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Thiol Specific and Tracelessly Removable Bioconjugation via Michael Addition to 5-Methylene Pyrrolones

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Thiol Specific and Tracelessly Removable Bioconjugation via ...

第十届全国化学生物学学术会议

作者： yingqian zhang Xiaoping Zhou Yonghui Xie Zhen Xi Chuanzheng Zhou State Key Laboratory of Elemento-Organic Chemistry and Department of Chemical Biology College of ChemistryNankai UniversityCollaborative Innovation Center of Chemical Science and Engineering （Tianjin）

Maleimide analogue, 5-methylene pyrrolones （5MPs） are highly thiol-specific and tracelessly removable bioconjugation tools. 5MPs are easily prepared from primary amines in one step. 5 MPs exhibit significantly improved stability and cysteine specificity compared to maleimides. Michael addition of thiol to 5MPs occurs rapidly without generating a stereocenter, leading to quite clean conjugation reactions. The conjugates efficiently release thiols via retro-Michael reaction in alkaline buffer（pH ≥ 9.5） or via thiol exchange. This unique property makes 5MPs valuable for the controlled release of conjugated cargo and temporary thiol protection. The utilization of 5MPs for protein immobilization and pull-down of active complexes is illustrated using E. coli. acetohydroxyacid synthase isozyme Ⅰ.

关键词： Bioconjugation Maleimide Cysteine

DNA-Protein Crosslinks in Nucleosome Core Particles: Formation and Biological Consequences

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DNA-Protein Crosslinks in Nucleosome Core Particles: Formati...

第十届全国化学生物学学术会议

作者： Jing Bai Fengchao Li yingqian zhang Zhen Xi Chuanzheng Zhou State Key Laboratory of Elemento-Organic Chemistry and Department of Chemical Biology College of Chemistry Nankai University

Nucleosome core particle(NCP) is the fundamental unit of genome DNA in eukaryotic cells. Recently studies have revealed that DNA damage and repair processes in NCP are much more complicated than in native DNA duplex. Histones can catalyze or retard the DNA damage and repair through different mechanism in NCPs. In the present study, we showed that some DNA damage intermediates lead to DNA-histone crosslinks. One example is that 5-formylcytosine(5 fC), which is thought to be a DNA demethylation intermediate, yields essential DNA-protein crosslink(DPC) in NCPs. This DPC form via C=N bond between the formyl function of 5 fC and primary amino groups on histones, and thus exist in in dynamic equilibrium. Another example is that OG, a DNA damage intermediate produced by oxidation of 8-oxoguanine(8-oxo-G), leads to DPC quantitatively. This type of DPC is stable and cannot repaired by DNA glycosylase hOGG1. These results suggest that DPCs formations in NCPs are common biological events and much remains to be learned about their biological consequences.

关键词： Nucleosome core particles DNA-protein crosslinks DNA damage and repair

5-Formylcytosine Yields DNA-Protein Crosslinks in Nucleosome Core Particles

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5-Formylcytosine Yields DNA-Protein Crosslinks in Nucleosome...

第十届全国化学生物学学术会议

作者： Fengchao Li yingqian zhang Jing Bai Zhen Xi Chuanzheng Zhou State Key Laboratory of Elemento-Organic Chemistry and Department of Chemical Biology College of ChemistryNankai UniversityCollaborative Innovation Center of Chemical Science and Engineering （Tianjin）

5-Formylcytosine （5fC） has been identified as a naturally occurring nucleobase and was initially thought to be merely an intermediate produced during DNA demethylation. Very recently, 5fC was found to be a stable DNA modification in mammals and this modification can alter the structure of the DNA double helix. The biological function of 5fC except for its role in DNA demethylation remains to be addressed. In situ generation of 5-formylcytosine （5fC） in nucleosome core particles（NCPs） reveals that 5fC leads to essential DNA-protein crosslinks（DPCs）. Mechanistic studies using chemical models as well as mutated histones demonstrate that DPCs form via C=N bond between the formyl function of 5fC and primary amino groups on histones, and thus exist in in dynamic equilibrium. These results suggest 5fC has more complicate biological consequences more than just demethylation intermediate.

