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负载局部缓释给药的唑来膦酸-明胶纳米微球聚多巴胺涂层多孔钛合金支架对破骨细胞影响的体外研究

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中华创伤骨科杂志 2022年第7期24卷 617-623页

作者：杨晓江孙国静严维娣武振方遆云帆鲁经纬赵建宁解放军东部战区总医院骨科南京210002

目的分析构建的负载局部缓释给药的唑来膦酸(ZOL)-明胶纳米微球(GNPs)聚多巴胺(PDA)涂层多孔钛合金支架对破骨细胞的生物学影响。方法基于电子束熔融技术构建多孔钛合金支架,利用去溶剂化法制备不同ZOL浓度(0、1、10、50、100、500μmol... 详细信息

目的分析构建的负载局部缓释给药的唑来膦酸(ZOL)-明胶纳米微球(GNPs)聚多巴胺(PDA)涂层多孔钛合金支架对破骨细胞的生物学影响。方法基于电子束熔融技术构建多孔钛合金支架,利用去溶剂化法制备不同ZOL浓度(0、1、10、50、100、500μmol/L)的ZOL-GNPs,两者复合构建负载ZOL-GNPs的PDA涂层多孔钛合金支架并进行表征分析,并对3种不同状况支架(裸多孔钛合金支架、PDA涂层多孔钛合金支架、负载ZOL-GNPs的PDA涂层多孔钛合金支架)进行生物力学检测,分别在第1、4、7、14、21、28天利用高效液相色谱仪进行药物释放检测。将破骨细胞与上述不同ZOL浓度的新型支架相复合,利用实时定量(RT)-聚合酶链式反应(PCR)检测破骨细胞相关基因表达;利用Western-blot技术检测破骨细胞相关蛋白表达。结果成功构建了负载ZOL-GNPs的PDA涂层多孔钛合金支架,电镜扫描显示GNPs成球性好,表面光滑,分散均一,粒径为(243.6±63.4)nm,ZOL-GNPs均匀复合于支架的表面及孔隙内,球形规整无粘连。生物力学实验结果显示3种不同状况下多孔钛合金支架的弹性模量分别为(1.81±0.12)、(1.80±0.23)、(1.81±0.15)GPa,差异无统计学意义(P>0.05);多孔钛合金支架在第1天的释药百分比明显较高,在随后的27 d中,药物释放逐渐缓慢增加。低浓度ZOL支架组中,细胞黏附增殖较多;50μmol/L组中则出现球状细胞;随后随着浓度的升高,球状细胞增多,甚至发生凋亡。RT-PCR结果显示Ctsk基因和TRAP基因在随着ZOL浓度升高而升高,其中在50μmol/L时表达最高,然后随浓度升高而降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western-blot结果显示Ctsk与TRAP的表达水平与其相关基因表达水平趋势相似。结论构建的一种负载ZOL-GNPs的PDA涂层多孔钛合金支架不但具有良好的机械性能,还具有局部药物缓释抗OP作用;当ZOL浓度为50μmol/L时,更有利于抑制破骨细胞生成。

关键词：骨质疏松破骨细胞纳米粒子唑来膦酸多孔钛合金支架

CRISPR/Cas13b系统对猪流行性腹泻病毒增殖的抑制作用

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华南农业大学学报 2019年第6期40卷 1-7页

作者：梅彦杨化强吴珍芳华南农业大学动物科学学院广东广州510642 温氏研究院广东云浮527400

【目的】猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种对养猪业造成巨大损失的高致死率的传染性疫病。CRISPR/Cas13b系统精准切割和编辑RNA的功能提供了一种靶向抑制RNA病毒的策略。本研究尝试利... 详细信息

【目的】猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种对养猪业造成巨大损失的高致死率的传染性疫病。CRISPR/Cas13b系统精准切割和编辑RNA的功能提供了一种靶向抑制RNA病毒的策略。本研究尝试利用CRISPR/Cas13b的RNA干扰功能对PEDV的基因组RNA进行切割,以探索一种新型的PEDV病毒抑制策略。【方法】设计了4对靶向PEDV基因组不同区域的CRISPR RNA(crRNA)位点,构建了CRISPR/Cas13b打靶载体,以打靶载体转染Vero细胞,并利用PEDV感染转染细胞,检测PEDV在CRISPR/Cas13b转染细胞内的增殖情况。【结果】CRISPR/Cas13b系统对PEDV在Vero细胞的增殖具有明显的抑制作用。打靶载体U6-crRNA3和U6-crRNA4转染组相较于正常细胞组,病毒免疫荧光试验中荧光团明显减少;定量PCR结果显示,打靶载体转染组在细胞水平抑制50%以上病毒增殖量。【结论】本研究构建的CRISPR/Cas13b系统能有效抑制PEDV增殖,为开发有效的RNA病毒防控手段、建立抗病动物模型提供了新的研究策略。

