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A pentapeptide enabled AL3810 liposome-based glioma-targeted therapy with immune opsonic effect attenuated

Acta Pharmaceutica Sinica B 2021年第1期11卷 283-299页

作者： Jinyang Li Jiasheng Lu Haiyan Guo Jianfen Zhou Songli Wang Kuan Jiang zhilan chai Shengyu Yao Xiaoyi Wang Linwei Lu Cao Xie Yi Chen Weiyue Lu Department of Pharmaceutics School of PharmacyFudan University&Key Laboratory of Smart Drug Delivery(Fudan University)Ministry of Education and PLAShanghai 201203China Chinese Academy of Sciences Shanghai Institute of Materia Medica Shanghai 201203China State Key Laboratory of Medical Neurobiology and MOE Frontiers Center for Brain Science Institutes of Brain ScienceFudan UniversityShanghai 200032China The Institutes of Integrative Medicine of Fudan University Shanghai 200041China Minhang Branch Zhongshan Hospital and Institute of Fudan-Minghang Academic Health SystemMinghang HospitalFudan UniversityShanghai 201199China

AL3810,a molecular dual inhibitor of the vascular endothelial growth factor receptor(VEGFR)and fibroblast growth factor receptor(FGFR),has earned the permission of phase II clinical trial for tumor treatment by China *** a reversible ATP-competitive inhibitor,AL3810 targets ATP-binding site on intracellular region of VEGFR and FGFR,whereas,AL3810 lacking interplay with extracellular region of receptors rendered deficient bloodebrain tumor barrier(BBTB)recognition,poor brain penetration and unsatisfactory anti-glioma *** avb3 overexpressed on capillary endothelial cells of BBTB as well as glioma cells illuminated ligand-modified liposomes for pinpoint spatial delivery into *** widely accepted peptide c(RGDyK)-modified liposome loading AL3810 of multiple dosing caused hypothermia,activated anti-c(RGDyK)-liposome IgG and IgM antibody and pertinent complements C3 b and C5 b-9,and experienced complement-dependent *** newly proposed a pentapeptide mn with superb avb3-binding affinity and tailored AL3810-loaded mn-modified liposome that afforded impervious blood circulation,targeting ability,and glioma therapeutic expertise as vastly alleviated immune opsonization on the underpinning of the finite antibodies and complements *** from attenuated immunogenicity,peptide mn strengthened liposome functions as a promising nanocarrier platform for molecular targeting agents.

关键词： Liposome mn c(RGDyK) Immune opsonization Immunogenicity Anti-glioma efficacy

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Polymeric Micelle-based Whole-process Glioma-targeted Drug Delivery Enabled by A Multifunctional D-peptide

Polymeric Micelle-based Whole-process Glioma-targeted Drug D...

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2018年第十二届中国药物制剂大会

作者：冉丹妮 Cao Xie zhilan chai Weiyue Lu Department of Pharmaceutics School of Pharmacy Fudan University & Key Laboratory of Smart Drug Delivery (Fudan University) Ministry of Education and PLA State Key Laboratory of Medical Neurobiology The Collaborative Innovation Center for Brain Science Fudan University

＜正＞Uncontrollable cell proliferation and irreversible neurological damage make glioma one of the most deadly *** the multiple biological barriers,glioma stem cells（GSCs）that are responsible for the maintenance and recurrence of tumor tissues also hinder the therapeutic efficacy of ***,whole-process glioma-targeted drug delivery systems that could efficiently deliver drugs to glioma cells and

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Cell membrane-coated nanoparticles for tumor-targeted drug delivery

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Science China Materials 2017年第6期60卷 504-510页

作者：柴芝兰胡雪峰陆伟跃 Department of Pharmaceutics School of Pharmacy Key Laboratory of Smart Drug Delivery Fudan University Shanghai 201203 China

