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The Journal of Biomedical Research 2018年第4期32卷 288-297页

作者： Muyi Yang zhenyu diao Zhiyin Wang Guijun Yan Guangfeng Zhao Mingming Zheng Anyi Dai Yimin Dai Yali Hu Drum Tower Clinical Medical College Nanjing Medical University Department of Obstetrics and Gynecology Nanjing Drum Tower HospitalNanjing University Medical School

Preeclampsia is associated with over-activation of the innate immune system in the placenta,in which toll-like receptor 4（TLR4） plays an essential *** their potent anti-inflammatory effects,statins have been suggested as potential prevention or treatment of preeclampsia,although evidence remains ***,we investigated whether pravastatin could ameliorate preeclampsia-like phenotypes in a previously established lipopolysaccharide（LPS）-induced rat preeclampsia model,through targeting the TLR4/NF-κB *** results showed that pravastatin reduced the blood pressure [maximum decline on gestational day（GD） 12,（101.33±2.49） mmHg vs.（118.3±1.37） mmHg,P〈0.05] and urine protein level [maximum decline on GD9,（3,726.23± 1,572.86） μg vs.（1,991.03 ±609.37）μg,P〈 0.05],which were elevated following LPS *** also significantly reduced the rate of fetal growth restriction in LPS-treated rats（34.10% vs.8.99%,P〈0.05）.Further pathological analyses suggested a restoration of normal spiral artery remodeling in preeclampsia rats by pravastatin *** effects of pravastatin were associated with decreased TLR4/NF-κB protein levels in the placenta and IL-6/MCP-1 levels in ***,no obvious abnormalities in fetal liver,brain,and kidney were found after administration of *** results provide supportive evidence for use of pravastatin in preventing preeclampsia.

关键词： preeclampsia arteriole remodeling pravastatin toll-like receptor 4 fetal development

STUDY ON INCREASING THE RELIABILITY OF SPEEDER SYSTEM IN ANALOGUE PRIME MOVERS

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STUDY ON INCREASING THE RELIABILITY OF SPEEDER SYSTEM IN ANA...

一种新型家蚕核多角体病毒Bac to Bac系统的构建

第一届电工产品可靠性与电接触国际会议

作者： Juemin Liu, Xianqiang diao, zhenyu Fu Hunan University,Changsha,410082,China

In this paper, the author studies on increasing the reliability of speeder system in analogue prime movers from aspect of increasing the reliability of element, introduces several protection circuits in brief, expatia... 详细信息

关键词： Index Terms—Analogue prime movers cooling rectifier reliability speeder system

来源： cnki会议评论

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微生物学报 2000年第2期40卷 155-160页

作者：邓小昭朱应刁振宇齐义鹏周宗安南京军区军事医学研究所分子生物学实验室南京210002 武汉大学病毒研究所武汉430073

用家蚕核型多角体病毒的全基因组DNA与AcBacmidDNA共转染家蚕BmN细胞,构建转座一穿梭载体BmBacmid。另一供体质粒以转座方式将乙肝病毒e抗原基因HBeAg整合到BmBacmid的attTn7位点上成为重组rBmHBe。结果表明BmBacmid既能在大肠杆菌中以... 详细信息

用家蚕核型多角体病毒的全基因组DNA与AcBacmidDNA共转染家蚕BmN细胞,构建转座一穿梭载体BmBacmid。另一供体质粒以转座方式将乙肝病毒e抗原基因HBeAg整合到BmBacmid的attTn7位点上成为重组rBmHBe。结果表明BmBacmid既能在大肠杆菌中以质粒的形式复制,又能在家蚕BmN细胞和草地夜蛾Sf9细胞中复制,形成感染性病毒粒子。Southernblotting证实重组病毒的构建是正确的。BmN细胞能正确识别与切割HBeAg信号肽序列,SDSPAGE表明HBeAg基因在家蚕细胞中高效表达,ELISA测定培养上清中HBeAg效价达1∶32000,细胞内HBeAg效价为1∶2000,培养液及细胞内的HBcAg含量极低(〈1∶160)。

关键词： BmNPV Bac to Bac策略表达系统 HBcAg

姜黄素对脂多糖诱导的滋养细胞系HTR-8/SVneo中微小RNA-155表达及细胞凋亡、侵袭的影响

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中华妇产科杂志 2016年第11期51卷 859-864页

作者：洪国敏龚萍杨沐怿沈莉刁振宇胡娅莉南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院 210023 南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科

目的探讨姜黄素对脂多糖（LPS）诱导的滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞中微小RNA-155（miR-155）表达、细胞凋亡和侵袭的影响。方法体外培养滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞。实验共4组：姜黄素＋LPS组（姜黄素浓度分别为12.5、25、50μmol/L预处... 详细信息