关键词：猪猪流行性腹泻病毒 CRISPR/Cas13b系统打靶质粒 RNA病毒基因编辑

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关于繁殖母猪群体更新率的探讨

华南农业大学学报 2019年第S1期40卷 143-146页

作者：刘敬顺吴珍芳广东温氏种猪科技有限公司广东新兴527400 国家生猪种业工程技术研究中心/华南农业大学动物科学学院广东广州510642

母猪群体的年更新率,其实是“母猪利用年限”问题,也是为了达到目标PSY水平所需合理的胎龄结构的生物经济学问题。影响更新率或母猪利用年限的因素有遗传因素,更多的是非遗传因素。主要原因是,母猪利用年限无法在核心群度量,也无法直接... 详细信息

母猪群体的年更新率,其实是“母猪利用年限”问题,也是为了达到目标PSY水平所需合理的胎龄结构的生物经济学问题。影响更新率或母猪利用年限的因素有遗传因素,更多的是非遗传因素。主要原因是,母猪利用年限无法在核心群度量,也无法直接纳入综合选择指数,遗传力低,为0.05~0.25。因而,后备母猪培育选留标准、饲喂体况管理、繁殖管理是世界养猪发达国家公认的母猪利用年限的主要提高手段。遗传选择和选择肢蹄完整良好的母猪是提高母猪利用年限的间接选育法,十分重要。

关键词：母猪群体更新率母系

单侧双通道内镜手术与显微内镜手术治疗腰椎管狭窄症的Meta分析

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中国脊柱脊髓杂志 2021年第8期31卷 719-730页

作者：王彬何鹏武振方许斌东南大学医学院南京市210009 南京大学附属金陵医院脊柱外科南京市210002

目的:通过Meta分析评价单侧双通道内镜手术(unilateral biportal endoscopic surgery,UBES)与显微内镜手术(micro endoscopic surgery,MES)治疗腰椎管狭窄症的疗效与安全性,为UBES在临床中的推广提供参考。方法:计算机检索万方数据库(Wa... 详细信息

目的:通过Meta分析评价单侧双通道内镜手术(unilateral biportal endoscopic surgery,UBES)与显微内镜手术(micro endoscopic surgery,MES)治疗腰椎管狭窄症的疗效与安全性,为UBES在临床中的推广提供参考。方法:计算机检索万方数据库(Wanfang Database)、中国期刊全文数据库(CNKI)、维普数据库(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)、PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane、Clinical Trials,并通过Google Scholar进行文献补充,搜集所有采用UBES与MES治疗腰椎管狭窄症的对照研究,检索时限从2000年1月1日至2021年3月25日。由2名评价员独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险。提取资料包括手术时间、术中出血量、术后并发症、住院时间,术后2d及术后1周的C反应蛋白量,术后1周内硬脊膜扩张度,术后1~2d、1~3个月、6~9个月和12个月的腰痛和下肢痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS),术后1周内、1~3个月、6~9个月和12个月的Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI),术后12个月时的改良Macnab标准评定及欧洲五维健康量表(EuroQol Five Dimensions Questionnaire,5Q-5D)评分。应用纽卡斯尔-渥太华量表(Newcastle-Ottawa scale,NOS)对纳入的队列研究进行质量评价,应用Cochrane偏倚风险评估工具对纳入的随机对照研究进行质量评价。采用Review Manager 5.4.1软件进行Meta分析,二分类变量采用优势比(odds ratio,OR)分析,连续性变量采用加权均数差(weighted mean difference,WMD)分析,所有合并数据使用95%可信区间(CI)表示,P0.05)。结论:相较于MES,UBES具有住院时间短、恢复快、手术并发症发生率低、术后炎症反应小等优势,术后12个月随访两者的疗效一致。

关键词：腰椎管狭窄症单侧双通道内镜手术显微内镜手术 Meta分析

猪子宫腔液外泌体来源的TIMP2蛋白对胚胎附植的影响

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畜牧兽医学报 2022年第4期53卷 1122-1132页