关键词： 5-Formylcytosine Nucleosome core particles DNA-protein crosslinks

民俗活动中的仪式实践与神明形象建构——以大理鸡足山太子像的考察为中心

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民族学刊 2022年第7期13卷 41-49,142页

作者：张应强和丽妮中山大学历史人类学研究中心中山大学人类学系中山大学社会学与人类学学院人类学系广东广州510275

在乡村社会普遍存在的民俗活动中,神像作为神明的化身,是民间信仰的重要载体,而相关仪式实践则是神明形象建构的基本途径。在大理鸡足山地区,释迦牟尼太子像在接佛节与打太子两个仪式活动中扮演了重要角色。两种仪式实践对太子像截然不... 详细信息

在乡村社会普遍存在的民俗活动中,神像作为神明的化身,是民间信仰的重要载体,而相关仪式实践则是神明形象建构的基本途径。在大理鸡足山地区,释迦牟尼太子像在接佛节与打太子两个仪式活动中扮演了重要角色。两种仪式实践对太子像截然不同的使用方式展现了人们并不一致的信仰观念,通过在仪式实践中对太子像不同特性的强调,人们创造了太子像的不同使用方法,并最终建构了太子像的双重神明形象。聚焦类似民俗活动特别是相关仪式实践中神像的使用,或可作为民间信仰研究的一种新路径,进而认识和理解乡村社会借以加深对凝聚整合的认识和理解。

关键词：鸡足山民俗神像仪式实践

基于TRIZ的螺旋板式换热器焊接工艺创新设计

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现代制造工程 2016年第4期 128-130页

作者：刘明张雪梅张应迁四川理工学院机械工程学院自贡643000 西安航天动力机械厂西安710025

针对螺旋板式换热器存在的螺旋通道端面焊缝开裂问题,应用TRIZ理论进行分析创新,提出一种"弧形连接条封焊螺旋通道端面"的改进设计方案。该方案已成功应用于某企业的四台螺旋板式换热器改造,解决了其焊缝开裂问题,而且其螺旋通道端面密... 详细信息

针对螺旋板式换热器存在的螺旋通道端面焊缝开裂问题,应用TRIZ理论进行分析创新,提出一种"弧形连接条封焊螺旋通道端面"的改进设计方案。该方案已成功应用于某企业的四台螺旋板式换热器改造,解决了其焊缝开裂问题,而且其螺旋通道端面密封效果好,大大延长了换热器的寿命,取得了较好的经济效益。

关键词： TRIZ理论螺旋板式换热器螺旋通道端面焊接

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基于GIS模型的林火蔓延计算机模拟

森林工程 2013年第3期29卷 13-17页

作者：张应乾罗传文东北林业大学林学院哈尔滨150040

采用王正非和毛贤敏的组合模型,以Visual Studio2008作为开发平台,使用C#3.5语言实现计算机模拟运算,最终结合ArcEnginet9.3相应控件对模拟结果数据进行可视化呈现,生成林火蔓延图,实现对林火蔓延的动态模拟,可视化地表达林火的燃点位... 详细信息

采用王正非和毛贤敏的组合模型,以Visual Studio2008作为开发平台,使用C#3.5语言实现计算机模拟运算,最终结合ArcEnginet9.3相应控件对模拟结果数据进行可视化呈现,生成林火蔓延图,实现对林火蔓延的动态模拟,可视化地表达林火的燃点位置、蔓延趋势、方向及不同时刻的燃烧状态。由于在模拟运算时对所有数据都采用IO流操作,较读写栅格数据提高效率,同时通过动态生成林火蔓延速度来更加合理的描述林火蔓延,充分发挥王正非和毛贤敏的组合模型,在风速、风向和地形上,对林火蔓延速度描述更为准确。通过对模拟结果的分析得出,在起火点位置数据合理的情况下,模拟效果很好。

关键词：组合模型 ArcEngine IO流林火蔓延

高层次创新应用型人才培养:现状、问题与对策——非全日制工程博士生视角

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高等工程教育研究 2023年第1期 172-176,200页

作者：朱佳斌章颖倩杨大伟刘群群上海交通大学教育学院上海交通大学研究生院培养办公室山东省东营市社会科学界联合会

工程博士专业学位的设立旨在培养高层次创新应用型工程人才。上海工程博士培养试点S校非全日制工程博士生的质性访谈与调研表明:导学关系方面,非全日制工程博士生与校内指导教师建立了平等合作关系,成为导师所在科研团队拓展实践体验的... 详细信息