目的探讨姜黄素对脂多糖（LPS）诱导的滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞中微小RNA-155（miR-155）表达、细胞凋亡和侵袭的影响。方法体外培养滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞。实验共4组：姜黄素＋LPS组（姜黄素浓度分别为12.5、25、50μmol/L预处理后，加入100 ng/ml LPS）、LPS组（加入100 ng/ml LPS）、重组腺病毒组（加入Ad-miR-155，感染复数为100）和空白对照组。采用实时荧光定量PCR、荧光素酶报告基因活性检测法和蛋白印迹法检测姜黄素＋LPS组、LPS组和空白对照组细胞的miR-155表达水平、荧光素酶转录活性及核因子κB（NF-κB）蛋白的表达水平；细胞凋亡酶联免疫法和细胞侵袭试验检测姜黄素＋LPS组、LPS组、重组腺病毒组和空白对照组细胞凋亡和侵袭能力的情况。结果（1）实时荧光定量PCR技术结果显示，LPS组HTR-8/SVneo细胞中miR-155的表达水平为空白对照组的（2.13±0.22）倍，两组比较，差异具有统计学意义（P〈0.01）；12.5、25、50μmol/L姜黄素＋LPS组HTR-8/SVneo细胞中miR-155的表达水平分别为LPS组的（0.37±0.08）、（0.68±0.14）、（0.49±0.09）倍，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）。（2）荧光素酶报告基因活性检测法显示， LPS组荧光素酶的转录活性为空白对照组的（2.25±0.56）倍，12.5、25、50μmol/L姜黄素＋LPS组荧光素酶转录活性分别为LPS组的（0.80±0.07）、（0.74±0.05）、（0.49±0.19）倍，差异均有统计学意义（P均〈0.05）。（3）蛋白印迹法检测显示，LPS组HTR-8/SVneo细胞中p65蛋白的表达水平为1.50±0.22，明显高于空白对照组（0.95±0.25，P〈0.01）。不同浓度姜黄素＋LPS组，姜黄素浓度为12.5μmol/L时，p65蛋白表达水平为0.31±0.07，与LPS组相比，下调最明显（P〈0.01）；浓度为25、50μmol/L时，蛋白表达水平分别为0.75±0.14、0.49±0.08，分别与LPS组比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）。（4）细胞凋亡酶联免疫法检测显示，空白对照组的吸光度（A）值为0.89±0.17，LPS组、重组腺病毒组的A值分别为2.02±0.35和1.67±0.48，分别与空白组比较，差异有统计学意义（P均〈0.05）。25、50μmol/L姜黄素＋LPS组的A值分别为0.74±0.05、0.49±0.09，细胞凋亡被抑制，分别与LPS组（设定为1.00）比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）；12.5μmol/L姜黄素＋LPS组的A值为0.80±0.07，细胞凋亡有抑制趋势，但与LPS组比较，差异无统计学意义（P〉0.05）。（5）细胞侵袭试验显示，LPS组穿膜细胞数量为（47±8）个，重组腺病毒组为（60±14）个，分别与空白对照组[（169±18）个]比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）；12.5、25μmol/L姜黄素＋LPS组的穿膜细胞数量分别为（143±10）、（137±10）个，与LPS组比较明显增加（P均〈0.05）；而50μmol/L姜黄素＋LPS组，穿膜细胞数量为（55±7）个，与LPS组比较有所增加，但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论姜黄素通过抑制NF-κB信号通路，下调LPS诱导的NF-κB和miR-155的表达水平，从而抑制绒毛外滋养细胞过度凋亡，保护其侵袭能力。

关键词：先兆子痫滋养层姜黄素细胞凋亡

survivin基因shRNA真核表达载体的构建及其对人胃癌细胞株中survivin表达的影响

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胃肠病学 2012年第9期17卷 540-544页

作者：陈敏刁振宇张松邹晓平徐肇敏李运红南京大学医学院附属鼓楼医院消化科 210008

背景:胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成员,在胃癌组织中高表达。目的:构建survivin基因短发夹RNA(shRNA)真核表达载体并观察其对人胃癌细胞株BGC823和SGC7901中survivin表达的影响。方法:根据GenBank中... 详细信息