作者：匡婧靖贺艳娟胡群顾婷吴珍芳蔡更元洪林君华南农业大学动物科学学院国家生猪种业工程技术研究中心广州510642

旨在研究猪子宫腔液外泌体来源的TIMP2蛋白对妊娠早期胚胎附植的影响。本研究采用超速离心法分离妊娠第9天(n=3)和第12天(n=3)大白猪子宫腔液外泌体,利用Western blot(WB)检测外泌体中TIMP2蛋白的变化,并通过免疫组化试验研究TIMP2蛋白... 详细信息

旨在研究猪子宫腔液外泌体来源的TIMP2蛋白对妊娠早期胚胎附植的影响。本研究采用超速离心法分离妊娠第9天(n=3)和第12天(n=3)大白猪子宫腔液外泌体,利用Western blot(WB)检测外泌体中TIMP2蛋白的变化,并通过免疫组化试验研究TIMP2蛋白在子宫中的表达定位。进一步用外泌体与猪胚胎滋养层细胞(porcine trophoblast,PTr2)共培养试验研究外泌体对TIMP2蛋白的靶向运输作用,最后在PTr2细胞中干扰和超表达TIMP2基因,利用CCK-8、EdU及划痕试验研究TIMP2蛋白对PTr2细胞增殖和迁移的影响。通过超速离心法成功分离到子宫腔液外泌体,其粒径主要分布在30~150 nm之间,WB试验结果表明,妊娠第12天猪子宫腔液外泌体中TIMP2蛋白含量显著增高(P<0.05),外泌体与滋养层细胞共培养试验表明,TIMP2蛋白能通过外泌体靶向运输到滋养层细胞。免疫组化结果发现,TIMP2蛋白在子宫内膜和胚胎中均表达,且在妊娠第12天子宫内膜中的表达量极显著高于妊娠第9天(P<0.01)。进一步通过体外细胞试验发现,干扰PTr2中的TIMP2基因,细胞增殖能力极显著增强(P<0.01),迁移能力显著增强(P<0.05);超表达该基因,细胞增殖能力极显著减弱(P<0.01),迁移能力也显著减弱(P<0.05)。以上结果表明,子宫腔液外泌体来源TIMP2蛋白可能由母体子宫内膜所分泌,并能通过外泌体靶向进入胚胎滋养层细胞调控其增殖和迁移,从而影响胚胎附植。

关键词：外泌体 TIMP2 PTr2 胚胎附植

杜洛克猪瘦肉率性状的窝效应分析及遗传参数估计

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畜牧兽医学报 2023年第6期54卷 2288-2296页

作者：周辅臣叶健郭才金曾海玉吴珍芳董林松蔡更元华南农业大学动物科学学院国家生猪种业工程技术研究中心广州510642 广东中芯种业科技有限公司广州510642

旨在评估瘦肉率性状的遗传参数及其主要生长性状之间的关系,并分析窝效应对瘦肉率和主要生长性状的影响,为瘦肉率性状的改良提供参考。本试验以广东中芯种业科技有限公司下属某核心场杜洛克猪群体(26392头)的校正115 kg瘦肉率(corrected... 详细信息

旨在评估瘦肉率性状的遗传参数及其主要生长性状之间的关系,并分析窝效应对瘦肉率和主要生长性状的影响,为瘦肉率性状的改良提供参考。本试验以广东中芯种业科技有限公司下属某核心场杜洛克猪群体(26392头)的校正115 kg瘦肉率(corrected 115 kg lean meat percentage,LMP)、校正115 kg日增重(corrected 115 kg daily gain,ADG)、校正115 kg背膘厚(corrected 115 kg backfat thickness,BFT)和校正115 kg眼肌面积(corrected 115 kg loin muscle area,LMA)性状为研究对象,利用R软件对影响杜洛克猪LMP、ADG、BFT和LMA性状的固定效应进行方差分析,并利用DMU软件计算了考虑和不考虑窝效应情况下LMP性状的遗传参数,评估其与生长性状间的遗传和表型相关。结果显示,上述各性状的表型记录数量均达到了20000条以上,当考虑窝效应时LMP性状的遗传力为0.34±0.019;不考虑窝效应时LMP性状遗传力为0.45±0.017。LMP与ADG性状的遗传相关系数较小,但与LMA性状呈极显著正相关。此外,该杜洛克群体的LMP、ADG、BFT和LMA性状的窝效应在总体方差中的比重分别为0.15、0.21、0.15和0.14,且LMP年平均估计育种值(estimated breeding value,EBV)呈上升趋势。上述结果说明,该杜洛克群体的LMP、ADG、BFT和LMA的遗传力均属于中等遗传力,且受窝效应影响较大。在遗传评估模型中考虑窝效应作为随机效应进一步提高了模型对上述性状的拟合效果,增加了遗传评估的准确性,此外如母体遗传效应等对上述性状的影响仍需进一步探讨。上述结果说明,眼肌面积受到了瘦肉率性状的协同选择,进一步说明了目前瘦肉率估算方程中将眼肌面积作为辅助性状的原因。