Nanoparticles can be enriched at tumor site and improve the therapeutic efficacy of many chemother- apy drugs with the well-known enhanced permeability and retention （EPR） effect. While conventional preparations of materials for nanoscale drug delivery system mainly focused on chemical synthesis, recently the combination of synthetic carrier and natural biomimetic carrier has gained more and more attention. As a new generation of biomimetic nanoparticles, cell membrane-coated nanoparticles combine the complex biological functions of natural membranes and the physicochemical properties of synthetic nanomaterials for a more effective drug delivery. Herein, we briefly review the recent advances on cell membrane-coated nanoparticles for tumor-targeted drug delivery via the prolonging systemic circulation lifetime and the active targeting effect. Since the preferential accumulation of cell membrane-coated nanopar- ticles in tumor site, they are able to improve the therapeutic efficacy of conventional chemotherapy drugs in antitumor treatment as well as to reduce the systemic toxicity. We also introduce a systematic targeted strategy for the promising application of this platform on brain tumors.

关键词： cell membrane biomimetic nanoparticle tumor-tar geting drug delivery

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外泌体作为药物递送载体的研究进展

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中国医药工业杂志 2020年第4期51卷 425-433页

作者：周建芬柴芝兰谢操陆伟跃复旦大学药学院智能化递药教育部及全军重点实验室(复旦大学)上海201203

外泌体(exosomes)是一种由细胞分泌的纳米尺度(40~100 nm)的囊泡,在细胞间物质运输和信号交流中发挥重要作用。外泌体在大小和功能上与合成的纳米颗粒类似,但作为天然内源性转运载体,具有毒性低、无免疫原性、渗透性好等优势,故可能成... 详细信息

外泌体(exosomes)是一种由细胞分泌的纳米尺度(40~100 nm)的囊泡,在细胞间物质运输和信号交流中发挥重要作用。外泌体在大小和功能上与合成的纳米颗粒类似,但作为天然内源性转运载体,具有毒性低、无免疫原性、渗透性好等优势,故可能成为更有应用前景的药物递送载体。本文主要介绍了外泌体的基本性质和获得方法、载药方法及其作为纳米载体在小分子和生物大分子药物递送和靶向研究中的应用进展情况,并分析探讨了外泌体在载药和靶向递送方面的不足。

关键词：外泌体药物载体靶向递药

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云南省部分地区猪圆环病毒2型的分离鉴定与进化分析

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黑龙江畜牧兽医 2021年第21期 74-80,85,153页

作者：李枝兰何帅张敬寒陶杰邹丰才张以芳柴俊云南农业大学动物医学院昆明650201 普洱市墨江县动物疫病预防控制中心云南普洱654800

为了了解云南省部分地区猪圆环病毒2型(PCV-2)的基因型,试验采用PCR方法检测了从养殖场采集的临床症状表现为疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的组织病料,阳性病料经无菌处理后接种于PK-15细胞进行病毒分离培养,病毒液经PCR扩增、克... 详细信息

为了了解云南省部分地区猪圆环病毒2型(PCV-2)的基因型,试验采用PCR方法检测了从养殖场采集的临床症状表现为疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的组织病料,阳性病料经无菌处理后接种于PK-15细胞进行病毒分离培养,病毒液经PCR扩增、克隆和测序后进行间接免疫荧光检测,利用DNAStar软件比较分析全基因和ORF2基因序列,用MEGA 6.0软件绘制遗传进化树,MegAlign软件比较分析氨基酸序列,按照Karber法计算TCID_(50)。结果表明:试验成功分离到2株分离株,分别命名为DH-202005和WS-202009,2株分离株的目的片段大小约为549 bp,全基因大小约为1767 bp,感染2株分离株的PK-15细胞均可观察到特异性绿色荧光,2株分离株的全基因序列同源性为99.9%,与GenBank中不同国家和地区的22株PCV-2分离株的同源性为92.6%~99.8%,与疫苗株SH(HM038027)和LG(HM038034)的同源性分别为95.6%和95.5%,2株分离株的ORF2基因序列的同源性为99.9%,与GenBank中不同国家和地区的22株PCV-2分离株的同源性为84.0%~100%,与疫苗株SH(HM038027)同源性分别为94.0%和93.9%,与疫苗株LG(HM038034)的同源性分别为92.0%和91.9%,2株分离株在同一遗传进化分支上,与YN/QuJing-2018(MK405699)的遗传关系最近,都属于PCV-2d基因型,2株分离株与其他PCV-2d基因型毒株ORF2的氨基酸序列同源性较高,均编码234个氨基酸,与PCV-2a、PCV-2b基因型相比,在第234位多一个赖氨酸(K)残基,位于第86~91位点上的SNPLTV和第190~191/206/210位点上的TGID氨基酸序列都是典型的PCV-2d基因型序列,2株分离株第10代病毒的TCID_(50)分别为1×10^(5.0) TCID_(50)/0.1 mL和1×10^(4.5) TCID_(50)/0.1 mL。说明云南省存在PCV-2d基因型的流行,且分离株与国内外其他PCV-2毒株遗传关系较近。

