本情况及特点,认为人口增长导致耕地扩张、耕作方式落后是造成石漠化的主要原因,提出调整农村产业、能源结构,林业技术与工程措施相结合、创新生态环境建设模式,坚持土地可持续利用,转移区域超载人口等石漠化治理策略;并对广南县“六子”石漠化综合治理模式的主要做法和取得的生态环境明显改善,产业结构明显优化、有效助力农村脱贫攻坚,基础设施改善、城乡环境得到优化等成效进行阐述,以期为石漠化治理提供参考。

关键词：石漠化综合治理 “六子”治理模式产业结构调整文山州广南县

过表达KDM4家族基因对猪克隆胚胎体外发育效率的影响

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黑龙江畜牧兽医 2023年第13期 55-62,135页

作者：梁雅琳邝哲李紫聪王兴旺华南农业大学动物科学学院动物遗传育种与繁殖系广州510642 国家生猪种业工程技术研究中心广州510642 畜禽育种国家地方联合工程研究中心广州510642 广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室广州510642 广东茂名农林科技职业学院动物科学系广东茂名525000

为了探究过表达H3K9me3的组蛋白去甲基化酶4(KDM4)家族基因对猪克隆胚胎体外发育效率的影响,试验采用pc-KDM4A~D质粒构建、酶切鉴定、细胞转染、定量PCR扩增及体外转录等方法制备过表达KDM4A~D的猪胎儿成纤维细胞和KDM4A~D mRNAs,通过... 详细信息

为了探究过表达H3K9me3的组蛋白去甲基化酶4(KDM4)家族基因对猪克隆胚胎体外发育效率的影响,试验采用pc-KDM4A~D质粒构建、酶切鉴定、细胞转染、定量PCR扩增及体外转录等方法制备过表达KDM4A~D的猪胎儿成纤维细胞和KDM4A~D mRNAs,通过体细胞核移植和显微注射的方式制备过表达KDM4A~D的猪克隆胚胎。将供体细胞过表达KDM4A~D的猪克隆胚胎分为1个对照组和5个试验组,分别为pcDNA3.1(+)组、pc-KDM4A组、pc-KDM4B组、pc-KDM4C组、pc-KDM4D组及4质粒组;将注射KDM4A~D mRNA的猪克隆胚胎分为1个对照组和5个试验组,分别为H_(2)O组、KDM4A组、KDM4B组、KDM4C组、KDM4D组及4mRNA组。统计各组的卵裂数、囊胚数和囊胚细胞数;利用免疫荧光检测4质粒组和4mRNA组4-细胞期猪克隆胚胎中H3K9me3的表达水平。结果表明:pc-KDM4A~D质粒构建成功,质粒转染的猪胎儿成纤维细胞可过表达KDM4A~D和降低细胞内H3K9me3水平。与pcDNA3.1(+)组比较,4质粒组可显著提高猪克隆胚胎的卵裂率和囊胚率(P<0.05),并显著降低4-细胞期猪克隆胚胎的H3K9me3水平(P<0.05);与H_(2)O组比较,4mRNA组可显著提高猪克隆胚胎的囊胚率(P<0.05),并显著降低4-细胞期猪克隆胚胎的H3K9me3水平(P<0.05)。说明过表达KDM4A~D可有效降低猪克隆胚胎中的H3K9me3水平并提高猪克隆胚胎的体外发育能力。

关键词：组蛋白去甲基化酶4(KDM4) H3K9me3 克隆胚胎重编程猪

猪耳成纤维细胞转录组异质性及对核移植胚胎发育的潜在影响

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遗传 2020年第9期42卷 898-915页

作者：周俊赵成成吴霄石俊松周荣吴珍芳李紫聪华南农业大学动物科学院国家生猪种业工程技术研究中心广州510642 广东温氏种猪科技有限公司新兴527400

同一来源的供体细胞之间存在异质性。许多研究已经表明体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)效率与供体细胞有关。然而,鲜有在单细胞水平分析供体细胞异质性对核移植效率的潜在影响。本研究利用单细胞转录组测序技术对同... 详细信息

同一来源的供体细胞之间存在异质性。许多研究已经表明体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)效率与供体细胞有关。然而,鲜有在单细胞水平分析供体细胞异质性对核移植效率的潜在影响。本研究利用单细胞转录组测序技术对同一来源且随机挑选的52个猪耳组织成纤维细胞进行测序分析。结果表明有48个单细胞的基因表达模式相似,4个单细胞(编号为D11_1、D12_1、DW61_2和DW99_2)的基因表达模式与其他单细胞存在较大的差异,并且不存在基因表达模式完全相同的两个单细胞。以基因表达模式相似的48个单细胞作为对照,进一步分析了单细胞D11_1、D12_1、DW61_2和DW99_2的差异基因表达模式:首先利用R语言筛选4个单细胞的差异表达基因,并对前50差异表达基因进行汇总;然后对差异表达基因进行GO富集分析和KEGG通路分析。富集分析发现差异表达基因的主要分子功能包括能量代谢、蛋白质代谢和细胞对刺激的反应等;主要通路包括KEGG中富集的与细胞周期、细胞代谢、DNA复制相关的通路。根据以上研究结果并结合SCNT研究进展讨论了4个单细胞的差异基因表达模式对核移植胚胎发育效率的潜在影响。本研究揭示了猪耳组织成纤维细胞的转录组异质性,并提供了分析精英供体细胞的一种有效方法,为提高克隆效率带来新的思路。

关键词：猪体细胞核移植供体细胞异质性单细胞测序