背景:胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成员,在胃癌组织中高表达。目的:构建survivin基因短发夹RNA(shRNA)真核表达载体并观察其对人胃癌细胞株BGC823和SGC7901中survivin表达的影响。方法:根据GenBank中survivin基因序列设计并合成能转录shRNA的双链DNA序列,插入含有绿色荧光蛋白(GFP)基因和U6启动子的真核表达载体pRNAT-U6.3中,构建重组载体pRNA-shSUR。重组载体经鉴定后转染胃癌细胞株BGC823和SGC7901,以转染pRNA-shControl作为阴性对照。荧光显微镜下观察转染情况,蛋白质印迹法检测survivin蛋白表达,Annexin V-FITC/PI双染法检测胃癌细胞凋亡情况。结果:成功构建了针对survivin基因的shRNA表达载体。转染胃癌BGC823和SGC7901细胞48 h后,与阴性对照组相比,pRNA-shSUR组GFP表达增强,survivin蛋白表达受到明显抑制(P<0.05),胃癌细胞早期凋亡率明显增加。结论:成功构建靶向survivin基因的特异性shRNA真核表达载体,转染胃癌细胞后可抑制survivin蛋白表达并促进细胞凋亡,为进一步研究survivin基因与胃癌生物学行为以及化疗耐药等的相关性奠定了基础。

关键词：生存素 RNA干扰胃肿瘤细胞凋亡

滋养细胞自噬在子痫前期胎盘中的形成及调控机制

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中华围产医学杂志 2017年第10期20卷 712-717页

作者：薛平平樊文强王慧艳刁振宇李玉静熊佳丽陈莉南京医科大学附属常州妇幼保健院妇产科 213000 南京医科大学附属常州第二人民医院乳腺外科 213003 南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科 210008

目的探讨自噬在子痫前期患者胎盘滋养细胞中的形成及调控机制。方法选择2016年8月至2016年11月在南京医科大学附属常州妇幼保健院产科剖宫产的20例重度子痫前期患者为子痫前期组，随机选取同期剖宫产的血压正常、无蛋白尿的20例正常孕... 详细信息

目的探讨自噬在子痫前期患者胎盘滋养细胞中的形成及调控机制。方法选择2016年8月至2016年11月在南京医科大学附属常州妇幼保健院产科剖宫产的20例重度子痫前期患者为子痫前期组，随机选取同期剖宫产的血压正常、无蛋白尿的20例正常孕妇为对照组。同时收集2组孕妇胎盘组织，采用透射电镜观察胎盘滋养细胞的超微结构及自噬体形成情况，实时定量聚合酶链反应和Western印迹法检测胎盘组织中微管相关蛋白1轻链3B（microtubule associated protein 1 light chain 3B，MAP1LC3B，亦称LC3B）和Beclin 1的表达情况，以及Western印迹法检测胎盘组织中蛋白激酶B（protein kinase B，PKB，亦称Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）通路的活性。采用两独立样本t检验或Mann-Whitney U检验对数据进行统计学分析。结果透射电镜可观察到重度子痫前期患者胎盘滋养细胞胞膜微绒毛稀少、排列紊乱，胞质中可见典型的自噬体形成增加。子痫前期组孕妇胎盘组织中LC3B mRNA和蛋白的表达水平及LC3-Ⅱ/ LC3-Ⅰ比值均高于对照组[分别为3.37（2.37~6.11）与0.62（0.25~4.15）、1.40±0.17与1.00±0.13及1.57±0.25与1.00±0.31，Z或t值分别为－4.440、3.274及3.113，P值均〈0.05]。而2组孕妇胎盘组织中Beclin 1 mRNA和蛋白的表达差异无统计学意义（P值均〉0.05）。与对照组相比，子痫前期组孕妇胎盘组织中Akt和mTOR蛋白的磷酸化修饰水平明显下降（分别为1.00±0.29与0.64±0.21、1.00±0.32与0.60±0.22，t值分别为－3.672及－2.895，P值均〈0.05）；但2组胎盘组织中Akt及mTOR蛋白表达差异均无统计学意义（P值均〉0.05）。结论重度子痫前期患者胎盘中Akt/mTOR通路活性下降，滋养细胞自噬过度激活，提示Akt/mTOR通路活性下降致使滋养细胞自噬过度激活可能是子痫前期发病的重要机制。

关键词：先兆子痫滋养层自噬胎盘原癌基因蛋白质c—akt TOR丝氨酸一苏氨酸激酶

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用微载体技术培养家蚕BmN细胞的实验研究

生物工程学报 1995年第4期11卷 332-336页

作者：邓小昭周永春张林元刁振宇陈宜峰南京军区军事医学研究所分子遗传学研究室南京210032 第二军医大学分子遗传学教研室上海200433 南京师范大学生物系南京2100243