关键词：猪圆环病毒2型云南省分离鉴定基因进化分析

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枯水期水位变化下菜子湖湿地生态修复

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人民长江 2022年第12期53卷 63-68页

作者：刘芷兰李红清石义军裴看元柴海涛江波长江水资源保护科学研究所湖北武汉430051 长江水利委员会湖库水源地面源污染生态调控重点实验室湖北武汉430051 安徽省引江济淮集团有限公司安徽合肥230000 安徽省引江济淮生态发展有限公司安徽合肥230000

引江济淮工程运行后,菜子湖作为调蓄湖泊,枯水期水位将有所抬升,泥滩和草本沼泽面积会相应减少,会对候鸟越冬期菜子湖水鸟栖息和觅食造成一定影响。因此,亟需在工程运行前开展湿地生态修复技术研究,探索适宜于菜子湖的湿地生态修复技术... 详细信息

引江济淮工程运行后,菜子湖作为调蓄湖泊,枯水期水位将有所抬升,泥滩和草本沼泽面积会相应减少,会对候鸟越冬期菜子湖水鸟栖息和觅食造成一定影响。因此,亟需在工程运行前开展湿地生态修复技术研究,探索适宜于菜子湖的湿地生态修复技术,确保工程不利影响得到最大程度的缓解。结合菜子湖湿地植被覆盖率现状及规划水平年2030年和2040年枯水期水位抬升对菜子湖湿地带来的可能性影响,提出在湖区实施试验性生态修复工程、在湖滨带实施植被修复工程。试验性修复主要是结合工程运行后菜子湖湿地水位变化过程及湿地生境影响分析结果,在菜子湖区选取3块试验性修复区域进行微地形改造和植被修复,改善水位抬升后泥滩和草本沼泽生境的出露问题。湖滨带植被修复主要是沿湖滨带构建植物群落带,改善菜子湖区存在的沉水植物退化问题。为保障湿地生态修复实施效果及湿地生态修复措施的可持续性,建议开展湿地生态修复实施效果评估,并根据实施效果评估情况进一步优化湿地生态修复技术方案或在湖区其他区域相机实施生态修复工程。

关键词：生态修复微地形改造植物配置湖泊湿地菜子湖引江济淮工程

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稳定表达IL-10的PK-15细胞的构建及其在PCV2增殖中的应用

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中国畜牧兽医 2022年第3期49卷 1085-1095页

作者：张敬寒李枝兰韩佃刚何帅刘金华吕念词邹丰才柴俊张以芳云南农业大学动物医学院昆明650201 昆明海关技术中心昆明650051 中国农业大学动物医学院北京100193

【目的】研究白细胞介素-10(IL-10)对猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)复制的影响,筛选PCV2高感染性细胞系和提高PCV2病毒滴度,为后续疫苗的研发及IL-10在PCV2感染中的作用研究提供参考。【方法】利用PCR技术扩增猪IL-10... 详细信息