工程博士专业学位的设立旨在培养高层次创新应用型工程人才。上海工程博士培养试点S校非全日制工程博士生的质性访谈与调研表明:导学关系方面,非全日制工程博士生与校内指导教师建立了平等合作关系,成为导师所在科研团队拓展实践体验的重要渠道,部分学生参与感较弱;课程体验方面,非全日制工程博士生在工程前沿知识、学术研究能力等方面得到较大提高,提出了跨学科、实践类课程的需求,期望工程管理能力等综合素质方面得到提升。针对非全日制工程博士生培养的具体问题,提供了落实高层次创新应用型工程人才培育的可操作对策。

关键词：非全日制工程博士学习体验导学关系

利拉鲁肽通过PI3K/Akt和MAPK/ERK通路促进心肌微血管内皮细胞的增殖和迁移

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南方医科大学学报 2015年第9期35卷 1221-1226页

作者：张颖胡舜英尹彤田峰王珊张颖倩陈韵岱解放军总医院心血管内科北京100853

目的研究胰高血糖素样肽-1类似物利拉鲁肽对原代大鼠心肌微血管内皮细胞（CMECs）增殖和迁移的影响及其机制。方法使用双酶消化法体外分离培养SD大鼠心肌微血管内皮细胞,差速贴壁法进行纯化,CD31和Ⅷ因子抗体进行免疫细胞化学染色鉴定... 详细信息

目的研究胰高血糖素样肽-1类似物利拉鲁肽对原代大鼠心肌微血管内皮细胞（CMECs）增殖和迁移的影响及其机制。方法使用双酶消化法体外分离培养SD大鼠心肌微血管内皮细胞,差速贴壁法进行纯化,CD31和Ⅷ因子抗体进行免疫细胞化学染色鉴定。采用不同浓度利拉鲁肽（0~1000 nmol/L）干预1代细胞,MTT绘制细胞生长曲线,Western blot检测利拉鲁肽对PI3K/Akt和MAPK/ERK通路的激活作用,Brd U荧光标记法和划痕实验观察药物作用下细胞增殖和迁移能力,并使用相应的通路阻断剂LY294002和PD98059来进一步证实。结果体外分离原代CMECs,CD31及Ⅷ因子免疫荧光染色示双阳性率大于95%,MTT示细胞于种植48 h后进入对数生长期,利拉鲁肽以浓度依赖方式促进CMECs的体外增殖,100 nmol/L为其最适生长浓度（P〈0.05）。予以100 nmol/L利拉鲁肽预干预细胞24 h后,Western blot显示胞内Akt和ERK磷酸化水平与正常细胞组相比有明显升高（P〈0.05）,加入相应通路阻断剂LY294002和PD98059,其磷酸化水平相较于利拉鲁肽组明显降低（P〈0.05）。Brd U和划痕实验均说明利拉鲁肽能促进CMECs的增殖和迁移能力（P〈0.05）,使用LY294002和PD98059预处理后,增殖迁移能力均显著低于利拉鲁肽组（P〈0.05）。结论利拉鲁肽是通过激活胞内PI3K/Akt和MAPK/ERK通路从而促进原代大鼠心肌微血管内皮细胞的增殖和迁移。

关键词：利拉鲁肽心肌微血管内皮细胞增殖迁移 PI3K/Akt MAPK/ERK

基于应变能密度的疲劳-蠕变裂纹扩展行为描述

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热加工工艺 2015年第12期44卷 60-63页

作者：于强罗云蓉付磊张应迁四川理工学院四川自贡643000 过程装备与控制工程四川省高校重点实验室四川自贡643000

为准确描述疲劳-蠕变裂纹的扩展行为,选取材料在一个循环周次内吸收的应变能密度增量为材料的损伤变量。将加、卸载阶段的裂纹扩展量与保载期的裂纹扩展量叠加,导出了基于有效应变能密度的疲劳-蠕变裂纹扩展速率表达式。该表达式不仅与... 详细信息

为准确描述疲劳-蠕变裂纹的扩展行为,选取材料在一个循环周次内吸收的应变能密度增量为材料的损伤变量。将加、卸载阶段的裂纹扩展量与保载期的裂纹扩展量叠加,导出了基于有效应变能密度的疲劳-蠕变裂纹扩展速率表达式。该表达式不仅与载荷的循环周次相关,而且还与材料的疲劳-蠕变速率相关。将1Cro10Mo Ni VNb N合金在600梯形应力波加载下的裂纹扩展速率实验值与该表达式的计算值相比较,结果基本吻合。该公式合理解释了某些合金材料的疲劳-蠕变裂纹扩展的部分行为特征。

关键词：应变能密度疲劳-蠕变裂纹扩展速率