观察了家蚕ＢｍＮ（从ＳｉｌｋｗｏｒｍＢｏｍｂｙｘｍｏｒｉ获得的细胞系）细胞在微载体Ｃｙｔｏｄｅｘ３上的贴壁分布，提出其分布符合Ｐｏｉｓｓｏｎ规律，并由此估计了不同细胞接种浓度时裸球的百分比，与实际观测结果基本符合... 详细信息

观察了家蚕ＢｍＮ（从ＳｉｌｋｗｏｒｍＢｏｍｂｙｘｍｏｒｉ获得的细胞系）细胞在微载体Ｃｙｔｏｄｅｘ３上的贴壁分布，提出其分布符合Ｐｏｉｓｓｏｎ规律，并由此估计了不同细胞接种浓度时裸球的百分比，与实际观测结果基本符合；研究了不同接种浓度与微载体浓度时细胞的生长情况，家蚕ＢｍＮ细胞在Ｃｙｔｏｄｅｘ３上生长的临界接种数为一珠粒６．４个细胞。当微载体浓度为３ｇ／Ｌ时，最低的接种浓度为１．０×１０＾５／

关键词：家蚕微载体昆虫细胞培养

Fault Detection and Recovery for Full Range of Hydrogen Sensor Based on Relevance Vector Machine

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Journal of Harbin Institute of Technology(New Series) 2015年第6期22卷 37-44页

作者： Kai Song Bing Wang Ming diao Hongquan Zhang zhenyu Zhang School of Electrical Engineering and Automation Harbin Institute of Technology College of Information and Communication Engineering Harbin Engineering University Chinese Electron Science and Technology Conglomerate 49th Research Institute College of Automation Harbin Engineering University No.703 Research Institute of China Shipbuilding Industry Corporation

In order to improve the reliability of hydrogen sensor,a novel strategy for full range of hydrogen sensor fault detection and recovery is proposed in this paper. Three kinds of sensors are integrated to realize the measurement for full range of hydrogen concentration based on relevance vector machine( RVM). Failure detection of hydrogen sensor is carried out by using the variance detection method. When a sensor fault is detected,the other fault-free sensors can recover the fault data in real-time by using RVM predictor accounting for the relevance of sensor data. Analysis,together with both simulated and experimental results,a full-range hydrogen detection and hydrogen sensor self-validating experiment is presented to demonstrate that the proposed strategy is superior at accuracy and runtime compared with the conventional methods. Results show that the proposed methodology provides a better solution to the full range of hydrogen detection and the reliability improvement of hydrogen sensor.

关键词： hydrogen concentration measurement full range fault detection fault recovery relevance vector machine

普伐他汀抑制脂多糖诱导的人绒毛外滋养细胞微小RNA-155表达并改善滋养细胞功能

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中华围产医学杂志 2017年第10期20卷 705-711页

作者：王志尹杨沐怿段晓宇刁振宇丁海林彭艳芳雷祎赵光锋刘丹胡娅莉南京医科大学鼓楼临床医学院妇产科 210029 东南大学医学院妇产科 210009 南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科 210008

目的探讨普伐他汀对脂多糖诱导的人绒毛外滋养细胞（HTR-8/SVneo细胞）中微小RNA-155（microRNA-155，miR-155）表达及其对滋养细胞功能的影响。方法将体外培养HTR-8/SVneo细胞分成空白对照组、带绿色光蛋白的增强型质粒（enhanced plas... 详细信息