【目的】研究白细胞介素-10(IL-10)对猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)复制的影响,筛选PCV2高感染性细胞系和提高PCV2病毒滴度,为后续疫苗的研发及IL-10在PCV2感染中的作用研究提供参考。【方法】利用PCR技术扩增猪IL-10基因,将目的基因与慢病毒表达载体(pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP+Puro)进行连接,获得重组质粒pCDH-CMV-IL-10,将其与包装质粒psPAX2和pMD2.G共转染293T细胞进行慢病毒包装。用收集的慢病毒液感染PK-15细胞,经嘌呤霉素筛选后得到细胞株PK-15-IL-10,对照组细胞分别命名为PK-15-pCDH和PK-15。PCV2感染PK-15-IL-10、PK-15-pCDH和PK-15细胞株后,在24、48和72 h分别收集细胞液,利用CCK-8检测细胞活力。利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测IL-10基因的表达水平和PCV2的复制情况;利用间接免疫荧光试验(IFA)观察PCV2在细胞中的复制情况及测定PCV2的病毒滴度(TCID50)。【结果】试验成功构建了重组质粒pCDH-CMV-IL-10,将其与包装质粒psPAX2和pMD2.G共转染293T细胞后,48 h时细胞状态最好,荧光最强。分别收集共转染48和72 h的慢病毒液上清感染PK-15细胞,pCDH-CMV-IL-10组的荧光最强,将其在嘌呤霉素浓度为2.5μg/mL的完全培养基中继续培养,获得仍有绿色荧光的稳转细胞株。实时荧光定量PCR和Western blotting检测发现,IL-10基因在pCDH-IL-10细胞株中的表达量明显高于对照组PK-15-pCDH和PK-15,PCV2的拷贝数增加了4倍,复制能力增强,且将病毒稀释连续传3代后,PK-15-IL-10细胞中的PCV2极显著高于PK-15细胞(P<0.01)。细胞增殖试验表明,猪IL-10基因在细胞中过表达对细胞活力无明显影响;IFA结果表明,PK-15-IL-10细胞中的荧光比PK-15细胞更强,PCV2在PK-15-IL-10细胞中的TCID50在感染后48 h极显著高于PK-15细胞(P<0.01)。【结论】本研究成功构建了pCDH-CMV-IL-10的慢病毒表达载体,并利用其感染PK-15细胞,继续培养后筛选出过表达IL-10的PK-15-IL-10细胞株,用PCV2感染该细胞株能促进PCV2在PK-15细胞中的复制。本试验结果为后期疫苗研究提供了参考,为进一步研究IL-10对PCV2在PK-15细胞中复制的影响奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒2型(PCV2) 白细胞介素-10(IL-10) 免疫抑制慢病毒表达载体稳定表达细胞系

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云南省部分猪场病料猪圆环病毒3型PCR检测及克隆测序

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中国动物检疫 2021年第8期38卷 4-7页

作者：陶杰张敬寒彭俊文刘艳丽李枝兰吕念词张以芳邹丰才柴俊云南农业大学动物医学院云南昆明650201 墨江县动物疫病预防控制中心云南墨江654800 墨江县畜牧工作站云南墨江654800

为了解猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)在云南省的流行及遗传进化情况,2020年10—12月收集云南省部分猪场疑似病料共24份,采用PCR方法进行PCV3病原检测;选取PCV3阳性扩增产物进行克隆测序,并将测序结果与16株国内外参考... 详细信息

为了解猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)在云南省的流行及遗传进化情况,2020年10—12月收集云南省部分猪场疑似病料共24份,采用PCR方法进行PCV3病原检测;选取PCV3阳性扩增产物进行克隆测序,并将测序结果与16株国内外参考毒株进行ORF2核苷酸序列同源性分析。结果显示:24份病料样品中检出阳性5份,阳性检出率为20.8%;克隆出的阳性扩增产物(YNJS-2020)ORF2核苷酸序列和国内外参考毒株的同源性较高,为97.4%~98.9%,其中与西班牙毒株MF80572000同源性最高,与安徽14-201611毒株同源性最低。结果表明,云南省存在PCV3流行,且流行毒株与国内外其他毒株遗传关系较近,但也有一定差异。结果提示,云南省应加强对PCV3的监测及其流行的控制,避免PCV3大面积流行。本研究为云南省PCV3基因型分析和疫苗研究提供了一定的数据基础。

关键词：圆环病毒3型 PCR 克隆同源性分析

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