关键词：杜洛克猪瘦肉率窝效应遗传参数

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2016-2017年拉美经济形势分析

西南科技大学学报（哲学社会科学版） 2017年第1期34卷 8-16页

作者：吴振方西南科技大学拉美研究中心四川绵阳621010

2016年世界经济仍处于弱复苏的长周期之中,增长乏力持续疲弱,拉美和加勒比地区受外部不利环境和内部结构调整的影响,经济持续下滑。拉美地区长期受经济结构失衡所困,经济依附现象突出,发展水平难以提升,经济脆弱性很难改观,目前正处于... 详细信息

2016年世界经济仍处于弱复苏的长周期之中,增长乏力持续疲弱,拉美和加勒比地区受外部不利环境和内部结构调整的影响,经济持续下滑。拉美地区长期受经济结构失衡所困,经济依附现象突出,发展水平难以提升,经济脆弱性很难改观,目前正处于经济结构调整的阵痛期。进入新世纪来,拉美地区通过不断加强与新兴经济体和发展中国家的联系,尤其是与中国的经贸往来,积极调整经济结构,产业结构调整升级有望推动拉美经济复苏。

关键词：拉美经济加勒比经济结构调整缓慢复苏中拉贸易

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精浆胞外囊泡对精子功能的作用研究进展

中国畜牧杂志 2022年第5期58卷 101-106页

作者：徐志谦谢言射蔡更元吴珍芳黄思秀洪林君华南农业大学动物科学学院广东广州510642 国家生猪种业工程技术研究中心广东广州510642

近年来,体液中的胞外囊泡受到特别关注,许多物种精浆中均含有胞外囊泡,这些精浆胞外囊泡可以影响精子功能,还可作为雄性动物繁殖力或人类不孕不育相关疾病的标志。本文综述了精浆胞外囊泡对精子功能作用的研究进展,以期更好地理解精子... 详细信息

近年来,体液中的胞外囊泡受到特别关注,许多物种精浆中均含有胞外囊泡,这些精浆胞外囊泡可以影响精子功能,还可作为雄性动物繁殖力或人类不孕不育相关疾病的标志。本文综述了精浆胞外囊泡对精子功能作用的研究进展,以期更好地理解精子受精能力的调控机制,同时为畜牧生产中提高雄性动物繁殖力和男性生育相关疾病治疗提供一定的思路和参考。

关键词：精浆胞外囊泡精子雄性生殖能力

粉末形状与松装密度对不锈钢烧结多孔材料制备工艺及其性能的影响

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粉末冶金技术 2012年第3期30卷 177-181页

作者：余培良尹凤霞吴振芳北京市粉末冶金研究所有限责任公司北京100079

通过选用气雾化及水雾化两种工艺方法制备的不锈钢粉末来制取粉末烧结多孔材料。探讨了粉末形状及松装密度对不锈钢粉末烧结多孔材料制造工艺中的成形压力和烧结温度等工艺参数的影响;研究了原料粉末松装密度对不锈钢粉末烧结多孔材料... 详细信息

通过选用气雾化及水雾化两种工艺方法制备的不锈钢粉末来制取粉末烧结多孔材料。探讨了粉末形状及松装密度对不锈钢粉末烧结多孔材料制造工艺中的成形压力和烧结温度等工艺参数的影响;研究了原料粉末松装密度对不锈钢粉末烧结多孔材料的透气性、拉伸强度的影响。结果表明:成形压力、烧结温度和制品的透气性受粉末松装密度影响显著。粒度范围为0.18～0.90mm时,气雾化粉末的成形压力比水雾化粉末要高近1倍;当粉末的粒度相同时,采用松装密度大的球形粉末所需的烧结温度比松装密度小的不规则粉末的高60～70℃;粒度为0.45～0.60mm时,选用松装密度为4.13 g/cm3粉末所制备的多孔制品的透气性为3.16×10-10m2,而选用松装密度为2.67 g/cm3的粉末所制备的多孔制品的透气性仅为8.8×10-11m2。不锈钢多孔材料的强度受原料粉末的松装密度影响显著;粒度相同,制备工艺相同时,采用较低松装密度的粉末的制品,能够得到较高的强度。

关键词：松装密度粉末烧结多孔材料