目的探讨普伐他汀对脂多糖诱导的人绒毛外滋养细胞（HTR-8/SVneo细胞）中微小RNA-155（microRNA-155，miR-155）表达及其对滋养细胞功能的影响。方法将体外培养HTR-8/SVneo细胞分成空白对照组、带绿色光蛋白的增强型质粒（enhanced plasmid with green fluorescent protein，pEGFP）-miR-155组（绿色荧光蛋白标记的miR-155质粒转染）、脂多糖组（脂多糖100 ng/ml）、miR-155抑制剂组＋脂多糖，普伐他汀＋脂多糖组（浓度分别为12.50、25.00、50.00、100.00 μg/ml普伐他汀预处理后，再加入100 ng/ml脂多糖）、普伐他汀＋pEGFP-miR-155组（50.00 μg/ml普伐他汀预处理后再转染pEGFP-miR-155）。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组miR-155的表达量、蛋白质印迹法检测各组AP-1亚基p-JunB和p-FosB蛋白的表达水平；检测细胞迁移、侵袭功能和凋亡情况。采用t检验进行统计学分析。结果（1）与空白对照组相比，pEGFP-miR-155组滋养细胞迁移距离较低[分别为（274.70±18.82）和（181.00±8.62）μm]，穿膜细胞减少[（123.00±4.36）和（63.00±6.08）个]，细胞凋亡率升高[分别为（5.40±0.68）%和（9.27±0.68）%]（P值均〈0.05）。与脂多糖组相比，miR-155抑制剂＋脂多糖组的迁移距离更长[（166.30±5.07）与（242.00±18.07） μm]，穿膜细胞增多[（71.67±6.12）与（109.00±7.81）个]，细胞凋亡率降低[（14.40±1.69）%与（6.23±0.44）%]（P〈0.05）。（2）脂多糖组HTR-8/SVneo细胞miR-155的mRNA表达水平为1.65±0.07，明显高于空白对照组的0.79±0.12（P〈0.05）。12.50、25.00、50.00、100.00 μg/ml普伐他汀＋脂多糖组的HTR-8/Svneo细胞中miR-155的mRNA表达水平分别为1.14±0.10、1.02±0.10、0.74±0.15和1.14±0.02，明显低于脂多糖组，其中以50.00 μg/ml普伐他汀降低程度最明显（P值均〈0.05）。（4）空白对照组、脂多糖组、50.00 μg/ml普伐他汀＋脂多糖组的磷酸化JunB的蛋白表达水平分别为0.33±0.06、1.22±0.20和0.31±0.02，磷酸化FosB的蛋白表达水平分别为0.37±0.07、0.80±0.13和0.21±0.05。脂多糖组表达水平明显高于空白对照组，50.00 μg/ml普伐他汀＋脂多糖组明显低于脂多糖组（P值均〈0.05）。（5）与脂多糖组相比，50.00 μg/ml普伐他汀＋脂多糖组的迁移距离增大[（166.30±5.07）与（246.80±13.42）μm]，穿膜细胞数增多[（71.67±6.12）与（95.33±2.73）个]，细胞凋亡率降低[（14.40±1.69）%与（6.05±0.35）%]（P值均〈0.05）。与pEGFP-miR-155组相比，50.00 μg/ml普伐他汀＋pEGFP-miR-155组的迁移距离更长[（197.50±13.86）与（275.80±13.63） μm]，穿膜细胞更多[（52.67±5.49）与（125.00±6.66）个]，细胞凋亡率降低[（8.90±1.00）%与（5.05±0.35）%]（P值均〈0.05）。结论普伐他汀能抑制炎症转录因子AP-1激活，下调脂多糖诱导的miR-155的表达水平，从而抑制绒毛外滋养细胞过度凋亡，保护其迁移侵袭能力，可能是其抑制子痫前期发展的机制之一。

关键词：普伐他汀先兆子痫滋养层微RNAs 细胞运动

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传染性法氏囊病病毒分离株变异的研究

药物生物技术 2001年第2期8卷 78-82页

作者：周宗安王永山邓小昭刁振宇高健赵新泰李锦军罗函禄南京军区军事医学研究所南京210002 上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室上海200032 江苏省农业科学院畜牧兽医研究所南京210014

为了了解我国传染性法氏囊病病毒 (IBDV)的变异现状 ,并为研究高效疫苗打下基础 ,用琼脂糖凝胶电泳 ,SDS PAGE和序列分析等分子生物学方法 ,分析IBDV病毒RNA ,结构蛋白的变异情况。结果表明 :⑴ 3种不同源IBDV均由双节段RNA组成 ,大小... 详细信息

为了了解我国传染性法氏囊病病毒 (IBDV)的变异现状 ,并为研究高效疫苗打下基础 ,用琼脂糖凝胶电泳 ,SDS PAGE和序列分析等分子生物学方法 ,分析IBDV病毒RNA ,结构蛋白的变异情况。结果表明 :⑴ 3种不同源IBDV均由双节段RNA组成 ,大小基因片段的电泳迁移率各病毒间无差异 ;⑵不同源IBDV的结构蛋白带谱相同 ,但各蛋白带的百分含量有差异 ;⑶IBDV血清Ⅰ型不同亚型的JS3和JS4毒株主要保护性抗原VP2高变区核酸序列的同源性最高达 98% ,与已发表的vvIBDV ,IBDV变异株 ,IBDV经典株及IBDV弱毒株核苷酸序列同源性在 92 %～ 98%之间。根据IBDV的大开放读框推导出该片段编码蛋白的氨基酸序列 ,JS3和JS4的同源性最高达 97% ,与上述其它毒株的同源性在 91%～ 97%之间 ;七肽区的氨基酸序列 ,在强毒株完全相同 ,而在弱毒株有一个丝氨酸突变成其它氨基酸。

关键词：传染性法氏囊病毒结构蛋白比较 VP2基因高变区序列分析鸡